人可溶性IL-6R及其突变体基因在COS7细胞中的表达及活性分析

目的：研究人可溶性ＩＬ６Ｒ（ｈｓＩＬ６Ｒ）的空间构效关系，为小分子拮抗剂设计提供理论依据。方法：首先利用ＰＣＲ技术扩增天然人ｓＩＬ６Ｒ基因片段，然后将第２８０位Ｈｉｓ残基突变成Ｉｌｅ。天然基因和突变体基因分别转染ＣＯＳ７细胞，经ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测证实转染细胞上清中的表达产物，并利用ＢｉｎｄｉｎｇａｓａｙＥＬＩＳＡ和生物学功能分析法检测表达产物与ＩＬ６的结合能力以及它们所介导的ＩＬ６信号转导功能的差异。结果：突变体Ｈ２８０Ｉ比天然ｓＩＬ６Ｒ具有更高的ＩＬ６结合能力，但拮抗ＩＬ６在两种效应细胞系上的信号传递功能。结论：第２８０位Ｈｉｓ残基对ｓＩＬ６Ｒ发挥正常生物学功能具有重要影响，是符合拮抗剂设计要求的一个很好的候选位点。

CMV启动子和RSV LTR启动子表达sIL-6R效率的比较

利用分别含有 CMV启动子和 RSV LTR启动子的两种真核表达载体 ,在 CHO- K细胞中成功地表达了人可溶性白细胞介素 - 6受体 ( hs IL- 6R) ,比较了两种启动子在表达效率上的差异 ,结果表明 ,CMV启动子的效率略高于 RSV LTR启动子。