荧光素酶标记人胃癌细胞裸鼠原位移植模型的建立

目的建立荧光素酶标记人胃癌原位异种移植模型。方法将萤火虫荧光素酶作为标记基因导入人胃癌MGC803细胞,建立稳定表达荧光素酶的细胞,将其接种裸鼠胃壁浆膜下,建立胃癌裸鼠原位肿瘤模型。用活体荧光成像系统检测肿瘤的发生发展,并进行小动物超声影像和病理学分析。结果裸鼠原位成瘤率为100%,活体荧光成像观察发现在接种第7天,就可以观察到肿瘤发光。21 d后肿瘤进入对数生长期,28 d后肿瘤出现明显坏死,平均荧光光子数呈现下降趋势。超声成像发现小鼠胃部有直径为8.39 mm,面积为28.92 mm2瘤块。结论荧光素酶标记可以实时监测原位异种移植人胃癌生长状况。

小动物超声成像技术在针灸研究中运用的新思路

超声成像技术在针灸临床上广泛应用于对疾病的诊断、疗效评价等方面,但由于低分辨率等限制,临床用超声仪无法应用于针灸基础研究。超高分辨率小动物超声成像系统具有分辨率高、无创、可实时、动态观察,亦可进行整体及局部观察等优势弥补了这个缺陷。然而目前该技术在针灸研究中的运用极少,而将小动物超声成像技术运用于针灸基础研究,尤其运用于针灸治疗心脏、血管、肿瘤等疾病的研究以及可视化针刺等方面,将有助于完善针灸治疗不同疾病效应及其作用机制的研究,亦可为不同深度针刺方法的临床应用提供科学依据,这将促进针灸效应机制研究的发展,为针灸基础研究开拓新的方向。

高校大型仪器小动物超声系统培训课程探索与实践

文章总结了实验小动物超声影像系统培训课程的特点以及实施方案。对学生实行按需培训,因人施教,培训内容以超声基础、解剖学、实验动物学等基础知识先行,实践操作培训为重;探索了大型仪器培训课程的建立,旨在使学生能更好地掌握这门技术,为科研课题取得优质的图像与数据;顺应了当今学科发展和人才培养新形势的要求,力争大型仪器共享与资源利用最大化。

生脉饮改善多柔比星对乳腺癌小鼠的治疗作用

目的:观察生脉饮与多柔比星(doxorubicin, DOX)联合应用对耐DOX乳腺癌小鼠的治疗作用。方法:雌性BALB/c小鼠,随机分为6组,分别为:(1)空白对照组(n=10)。(2)模型组(n=20)。(3) DOX组(n=20)。(4) DOX+生脉饮低剂量组(n=20)。(5) DOX+生脉饮中剂量组(n=20)。(6) DOX+生脉饮高剂量组(n=20)。小鼠乳垫原位接种4T1-Luc/DOX细胞制备耐DOX乳腺癌小鼠模型,动态观察小鼠一般状态及瘤体积;小动物活体成像检测系统分别于造模后2,3,4周对模型小鼠肿瘤生长情况进行动态分析,取材前应用高分辨小动物超声影像系统检测各组小鼠心功能。记录小鼠死亡时间。结果:4T1-Luc/DOX细胞原位接种制备乳腺癌小鼠模型成功率为100%。DOX组及DOX+生脉饮各剂量组在造模2~5周时,小鼠体重低于空白组和模型组。DOX组及DOX+生脉饮中剂量组在造模3周时,肿瘤组织光强值低于模型组。DOX+生脉饮各剂量组3~5周时,瘤体积小于模型组。DOX+生脉饮中、高剂量组在3周时,瘤体积小于DOX组。DOX+生脉饮各剂量组心脏重量低于空白组和模型组。与DOX组比较,DOX+生脉饮中、高剂量组射血分数和短轴缩短率增高。各组死亡率比较:(3)>(5)>(4)>(6)>(2)>(1)。结论:生脉饮与DOX联合应用能够增强DOX治疗乳腺癌效应,减轻DOX引起的心功能损伤,降低肿瘤小鼠的死亡率。

基于调控HIF-1α表达探讨温经汤改善大鼠子宫内膜异位症的机制

目的:观察温经汤对子宫内膜异位症(EMs)大鼠缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达及线粒体超微结构的影响,探讨温经汤治疗EMs的作用机制。方法:采用自体内膜移植法复制大鼠EMs模型,小动物超声成像系统检测异位病灶体积,依据体积均衡原则随机分为模型组、温经汤低、中、高剂量组(4.85,9.7,19.4 g·kg-1)及孕三烯酮组(0.25 mg·kg-1),每组10只,另设假手术组10只。药物治疗6周后,超声成像系统及卡尺分别测量异位病灶体积,苏木素-伊红(HE)染色观察异位内膜组织形态,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测腹腔液白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测在位或异位内膜组织HIF-1αmRNA及蛋白表达,透射电镜观察异位内膜线粒体超微结构。结果:与假手术组比较,模型组可见异位病灶生成,呈囊泡样结构,病灶内可见典型的子宫内膜组织形态,IL-1β,TNF-α,TGF-β1含量显著升高(P<0.01),HIF-1αmRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),透射电镜可见异位内膜胞浆中线粒体数量增加,结构完整;与模型组比较,温经汤各剂量组异位病灶体积显著降低(P<0.01),且超声检测结果与卡尺测量结果大体一致,HE染色可见异位内膜柱状上皮细胞破损或脱落、间质细胞疏松;温经汤各剂量组TNF-α含量明显降低,温经汤中、高剂量组IL-1β,TGF-β1含量明显降低(P<0.05,P<0.01);温经汤各剂量组还可明显降低HIF-1αmRNA及蛋白表达(P<0.05,P<0.01);且温经汤治疗后异位内膜线粒体明显肿胀,嵴断裂甚至消失,部分线粒体空泡变性,外膜破裂。结论:温经汤对大鼠实验性EMs具有较好的治疗作用,机制与降低HIF-1α表达,改善异位病灶乏氧,诱导异位内膜线粒体损伤有关。