Hsa-miR-193b抑制人子宫内膜腺癌细胞株HEC-1B侵袭能力

目的探讨Hsa-miR-193b对人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1B侵袭的影响及其相关机制。方法将Hsa-miR-193b模拟物(mimics)、Hsa-miR-193b抑制剂(inhibitor)转染HEC-1B细胞,Real-time PCR证实转染是否成功;Transwell小室法检测转染Hsa-miR-193b mimics后HEC-1B细胞的侵袭能力;通过miRGen、Targetscan、Pictar数据库筛查Hsa-miR-193b指向与侵袭相关的靶基因;Real-time PCR检测转染Hsa-miR-193b mimics转染组和对照组mRNA水平;Western blot检测各组GRB7蛋白表达的水平。结果①Hsa-miR-193b mimics、Hsa-miR-193b inhibitor转染HEC-1B细胞成功,两转染组Hsa-miR-193b表达水平与未转染组比较差异有统计学意义(P<0.05)。②转染Hsa-miR-193b mimics组与对照组比较,肿瘤细胞的侵袭能力明显降低(P<0.05)。③转染后,靶基因GRB7蛋白Hsa-miR-193b mimics组表达下降(P<0.05)、Hsa-miR-193b inhibitor组表达增加(P<0.05),且各组GRB7 mRNA水平无显著变化。结论在HEC-1B中转染Hsa-miR-193b mimics能下调GRB7蛋白表达,并抑制HEC-1B细胞的侵袭。

局部晚期食管癌患者血清miR-193b、miR-330-5p水平与新辅助放化疗疗效的关系

目的探讨局部晚期食管癌患者血清微小RNA-193b(miR-193b)、miR-330-5p水平与新辅助放化疗疗效的关系。方法选取局部晚期食管癌患者180例,qRT-PCR法检测患者血清miR-193b、miR-330-5p。于新辅助放化疗后评估放化疗疗效,将完全缓解+部分缓解患者定义为放化疗有效者,疾病进展+稳定患者定义为放化疗无效者。比较新辅助放化疗有效与无效的局部晚期食管癌患者临床资料,取有统计学差异的临床资料进一步纳入多因素Logistic回归分析。采用多因素Logistic回归分析局部晚期食管癌患者新辅助放化疗无效的影响因素,并通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-193b、miR-330-5p对局部晚期食管癌患者新辅助放化疗无效的预测价值。结果180例局部晚期食管癌患者中行新辅助放化疗有效者84例、无效者96例,新辅助放化疗有效与无效的局部晚期食管癌患者肿瘤分化程度、肿瘤N分期、血清miR-193b、血清miR-330-5p比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,低血清miR-193b、低血清miR-330-5p是局部晚期食管癌患者新辅助放化疗无效的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-193b、血清miR-330-5p预测局部晚期食管癌患者新辅助放化疗无效的AUC依次为0.752、0.777,两项指标联合预测局部晚期食管癌患者新辅助放化疗无效的AUC为0.829。结论行新辅助放化疗有效的局部晚期食管癌患者血清miR-193b、miR-330-5p水平高于放化疗无效的患者,血清miR-193b、miR-330-5p低水平是局部晚期食管癌患者新辅助放化疗无效的独立危险因素,两者联合对局部晚期食管癌新辅助放化疗疗效具有一定预测价值。

胃癌根治性切除患者术前血清外泌体miR-193a和miR-208b水平表达及其对预后预测价值研究

目的探究胃癌(gastric cancer,GC)患者在根治性手术前血清外泌体微小核糖核酸(micro RNA,miR)-193a和微小核糖核酸(microRNA,miR)-208b水平表达及其预后预测价值。方法以新疆医科大学第一附属医院2018年3月~2020年3月收治的132例GC根治性切除术前患者为GC组,同期132例体检健康者为对照组。收集对比患者临床病理资料。血清外泌体miR-193a和miR-208b相对表达水平的检测采用实时荧光定量PCR(quantitative realtime polymerase chain reaction,qRT-PCR)法,Pearson法分析miR-193a和miR-208b的相关性。GC患者术前血清外泌体miR-193a,miR-208b表达与术后患者预后相关性采用Kaplan-Meier法分析;单因素及多因素COX回归分析患者预后的影响因素。结果GC组外泌体miR-208b表达水平较对照组明显升高(1.77±0.14 vs 1.02±0.01),miR-193a表达水平明显降低(0.52±0.06 vs 1.01±0.01),差异具有统计学意义(t=92.551,61.392,均P<0.05)。GC患者术前miR-193a与miR-208b的表达水平呈负相关(r=-0.409,P<0.05)。患者中TNM分期为I+II期、无淋巴结转移、无远处转移的miR-193a低表达比例和miR-208b高表达比例明显低于TNM分期为III+IV、有淋巴结转移、有远处转移患者,差异具有统计学意义(χ^(2)=5.008,4.397;7.142,4.688;4.407,5.189,均P<0.05)。miR-193a低表达患者三年累积生存率(30.43%)显著低于高表达(60.32%)患者(χ^(2)=17.861,P<0.001),miR-208b高表达患者三年累积生存率(27.14%)低于低表达(64.52%)患者(χ^(2)=16.340,P<0.001)。血清外泌体miR-193a(HR=0.493,95%CI:0.323~0.753)和miR-208b水平(HR=2.697,95%CI:1.382~5.262)是患者预后的独立影响因素(P<0.05)。结论术前血清外泌体miR-193a水平降低,miR-208b水平升高,两者表达水平与GC根治性切除术患者的预后有关。

弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达量及临床意义探究

目的:探讨分析弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达量及临床意义。方法:选取DLBCL患者76例(纳入DLBCL组)及淋巴结反应性增生(RHL)患者70例(纳入RHL组),采用实时荧光定量PCR法检测所有患者淋巴组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达水平,并分析二者的表达水平与DLBCL临床特征的关系。结果:miR-193a-3p及miR-146b-5p在DLBCL组中的表达水平均低于RHL组(P<0.05),二者的表达水平与Ann-Arbo分期、国际预后指数(IPI)评分有关。miR-193a-3p、miR-146b-5p的表达水平与DLBCL的临床分期呈负相关,随着miR-193a-3p、miR-146b-5p表达水平的降低,DLBCL临床分期越高(P<0.05)。淋巴组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p表达下调是DLBCL临床高分期的危险因子(OR>1,P<0.05)。结论:DLBCL组织中miR-193a-3p、miR-146b-5p表达水平下调,可能参与了DLBCL的发生、发展,二者的表达水平与DLBCL的临床分期有关,可作为DLBCL临床诊治的重要参考依据。

喉鳞状细胞癌SMAD3和hsa-miR-193b表达与靶向关系验证

目的 Hsa-miR-193b与LSCC的发生发展密切相关。本研究探讨LSCC中miR-193b与SMAD3的表达及二者的靶向调控关系。方法 qRT-PCR检测山西医科大学第一医院2013-01-03-2014-06-30来源的20例喉鳞状细胞癌(laryngal squamous cell carcinoma,LSCC)组织及癌旁正常黏膜组织中miR-193b的表达,qRT-PCR、蛋白质印迹法检测SMAD3的表达。构建野生型和突变型SMAD3 3′UTR载体,与miR-193bmimics或NC共转染HEK-293T细胞,双荧光素酶报告系统检测各组荧光素酶活性。结果 qRT-PCR检测结果,癌组织miR-193b总表达为11.50±6.289,癌旁正常组织为1.00±0.000,与癌旁正常组织相比,miR-193b在LSCC组织中的表达上调且差异有统计学意义,t=7.466,P<0.001;癌组织SMAD3表达为0.402±0.201,癌旁正常组织表达为1.00±0.000,SMAD3在LSCC组织中的表达降低且差异有统计学意义,t=13.31,P<0.001。蛋白质印迹法检测结果,癌组织SMAD3表达为1.57±0.127,癌旁正常组织表达为3.68±0.198,SMAD3在癌组织的表达降低且差异有统计学意义,t=48.40,P<0.001。经测序,成功构建野生型与突变型SMAD3 3′UTR载体,共转染后各组样品经检测显示,miR-193b+mutSMAD3组荧光素酶活性变化倍数为1.042±0.100 8,NC+mutSMAD3组为1.102±0.070 6,差异无统计学意义(t=0.854,P=0.442),miR-193b+SMAD3组荧光素酶活性变化倍数为0.449±0.047 2,NC+SMAD3组为1.124±0.014 1,miR-193b+SMAD3组比NC+SMAD3组荧光素酶活性明显降低(t=31.89,P=0.001),说明miR-193b可以与SMAD3 3′UTR结合。结论 LSCC组织中miR-193b表达上调,SMAD3表达明显降低。SMAD3是miR-193b的直接调控靶基因。

Hsa-miR-193b对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞生物学功能的影响

目的:研究hsa-miR-193b对喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖、凋亡等生物学功能的作用。方法:实验分组为Hep-2组、NC组(Hep-2细胞+miR-193binhibitor NC)、miR-193b抑制组(Hep-2细胞+miR-193binhibitor)。采用qRT-PCR检测miR-193b的表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期以及凋亡,Transwell检测细胞迁移能力。采用生物信息学技术进行靶基因预测,Western blot检测转染miR-193b后Hep-2细胞SMAD3的表达情况。结果:转染miR-193binhibitor后,miR-193b抑制组细胞miR-193b的表达显著降低,与Hep-2组和NC组比较差异有统计学意义(P<0.01),后2组miR-193b表达量差异无统计学意义(P>0.05)。和NC组比较,miR-193b抑制组的Hep-2细胞增殖能力在24、48和72h显著降低(P<0.05或P<0.01),G1/S期的细胞比例增多(P<0.01),细胞凋亡明显增多(P<0.01),细胞迁移能力显著降低(P<0.01)。生物学信息分析预测miR-193b靶基因为SMAD3,Hep-2细胞转染miR-193b后与NC组相比,SMAD3蛋白表达显著下调(P<0.05)。结论:miR-193b抑制剂能够抑制Hep-2细胞的增殖、迁移,促进细胞凋亡,提示miR-193b对喉鳞状细胞癌起到"癌基因"的作用,有望成为临床治疗的新靶点。

MicroRNA-218、microRNA-193b在宫颈癌组织中的表达及与化疗耐药性的关系

目的 探讨microRNA-218(miR-218)、microRNA-193b(miR-193b)在宫颈癌组织中的表达及其与化疗耐药性的关系。方法 选取2018年1月-2023年1月成都医学院第一附属医院收治的101例行手术治疗的宫颈癌患者。患者均行紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂药物敏感性试验,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-218、miR-193b表达情况。比较癌组织、癌旁组织中miR-218、miR-193b表达情况,统计化疗药物耐药情况,分析宫颈癌组织中miR-218、miR-193b的表达与化疗耐药性的关系。结果 癌组织中miR-218相对表达量低于癌旁组织(P <0.05),miR-193b相对表达量高于癌旁组织(P <0.05)。宫颈癌患者行体外化疗药物紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂的耐药率分别为38.61%、46.53%、48.51%、26.73%和40.59%。宫颈鳞癌与宫颈腺癌患者对体外化疗药物紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂耐药率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。耐药患者癌组织中miR-218相对表达量均低于敏感患者,miR-193b相对表达量均高于敏感患者(P <0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,miR-218、miR-193b及两者联合预测宫颈癌患者化疗耐药性的敏感性分别为74.51%(95%CI:0.601,0.852)、70.59%(95%CI:0.560,0.821)、82.35%(95%CI:0.686,0.911),特异性分别为74.00%(95%CI:0.594,0.849)、78.00%(95%CI:0.637,0.880)、90.00%(95%CI:0.774,0.963),曲线下面积分别为0.754(95%CI:0.661,0.847)、0.743(95%CI:0.643,0.843)、0.890(95%CI:0.824,0.956)。结论 宫颈癌组织中miR-218表达低于癌旁组织、miR-193b表达高于癌旁组织,miR-218、miR-193b的表达水平与宫颈癌患者化疗耐药性有关,两者联合预测宫颈癌患者化疗耐药性效能良好。

原发性舍格伦综合征患者血清miR-193b表达水平及其临床价值研究

目的探讨原发性舍格伦综合征(primary Sjogren’s syndrome,pSS)患者血清中miR-193b表达变化以及临床意义。方法选取2015年9月~2020年9月在黄石市中心医院治疗的98例pSS患者作为病例组,45例健康体检者作为对照组。根据患者病情严重程度分为轻度组(n=31)、中度组(n=43)和重度组(n=24)。收集临床资料,实时荧光定量PCR法检测血清中miR-193b表达量,采用Pearson相关分析分析pSS患者血清中miR-193b表达量和临床指标间相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清中miR-193b表达量对pSS患者诊断价值。结果pSS患者血清中miR-193b表达量在对照组、pSS轻度组、pSS中度组和pSS重度组依次升高(1.79±0.311,1.91±0.21,2.46±0.25,3.11±0.22),差异有统计学意义(F=165.948,P<0.001),且pSS重度组>pSS中度组>pSS轻度组>对照组(t=10.720,9.924,2.029,均P<0.05);Pearson相关分析结果显示,pSS患者血清中miR-193b表达量与B细胞比例、ESR,IgG,ESSDAI评分和ESSPRI评分呈正相关(r=0.432,0.554,0.448,0.356和0.361,均P<0.05),而与白细胞数、唾液流率和泪流率呈负相关(r=-0.215,-0.323,-0.369,均P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清中miR-193b表达量在预测pSS发生时曲线下面积为0.864(95%CI:0.805~0.923),当血清中miR-193b表达量为2.06时,灵敏度和特异度分别为78.57%,82.22%。结论miR-193b在pSS患者血清中表达量升高,与pSS病情轻重和患者腺体分泌有关,检测血清miR-193b有助于诊断pSS。

AD患者lncRNA BACE-AS BDNF及miR-193b水平与认知功能的关系

目的分析联合检测血浆和脑脊液lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平在阿尔茨海默病中的诊断价值及与认知功能的相关性。方法选取50例AD患者及100例健康体检的健康者为对象,检测受试者血浆lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平并分析各指标的诊断价值;检测AD患者脑脊液lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平,并分析脑脊液lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平与认知功能的相关性。结果AD组患者血浆lncRNA BACE-AS及BDNF水平显著高于对照组(P<0.05),且AD组患者血浆miR-193b水平显著低于对照组(P<0.05)。lncRNA BACE-AS、BDNF及miR-193b三指标联合检测诊断AD的敏感度、特异度及AUC均明显高于各单个指标,差异有统计学意义(P<0.05)。随着AD患者认知功能障碍加重,脑脊液lncRNA BACE-AS及BDNF水平显著升高(P<0.05),miR-193b水平显著降低(P<0.05),lncRNA BACE-AS、BDNF与AD患者认知功能障碍呈显著正相关(P<0.05),miR-193b与认知功能障碍呈显著负相关(P<0.05)。血浆和脑脊液lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平均呈正相关(P<0.05)。结论联合检测血浆lncRNA BACE-AS、BDNF、miR-193b水平可显著提高AD的诊断效果,且脑脊液lncRNA BACE-AS、BDNF水平与AD认知功能呈正相关,miR-193b水平与AD认知功能呈负相关。

hsa-miR-126和hsa-miR-518b在食管鳞癌中的表达

目的探讨食管鳞癌及正常组织微小RNA(miRNA)分子表达谱的差异,寻找并验证具有差异表达的miRNA。方法随机选3例首次诊治食管鳞癌患者的手术切除标本,取癌组织及正常粘膜。采用荧光探针杂交芯片扫描技术,获得食管鳞癌miRNA表达谱,并对表达谱的可靠性进行荧光实时定量RT-PCR验证。另取15例首次诊治食管鳞癌患者手术切除标本的癌组织及正常粘膜,对其中具有表达差异的hsa-miR-126和hsa-miR-518b进行进一步验证。结果得到了食管鳞癌及正常组织的MicroRNA表达谱,分析得到表达变化且具有统计学意义(单侧t检验,P<0.05)的miRNA11个,其中上调1个,下调10个。在另外15对验证样本中,hsa-miR-126上调10例(配对t检验,P<0.05),hsa-miR-518b下调12例(配对t检验,P<0.05)。结论 hsa-miR-126和hsa-miR-518b在食管鳞癌组织和正常组织中存在差异表达,hsa-miR-126在食管癌组织中上调,hsa-miR-518b下调。

Hsa-miR-125b在人胃癌耐药细胞株中的表达及其靶基因的功能分析

研究表明,Hsa-miR-125b在人胃癌耐氟尿嘧啶细胞株BGC823/Fu中表达下降。为进一步探讨hsa-miR-125b在获得性耐药中所起的作用,文章应用miRbase、靶基因预测软件、Gene Ontology数据库及KEGG数据库对hsa-miR-125b的序列特征、进化保守性、靶基因及功能以及靶基因所参与的信号通路等进行了深入的生物信息学分析。结果显示:has-miR-125b在多个物种之间具有高度序列保守性;通过软件预测获得hsa-miR-125b靶基因79个,其分子功能包括转录调节、蛋白质结合和肽酶类活性等(P<0.001),其所参与的生物学过程主要有细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡的正性或负性调控以及细胞因子刺激反应性、药物反应性、DNA损伤反应性等(P<0.001),调控包括MAPK、Wnt、p53等多条信号转导通路(P<0.01)。上述结果表明hsa-miR-125b可能参与调控多个生物学过程和信号转导通路,而其中细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期等生物学过程以及MAPK、Wnt、p53等信号通路已被证实与肿瘤耐药的发生有关。因此,hsa-miR-125b可能通过调控上述环节中的靶基因来影响肿瘤细胞对药物的敏感性,从而为hsa-miR-125b在肿瘤耐药中的作用机制提供新的研究线索。

血浆miR-193b和miR-199a在食管癌诊治中的临床价值

目的探讨miRNA-193b和miRNA-199a在血浆中的表达对食管鳞癌的诊治价值。方法选取2014年9月至2015年6月之间食管鳞癌患者56例,同期健康体检者30例。采用qRT-PCR技术(Taq Man探针法)检测食管鳞癌患者和健康者血浆中miRNA-193b、miRNA-199a的表达水平,以及检测食管鳞癌患者术前、术后1w血浆中miRNA-193b、miRNA-199a的表达水平,并结合临床病理资料,探讨它们与食管鳞癌的关系。结果食管鳞癌患者血浆中miR-193b和miR-199a的表达量均明显低于健康体检者(P<0.05);食管癌患者术后血浆中miR-193b和miR-199a的表达量均明显高于术前(P<0.05);血浆中miR-193b的表达与肿瘤TNM分期有关(t=-5.332,P=0.000),表现为随着TNM分期越晚,表达逐渐下调的趋势,与患者年龄、性别、肿瘤分化程度、淋巴结转移无明显关联(P>0.05)。miR-199a的表达与肿瘤分化程度、肿瘤TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05),表现为随着分化程度越低、TNM分期越晚和出现淋巴结转移,表达逐渐下调的趋势,而与患者年龄、性别无明显关联(P>0.05)。结论 miRNA-193b、miRNA-199a在食管鳞癌患者血浆中表达下调,可能作为抑癌基因参与食管鳞癌的发生发展。

过表达miR-193b对黑色素细胞中MITF和TYR表达的影响

旨在探讨miR-193b对黑色素生成关键基因MITF和TYR表达的影响,进而说明miR-193b对黑色素形成的影响。本研究通过细胞转染技术,在绵羊黑色素细胞中过表达miR-193b,检测黑色素细胞中黑色素含量的变化,采用实时荧光定量PCR和Western blot分别对转染细胞中MITF和TYR mRNA和蛋白表达水平进行测定。结果显示:过表达miR-193b的黑色素细胞,黑色素含量明显减少;MITF mRNA和TYR mRNA表达均显著降低(P<0.01),分别降低0.233倍和0.198倍;MITF和TYR蛋白表达量也显著降低(P<0.01),分别降低0.232倍和0.321倍。本研究表明,过表达miR-193b使黑色素细胞中MITF和TYR表达量降低而间接影响黑色素生成。

血清外泌体miRNA-193b诊断阿尔茨海默病的价值

目的探讨血清外泌体miR-193b在阿尔茨海默病(AD)早期诊断的应用价值。方法以2015年9月至2016年8月就诊于首都医科大学宣武医院的患者为研究对象,使用荧光定量PCR法检测主观认知障碍(SCD)、轻度认知障碍(MCI)、痴呆期(DAT)患者及正常对照组血清外泌体miR-193b水平并进行组间比较,用ROC曲线来评价分析miR-193b对SCD的诊断能力。结果 SCD、MCI和DAT患者血清外泌体内miR-193b水平均低于对照组,且DAT组低于MCI组,MCI组低于SCD组,差异有统计学意义(P <0.05)。诊断SCD时,AUC为0.947(95%CI:0.886～0.981),当诊断临界值为1.83时,特异度为94.7%,灵敏度为83.3%。结论血清外泌体miR-193b有望成为AD早期诊断的生物标志物。

生物信息学预测hsa-miR-26b的作用靶标及功能

目的通过生物信息学预测hsa-miR-26b的靶基因,进一步分析其潜在功能,为其后续功能研究提供理论依据。方法用pubmed、谷歌(google)等工具检索hsa-miR-26b相关文献;用miRbase、NCBI、UCSC Browser和Promoter scan等在线工具分析hsa-miR-26b序列及所在基因组特征;用TargetScan、PicTar及miRanda预测hsa-miR-26b的靶基因;通过功能富集分析(GOanalysis)和信号转导通路富集分析(Pathway analysis),预测所得靶基因和已证实的靶标基因。结果研究证实hsa-miR-26b与神经发育、心肌肥大及各种肿瘤发生、发展有关;hsa-miR-26b位于CTDSP1基因内含子内,但可能具有与该基因不同的启动子;3种方法预测结果取交集获得可能靶标基因33个,合并已知靶标基因14个;hsa-miR-26b靶基因主要参与钠离子转运、溶酶体组织和生物形成、抑制细胞增殖、转运等生物学过程,涉及Notch、氨基糖类代谢、ABC转运子、VEGF及TGF-β等信号转导通路。结论 hsa-miR-26b的功能较为广泛,与发育、代谢等密切相关。

miR-193b及其靶基因Kit在不同毛色羊驼皮肤中的表达

本研究旨在检测miR-193b及其靶基因Kit在不同毛色羊驼皮肤中的表达,并分析它们与羊驼毛色的关系。试验以不同毛色的成年羊驼为研究对象,应用实时荧光定量PCR技术(QRT-PCR)对miR-193b及Kit在不同毛色羊驼皮肤中的相对表达量进行检测。结果显示,miR-193b在棕色羊驼中显著表达,其相对表达量是白色羊驼的1.741346倍;而Kit在白色羊驼中显著表达,其相对表达量是棕色羊驼的4.6029倍。通过以上研究结果显示miR-193b及其靶基因Kit可能参与羊驼毛色形成过程。提示,miR-193b可能通过负调控Kit参与羊驼毛色形成。

miR-193b在宫颈癌中的表达与功能及其对化疗敏感性的影响

目的:探讨微小RNA-193b(miR-193b)在不同宫颈组织中的表达以及其对顺铂作用于宫颈癌细胞敏感性的影响,并初步探讨其作用机制。方法:实时荧光定量PCR(qPCR)检测不同宫颈组织中miR-193b的表达水平。采用脂质体将miR-193b-inhibitor转染至HeLa细胞,Transwell法、CCK-8法和免疫蛋白印迹法分别检测细胞迁移数、细胞对顺铂的敏感性以及细胞中PTEN、Akt、p-Akt和P-糖蛋白(P-gp)的蛋白水平。结果:qPCR结果显示miR-193b在正常宫颈组织及宫颈糜烂组织中呈低表达,在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中的表达明显上升;转染miR-193b-inhibitor后,HeLa细胞迁移数明显减少(P<0.05),顺铂对HeLa细胞活力的抑制作用进一步增强(P<0.05),细胞中PTEN的蛋白表达明显上调(P<0.05),Akt的蛋白表达无明显变化,p-Akt和P-gp的蛋白水平明显下调(P<0.05)。结论:miR-193b在宫颈癌组织中呈高表达,沉默miR-193b可增加HeLa细胞对顺铂的敏感性,作用机制可能与PTEN-PI3K/Akt通路有关。

miR-193b与肿瘤相关性的研究进展

miRNAs已被证实是基因表达的关键调控因子,不同水平的表达与各种疾病相关。大多数的研究表明,miRNAs表达谱中的miR-193b参与机体多种病理生理过程,在肿瘤发生、发展过程中发挥抑癌基因的作用,可抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力。因此,miR-193b在疾病的诊断、治疗和预后评估等方面将会发挥更大的作用,有着广阔的应用前景。本文就miR-193b与肿瘤相关性研究进展作一综述。

MicroRNA-193b对K562细胞C-KIT蛋白表达及生物学行为的影响

本研究探讨microRNA-193b(miR-193b)对K562白血病细胞系C-KIT蛋白表达及生物学行为的影响。采用HiPerFect转染试剂介导FAM荧光标记的miR-193b mimic或阴性对照分别转染过表达C-KIT的K562细胞系,采用流式细胞术检测FAM阳性细胞百分比以监测转染效率,采用Western blot检测C-KIT和磷酸化C-KIT蛋白表达水平,采用CCK-8试剂检测细胞生长曲线,采用AnnexinⅤ染色后流式细胞仪检测细胞凋亡,采用流式细胞仪检测粒系分化标志CD11b和CD15阳性细胞百分比。结果显示,miR-193b或阴性对照转染的K562细胞中,FAM阳性细胞可达80%左右;与对照组相比,过表达miR-193b可明显抑制K562细胞中C-KIT、磷酸化C-KIT蛋白表达水平,同时,K562细胞的增殖受到抑制,凋亡细胞、CD11b阳性细胞、CD15阳性细胞的百分比均有增加。结论:miR-193b可抑制K562细胞C-KIT表达,并抑制细胞增殖;该增殖抑制作用可能与miR-193b诱导的细胞凋亡、分化有关,本研究为进一步分析miR-193b在白血病发生中的作用提供了实验依据。

神经胶质瘤患者miRNA-193b基因表达水平的改变及其意义

目的探讨神经胶质瘤患者miRNA-193b基因表达水平的改变及其意义。方法对72例神经胶质瘤患者(神经胶质瘤组)和30例脑外伤手术患者(对照组)的脑组织标本进行miRNA-193b基因表达水平的检测。采用甲基化特异性PCR技术对神经胶质瘤患者miRNA-193b启动子区甲基化水平进行检测。对结果进行比较分析。结果对照组miRNA-193b基因表达水平(0.5528±0.1957)明显高于神经胶质瘤组(0.2450±0.1845)(P<0.01)。低级别亚组神经胶质瘤患者miRNA-193b基因表达水平(0.2909±0.1802)明显高于高级别亚组(0.1991±0.1795)(P<0.05)。低甲基化亚组神经胶质瘤患者miRNA-193b基因表达水平(0.2817±0.1883)明显高于高甲基化亚组(0.1615±0.1476)(P<0.01)。结论神经胶质瘤患者miRNA-193b基因表达水平低,且病理级别越高、甲基化水平越高,miRNA-193b基因表达水平越低。该基因表达水平可作为神经胶质瘤早期诊断或病情监测的指标之一。