抗hnRNPB1单克隆抗体结合^(131)I对肺癌小鼠靶向治疗的实验研究

目的观察131I-抗hnRNPB1单克隆抗体(131I-抗hnRNPB1 MAb)、抗hnRNPB1 MAb对肺癌小鼠移植瘤的靶向治疗作用。方法用常规氯胺-T法合成131I-抗hnRNPB1 MAb,30只C57BL/6小鼠皮下接种Lewis肺癌细胞7 d后,将荷瘤鼠随机分成5组,每组6只。分别经尾静脉注射,组:131I-抗hnRNPB1 MAb 11.1 MBq/鼠单次治疗,组:131I-抗hnRNPB1 MAb 11.1 MBq/鼠强化治疗(给药2次,每次给药间隔3 d),组:Na131I 11.1MBq/鼠,组:抗hnRNPB1 MAb 50μg/鼠,组(对照组):生理盐水0.12 mL/鼠。治疗开始后每周测量1次小鼠肿瘤的长径及短径,4周后处死小鼠,分离肿瘤并称其质量,计算抑瘤率,肿瘤组织作常规HE染色检查。结果治疗结束时,、、、、组小鼠的平均肿瘤体积分别为(3869±192)mm3、(1987±149)mm3、(6922±532)mm3、(6962±509)mm3、(6597±521)mm3,其中、组分别与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05),且组的平均肿瘤体积小于组(P<0.05),而、组治疗结束时平均肿瘤体积分别与对照组相比差异无统计学意义。、组的抑瘤率分别为67.17%和39.03%,高于(1.36%)、(0.9%)组的抑瘤率(P<0.05),且、组间抑瘤率的差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论抗hnRNPB1 MAb结合131I对肺癌小鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用,且抑制作用呈量效关系。

抗hnRNPB1单克隆抗体结合^131I对肺癌小鼠靶向治疗的实验研究

目的 观察^131I-抗hnRNP B1MAb、抗hnRNP B1MAb对肺癌小鼠移植瘤的靶向治疗作用。方法 用常规氯胺-T法合成^131I-抗hnRNP B1MAb,皮下接种肺癌细胞7d后,将肺癌小鼠随机分成5组,每组6只。分别经尾静脉注射,Ⅰ组：^131I-抗hnRNP B1MAb11.1MBq/只单次治疗,Ⅱ组：^131I-抗hnRNP B1MAb2×11.1MBq/只强化治疗,Ⅲ组：Na^131I11.1MBq/只,Ⅳ组：抗hnRNP B1MAb50μg/只,Ⅴ组：生理盐水0.12ml作为对照组。干预后每周测量一次小鼠肿瘤的长径及短径,4周后处死小鼠,分离肿瘤并称其质量,计算抑瘤率,肿瘤组织做苏木素伊红（HE）染色检查。结果 治疗结束时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组小鼠肿瘤的平均体积分别为（3869±192）mm^3、（1987±149）mm^3、（6922±532）mm^3、（6962±509）mm^3、（6957±521）mm^3,其中I组、Ⅱ组与Ⅴ组肿瘤平均体积相比差异具有统计学意义（P〈0.05）,而I组、Ⅲ组治疗结束时肿瘤平均体积与Ⅴ组相比较无统计学意义（P〉0.05）。治疗结束时各组小鼠平均体质量差异无统计学意义（P〉0.05）。Ⅰ组强化组及Ⅱ组的抑瘤率分别为69.88%和41.35%。各治疗组小鼠未发现明显的不良反应。结论 抗hnRNP B1MAb结合^131I对小鼠肺癌的生长具有显著抑制作用,抑制作用呈量效关系,未发现明显的毒副作用。单纯抗hnRNP B1MAb及Na^131I未出现明显抑制肿瘤生长的作用。

hnRNPB1mRNA在肺癌患者外周血中手术前后的表达变化及其临床意义

不均一核糖核蛋白（hnRNP）B1是hnRNP家族最重要的成员之一。研究结果显示hnRNPB1在人体肺癌的过表达具有特异性，与肺癌发生发展密切相关。我们用Realtime FQ-RT-PCR方法检测肺癌患者外周血中hnRNPB1mRNA手术前后表达水平的变化并探讨其临床意义。

纤维支气管镜刷检细胞核内不均一核糖核蛋白B_1染色诊断肺癌价值的研究

目的 探讨纤维支气管镜刷检细胞核内不均一核糖核蛋白B1(HnRNPB1)染色在肺癌诊断中的价值。方法 对 381例病理检查证实的肺癌患者及 10 0例非肺癌患者 ,经纤维支气管镜刷检脱落细胞涂片 ,采用抗HnRNPB1单克隆抗体免疫细胞化学染色 ,研究HnRNPB1诊断肺癌的敏感性与特异性 ,并与传统的CT及痰脱落细胞学检查进行比较。结果 381例肺癌患者均经纤维支气管镜检查于病变所在叶支气管进行刷检涂片 ,HE染色脱落细胞学检查发现癌细胞 2 18例 ,采用抗HnRNPB1单克隆抗体免疫细胞学检查 ,2 0 8例样本可见HnRNPB1染色。在癌细胞阴性的 16 3例样本中HnRNPB1染色阳性 12 1例 ,癌细胞阳性与阴性组间HnRNPB1表达有明显差异 (P <0 .0 5 )。不同病理类型肺癌的HnRNPB1表达为 :鳞癌 2 19例 ,HnRNPB1染色阳性 197例 (90 .0 % ) ;腺癌 10 8例 ,HnRNPB1染色阳性 85例 (78.7% ) ;小细胞癌 5 4例 ,HnRNPB1染色阳性 4 7例 (87.0 % )。鳞癌及小细胞肺癌HnRNPB1表达阳性率高于腺癌 (P <0 .0 5 )。HnRNPB1免疫细胞化学染色诊断肺癌的敏感性为 86 .4 % ,特异性为 91% ,假阴性率为 13.6 % ,假阳性率为 9% ,阴性提示率为 6 3.6 % ,阳性提示率为 97.3%。结论 HnRNPB1免疫细胞学检查诊断肺癌的敏感性明显优于痰脱落细胞学检查 。

不均一性核糖核蛋白A2/B1、B1在肺癌早期诊断中的价值

目的探讨不均一性核糖核蛋白A2/B1、B1(HnRNPA2/B1、HnRNPB1)在肺癌早期诊断中的应用价值。方法采用RT-PCR方法扩增肺癌组织、癌旁组织标本中的HnRNPA2/B1 mRNA、HnRNPB1 mRNA,分析比较它们表达情况的差异,观察它们与肿瘤分期、病理类型的关系。结果HnRNPA2/B1、HnRNPB1在鳞状化生、不典型增生及各种类型的肺癌中均有高表达,其中在腺癌中的表达率相对较低。HnRNPA2/B1、HnRNPB1在癌前病变中表达率达80%,在I期肺癌的表达率达90%～100%,随着肿瘤TNM分期的进展表达有下降趋势。结论HnRNPA2/B1、Hn-RNPB1的异常表达为肺癌发生的早期事件,可作为肺癌早期诊断的标记物。

HnPNPB1基因短发夹环RNA载体的构建与鉴定

目的利用RNA干扰(RNA interfering,RNAi)技术,构建HnRNPB1表达载体,并进行鉴定。方法采用H1启动子,分别把被7bP序列间隔的21bp长短的HnRNPB1靶序列的反向重复序列,置于PsiRNA-hH1neoG2质粒中,分别构建HnRNPB1短发夹环RNA(ShRNA),产生重组质粒PSiRNA-hH1neoG2 HnRNPB1。结果将合成的DNA序列退火后克隆到载体上,并作测序分析,经测序鉴定确定为所需序列。结论针对HnRNPB1基因的特异性ShRNA真核表达载体PSiR-NA-hH1neoG2 HnRNPB1的成功构建,为进一步研究其基因功能打下基础。

非小细胞肺癌PET-CT显像及hnRNPA2/B1表达分析

32例非小细胞肺癌(NSCLC)患者于术前行全身PET-CT显像,测定标准摄取值(SUV)。手术获得肿瘤标本经常规石蜡切片,用免疫组化检测肿瘤组织核内不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)表达(即H-score评分),取肿瘤周围正常肺组织作对照。结果肺癌原发灶、阳性淋巴结、阴性淋巴结的hnRNPA2/B1表达H-score评分与PET-CT显像SUV均呈正相关(r=0.76、0.60、0.52,P<0.01、<0.01、<0.05)。认为hnRNPA2/B1和SUV可间接评价NSCLC细胞的癌变程度,hnRNP A2/B1是早期肺癌的标记。

不均一性核糖核蛋白B1在肺癌中的表达及临床意义

目的探讨不均一性核糖核蛋白B1（HnRNPB1）的表达与肺癌发生发展的关系及其临床意义。方法采用RT-PCR方法扩增肺癌组织、癌旁组织标本中的HnRNPB1 mRNA,观察它与肿瘤分期、病理类型的关系。结果HnRNPB1在鳞状化生、不典型增生及各种类型的肺癌中均有高表达,其中在腺癌中的表达率相对较低。HnRNPB1 mRNA在癌组织（T）中的表达量明显高于癌旁组织（N）,T/N=1.5～7.34。HnRNPB1在Ⅰ、Ⅱ期肺癌的表达率达100%,随着肿瘤TNM分期的进展表达率和表达量均有下降趋势。结论HnRNPB1的异常表达为肺癌发生的早期事件,是诊断早期肺癌灵敏度很高的指标。

hnRNPB_1基因的RNA干扰抑制肺癌细胞A549增殖研究

目的探讨特异性小分子干扰（small interference，siRNA）抑制肺癌A549细胞核内不均一核糖蛋白B1（heterogeneous nuclear ribonucleoprotein，hnRNPB1）基因的表达后，对A549细胞增殖的影响。方法构建hnRNPB1特异性的siRNA真核细胞表达载体并转染人肺癌细胞株A549，观察重组载体分别在第1、4及6周对A549细胞hnRNPB1基因的干扰效果以及对肺癌细胞周期及凋亡的影响。结果特异性siRNA真核表达可显著抑制肺癌细胞hnRNPB1基因的表达，使hnRNPB1 mRNA的表达减少46％～73％，蛋白表达减少77．69％～83．04％，作用时间至少可维持克隆形成后4周，同时，hnRNPB1基因表达下调抑制了A549细胞在体外的增殖，促进了肺癌细胞的凋亡。结论特异性siRNA能特异、高效地抑制肺癌细胞株A549细胞hnRNPB1基因的表达，RNAi可能为肺癌的基因治疗提供新策略。

抗核内不均一核糖核蛋白B1单克隆抗体结合^(131)Ⅰ对肺癌小鼠靶向治疗结果

核内不均一核糖核蛋白（hnRNP）B1是存在于细胞核的一种RNA结合蛋白，在肺癌细胞株和手术切除的肺癌组织中表达，在临近的正常组织、正常的支气管上皮和肺泡上皮细胞的细胞核未见表达。我们推测抗hnRNPB1单克隆抗体（MAb）能特异性与肺癌组织高表达的hnRNPB1蛋白结合，是潜在的肺癌治疗靶点。