FL-1多功能吸附树脂对沙棘叶总黄酮的分离纯化

目的 考察 FL- 1多功能吸附树脂对沙棘叶中总黄酮的分离纯化方法。方法 根据沙棘叶黄酮的结构特征 ,考察了 FL - 1树脂的吸附性能 ,并采用高效液相色谱法对沙棘叶总黄酮进行了定量分析。结果 FL - 1树脂对沙棘叶总黄酮具有较高的吸附选择性 ,70 %乙醇作为脱附剂 ,产品中总黄酮含量为 4 0 .2 %。结论 FL- 1树脂用于沙棘叶总黄酮的分离纯化简便有效。

RP-HPLC法测定沙棘叶发酵前后4种黄酮苷类成分含量的变化

目的建立反向高效液相色谱(RP-HPLC)法比较沙棘叶发酵前后芦丁、异槲皮苷、水仙苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷含量的变化。方法沙棘叶及其发酵茶水提液浓缩干燥后用70%乙醇溶解,分析采用HPLC法,Extend-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,流速1 ml/min,检测波长为356 nm,柱温30℃。结果沙棘叶中芦丁含量较高。经过发酵后,除异槲皮苷含量略有升高外,异鼠李素-3-O-葡萄糖苷含量变化不大,芦丁、水仙苷含量均有所下降。上述4种成分在一定范围内呈现良好的线性关系,相关系数r均大于0.9997;精密度、重复性和稳定性良好;加样回收率在96%~103%之间。结论沙棘叶发酵降低了芦丁和水仙苷含量,增加了异槲皮苷含量。该法简便、可靠,可为沙棘叶和沙棘叶发酵茶的质量评价提供科学依据。

沙棘叶黄酮糖苷生物转化黄酮苷元研究

沙棘叶中的黄酮类化合物主要以糖苷形式存在,现采用酶法水解糖苷中的糖基使其变成苷元,提高抗氧化活性。沙棘黄酮糖苷经过α-鼠李糖苷酶(1IU)、β-葡萄糖苷酶(2IU)、木聚糖酶(1.5IU)、纤维素酶(15IU)、果胶酶(0.5IU)、α-淀粉酶(2IU)组成的复合酶预处理后,黄酮糖苷转化率仅为0.23%,再用柚苷酶水解可获得高含量的黄酮苷元,转化率达85%以上,其中槲皮素占总黄酮苷元的23.31%,异鼠李素占35.11%,山奈酚占9.95%。沙棘黄酮苷元不易溶于水而溶于乙醇。

微波辅助萃取沙棘叶多糖的研究

选取料液比、微波功率和萃取时间为因素,用正交试验的方法对微波辅助萃取沙棘叶多糖进行了研究.结果表明最佳萃取条件为:料液比(g∶mL)1∶40,微波功率540W,萃取时间50s.沙棘叶多糖提取率为5.25%.

沙棘叶水溶性多糖的分离纯化及体外清除自由基活性研究

通过采用热水提取、乙醇沉淀获得沙棘叶水溶性粗多糖,再经酸性乙醇分级,将沙棘叶水溶性粗多糖分为三个级分SJ1、SJ2和SJ3,将对自由基有初步清除作用的SJ2脱蛋白后经DEAE-SephdexA-25进行分离纯化得SJ22。SJ22经纸层析、醋酸纤维薄膜电泳和SephroseCL-4B柱层析纯度鉴定表明:SJ22为分子量均一的纯多糖。分子量为7万。纸层析显示SJ22单糖组成为Xy1、Ara、G lc、Gal、GalA。抗衰老活性研究结果表明,SJ22能有效清除.OH、O2-.自由基,对脂质自由基.R效果不明显。

沙棘多糖HRPⅠa纯化及鉴定

作者研究了沙棘多糖Ⅰ(Hippophae rhamnoides L. polysaccharideⅠ,HRPⅠ)的组成。采用DEAE-Sephadex A-50凝胶柱对粗提多糖进行分离,酶法对HRPⅠ脱蛋白后,Sephadex-G150层析对HRPⅠ多糖进一步提纯,HPLC层析确定HRPⅠa组成及组分比例,利用红外光谱鉴定多糖HRPⅠa糖苷键。采用DEAE-SephadexA-50凝胶柱分离多糖,得到2种组分分别为HRPⅠa、HRPⅠb。HPLC检测HRPⅠa水解物由木糖、甘露糖、葡萄糖组成,并且它们之间的摩尔比值为1∶1.06∶1.13。红外光谱确定多糖HRPⅠa构型同时含有α和β-型糖苷。

沙棘果水溶性多糖的分离纯化、组分分析及抗氧化活性的研究

用热水提取沙棘果多糖,乙醇沉淀,并用正交实验确定最佳条件,Sevage法去蛋白,酸性乙醇分级沉淀,分出A、B、C及D四个组分,其中C用DEAE柱层析进一步纯化出C1和C2两个级分,SephadexG-75及聚丙烯酰胺凝胶电泳证明C1为单一组分,C2为两种多糖混合组分,经薄层层析分析,C1中含葡萄糖。C2的主要级分中含木糖和一未知组分。抗氧化实验表明沙棘多糖具有抗氧化活性,且抗氧化作用随浓度增加而加大。

沙棘叶水溶性多糖的初步纯化及体外清除自由基活性研究

通过采用热水提取乙醇沉淀获得沙棘叶水溶性粗多糖,再经酸性乙醇分级,将沙棘叶水溶性粗多糖分为三个级分:SJ1、SJ2和SJ3,经PC和GC分析都含有X y l(木糖)、A ra(阿拉伯糖)、G lc(葡萄糖)、M an(甘露糖)、G a l(半乳糖)、G a lA(半乳糖醛酸).对粗多糖及SJ2脱蛋白后的多糖SJ2′进行清除自由基活性研究,结果表明,粗多糖对三种自由基的清除力很小,而SJ2′能有效清除.OH、O2-.自由基,对脂质自由基R.效果不明显.

沙棘多糖HRP Ⅰa生物活性初探

研究了沙棘多糖(Hippophae rhamnoidesL.polysaccharide,HRP)保健功能及其抑菌作用。分别对HRP、HRP Ⅰ、HRP Ⅰa进行自由基.OH、O.-2、R.清除、抑菌效果及最小抑菌浓度的测定。HRP Ⅰa对.OH、O.-2及R.清除率最高,清除.OH、O.-2及R.所需最大质量浓度分别为:1 000、400、80μg/mL;HRP Ⅰa对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、腊状芽孢杆菌等菌种均有一定的抑制作用。

沙棘叶多糖的超声波辅助提取及抑菌作用研究

为了研究沙棘叶多糖的提取工艺条件,在液固比、超声波功率和超声波作用时间3个单因素对多糖得率影响的基础上,利用响应面分析法对超声波辅助提取沙棘叶多糖的最佳工艺条件进行优化。实验结果表明,沙棘叶多糖的最佳提取条件为液固比52.5∶1、超声波功率607.1W、超声波作用时间42.3 min,此优化条件下,多糖得率可达7.50%(质量分数)。此外沙棘叶多糖经初步纯化后,采用琼脂平板扩散法进行抑菌试验,结果显示沙棘叶多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等四种病原菌均有一定的抑制作用。

沙棘叶水溶性多糖SJ_(21)的研究

热水提取乙醇沉淀获得沙棘叶粗多糖,经酸性乙醇分级和DEAE-SephadexA-25纯化得多糖SJ21.纯度鉴定表明多糖SJ21为均一多糖,分子量约为70KD.单糖组成为Xyl、Ara、Man、Gal、G lc.摩尔比为1.0∶2.1∶5.3∶3.7∶2.9.多糖SJ21结构分析采用了UV、IR、高碘酸氧化、Sm ith降解、甲基化分析、GC、GC—MS和NMR等方法.结果表明:多糖SJ21主链由β-(1→4)Man基、β-(1→6)Gal基、β-(1→4)G lc基构成,其中Man在6-O处有分枝;Gal在3-O处和4-O处有分枝;支链由(1→4)、(1→3)Xyl基和(1→4)或(1→5)Ara基和(1→2、4)或(1→2、5)Ara;末端基为G lc、Gal、Ara.沙棘多糖SJ21是一新结构多糖,为首次从该植物中分离得到.

沙棘叶水溶性多糖的生物活性研究

采用热水提取乙醇沉淀,获得了沙棘叶水溶性粗多糖,再经酸性乙醇分级,将沙棘叶水溶性粗多糖分为3个级分(即SJ1,SJ2和SJ3),经PC和GC分析,各级分都含有Xyl,Ara,G lc,M an,Gal,GalA.抑菌实验表明:沙棘叶多糖对大肠杆菌、枯草杆菌和四叠菌都有明显的抑菌作用,对白葡萄球菌呈阴性.

沙棘叶中总黄酮的提取和纯化

目的研究不同方法对沙棘叶总黄酮的提取效果以及大孔吸附树脂对沙棘叶总黄酮的纯化性能及纯化条件。方法采用索氏提取法、超声提取法和微波提取法提取沙棘叶总黄酮,用X-5大孔吸附树脂对沙棘叶总黄酮进行纯化,并用紫外分光光度法测定其含量。结果索氏提取法提取6h的提取率为19.78%,超声提取10min的提取率为19.19%,微波提取10min的提取率为24.19%;X-5大孔吸附树脂对沙棘叶总黄酮的纯化性能较佳,其对沙棘叶总黄酮的纯化条件为:上样液浓度1.159-1.545mg/ml,上样液pH值4.06,洗脱剂为50%乙醇。结论循环超声提取10min即与索氏提取6h的提取效果相当,而微波提取技术大大缩短了提取时间,而且提取率有所增加;X-5树脂适合应用于沙棘叶总黄酮的纯化。

沙棘籽渣多糖对正常及糖尿病模型动物血糖的影响

本文研究了沙棘籽渣多糖(Polysaccharides from seed residue of Hippophae rhamnoide L.,PSH)对正常小鼠及实验性2型糖尿病大鼠血糖、血脂代谢的影响。以100、200和400 mg/kg剂量的PSH连续灌胃正常小鼠20d;以50和100 mg/kg剂量的PSH连续灌胃由烟酰胺联合链脲佐菌素诱导的类似2型糖尿病大鼠3周,测定血糖、糖基化血清蛋白、血清胰岛素、血清总胆固醇、甘油三酯及肝糖原含量。结果显示:PSH对正常小鼠的血糖和血脂代谢没有明显影响;但能明显降低2型糖尿病大鼠的血清葡萄糖、总胆固醇和糖基化血清蛋白水平,同时显著增加糖尿病大鼠的血清胰岛素含量。上述结果表明:PSH在实验性2型糖尿病大鼠模型上具有降血糖和降胆固醇的活性。

沙棘叶水溶性多糖分级组分抗氧化活性的研究

为了研究沙棘叶水溶性多糖分级组分的体外抗氧化活性,采用热水浸提、乙醇分级沉淀,得到沙棘叶水溶性多糖分级组分:WPFH60、WPFH70、WPFH80,经Sevag法脱蛋白,透析,冷冻干燥后备用。通过还原力、清除超氧阴离子、清除羟基自由基和抑制H2O2诱导红细胞氧化溶血试验来评价3个组分的体外抗氧化能力,并与BTH进行比较。结果表明:WPFH60、WPFH70和WPFH80均具有一定的抗氧化活性,且呈显著的量效关系。其中,WPFH70对O2-和OH-具有较强的清除作用,IC50分别为:311.1和179.9μg.mL-1;对H2O2诱导红细胞氧化溶血及MDA生成有很强的抑制作用,IC50分别为:194.3和174.5μg.mL-1。WPFH60、WPFH70和WPFH80在一定浓度范围内都具有抗氧化性,是一种天然的抗氧化剂。

亲子群体沙棘叶黄酮成分含量及其变化研究

本研究对 2个沙棘杂交子代群体、亲本群体及对照实生中国沙棘在不同时间的沙棘叶游离黄酮和部分叶样的水解黄酮甙进行了分析。对内蒙古坝口子和九城宫 2个基地 7个群体的沙棘叶分析表明 :沙棘叶中槲皮素、异鼠李素及桑色素等黄酮组分均处于非游离状态 ,而只有芦丁以游离态存在。从 2个基地研究群体的游离总黄酮变化来看 ,6月初到 7月中旬叶中总黄酮含量保持相对稳定 ,其中坝口子群体变化在80 0～ 10 0 0mg/ 10 0 g ,九城宫各群体叶中游离总黄酮含量变化在 90 0～ 1380mg/ 10 0 g之间。对九城宫的杂交子代群体和当地中国沙棘 2群体的叶水解黄酮甙进一步分析发现 ,沙棘叶中主要有 3种黄酮甙、槲皮素、异鼠李素和山奈酚。该 2群体叶中槲皮素的含量集中在 6月 1日到 8月 15日之间 ,变化在 0 3～ 0 4 g/10 0 g ,异鼠李素含量变化在 0 2 7～ 0 38g/ 10 0g范围内 ;山奈酚 2群体叶中含量接近 ,变化范围在 0 6 g/10 0 g～ 0 2 g/ 10 0g ,水解总黄酮甙含量则呈现波浪式下降趋势 ,2群体变化范围在 1 3g/ 10 0 g～ 0 79g/10 0 g。

硫酸酯化沙棘叶多糖的制备及其解酒作用

探究硫酸酯化沙棘叶多糖(sulfated seabuckthorn leaf polysaccharide,SSLP)的解酒作用。采用氯磺酸-吡啶法修饰沙棘叶多糖(seabuckthorn leaf polysaccharide,SLP),氯化钡-明胶浊度法及红外光谱法检测其取代情况。瓦勒-霍赫法检测SSLP及SLP对乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase ,ADH)的影响作用。使用酒精建立小鼠醉酒模型,记录小鼠醉酒潜伏时间、持续醉酒时间,测定血清中ADH活性。结果表明,SSLP在1 244.07、808.16 cm-1处有S=O 、C-O-S吸收峰,表明酯化成功,硫酸基取代度为1.63;与模型组比较,SLP和SSLP组小鼠醉酒潜伏期显著延长,持续醉酒时间显著缩短,ADH活性显著增强,且SSLP优于SLP。说明SSLP与SLP均具有较好的解酒作用且SSLP的解酒活性更优,因此可通过衍生化的方式增强SLP的解酒活性。

表面活性剂辅助提取沙棘叶黄酮工艺优化及其抗氧化活性测定

通过单因素试验优化表面活性剂辅助提取沙棘(Hippophae rhamnoides L.)叶中黄酮的提取工艺,并且对粗提液的抗氧化活性进行测定。结果表明,表面活性剂辅助提取沙棘叶黄酮的最佳提取工艺为选用0.02 g/m L的蔗糖酯作表面活性剂、乙醇体积分数5%、提取温度70℃、料液比1∶70(g∶m L)、提取时间1.5 h,此条件下黄酮提取率为1.6%。黄酮粗提液对超氧阴离子自由基、羟自由基、DPPH自由基有明显的清除作用。

沙棘多糖清除自由基及抗脂质过氧化作用研究

目的:探讨沙棘多糖体外清除自由基及抗脂质过氧化作用。方法:采用体外抗氧化活性法测定沙棘多糖对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除能力及沙棘多糖总还原能力;制备5%小鼠肝脏匀浆,通过模拟建立体外小鼠肝匀浆自发性脂质过氧化模型、CCl_4体外诱导小鼠肝匀浆脂质过氧化模型、H_2O_2体外诱导小鼠肝匀浆脂质过氧化模型、Fe^(2+)-V_C体外诱导小鼠肝脏脂质过氧化模型,利用TBA显色法,观察沙棘多糖对脂质过氧化的抑制作用。结果:沙棘多糖对DPPH自由基、OH自由基和超氧阴离子自由基都具有一定的清除能力,其IC_(50)值分别为1.55、1.23、8.31 mg/mL,其浓度为2 mg/mL时,还原能力稍高于同浓度V_C。沙棘多糖对小鼠肝匀浆自发性脂质过氧化及CCl_4、H_2O_2、Fe^(2+)-V_C所诱导的肝脏脂质过氧化均具有抑制作用,其IC_(50)值分别为1.10、1.59、9.13、1.39 mg/mL。结论:沙棘多糖具有一定的抗氧化活性及抗脂质过氧化作用。

沙棘叶黄酮纯化工艺优化

采用溶剂浸提法提取总黄酮,大孔树脂吸附纯化,分光光度法测定总黄酮的含量,正交试验建立沙棘叶总黄酮纯化的优化工艺.结果得出沙棘叶黄酮纯化优化工艺是:选用AB-8型大孔树脂对沙棘叶总黄酮粗制品进行吸附纯化,用浓度为0.20mg/mL,pH=6.0沙棘叶黄酮溶液上样,控制流速为2.0mL/min.选用70%乙醇进行洗脱,用量为柱床体积的4倍,流速为3.0mL/min.经纯化后得精制品1.29g,总黄酮含量为14.89%,比粗制品黄酮含量提高103倍.用此工艺,AB-8型湿树脂饱和吸附量为79.19mg/ml,树脂重复利用8次后,吸附率都在70%以上,仍无明显变化.上述工艺操作简单、方法可靠,产品得率高,说明此工艺可以有效纯化沙棘叶总黄酮,且树脂可重复利用次数多,性能好,适合于沙棘叶黄酮的大规模生产.