三联组氨酸核苷酸结合蛋白1与人类疾病

三联组氨酸核苷酸结合蛋白1(HINT1)是三联组氨酸蛋白超家族成员之一,三联组氨酸因为具有保守的核苷酸结合基序组氨酸-x-组氨酸-x-组氨酸-xx(x代表1个疏水氨基酸)而得名,HINT1广泛参与肿瘤、神经精神疾病等人类疾病的病理生理过程。本文主要综述HINT1的结构、分布、酶活性基本功能,以及与人类疾病的关联。

氧化损伤对视网膜色素上皮细胞三联组氨酸核苷结合蛋白1(HINT1)表达的影响

目的探讨过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化损伤对三联组氨酸核苷结合蛋白1(histidine triad nucleotide binding protein 1,HINT1)表达的影响。方法将人ARPE-19细胞系分别用0μmol·L^(-1)H_2O_2(对照组)、50μmol·L^(-1)H_2O_2、100μmol·L^(-1)H_2O_2、200μmol·L^(-1)H_2O_2、400μmol·L^(-1)H_2O_2、600μmol·L^(-1)H_2O_26个浓度梯度处理。采用Live/Dead荧光双染法和MTT法分别检测细胞活力和增殖能力;采用Western blot检测RPE细胞内BAX、BCL-2以及HINT1的表达水平。结果 H_2O_2处理6 h后,对照组及50μmol·L^(-1)、100μmol·L^(-1)、200μmol·L^(-1)、400μmol·L^(-1)及600μmol·L^(-1)H_2O_2组RPE细胞死亡率分别为(0. 35±0. 11)%、(2. 03±0. 87)%、(3. 76±1. 41)%、(12. 17±1. 26)%、(17. 69±2. 24)%、(25. 22±0. 59)%,RPE细胞死亡率呈剂量依赖性升高(P <0. 05)。H_2O_2作用后对照组及50μmol·L^(-1)、100μmol·L^(-1)、200μmol·L^(-1)、400μmol·L^(-1)、600μmol·L^(-1)H_2O_2组RPE细胞生存率分别为(40. 72±2. 71)%、(37. 75±0. 62)%、(35. 30±0. 68)%、(34. 10±0. 74)%、(33. 61±0. 71)%、(31. 05±1. 41)%,RPE细胞增殖明显减少(P <0. 05),具有剂量-效应关系。随着H_2O_2浓度的增加,BAX蛋白表达逐渐上升(P <0. 01),而抗凋亡BCL-2蛋白表达则逐渐下降(P <0. 01),BAX/BCL-2比值相比对照组分别升高1. 85倍(50μmol·L^(-1)H_2O_2组)、2. 35倍(100μmol·L^(-1)H_2O_2组)、2. 86倍(200μmol·L^(-1)H_2O_2组)、3. 97倍(400μmol·L^(-1)H_2O_2组)、8. 50倍(600μmol·L^(-1)H_2O_2组); HINT1在H_2O_2处理的RPE细胞中以剂量依赖性方式逐渐下降(P <0. 01),分别下降0. 78倍(50μmol·L^(-1)H_2O_2组)、0. 59倍(100μmol·L^(-1)H_2O_2组)、0. 45倍(200μmol·L^(-1)H_2O_2组)、0. 42倍(400μmol·L^(-1)H_2O_2组)、0. 38倍(600μmol·L^(-1)H_2O_2组)。结论 H_2O_2氧化损伤诱导RPE细胞活力显著减弱,细胞凋亡相关蛋白BAX表达升高;同时,细胞中HINT1表达下调,表明HINT1可能通过影响细胞凋亡参与年龄相关性黄斑变性的发生,为其药物作用的潜在靶点。

组氨酸三聚体核苷结合蛋白1的研究进展

组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(HINT1)是新近发现的一种肿瘤抑制因子。HINT1可以通过多种途径控制多种转录过程,发挥肿瘤抑制作用,涉及Wnt通路、p27KIP1、核因子κB、激活蛋白1和小眼畸形转录因子等,但具体机制尚未完全明确。HINT1在部分肿瘤细胞中的低表达可能与其启动子区超甲基化有关。该文就HINT1的分子结构、启动子区超甲基化现象、抑癌作用及目前发现的作用机制的研究进展予以综述。

三联组氨酸核苷结合蛋白1及其在神经精神疾病中的功能

三联组氨酸核苷结合蛋白1(HINT1)是三联组氨酸(HIT)酶家族成员,作为核苷水解酶或转移酶起作用,其生物学功能尚不清楚。HINT1蛋白可在多种组织中表达,在转录和信号转导中发挥重要作用。早期研究已经明确HINT1是单倍剂量不足的肿瘤抑制因子;也有研究表明HINT1广泛参与一系列生理过程,且部分功能与其基本的酶活性无关;新近研究表明这一蛋白与诸多外周、中枢神经系统疾病存在密切关系,在遗传性周围神经病、精神分裂症、心境障碍、药物成瘾、唐氏综合征等神经精神疾病中起作用。本文针对HINT1蛋白在以上不同神经精神疾病中的作用做了详细综述,分析归纳了HINT1在上述每一种疾病中的研究发现,以期对今后该蛋白的深入研究起到一定的指导作用。

Hint1诱导胃癌化疗耐药的临床观察及分子机制研究

【目的】观察组氨酸三聚体核苷结合蛋白1基因(Histidine triad nucleotide binding protein 1 gene,Hint1)对胃癌患者化疗疗效的影响并初步研究其可能机制。【方法】收集临床胃癌及癌旁组织,检测Hint1基因及蛋白表达并评估与化疗疗效的相关性,随后建立Hint1沉默胃癌细胞株,MTT观察沉默组及对照组对顺铂的敏感性,,免疫荧光检测DNA双链断裂(DNA double strands breaks,DSB),蛋白印迹测定共济失调毛细血管扩张综合征突变基因(ataxia telangiectasis mutated,ATM)-周期素依赖性激酶2(Cyclin-dependent kinase 2,Chk2)信号通路。【结果】Hint1肿瘤组织低表达组患者化疗有效率达82.35%,而非低表达组仅为61.54%,细胞实验显示沉默Hint1后胃癌细胞对顺铂敏感性增加,DSB损伤持续时间延长,ATM-Chk2活性显著低于对照组。【结论】Hint1可能通过调控ATM-Chk2信号通路,参与DSB损伤修复,降低胃癌化疗的敏感性。

HINT1基因在喉鳞状细胞癌中的表达和意义

目的组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(histidine triad nucleotide-binding protein1,HINT1)基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达情况及其与患者临床病理特征的关系,探讨HINT1基因在喉鳞状细胞癌发病过程中的作用。方法通过实时定量PCR和免疫组织化学检测82例喉鳞状细胞癌组织和56例癌旁组织中HINT1mRNA和蛋白水平的表达,分析其蛋白表达与患者临床病理特征的关系。结果喉鳞状细胞癌组织HINT1mRNA水平显著低于癌旁组织(P<0.01),HINT1蛋白表达阳性率显著低于癌旁组织(P<0.05)。晚期喉鳞状细胞癌组织中HINT1蛋白表达显著低于早期喉鳞状细胞癌组织(P<0.05)。结论 HINT1在喉鳞状细胞癌中可能发挥抑癌基因的作用。

非小细胞肺癌组织miR-148a-3p、Hint1 mRNA表达水平与患者预后的相关性分析

目的检测非小细胞肺癌组织中微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)、组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(Hint1)信使核糖核酸(mRNA)表达水平,并分析其与患者预后的关系。方法选取2014年6月—2016年10月于浙江省台州医院就诊的86例非小细胞肺癌患者,术中收集患者肺癌组织和配对的癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测所有组织miR-148a-3p、Hint1 mRNA表达水平,分析肺癌组织miR-148a-3p、Hint1 mRNA表达水平与患者临床病理特征的关系及二者之间的相关性,Kaplan-Meier法分析肺癌组织miR-148a-3p、Hint1 mRNA表达水平与患者5年总生存率的关系;多因素logistic回归分析影响非小细胞肺癌患者预后的危险因素。结果肺癌组织miR-148a-3p表达水平高于癌旁组织(P<0.05),Hint1 mRNA表达水平低于癌旁组织(P<0.05);无淋巴结转移患者肺癌组织miR-148a-3p表达水平低于有淋巴结转移患者,Hint1 mRNA表达水平高于有淋巴结转移患者(P<0.05);I期~Ⅱ期患者肺癌组织miR-148a-3p表达水平低于Ⅲ期患者,Hint1 mRNA表达水平高于Ⅲ期患者(P<0.05);肺癌组织miR-148a-3p与Hint1 mRNA表达水平成负相关(P<0.05);肺癌组织miR-148a-3p高表达、Hint1 mRNA低表达是非小细胞肺癌患者不良预后的危险因素(P<0.05)。结论非小细胞肺癌组织中miR-148a-3p表达上调、Hint1 mRNA表达下调,与患者临床病理特征和预后密切相关,可能成为新的肺癌治疗靶点。

组氨酸三聚体核苷结合蛋白1在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的:通过检测组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(histidine triad nucleotide-binding protein1,HINT1)mRNA及其蛋白质在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达情况,探讨其与临床病理特征的关系。方法:应用实时荧光定量(real-time fluorescence quantitative,RFQ)-PCR和免疫组织化学分别从mRNA和蛋白质水平检测HINT1在36例新鲜ccRCC组织、37例新鲜正常肾组织(其中29例配对)、30例石蜡包埋ccRCC组织与12例石蜡包埋正常肾组织中的表达水平,并分析其与临床病理特征间的关系。结果:HINT1mRNA在29例配对ccRCC和癌旁正常肾组织中的表达量分别为0.209±0.033和0.733±0.136(P<0.001),在36例ccRCC和37例癌旁正常肾组织中的表达量分别为0.245±0.035和0.694±0.108(P<0.001)。HINT1蛋白在癌旁正常肾组织中的阳性表达率为100%(12/12),弥漫性分布于细胞核及细胞质中,其中近曲小管表达强度高于远曲小管。肾小球基膜、肾小囊壁层上皮细胞可见HINT1蛋白部分表达,其强度低于肾小管,肾间质未见阳性表达。HINT1蛋白在ccRCC中的阳性表达率为60%(18/30),同样分布于细胞核及细胞质,癌组织间质阴性(P<0.01)。HINT1在mRNA和蛋白质水平表达趋势一致,在ccRCC中表达水平低于癌旁正常肾组织,并且在T3-4晚期肿瘤中表达量低于T1-2早期肿瘤中的表达量(P<0.05);但2者在不同Fuhrman核分级、性别、年龄和肿瘤大小中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HINT1可能在ccRCC发病机制中发挥肿瘤抑制作用,其表达异常可能与翻译水平之前的异常调控有关。推测HINT1mRNA和蛋白质的异常表达可作为ccRCC发生和进展的预后指标。