高效逆流色谱分离化橘红中黄酮类化合物及组分结构鉴定

应用高效逆流色谱法分离纯化了化橘红中两种黄酮类化合物。以乙酸乙酯-正丁醇-水(1:4:5,V/V)为两相溶剂系统,从1g粗提物中可1次分离得到纯度大于98%的柚皮苷单体83.3mg。以二氯甲烷-甲醇-水(10:7:4,V/V)和正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:1:1:1,V/V)为溶剂系统,可从1g粗提物的酸解物中经2次分离得到纯度大于98%的柚皮素单体27.5mg。两种物质的分离时间均在60min内,该法简便、快速、制备量大,可用于化橘红中黄酮类化合物的快速分离制备。

儿茶素和表儿茶素异构体的高效逆流色谱分离制备

应用高效逆流色谱法(HPCCC)对茶叶中的儿茶素和表儿茶素两种同分异构体的分离制备方法进行研究。结果表明:以正己烷-乙酸乙酯-水(体积比1:20:20)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,可以实现儿茶素和表儿茶素的完全分离。采用138mL的分离柱、1g儿茶素粗提物,在120min内一次制备即可得到纯度在95%以上的表儿茶素约35mg,纯度在99%以上的儿茶素325mg,纯度90%～99%的儿茶素100mg。

玄参中苯乙醇苷化合物的高效逆流色谱技术分离

目的应用高效逆流色谱技术分离玄参中的苯乙醇苷化合物。方法采用高效逆流色谱,以醋酸乙酯:正丁醇:乙醇:水(1:1:0.1:2)为溶剂体系,分离玄参中的苯乙醇苷类化合物,流速3 ml/min,检测波长320 nm。结果分离得到麦角甾苷和安格洛苷C化合物纯度达90%以上。结论应用高效液相色谱技术和电喷雾质谱可快速鉴定化合物结构。

高效逆流色谱法制备苏木中的氧化巴西木素

氧化巴西木素是苏木的主要化学成分之一,具有广泛的药理活性且常作为染色剂应用于各行各业。采用传统柱色谱法进行分离,不仅会造成色谱柱材料的污染,也会造成活性成分的损失。故采用高效逆流色谱(HPCCC)对苏木中的活性化合物氧化巴西木素进行分离纯化。苏木乙醇提取物经乙酸乙酯萃取后直接进行高效逆流色谱分离。首先利用基于薄层色谱的常用溶剂体系估算法和摇瓶法结合高效逆流色谱分析模式进行溶剂体系筛选。结果表明,最佳溶剂体系为氯仿-甲醇-水(4∶3∶2,v/v/v)。高效逆流色谱以反相模式为洗脱模式,主机转速为1600 r/min,流速为10 mL/min,分离温度为25℃,检测波长为285 nm,在氯仿-甲醇-水(4∶3∶2,v/v/v)溶剂体系下,从500 mg苏木乙酸乙酯萃取物中一次性分离制备得到15.2 mg纯度为95.6%的氧化巴西木素及一微量成分caesappanin C。采用高效逆流色谱分离制备氧化巴西木素,可避免苏木中的活性成分氧化巴西木素对色谱柱中的固体填充材料染色和难以洗脱等问题,并缩短分离纯化工作时间,提高工作效率。故可将高效逆流色谱应用到苏木中其他色素化合物或其他染料植物的分离制备工艺研究中。

红土茯苓抑制5-LOX活性成分的筛选与分离

本实验以5-脂氧合酶为靶点,利用超滤液质联用技术筛选并鉴定红土茯苓中抑制5-脂氧合酶活性成分。结果表明,红土茯苓中白藜芦醇对5-脂氧合酶的抑制活性最强,其次为落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷和异落新妇苷。在此基础上首次采用高效逆流色谱技术,以正己烷∶正丁醇∶水(1∶2∶3∶v/v/v)为溶剂体系,从红土茯苓中分离得到落新妇苷、异落新妇苷、黄杞苷、异黄杞苷和白藜芦醇,经高效液相色谱分析,其纯度分别为98.39%,86.23%,97.15%,90.28%和99.29%。应用液-质联用技术,通过与标准化合物的保留时间、分子量,对分离得到五种化合物进行了结构鉴定。

应用高效逆流色谱分离桑叶黄酮类化合物

首次采用高效逆流色谱技术,以乙酸乙酯:石油醚:乙醇:水(1. 25:0. 2:0. 1:1. 4,V/V/V/V)为溶剂体系,从50 g桑叶乙酸乙酯提取物中分离得到52. 1 mg异槲皮苷和32. 7 mg紫云英苷两种黄酮化合物。经高效液相色谱检测,其纯度分别为96. 61%和97. 78%。应用高效液相色谱和电喷雾质谱联用技术,通过与标准化合物的液相色谱保留时间、紫外光谱,分子离子峰及中性碎片的丢失等进行对比,对分离得到的两种化合物的进行结构鉴定。

高效逆流色谱法从白益母草中分离制备4个抗氧化活性成分

目的:建立高效逆流色谱法(HPCCC)从白益母草中分离制备4个抗氧化成分。方法:白益母草95%乙醇水提取物经D101大孔树脂柱色谱,先用水和45%乙醇水各1000 mL洗脱,然后用70%乙醇水(5000 mL)洗脱。70%乙醇水洗脱液减压回收至干,用HPCCC法以正己烷-正丁醇-水-冰醋酸(1∶2∶1∶0.1)为两相溶剂系统,在主机转速1000 r·min^(–1),检测波长261 nm条件下进行分离制备,得到化合物1~4,经谱学数据分析,确定其结构式。同时,利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法测定化合物1~4的抗氧化活性。结果:从白益母草70%乙醇水洗脱液中分离得到4个化合物,分别为5,7,4′-三羟基黄酮-7-O-(6′′-O-反式-咖啡酰基)-β-葡萄糖苷(1)、5,7,4′-三羟基黄酮-7-O-(2′′,6′′-O-反式-二香豆酰基)-β-葡萄糖苷(2)、5,7,4′-三羟基黄酮-7-O-(6′′-O-反式-香豆酰基)-葡萄糖苷(3)和毛蕊花苷(4)。化合物1~4表现出显著的抗氧化活性,其有效半数浓度(EC_(50))平均值分别为(22.9±2.7)、(26.2±3.4)、(24.4±3.1)和(19.5±1.8)μg·mL^(-1)。结论:建立的方法可高效分离纯化白益母草中可作为天然抗氧化剂的4个化合物。