炙黄芪-水蛭联合阿加曲班注射液治疗气虚血瘀型急性脑梗死的疗效观察

[目的]探究炙黄芪-水蛭联合阿加曲班注射液治疗气虚血瘀型急性脑梗死的疗效观察。[方法]选取2021年2月—2023年2月于本院进行急性脑梗死治疗的患者110例,按照随机数字表法将其分为阿加曲班注射液组(西药组)34例、炙黄芪-水蛭组(中药组)36例,以及联合组40例。西药组给予阿加曲班注射液;中药组给予炙黄芪-水蛭;联合组给予炙黄芪-水蛭联合阿加曲班注射液治疗。评估患者治疗前后中医证候积分水平;采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、改良Rankin(mRS)评分量表评估患者自身的神经功能缺损情况以及神经功能恢复情况;检测脑血流阻力指数(RI)、舒张期血流速度(Vd)、收缩期峰值流速(Vs)、平均血流速度(Vm)、血管内皮生长因子(VEGF)、一氧化氮(NO)水平。[结果]治疗后,联合组中医证候积分、NIHSS、mRS评分、RI、VEGF水平均低于西药组、中药组(P<0.05);Vd、Vs、Vm、NO水平高于西药组、中药组(P<0.05);联合组总有效率较高(P<0.01)。[结论]经炙黄芪-水蛭、阿加曲班注射液联合治疗,其气虚血瘀型急性脑梗死患者中医证候积分水平降低,相关神经功能、血流情况及血管内皮损伤情况均得到显著改善,临床治疗效果显著。

基于本草考证的水蛭功能主治及用法用量探究

基于本草考证,水蛭功能主要为破血逐瘀和活血通络;用药形式以水煎剂和研末为主;现代水煎剂用量2~20 g,研末用量1~10 g,古今均超出药典规定剂量,剂量选择与临床用药目的、用药形式相关,破血逐瘀之功用量常高于活血通络之功用量,水煎剂用量高于粉剂。水蛭的临床剂量具有一定的研究价值,《中华人民共和国药典》规定剂量有一定的局限性,临床应用应因人、因证、因时制宜给予最佳剂量。

水蛭治疗脑小血管病所致认知功能障碍的疗效分析

目的探究水蛭饮片治疗脑小血管病(Cerebral Small Vessel Disease,CSVD)所致认知障碍患者的临床疗效。方法方便选取2020年10月—2023年6月广西壮族自治区民族医院神经内科收治的120例CSVD所致认知障碍患者为研究对象,以随机数表法分为对照组和观察组,各60例。对照组实施内科常规西药基础治疗,观察组在对照组治疗基础上增加中药水蛭口服治疗。观察并对比两组的治疗结果。结果治疗后与对照组相比,观察组最小量认知评估量表(Mini Mental State Examination,MMSE)评分、蒙特利尔认知评估量表(Montreal Cognitive Assessment,MoCA)评分更高,差异有统计学意义(P均<0.05)。观察组临床治疗有效率(86.67%)显著高于对照组(71.67%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.093,P<0.05)。治疗后与对照组相比,观察组的白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)和超敏-C反应蛋白(High Sensitive C-reactive Protein,hs-CRP)水平更低,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论水蛭能有效减轻CSVD所致认知障碍患者的临床症状,改善患者的认知功能障碍。

水蛭治疗脑小血管病所致神经功能障碍的疗效及其对相关生物标志物的影响

目的探讨水蛭治疗脑小血管病(Cerebral Small Vessel Disease,CSVD)所致神经功能障碍患者的临床疗效。方法选取2020年10月—2023年6月广西壮族自治区民族医院神经内科收治的120例CSVD导致认知功能障碍患者为研究对象,以随机数表法分为对照组(n=60,常规西药内科基础治疗)和观察组(n=60,在对照组基础上增加中药水蛭治疗)。分别于治疗前、治疗2周及治疗3个月后观察两组患者的神经功能障碍评分和血清胱抑素C、同型半胱氨酸、高敏C反应蛋白指标水平。结果与治疗前相比,两组治疗2周、治疗3个月后的神经功能障碍评分以及血清胱抑素C、同型半胱氨酸、高敏C反应蛋白指标水平均明显下降,且观察组治疗3个月后下降幅度更大,差异有统计学意义(P均<0.05)。观察组治疗的总有效率(86.67%)高于对照组(71.67%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.093,P<0.05)。结论水蛭能有效改善CSVD所致的神经功能缺损,同时能降低患者血清胱抑素C、同型半胱氨酸、高敏C反应蛋白指标水平。

戈焰教授运用水蛭治疗慢性萎缩性胃炎经验总结

水蛭,为水蛭科动物蚂蟥Whitmania pigra Whitman、水蛭Hirudo nipponica Whitman或柳叶蚂蟥Whitmania acranulata Whitman的干燥全体^([1]),全国各地均有出产。其首见于《神农本草经》,记载水蛭“主逐恶血、瘀血、月闭,破血瘕积聚,无子,利水道”。后世认为其性咸、苦、平,有小毒,归肝经,功效为破血通经、逐瘀消癥。现代药理研究^([2])表明,水蛭具有抗凝、抗血栓、抗肿瘤、抗炎、抗纤维化等广泛的药理作用,目前主要应用于心脑血管疾病。

水蛭素对腹膜透析相关性腹膜纤维化模型大鼠的干预作用及机制研究

目的:探究水蛭素对腹膜透析(PD)相关性腹膜纤维化(PF)模型大鼠的干预作用及机制。方法:选取60只SD大鼠,随机分为对照组、模型组及水蛭素高、低剂量组,每组15只。除对照组外,所有大鼠均建立PD相关性PF模型。各组均于建模第1日开始皮下注射给药,水蛭素高剂量组给予水蛭素0.8g/(kg·d),水蛭素低剂量组给予水蛭素0.2g/(kg·d),模型组及对照组均给予等量的0.9%氯化钠注射液。连续干预28d后,测量大鼠腹膜超滤量及腹膜厚度,检测大鼠肾功能指标[尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)]及Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)水平,观察大鼠腹膜组织病理学变化,并检测Wnt/β-catenin通路蛋白表达情况。结果:与对照组比较,模型组腹膜超滤量及腹膜厚度增加(P<0.05),SCr、BUN及PⅢNP水平升高(P<0.05),Wnt1、β-连环蛋白(β-catenin)及纤维连接蛋白(FN)表达上调(P<0.05);与模型组比较,水蛭素低、高剂量组腹膜超滤量及腹膜厚度减少(P<0.05),SCr、BUN、PⅢNP水平降低(P<0.05),Wnt1、β-catenin及FN表达下调(P<0.05),且水蛭素高剂量组腹膜超滤量及腹膜厚度小于水蛭素低剂量组(P<0.05),SCr、BUN、PⅢNP水平及Wnt1、β-catenin、FN表达低于水蛭素低剂量组(P<0.05)。结论:水蛭素能改善PD相关性PF大鼠腹膜功能,改善肾功能,降低腹膜纤维化,其作用机制可能与水蛭素对Wnt1/β-catenin通路的抑制作用有关。

基于破血逐瘀理论探讨中药水蛭及其复方治疗肿瘤的研究进展

肿瘤是临床中比较难治疗的疾病,化疗药物的耐药性以及治疗过程中的不良反应增加了治疗的难度。中药作为天然药物,具有不良反应少、遗传毒性低等优点,可以在治疗肿瘤疾病的同时对机体功能从根本上进行调理,通过查阅文献发现破血逐瘀药物,如三棱、莪术、水蛭、斑蝥等用于治疗肿瘤疗效确切,基于此,从破血逐瘀理论出发,分析肿瘤的中医病因病机及破血逐瘀治则,总结水蛭临床治疗肿瘤的部分作用机制,旨在为临床诊疗该疾病提供参考及研究方向。

水蛭抗凝血类成分及提取物治疗缺血性中风的研究进展

水蛭是我国传统的动物类活血化瘀药,现代药理学研究表明,水蛭提取物中含有大量的抗凝类成分,具有多种药理作用,水蛭提取物对心脑血管疾病具有很好的临床治疗效果。笔者通过对水蛭中抗凝血类化学成分及其药理作用相关研究文献进行综述,发现水蛭中含有蛋白质等多肽类、类脂类、蝶啶类等化合物,其中水蛭中抗凝类化合物为水蛭中的主要有效成分,具有抗血栓、抗凝血、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤、抗炎等多种药理作用,治疗缺血性中风的作用机制与改善凝血、改善血液流变和微循环并能修复受损血脑屏障作用有关。

水蛭素的HPLC色谱分析条件优化研究

为研究水蛭素的HPLC最佳色谱分析条件,通过对比重组水蛭素的HPLC分析方法的洗脱条件、检测波长、色谱柱的分离效果,拟合水蛭素浓度与峰面积的线性方程,优选最佳水蛭素色谱分析条件。结果显示,ODSC18柱分析最佳条件为:采用梯度洗脱,流动相A和B洗脱程序:0~60 min,B:0%~100%,进样量20μL,柱温35℃,流速为1 mL/min,波长205 nm;TSKgelG2000SW柱最佳分析条件为:流动相磷酸缓冲液(0.02 mol/L,pH 7.0),流速0.5 mL/min,检测波长205 nm,进样量20μL。研究表明,水蛭素浓度与峰面积具有良好的直线线性相关关系,采用TSKgelG2000SW色谱柱的分析效果优于ODSC18柱,可为动物活性多肽的分析提供依据。

水蛭药理作用及其在脑病中的应用

水蛭,最早见于《神农本草经》,其历史悠久,为破血消癥、活血祛瘀要药,是脑系疾病治疗的常用药物。根据目前研究总结发现,水蛭药理作用包括抗凝血、抗血栓、抗肿瘤、抗炎、抗纤维化、抗细胞凋亡、抑制血脂等方面。随着对水蛭临床疗效的逐步认识,运用中医药治疗脑病也愈加常见。水蛭在治疗脑病中的优势逐渐显现,运用水蛭治疗卒中、头痛、眩晕、痴呆、颤证等脑系疾病常取得较好疗效。

药用水蛭的化学成分及药理作用研究进展

水蛭,俗名蚂蟥,生长繁殖于内陆淡水水域,是我国传统的特种药用水生动物。部分水蛭的干燥全体泡制后入药,具有治疗中风、高血压、瘀血、闭经、跌打损伤等功效,药用价值高,因此被称为药用水蛭。近年来,随着药用水蛭资源的开发利用,其在临床医学领域的应用日益广泛,但有关合理高效利用药用水蛭鲜见相关报道,文章综述了药用水蛭的化学成分及相关的药理作用,为科学合理应用药用水蛭提供理论指导。

水蛭弹性蛋白酶抑制剂基因HnGUA的克隆及原核表达研究

目的克隆获得水蛭Hirudo nipponia弹性蛋白酶抑制剂(guamerin)基因HnGUA,并对其进行生物信息学分析、蛋白原核表达、时空表达模式等研究,以期为揭示水蛭抗凝类小分子物质生物合成途径、分子调控机理机制奠定基础。方法以日本医蛭为研究对象,基于前期转录组数据,采用cDNA末端快速扩增方法(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)获取HnGUA基因全长,并进行生物信息学分析;构建原核表达载体pET32a-HnGUA,并转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)感受态细胞,诱导重组蛋白的表达;通过实时荧光定量检测了水蛭不同吸食阶段4个组织的HnGUA基因表达模式。结果HnGUA基因cDNA全长507 bp(GenBank登录号OP490295),开放阅读框(Open reading frame,ORF)231 bp,编码76个氨基酸,蛋白分子量和理论等电点分别为8.17 kDa和4.44,包含一段长19个氨基酸的信号肽序列。多重比对分析结果显示,HnGUA蛋白与其他蛭类抑制剂基因编码蛋白具有较高的同源性。原核表达分析结果显示,构建的pET32aHnGUA载体能在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,SDS-PAGE结果显示,诱导的重组表达蛋白相对分子质量在6 kDa左右,与预测大小一致。实时荧光定量PCR结果表明,HnGUA基因存在时空表达差异,其主要在皮肤和嗉囊组织中表达。结论该研究首次在日本医蛭中克隆得到HnGUA基因,使其重组蛋白在大肠杆菌中成功表达,并且进一步研究了该基因的时空表达模式,为后续深入研究该基因功能奠定基础,同时对于不依赖于水蛭药材直接生产活性成分,加快实现中药现代化进程具有重要的理论和实践意义。

水蛭对非酒精性脂肪肝病小鼠的保护作用及其机制

目的探讨水蛭对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠的保护作用及潜在机制。方法将雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠随机分为模型组和水蛭低、高剂量组(0.45、0.9 g/kg),每组10只;另取同周龄野生型雄性C57BL/6J小鼠10只,作为对照组。对照组小鼠以基础维持饲料喂养,其余各组小鼠以高脂饲料喂养12周以建立NAFLD模型。第13周,各药物组小鼠灌胃相应药液,每天1次,连续8周。末次给药后,测定各组小鼠的体重、肝脏质量,并计算肝脏指数;检测其血清核因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;观察其肝组织病理形态学变化,并检测肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、沉默信息调节因子1(SIRT1)蛋白的表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠肝组织可见较多的脂肪空泡和炎症细胞浸润,并有明显的脂质堆积;其体重、肝脏质量及肝脏指数和血清NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、TC、TG、LDL-C水平均显著升高,血清HDL-C水平和肝组织中PPARγ、SIRT1蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,水蛭低、高剂量组小鼠肝组织病理改变均有所缓解;其体重、肝脏质量及肝脏指数和血清NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、TC、TG、LDL-C水平均显著降低,血清HDL-C水平和肝组织中PPARγ、SIRT1蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论水蛭可能通过激活PPARγ、SIRT1蛋白的表达来调节肝脏脂质代谢、抑制炎症反应,从而发挥对NAFLD的改善作用。

重构本草——水蛭

通过古籍文献调研、中医药现代研究成果的梳理,结合中医临床及中药学等学科领域内知名专家学者的认识及应用经验,归纳出水蛭:功效主要为破血通经,逐瘀消癥。症靶为闭经或月经量少或月经血块多,心腹疼痛,肢体感觉异常,跌扑损伤之肿胀、疼痛、出血。标靶为腹内结块、肿瘤,恢复期脑卒中,肾纤维化,肝纤维化改变。现代药理研究发现,水蛭及其有效成分具有抗凝、抗血栓、抗肿瘤、抗炎、抗纤维化、降血脂、保护血管内皮细胞、抗神经损伤等作用。水蛭煎剂可引发胃肠道反应及过敏反应,孕妇及月经过多者禁用。高温破坏水蛭素,临床使用应注意冲服法或用量。临床使用水蛭煎服剂量多为1~9 g,打粉吞服剂量为0.3~10 g,内服时当根据不同疾病,或同一疾病的不同阶段进行辨证使用,并积极探索水蛭用量与症靶、标靶的量效关系构建。

水蛭冻干粉与微粉的研究进展

水蛭是目前常用的活血化瘀药,其体内含有较高的抗凝血酶活性物质以及多种活性成分,从《神农本草经》开始记载使用,至今已有2000余年的历史,在医学领域有着广阔的应用实践和发展前景。近年来随着对水蛭研究的不断深入,对其药理药效的研究和实践应用的探索越来越多,而水蛭一些有效成分的不耐热性问题和对药材饮片质量提升等方面也越来越被重视,为解决这些矛盾,在炮制方式和药材饮片呈现形式也不断改进创新,水蛭冻干粉和微粉等新型饮片形式应运而生,目前已经在市场上广泛流通并受到认可。本文对水蛭冻干粉及微粉的研究成果进行综述,为水蛭冻干粉及微粉的进一步研究和使用提供参考。

基于LC-MS/MS技术的水蛭配方颗粒中7种碱基和核苷成分分析方法的建立

本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪Nexera X2和三重四极杆质谱仪LCMS-8050联用测定水蛭配方颗粒中7种碱基和核苷成分的分析方法.水蛭配方颗粒以10%甲醇50℃超声提取30 min,MRM正负模式同时检测.以Discovery■HS F5-3色谱柱进行分离,流动相为0.15%甲酸水溶液和甲醇,10 min内完成梯度洗脱.本方法采用外标法定量,7种化合物在相应的浓度范围内线性关系良好,判定系数(R^(2))均大于0.996,定量限在0.42—3.94μg·g^(-1)之间. 10 ng·mL^(-1)的混合标准品溶液连续进样6次,待测化合物峰面积RSD均小于6%,精密度良好.平行6份加标回收试验,7种化合物平均回收率在87.09%—105.81%之间,RSD%在1.35%—4.70%之间.残留实验结果为阴性.该方法准确可靠,可为水蛭配方颗粒的质量控制提供参考依据.

水蛭抗凝活性检测两种滴定方法比较

目的:比较药典标准凝血酶滴定法和白瓷板法对中药水蛭抗凝活性检测结果的影响。方法:分别采用《中国药典》中凝血酶滴定法和云南省《菲牛蛭冻干粉中药饮片炮制规范征求意见稿》中白瓷板法对水蛭抗凝活性进行多次平行滴定实验。结果:抗凝活性成分含量较高的菲牛蛭其药典法滴定结果重复性更稳定,白瓷板滴定法结果的重复性会随着单次进样量减少而趋于稳定;宽体金线蛭的抗凝活性结果在两种方法的对比检测下均较为稳定。结论:对于吸血水蛭品种抗凝活性的测量,建议保留原凝血酶滴定法;对于抗凝活性较低,实验中凝血酶溶液浓度较小的水蛭品种,两种滴定法均适用,也可同时应用互相验证。另在滴定操作中,将反应试管改换成玻璃液相进样瓶,且在滴定动作后将反应容器呈一定角度倾斜放置,有助于对反应终点进行判断,提高实验结果的准确性和稳定性。

水蛭素对糖尿病肾病模型小鼠的作用机制研究

目的本研究旨在探讨水蛭素对糖尿病肾病模型小鼠的治疗作用及机制。方法采用高脂饮食和腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病肾病小鼠模型,将模型小鼠随机分为模型组和水蛭素治疗组。治疗组小鼠给予水蛭素灌胃,连续8周。观察小鼠肾功能指数、尿液指标、炎症因子及炎性蛋白表达水平的变化。结果小鼠造模后,血糖水平显著提高,出现明显肾损伤,说明造模成功。水蛭素治疗后,血尿素氮(BUN)、血清肌酐(CREA)和尿白蛋白与肌酐比值(UACR)水平均显著降低,尿液β2-微球蛋白(β2-MG)和尿肌酐(UCr)水平均显著改善,肾皮质中炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和MCP-1的浓度均明显降低。进一步的蛋白印迹实验表明,水蛭素可以显著抑制NLRP3和TLR4蛋白的表达水平。结论水蛭素对糖尿病肾病小鼠有治疗作用,其机制可能与抗炎作用有关。

水蛭治疗缺血性脑卒中的研究进展

目前水蛭及相关制剂在缺血性脑卒中的临床治疗中运用广泛,除单用水蛭外,临床常与益气活血类中药配伍使用,其复方制剂发展和运用也愈加广泛。本文就近年来活血化瘀类中药水蛭及常用药对和复方制剂对缺血性脑卒中治疗的研究进展进行综述,总结归纳了相关临床疗效评价和作用机制研究,梳理了水蛭及常用药对和相关制剂在缺血性脑卒中的防治及在抗凝抗血栓、抗炎抗氧化、抗凋亡等各方面效用,以期为今后水蛭及相关制剂防治缺血性脑卒中的临床运用和科学研究提供参考。

基于转录组学探讨水蛭素对HK-2细胞的影响机制

目的采用转录组学技术探讨水蛭素对人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)的影响及机制。方法利用CCK-8法检测水蛭素处理之后的HK-2细胞活力,通过转录组学的技术对溶媒对照组和水蛭素组进行转录组测序;通过RSEM的方法计算不同样品中的基因表达水平,差异基因的筛选采用DEseq2方法,筛选标准为|log2FC值|≥1,P<0.05。随后根据差异表达的基因进行富集分析。结果水蛭素5 mg/mL下提高HK-2细胞活力效果最佳,转录组学研究结果表明,与正常HK-2细胞相比,水蛭素处理后的HK-2细胞有1723个基因发生差异表达。GO和KEGG分析结果表明,炎症通路的调控是水蛭素治疗高尿酸血症的主要作用机制。结论水蛭素作用于多条炎症信号通路,进而促进尿酸排泄,促进集体代谢和尿酸排出体外,起到降尿酸的作用,表明水蛭素在治疗高尿酸血症方面效果显著。