重组人酸性成纤维细胞生长因子对创面愈合的作用

目的:观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对创面愈合的影响,探讨rhaFGF在组织修复中的作用机制。方法:利用大鼠创伤模型,采用HE染色观察不同时间点创面愈合情况;采用免疫组化方法检测伤后不同时间点创面愈合组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)的表达情况;采用羟脯氨酸测试法检测伤口中胶原纤维的含量,并对照观察创面应用rhaFGF后以上各项指标的变化。结果:外用rhaFGF后创面组织中伤后第8天毛细血管胚芽与成纤维数量显著多于单纯创伤组,伤后第14天,经rhaFGF治疗的大鼠创面的再上皮化明显强于单纯创伤组。创面组织中caspase-3的表达量逐渐增加,外用rhaFGF后第14天和第21天的caspase-3表达量显著高于单纯创伤组。伤口中羟脯氨酸的含量逐渐增加,外用rhaFGF后第8天和第14天的羟脯氨酸含量显著高于单纯创伤组。结论:外用rhaFGF在创伤愈合的前期可以促进肉芽组织生长使得愈合周期缩短。在创伤愈合的后期可以直接或间接的促进成纤维细胞的凋亡,维持了细胞增殖与凋亡的平衡。

重组人P53腺病毒增强肝癌细胞放疗的敏感性

目的:探讨重组人P53腺病毒(recombinant human adenovirusP53,rAd-P53)对不同P53状态肝癌细胞生长的抑制和放射增敏作用。方法:以重组人P53腺病毒分别感染突变型P53肝癌细胞PLC/PRF/5和野生型P53肝癌细胞SMMC-7721,Western blotting检测肝癌细胞P53蛋白表达,MTT法检测细胞存活率,台酚蓝染色绘制细胞生长曲线。肝癌细胞感染rAd-P5348h后照射不同剂量的X射线,克隆形成法检测放射增敏比,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:50MOIrAd-P53转染PLC/PRF/5和SMMC-7721细胞后转染效率分别为89.37%和87.53%,转染48h可见P53蛋白高表达,MTT法显示细胞存活率分别为3.41%和35.44%,细胞生长曲线显示感染后第5天两种细胞生长抑制率分别为41.91%和17.03%(P<0.01),PLC/PRF/5细胞的凋亡率[(8.8±1.4)%]显著高于SMMC-7721[(4.1±1.1)%](P<0.01)。应用20MOI的rAd-P53转染细胞48h后加X射线(4Gy)照射,PLC/PRF/5细胞的凋亡率为(26.9±5.6)%,显著高于SMMC-7721细胞凋亡率(16.4±2.9)%(P<0.01);20MOI的rAd-P53转染后加照射PLC/PRF/5和SMMC-7721,细胞的放射增敏比SER(Dq)值分别为1.30和1.16;SER(D0)值分别为1.57和1.25。结论:rAd-P53能显著抑制人肝癌细胞生长、诱导细胞凋亡并提高细胞的放射敏感性,其对PLC/PRF/5细胞作用显著强于SMMC-7721细胞;表明不同内源性P53状态的肝癌细胞对rAd-P53治疗及其协同的放疗敏感性可能不同。

同步荧光法测定人尿中异黄蝶呤

研究了一种测定人尿中异黄蝶呤的同步荧光分析方法.在KH2PO4-NaOH缓冲溶液中（pH 7.8）,波长差（Δλ）为65 nm的条件下进行同步荧光扫描,可有效排除尿液中其它物质对异黄蝶呤测定的干扰.异黄蝶呤的质量浓度在0～1.4 μg/mL范围内与荧光强度呈良好的线性关系.线性方程为Ⅰ=4105.3ρ＋59.696, 相关系数r=0.9997.异黄蝶呤添加到健康人和胃癌病人尿样中的平均回收率分别在102.9%～108.4%及85.6%～95.6%之间,其相对标准偏差（RSD）分别为0.37%～1.2%及1.0%～2.2%.方法已应用于人尿中异黄蝶呤的测定.

惠州市成年女性HPV感染及其基因型分布

目的了解本辖区成年女性HPV感染状况及人乳头瘤病毒(HPV)基因型分布,为宫颈癌筛查及防控策略提供科学依据。方法收集2009年1月～2011年12月间惠州市部分医院妇科门诊妇检人群宫颈脱落细胞有效标本5 860份,其中宫颈上皮内瘤变Ⅰ(CINI)47例、CINⅡ49例、CINⅢ38例,宫颈癌4例,应用核酸分子杂交技术检测HPV基因型。结果 5 860例标本中,HPV阳性1 154例,HPV阳性率19.7%,<20岁年龄组、20岁～年龄组和50～60岁年龄组阳性率较高,分别达23.7%、20.2%和22.8%。共检出19种基因型,高危亚型13种,占HPV阳性57.89%,低危亚型6种占42.11%,高危亚型主要有HPVl6、58、52、33、18、6、45等13种。低危主要有HPV6、11、40、42、43、44等6种。47例CINⅠ、49例CINⅡ、38例CINⅢ及4例宫颈癌组织中HPV阳性率分别为63.4%、85.3%、92.1%、100%。CIN检出高危HPV基因型16、58、52、33、18等,4例宫颈癌组织中即检出HPV基因型HPV16、58、33。结论本辖区成年女性HPV感染率为19.7%,高危HPV感染率达11.3%。本地女性CIN及宫颈癌组织中高危HPV感染率较高,HPV16、58、52、33、18可能是本地区CIN及宫颈癌常见的高危HPV基因型。

人白介素-2／人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的表达

目的:构建编码人白介素-2/人血清白蛋白的重组表达质粒pPIH,在毕赤酵母(Pichiapastria)中进行表达,获得具有白介素-2(IL-2)活性的融合蛋白。方法:通过逆转录方法从人外周血单核细胞得到人IL-2的cDNA,再通过重叠PCR方法,将编码人IL-2的cDNA和编码人白蛋白的cDNA拼接起来,克隆至T载体获得含有融合基因IH的质粒pMD19/IH。用EcoRI和NotI双酶切pMD19/IH和pPIC9K两种质粒,通过琼脂糖凝胶电泳分离,试剂盒纯化,将IH片段和pPIC9K连接获得表达型pPIH的重组质粒,利用电转化方法转化毕赤酵母KM71获得重组表达质粒pPIH;CTLL-2/MTT法测定融合蛋白中人IL-2活性。结果:成功构建了人白介素-2/人血清白蛋白的重组表达质粒pPIH,融合蛋白得到了较理想的表达;重组菌经甲醇诱导表达后含有融合蛋白IL-2-HSA发酵上清液表现100U/mL的生物学活性。结论:成功获得具有人IL-2生物活性的重组人白介素-2/血清白蛋白融合蛋白,该研究结果未见文献报道。

体外诱导人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化

目的通过体外培养将人脐带间充质干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞。方法将体外培养的人脐带间充质干细胞分为诱导组和对照组。诱导组先后予以1 mmol·L-12-巯基乙醇培养2 d,10μg·L-1表皮生长因子、10μg·L-1碱性成纤维细胞生长因子及2%B27培养7 d,之后添加20 mmol·L-1尼克酰胺及艾塞那肽培养7 d。对照组不添加诱导剂,继续换液培养。通过观察细胞形态变化、RT-PCR体外扩增两组细胞的胰腺—十二指肠同源框-1(PDX-1)基因、放射免疫法测定两组细胞胰岛素分泌量三种方法来鉴定胰岛素分泌细胞。结果 (1)通过形态学观察,诱导组细胞类似胰岛样细胞,对照组细胞则无明显改变;(2)应用RT-PCR方法,诱导组细胞可扩增出PDX-1基因,而对照组则没有。(3)诱导组细胞培养上清液可检测出胰岛素分泌,7 d时胰岛素浓度为(6.32±0.18)mIU·L-1,21 d时增至(34.57±4.54)mIU·L-1,而对照组则未测出。结论成功在体外微环境下将人脐带间充质干细胞诱导分化为胰岛素分泌细胞。

信息化建设措施在医院人力资源管理中的应用

通过目前的网络和计算机技术,充分发挥信息化在医院人力资源管理中的作用。分析传统管理方式的不足,在新型信息化社会下做好医院人力资源信息化建设,做好人力资源管理的观念、组织管理、人才招聘、培训、绩效管理、薪酬福利等几个方面工作,充分利用网络技术和计算机技术,对人力资源管理信息化系统作出初步构建。

莫匹罗星联合重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶外用治疗深Ⅱ度烧伤创面效果观察

目的探讨莫匹罗星软膏联合重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶外用治疗深Ⅱ度烧伤创面的临床效果。方法选取128例深Ⅱ度烧伤创面患者随机分为观察组和对照组,每组64例。对照组患者给予莫匹罗星软膏治疗,观察组患者给予莫匹罗星软膏联合重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶外用治疗,比较2组患者治疗后7、14、21、28 d细菌培养阳性率、创面愈合率、临床疗效、愈合时间及不良反应发生情况。结果观察组患者治疗后7、14、21、28 d细菌培养阳性率较对照组显著降低,创面愈合率较对照组均显著提高,临床疗效总有效率较对照组患者显著提高,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者创面愈合时间较对照组患者显著缩短,差异有统计学意义(P<0.01)。结论莫匹罗星软膏联合重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶外用治疗深Ⅱ度烧伤创面可显著提高临床疗效,降低创面感染率,缩短创面愈合时间,值得在临床上广泛推广。

医院人力资源危机管理的国内外研究现状及进展

人力资源危机管理是医院管理的重要方面,探索适合我国医院现状的人力资源危机管理模式具有十分重要的现实意义。本文对医院人力资源危机管理国内外研究现状及进展的定性分析、定量分析两个方面进行梳理、归纳和总结,以期为学者进一步深入研究医院人力资源危机管理提供参考。

等待肾移植患者体内预存HLA抗体特点及致敏因素分析

目的分析研究等待肾移植手术的患者体内预存群体反应性抗体(PRA)特点及其产生原因。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测1 618名等待肾移植患者PRA,根据患者原有的输血史、妊娠史和移植史,将其分为5组:未输血未妊娠组(n=804);单纯输血组(n=330);单纯妊娠组(n=229);输血合并妊娠组(n=196);有移植史组(n=59)。结果 1 618名等待肾移植患者中,未输血未妊娠组、单纯输血组、单纯妊娠组、输血合并妊娠组和有移植史组PRA阳性率分别为5.97%、18.18%、22.71%、48.47%和76.27%。患者出现频率较高的HLAⅠ类抗体有抗-A2、-A23、-A66和-B7等,HLAⅡ类抗体有抗-DR52、-DR53、-DQ5和-DQ6等。有移植史组患者产生DR53和DR52抗体的频率较高,占HLAⅡ类抗体总数的19.32%。结论不同个体对相同致敏因素反应不同;在相同致敏因素存在的情况下,男性和女性患者PRA阳性率差异无统计学意义;输血史、妊娠史和移植史可协同提高致敏率;抗体产生的频率与抗原频率分布不相一致;HLAⅡ类抗体中,DR52和DR53抗体的产生与移植物失功存在一定关联性。

人H-FABP单克隆抗体制备和纯化及其特性鉴定

目的制备人心肌型脂肪酸结合蛋白(Heart type fatty acid-binding protein;H-FABP)单克隆抗体。方法(1)应用淋巴细胞杂交瘤技术,将重组人H-FABP腹腔注射免疫BALB/C小鼠。(2)将鼠脾细胞与鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合、培养。通过HAT和间接ELISA法筛选、鉴定制备稳定分泌抗人H-FABP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。(3)利用Protein G Sepharose 4 Fast Flow亲合纯化体内诱生法制备的腹水抗体,并对抗体特性进行鉴定。结果得到7株特异性识别人H-FABP单克隆抗体,并纯化两株亲合力高、空间位点远的单克隆抗体。结论成功制备了稳定分泌抗人H-FABP单克隆抗体的杂交瘤细胞株。

原子力显微镜研究高乌甲素对人脐静脉内皮细胞形态的影响

在纳米量级上探测药物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抑制作用对于揭示药物的功效及肿瘤的有效治疗十分重要。通过高分辨率的原子力显微镜研究了不同浓度的高乌甲素培养的HUVEC的形貌特征,包括整个细胞的形貌和超微结构的表面膜的差异。从形貌学方面探讨了高乌甲素对HUVEC的抑制作用,可为临床应用高乌甲素提供依据。结果表明,我们可以通过HUVEC的形貌参数(例如细胞的峰谷差、平均表面粗糙度)来判断药物的功效,以及评估治疗效果。

环介导等温扩增技术快速检测HPV18方法的建立

目的应用环介导等温扩增技术(LAMP)对人乳头瘤病毒18(HPV18)进行基因检测,建立一种快速、可视的HPV18核酸检测方法。方法针对HPV18病毒特异性E6区设计LAMP检测引物,通过调整反应物浓度建立LAMP反应体系,用羟基萘酚蓝(HNB)染料对产物进行可视化判定。通过检测其他不同基因型别的病毒评估引物特异性,检测倍比稀释的临床标本确定其灵敏度,通过LAMP法检测临床标本验证其与PCR法的一致性。结果利用LAMP方法检测到HPV18病毒E6引物的特异性好,恒温65℃条件下反应60 min即可较好完成检测。LAMP特异性好,灵敏度高,灵敏度为2.5×10~3拷贝/ml。LAMP可视化结果判定与PCR凝胶电泳结果相当,二者有较好的一致性(P>0.05)。结论建立了HPV18病毒的LAMP快速、可视化检测方法,该法操作简便快捷,具有很好的开发应用前景。

舰船自动化及人机行为层次研究

分析了舰船设计需重视人机协调的原因,以及将心理学原理用于舰船设计的必要性。应用心理学原理对人机行为层次进行了研究,探讨了舰船自动化与认知过程的关系,并建立了基于SRK认知原理的任务类型判定模型,初步探讨了认知原理在舰船设计上的应用。

pEgr-hp53体外稳定转染联合辐射对人肺腺癌A549细胞周期进程及增殖的影响

目的探讨pEgr-hp53重组质粒体外稳定转染联合辐射对人肺腺癌A549细胞周期进程及增殖的影响,阐明其抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法脂质体包裹重组质粒pEgr-hp53体外转染A549细胞,G418筛选稳定表达细胞株并扩增培养,采用细胞计数法检测肿瘤细胞增殖速度,流式细胞术检测肿瘤细胞周期的变化。结果经pEgr-hp53体外转染A549细胞10到20d,G418筛选得到稳定表达的细胞株,联合X射线照射可明显抑制A549细胞的体外增殖,细胞周期进程明显改变,G1期和G2期发生阻滞。结论提示pEgr-hp53体外稳定转染联合辐射可使人肺腺癌A549细胞周期阻滞于G1期和G2期,并可抑制肿瘤细胞增殖,本研究为提高肿瘤放射治疗效果提供新的治疗方案奠定了理论基础和实验依据。

人类疱疹病毒感染对新生儿血小板减少的影响及其护理对策

目的探讨人类疱疹病毒(HHV)感染对住院新生儿血小板减少的影响及其护理对策。方法选择2015年1月~2016年10月于我院就诊的120例HHV感染的新生儿作为研究对象。同时选择120例同期的健康体检新生儿作为对照组。探讨HHV感染对住院新生儿血小板减少的影响及其护理对策。结果与对照组相比,试验组PLT水平降低(P<0.05)。与对照组相比,试验组PDW、MPV水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比试验组IgG、IgM水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。人类疱疹病毒感染的住院新生儿120例患者中,其中108例检出HHV的DNA阳性,阳性率为90%(108/120),结论 HHV感染可引起新生儿血小板减少,应加强对HHV感染的新生儿患者采取积极有效的护理措施。

以科学发展观指导图书馆的发展

文章在探讨马克思主义的以人为本的科学发展观含义的基础上,结合我国图书馆现代化建设中存在的问题,分析了图书馆的发展策略,具体阐述了马克思主义的以人为本的科学发展观是科学发展图书馆的指导思想,改革与创新发展才是推动图书馆现代化建设的真正动力。

广西瑶族人群血小板抗原1～17系统基因多态性研究

目的研究广西瑶族人群血小板抗原HPA-1～17系统基因多态性分布特点。方法采用PCR-序列特异性引物(PCR-SSP)方法对48例广西瑶族健康人进行HPA-1～17系统基因分型,计算基因型频率、等位基因频率,并与其他种族、地区人群相关资料比较。结果在17个HPA系统中,HPA-3基因型杂合频率最高,HPA 3a/3a、HPA3a/3b和HPA 3b/3b的频率分别为0.2292,0.5208和0.2500;HPA-15的杂合程度仅次之,HPA 15a/15a,HPA 15a/15b和HPA15b/15b的频率分别为0.3125、0.4583和0.2292;其余HPA系统只检测到a等位基因,其基因频率均为1.000,符合Hardy-Weinberg遗传定律。结论 HPA基因多态性分布存在明显的种族和地域性差异。广西瑶族HPA-3和HPA-15系统基因频率分布具有多态性,在临床血小板输注中必须重视。

日本徂徕学派对儒法“人情论”的继承与超越

就观念形态的主调而言,日本的近代化,自始至终都是一个“脱儒”的过程。日本徂徕学派对儒法“人情论”所做的近代转换工作,则可视为这一过程的中心和枢纽。徂徕学派对儒法“人情论”取长补短、融为一炉的改造,最终形成了具有近代意义的政治优位、公私分治、政教分离的思想,为日本的早期近代化铺平了道路。

内陆核电场址非人类物种辐射影响评价——参考生物的选择及应用

内陆核电建设对非人类物种电离辐射的影响逐渐为人们所重视,环境影响评价报告中对生物的辐射影响评价提出了明确要求。参考生物作为评估的基础,目前为止还没有明确的选择和确定方法。本文根据国内外对于参考生物的研究结果及选取准则,提出了参考生物的选择指标及方法,并应用于彭泽核电厂,初步确定了彭泽核电厂非人类物种电离辐射影响评估的一些主要参考生物。