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hok/sok-parDE增强鼠伤寒沙门菌菌毛编码质粒稳定性研究
被引量:
1
1
作者
杨维红
陈杨
+5 位作者
张成栋
孙国忠
凌洁玉
涂玲玲
陈焕春
郭爱珍
《动物医学进展》
CSCD
2007年第9期7-11,共5页
将编码两个质粒稳定系统的融合基因克隆至表达鼠沙门菌Ⅰ型菌毛(fim)基因的质粒pAZ44中,获得pAZ44-h。将两质粒分别转化鼠伤寒沙门菌,连续培养144 h,每隔12 h转接1代,并取样,用抗性平板计数细菌,通过抗性检测质粒存在状况。结果发现,质...
将编码两个质粒稳定系统的融合基因克隆至表达鼠沙门菌Ⅰ型菌毛(fim)基因的质粒pAZ44中,获得pAZ44-h。将两质粒分别转化鼠伤寒沙门菌,连续培养144 h,每隔12 h转接1代,并取样,用抗性平板计数细菌,通过抗性检测质粒存在状况。结果发现,质粒pAZ44在细菌培养12 h^24 h后开始丢失,而含稳定系统的质粒pAZ44-h在连续培养10代或120 h都未发生丢失。表明aphA-hok-parDE序列显著增强了质粒的稳定性,为进一步研究鼠沙门菌Ⅰ型菌毛的功能奠定了基础。
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关键词
质粒稳定性
hok/sok
parDE
沙门菌
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职称材料
重组质粒pACYC184-hok/sok的构建及稳定性研究
被引量:
2
2
作者
康小燕
蒋志伟
+4 位作者
郁磊
羊扬
舒燕
姚丰华
朱国强
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期361-367,共7页
以低拷贝质粒pACYC184为载体,将hok/sok基因插入到载体BamHⅠ位点,构建重组质粒pACYC184-hok/sok稳定系统,同时构建hok/sok基因缺失突变重组质粒pACYC184-hok/sok(M)。通过对构建的重组菌进行连续传代和对不同代次的重组质粒进行SphⅠ酶...
以低拷贝质粒pACYC184为载体,将hok/sok基因插入到载体BamHⅠ位点,构建重组质粒pACYC184-hok/sok稳定系统,同时构建hok/sok基因缺失突变重组质粒pACYC184-hok/sok(M)。通过对构建的重组菌进行连续传代和对不同代次的重组质粒进行SphⅠ酶切,分析hok/sok基因的引入对宿主细胞生长的影响。结果表明,重组质粒pACYC184-hok/sok在无抗生素筛选压力下连续传代,传至第135代时质粒稳定率仍是100%,且传代前后的质粒SphⅠ酶切图谱没有发生变化,DNA序列测定表明,插入的hok/sok基因没有发生任何突变。突变重组质粒pACYC184-hok/sok(M)传代前后的质粒SphⅠ酶切结果虽没有发生变化,但其相应的重组菌传至第15代,质粒几乎完全丢失。生长曲线的测定结果表明,与含pACYC184重组菌生长曲线相似,pACYC184-hok/sok重组菌生长较快,而pACYC184-hok/sok(M)重组菌生长缓慢。以上结果表明,含hok/sok稳定系统,其稳定性明显高于无hok/sok稳定系统的质粒pACYC184以及突变质粒pACYC184-hok/sok(M)。重组质粒pACYC184-hok/sok具有良好的结构稳定性和分离稳定性。
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关键词
hok/sok
基因
PSK
重组质
原文传递
题名
hok/sok-parDE增强鼠伤寒沙门菌菌毛编码质粒稳定性研究
被引量:
1
1
作者
杨维红
陈杨
张成栋
孙国忠
凌洁玉
涂玲玲
陈焕春
郭爱珍
机构
华中农业大学农业微生物学国家重点实验室
出处
《动物医学进展》
CSCD
2007年第9期7-11,共5页
基金
国家自然科学基金项目(30571386)
文摘
将编码两个质粒稳定系统的融合基因克隆至表达鼠沙门菌Ⅰ型菌毛(fim)基因的质粒pAZ44中,获得pAZ44-h。将两质粒分别转化鼠伤寒沙门菌,连续培养144 h,每隔12 h转接1代,并取样,用抗性平板计数细菌,通过抗性检测质粒存在状况。结果发现,质粒pAZ44在细菌培养12 h^24 h后开始丢失,而含稳定系统的质粒pAZ44-h在连续培养10代或120 h都未发生丢失。表明aphA-hok-parDE序列显著增强了质粒的稳定性,为进一步研究鼠沙门菌Ⅰ型菌毛的功能奠定了基础。
关键词
质粒稳定性
hok/sok
parDE
沙门菌
Keywords
plasmid stability
hok/sok
parDE
Salmonella
分类号
S852.612 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
重组质粒pACYC184-hok/sok的构建及稳定性研究
被引量:
2
2
作者
康小燕
蒋志伟
郁磊
羊扬
舒燕
姚丰华
朱国强
机构
扬州大学兽医学院
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期361-367,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(30571374
30771603
+2 种基金
31072136)
江苏省属高校自然科学重大基础研究项目(08KJA230002)
科技部转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08006-004B)
文摘
以低拷贝质粒pACYC184为载体,将hok/sok基因插入到载体BamHⅠ位点,构建重组质粒pACYC184-hok/sok稳定系统,同时构建hok/sok基因缺失突变重组质粒pACYC184-hok/sok(M)。通过对构建的重组菌进行连续传代和对不同代次的重组质粒进行SphⅠ酶切,分析hok/sok基因的引入对宿主细胞生长的影响。结果表明,重组质粒pACYC184-hok/sok在无抗生素筛选压力下连续传代,传至第135代时质粒稳定率仍是100%,且传代前后的质粒SphⅠ酶切图谱没有发生变化,DNA序列测定表明,插入的hok/sok基因没有发生任何突变。突变重组质粒pACYC184-hok/sok(M)传代前后的质粒SphⅠ酶切结果虽没有发生变化,但其相应的重组菌传至第15代,质粒几乎完全丢失。生长曲线的测定结果表明,与含pACYC184重组菌生长曲线相似,pACYC184-hok/sok重组菌生长较快,而pACYC184-hok/sok(M)重组菌生长缓慢。以上结果表明,含hok/sok稳定系统,其稳定性明显高于无hok/sok稳定系统的质粒pACYC184以及突变质粒pACYC184-hok/sok(M)。重组质粒pACYC184-hok/sok具有良好的结构稳定性和分离稳定性。
关键词
hok/sok
基因
PSK
重组质
Keywords
hok/sok
PSK
recombinant plasmid
structural instability
segregational instability
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
hok/sok-parDE增强鼠伤寒沙门菌菌毛编码质粒稳定性研究
杨维红
陈杨
张成栋
孙国忠
凌洁玉
涂玲玲
陈焕春
郭爱珍
《动物医学进展》
CSCD
2007
1
下载PDF
职称材料
2
重组质粒pACYC184-hok/sok的构建及稳定性研究
康小燕
蒋志伟
郁磊
羊扬
舒燕
姚丰华
朱国强
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
2
原文传递
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引证文献
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