响应面法优化枳椇子总黄酮超声波提取工艺

为了更好开发和利用枳椇子资源,以枳椇子为原料,利用响应面设计对超声波法提取枳椇子总黄酮工艺进行优化。结果表明:在提取温度65℃、提取时间60min条件下,影响提取率的主次因素依次为乙醇体积分数>液料比>超声波功率,最佳超声波提取条件为超声波功率374.4W、液料比69.4:1(mL/g)、乙醇体积分数64.5%。验证总黄酮得率达到(0.819±0.003)%,接近于预测值0.823%。研究表明,优化得到的回归模型是可行的,具有良好预测能力。

枳椇子营养成分和总黄酮含量分析及评价

以枳椇子为试材,分析研究枳椇子的常规理化成分、氨基酸组成、矿物元素含量、枳椇子油的脂肪酸组成及黄酮类物质含量。结果表明,枳椇子中含有丰富的碳水化合物(12.08%)、粗蛋白(13.96%)、粗脂肪(9.45%)和粗纤维(53.91%),15种氨基酸总含量为12.63 g/100 g,7种必需氨基酸含量占氨基酸总量的35%,必需氨基酸和非必需氨基酸含量的比值为0.54。AAS与CS值显示,蛋氨酸为枳椇子蛋白质第一限制氨基酸;元素含量从高到低依次为K、Ca、Mg、Na、Fe、Mn、Cu、Zn;枳椇子油中脂肪酸主要由不饱和脂肪酸组成(89.74%),以亚麻酸含量最高(40.26%)。枳椇子中黄酮类物质的含量为27.61 mg/g。枳椇子富含人体必需的营养成分,属营养和保健功能兼具的新资源食品。

枳椇子理化特性及营养成分分析

为了更好开发枳椇子资源,利用常规分析和仪器分析对枳椇子理化特性和营养成分进行测定,试验结果表明:枳椇子三维尺寸长、宽、厚分别为4.05 mm、3.66 mm、1.82 mm,千粒重为16.8 g,含仁率为45.66%、容重为765.1 g/L。枳椇子的主要成分质量分数为:粗纤维53.45%、粗蛋白15.79%、碳水化合物10.95%、粗脂肪8.03%、灰分2.08%。枳椇子蛋白中必需氨基酸占29.1%。枳椇子灰分中常量元素(钾、镁、钙、钠)占98.7%,微量元素(铁、锰、铜、锌)占1.3%。枳椇子油的亚麻酸、油酸、亚油酸含量较高,其中亚麻酸质量分数高达45.56%。

枳椇籽油的微胶囊化研究

采用喷雾干燥法对富含亚麻酸枳椇籽油进行微胶囊化研究?峁砻鳎罴盐⒔耗以吓浞阶榉郑海?明胶:Mβ-环糊精1:6,M壁材:M水15:85,M芯材:M壁材1:3.5、复合剂加入量10%;最佳微胶囊化加工参数为:超声乳化10min、均质压力30MPa、进口温度160℃、出口温度80℃。所得微胶囊的包埋率为88.89%,微胶囊化效率为90.83%。经优化配比和工艺制成的枳椇籽油的微胶囊产品颗罭蛐危笮≡冢浮保唉蹋?之间,颗粒表面平整光滑、层次清晰,大小分布均匀,包埋效果好。

枳椇种子休眠原因及解除方法

从枳椇种子的种皮结构和透性、离体胚萌发等方面开展种子休眠原因的研究，同时采取低温层积、浓硫酸处理、机械处理等方法研究枳椇种子休眠解除技术。结果表明：枳椇种子种皮结构致密，透水性差是抑制种子萌发的主要原因，种子休眠类型为物理休眠（ PY）。低温层积75 d枳椇种子的发芽率达到72％，层积90 d种子发芽率达到76％，且发芽速度更快；浓硫酸处理5～25 min，种子发芽率在76％～81％，各处理种子的发芽率没有差异，但浓硫酸处理30 min对种子明显产生伤害，发芽率仅为64％；切除部分种皮的种子在置床后4 d开始萌发，发芽速度与层积90 d的发芽速度一致，置床16 d后萌发结束，发芽率为80％；擦伤种子表面的种子置床后6 d开始萌发，发芽率为73％。

枳椇籽油理化性质及其脂肪酸分析

对枳椇籽油的理化特性进行了测定,并利用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对枳椇籽油的脂肪酸组成进行了分析和鉴定。结果表明:枳椇籽含油率为8.0%,其中不饱和脂肪酸占87.46%以上,亚麻酸含量高达45.56%;枳椇籽油折光指数(20℃)为1.478 9,相对密度(d240)0.918 7,碘值(I)170.7 g/100 g,皂化值(KOH)178.9 mg/g。枳椇籽油具有较高的营养价值。

枳椇子各部位清除羟自由基作用的比较

目的比较枳木具子不同提取部位对羟自由基的清除作用。方法采用邻二氮菲氧化法,检测枳子不同提取部位对体系产生的羟自由基的清除作用。结果枳木具子乙酸乙酯部位的羟自由基清除率为11.7%,总提取物的羟自由基清除率为13.6%,剩余物的羟自由基清除率为-6.5%。结论枳子清除羟自由的有效部位集中在乙酸乙酯部位。

葛花枳椇子不同比例配伍对酒精性肝损伤大鼠肝组织病理形态影响的实验研究

为了观察葛花、枳椇子不同比例配伍对酒精性肝损伤大鼠肝组织病理形态的影响。采用白酒灌胃的方法复制酒精性肝损伤的模型,将Wistar大鼠160只,按体重随机分为空白组,模型组,东宝肝泰对照组,葛花组,枳椇子组,葛花枳椇子配伍1∶1,1∶2和2∶1八组。连续灌胃8周,于8周末取材,摘取肝脏,制成病理切片,在光镜下观察大鼠肝脏的病理形态变化。结果显示:光镜下模型组可见肝小叶结构遭到破坏,肝细胞索排列紊乱,肝血窦间隙增大,肝细胞肿大出现水样变,炎性细胞侵润及纤维组织增多,葛花与枳椇子配伍组肝细胞索排列紊乱、肝细胞水样变较模型组减轻,纤维结缔组织无明显增生。由此得出结论:大量饮酒可以导致肝损伤,葛花与枳椇子不同比例配伍对酒精性肝损伤大鼠肝细胞具有保护作用。

枳椇种子生活力的四唑测定方法

通过对枳椇种子不同预处理、不同的TTC浓度和染色时间的设定,研究枳椇种子生活力测定的最佳条件。结果表明:四唑染色法能够准确的检测种子的生活力,测定的适宜条件为在远离胚根部位切除少部分种子组织后,室温条件下浸种24 h,去除种皮。在30℃环境下,采用0.25%的TTC溶液染色4 h,或0.75%TTC溶液染色2 h。

枳木具子药材HPLC指纹图谱及4种黄酮类成分的含量测定方法研究

目的以不同产地的枳椇子为研究对象,采用高效液相色谱法建立枳椇子药材的指纹图谱及其4种黄酮类成分的含量测定方法,为科学评价和控制枳椇子药材的质量提供科学依据。方法采用高效液相色谱法,建立指纹图谱与含量测定的方法,色谱柱为Agilent Zorbax Extend-C18柱(250mm×4. 6 mm,5μm),以体积分数0. 1%乙酸溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,检测波长为350nm,柱温为35℃。结果建立了枳椇子药材的指纹图谱和4种黄酮类成分的含量测定方法,确定了枳椇子药材指纹图谱中的14个共有峰。二氢杨梅素、二氢槲皮素、杨梅素和槲皮素质量浓度分别在6～600 mg·L-1、2～200 mg·L-1、1～100 mg·L-1和0. 5～50 mg·L-1内呈良好线性关系(r>0. 999)。结论本方法为科学评价枳椇子药材质量提供了依据。

响应面优化超声辅助法提取拐枣种子中二氢杨梅素的工艺

二氢杨梅素和杨梅素是拐枣种子中的重要成分。通过超声辅助法从拐枣种子中提取二氢杨梅素,采用单因素法考察乙醇体积分数、超声辐照功率、提取温度、液料比和超声辐照时间影响参数的基础上,并选用Box-Behnken响应面设计法分析建立了超声辐照功率、超声辐照时间和液料比的二次多项式模型,优化提取工艺。结果得到超声辅助法提取拐枣种子中二氢杨梅素的最佳工艺参数为:乙醇体积分数为60%、超声辐照功率140 W、超声辐照时间30 min、液料比20.5 mL·g-1,提取温度40℃。在此最佳条件下,二氢杨梅素得率为2.14±0.09 mg·g-1。本提取方法简单快速,效率高,有利于拐枣资源的综合加工利用。

不同处理对拐枣种子发芽的影响

通过对拐枣种子吸水性的初步研究,利用机械处理、酸蚀、低温裸层积以及赤霉素浸种等方法进行种子发芽试验,探寻拐枣种子休眠的原因并寻求相应的破眠方法。结果表明,(1)休眠原因主要是种皮障碍;(2)机械处理中,沙磨、破裂种皮均可打破休眠,以沙磨效果更佳,发芽率达46.27%;(3)酸蚀10min后经低温裸层积30天能有效提高种子发芽率,发芽率达64.26%,但是单独低温裸层积30天处理会抑制拐枣种子萌发;(4)GA_3处理种子表现出低浓度抑制、高浓度促进的趋势,效果最佳处理是500mg/L GA_3浸种10min,发芽率达30.56%。(5)综合处理中,以浓硫酸预处理20min后400mg/L GA_3浸种24h破眠处理萌发最好,种子发芽率达77.96%。

多重连接探针扩增技术鉴别酸枣仁及混伪品的研究

目的:针对市场上出现的酸枣仁药材掺假现象,开发一种快速鉴别酸枣仁药材是否含有掺伪品的方法。方法:基于多重连接探针扩增技术(MLPA),针对酸枣仁与理枣仁ITS2序列205位点处A/G变异,以及枳椇子170位点分别设计酸枣仁、理枣仁与枳椇子的MLPA探针,MLPA扩增后依据熔解曲线Tm值差异来进行鉴别,并考察了特异性、敏感度、掺伪比等内容,以验证该方法的可行性。结果:酸枣仁、理枣仁和枳椇子分别与特异性探针在85.56℃、87.26℃和83.93℃处出现单一扩增峰,表明探针特异性好;通过不断稀释DNA模板,仍旧可以检测出0.05 ng酸枣仁DNA量,同样酸枣仁中掺入10%的伪品均可被有效检出,表明该方法具有高灵敏度。结论:该研究建立的酸枣仁药材及其混伪品鉴别方法具有特异性强、灵敏度高的特点,对于解决酸枣仁药材掺伪问题具有良好的推广应用价值。

ICP-MS法测定黔产枳椇果梗、枳椇子中22种金属元素

建立微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法同时分析枳椇果梗、枳椇子中Be、Mg、Al、Ti、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、As、Sr、Mo、Ag、Cd、Sn、Sb、Ba、Tl、Pb等22种元素的含量。样品经微波消解后,利用ICP-MS测定上述22种元素,通过标准曲线计算其含量。实验结果表明,22种元素在其线性范围内线性关系良好,r值>0.995;检出限为0.0007~1.0713μg/L;重复性的相对标准偏差(RSD)<3%;精密度的相对标准偏差(RSD)<7%;回收率为81.14%~112.91%。该方法灵敏度高,重复性好,分析速度快,适用于枳椇果梗、枳椇子中22种元素的含量测定。

丹参血脂茶质量标准研究

[目的]建立丹参血脂茶中决明子、枳壳定性鉴别及测定丹参酮ⅡA含量方法。[方法]采用TLC对丹参血脂茶中的主要药物决明子、枳壳进行鉴别和高效液相色谱法测定丹参酮ⅡA的含量。[结果]TLC色谱中均能检出决明子、枳壳,专属性强,重现性好;在流动相:甲醇-水(78:22),检测波长270nm,柱温30℃,体积流量1.0m L/min的条件下使用高效液相色谱法对供试品进测定丹参酮ⅡA含量,结果准确可靠,分离完全,重复性好。[结论]TLC与高效液相色谱法简便、专属性强、重现性好,结果稳定,可有效控制丹参血脂茶的质量。

葛花、枳椇子不同比例配伍对酒精性疾病大鼠海马单胺类神经递质的影响

目的:探讨葛花、枳椇子不同比例配伍对酒精性疾病大鼠築淼グ防嗌窬葜实挠跋臁7椒ǎ翰捎?白酒灌胃的方法复制酒精性疾病大鼠模型,将Wistar大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、东宝甘泰组、葛花组、枳椇子组、葛花枳椇子不同比例配伍组,灌胃8周后取海马组织,利用高效液相-电化学方法检测大鼠海马单胺类神经递质及其代谢产物的含量。结果:模型组与空白组相比,各神经递质含量均有上升趋势,给药组与模型组相比无统计学差异。结论:大量饮酒可能导致脑神经递质含量的变化,但还需根据其他脑区神经递质的含量进行综合分析,并深入研究,为葛花、枳椇子防治酒精性疾病提供更加详实的数据支撑。

决枳合剂治疗酒精性脂肪肝大鼠的实验研究

目的研究决枳合剂对酒精性脂肪肝大鼠肝组织病理、肝功能和炎症因子的影响。方法用56%酒精灌胃建立酒精性脂肪肝模型,并随机分为模型组、对照A组、对照B组和实验组。另取正常大鼠设为空白组。空白组和模型组均予以10 mL·kg^(-1)0.9%Na Cl,qd;对照A组按10 mL·kg^(-1)剂量予以1.5g·mL^(-1)决明子,qd;对照B组按10 mL·kg^(-1)剂量予以1.5 g·mL^(-1)枳椇子,qd;实验组按10 mL·kg^(-1)剂量予以1.5 g·mL^(-1)决枳合剂,qd。5组大鼠均灌胃给药4周。比较5组大鼠的肝组织病理结果、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、核转录因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果空白组、模型组、对照A组、对照B组和实验组的肝炎活动度评分分别为(0.57±0.48),(3.71±0.85),(2.52±0.79),(2.37±0.81)和(1.61±0.67)分,ALT分别为(39.25±10.07),(89.37±14.53),(72.43±12.08),(70.17±13.56)和(51.26±11.57)U·L^(-1),AST分别为(34.14±4.95),(139.19±14.87),(90.00±17.57),(87.47±12.38)和(51.27±8.25)U·L^(-1),NF-κB分别为(265.45±47.12),(534.41±72.18),(387.15±60.29),(390.31±63.64)和(321.26±43.25)ng·L^(-1),TNF-α分别为(26.85±4.97),(89.78±9.86),(55.21±11.79),(57.32±9.63)和(40.24±9.47)nmol·L^(-1),IL-6分别为(12.13±5.86),(69.34±12.79),(43.16±10.62),(46.28±11.57)和(24.47±10.84)pg·mL^(-1),实验组的上述指标与其他4组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论决枳合剂能够明显改善酒精性脂肪肝大鼠肝组织的病理变化和肝功能,且能够下调炎症因子的表达。

枳椇子脂肪油超临界CO_2流体萃取及GC-MS分析

目的:超临界CO2流体萃取枳椇子脂肪油并分析其组成成分。方法:采用超临界CO2流体萃取技术提取枳子脂肪油,用气相色谱-质谱联用技术进行分离和鉴定,以压力、温度、时间3因素确定其最佳提取条件。结果:枳椇子脂肪油的最佳提取条件为压力32MP、温度40℃、时间1h。枳子脂肪油含量为8.3%,其中不饱和脂肪酸约占37.6%。结论:超临界CO2流体萃取枳椇子脂肪油具有提取时间短、提取率高等优点,可为工业化生产提供理论依据。

枳椇子乙酸乙酯提取部位的解酒作用研究

目的:研究枳椇子乙酸乙酯提取部位的解酒作用。方法:将小鼠随机分成5组,即空白、模型(生理盐水)、阳性(灌胃海王金樽20g·kg-1)和乙酸乙酯提取物高、低剂量组(乙酸乙酯提取物相当于20、10g生药.kg-1)。研究各种提取物对急性酒精中毒小鼠血清谷丙转氨酶(SGPT)活性、肝脏丙二醛(MDA)含量、醇脱氢酶(ADH)活性、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果:枳椇子乙酸乙酯提取部位可降低急性酒精中毒小鼠血清SGPT活性和肝脏MDA含量,升高小鼠肝脏ADH、SOD活性和GSH含量。结论:枳椇子乙酸乙酯提取部位具有显著的解酒效果,值得进行深入研究。

葛枳颗粒剂的制备及其体外酶活性研究

优化葛枳颗粒剂的制备工艺,并检测葛枳颗粒对乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性的影响。以颗粒的成型率、休止角、堆密度、吸湿率、溶化率作为考察指标,在单因素试验基础上,通过响应面优化试验筛选辅料的种类、配比、用量及最佳制备工艺,并对制得的颗粒剂进行相关品质检查,检测不同浓度的葛枳颗粒对ADH和SOD活性的影响。最佳制备工艺条件为:稀释剂配比为微晶纤维素:糊精1:1.5(g/g),浸膏粉与稀释剂配比为1:1(g/g),矫味剂配比为果糖:阿斯巴甜1:1(g/g),润湿剂为81%乙醇溶液,制得的颗粒剂颗粒均匀,色泽一致,水分、流动性、溶化性等均符合颗粒剂的质量标准。当葛枳颗粒剂浓度为1、5、10 mg/mL时,ADH的酶活力分别为4673.62、6940.97、13248.49U/mL,SOD的酶活力分别为0.00536、0.0104、0.0193U/mL。结果表明:优选出的葛枳颗粒剂制备工艺是稳定、可行的,葛枳颗粒对ADH和SOD活性均有一定的促进作用,并且随着颗粒剂浓度的增加,ADH和SOD活性逐渐增强。研究可为葛枳颗粒剂制粒工艺条件的确定及工业化生产提供试验依据。