结直肠癌组织中METTL3、miR-23a-3p表达与病理参数及术后肝转移的关系

目的探讨结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)组织中甲基转移样酶3(Methyltransferase-like protein 3,METTL3)、微小核糖核酸-23a-3p(miRNA-23a-3p,miR-23a-3p)表达与病理参数及CRC术后肝转移的关系。方法选取2018年3月至2021年6月中国医科大学附属盛京医院收治的145例CRC患者,患者均进行CRC根治术,术中取患者CRC组织及癌旁组织样本,采用荧光定量聚合酶链反应法检测METTL3 mRNA、miR-23a-3p水平,分析不同病理参数的CRC组织METTL3 mRNA、miR-23a-3p表达情况。收集患者临床病理资料,采用Cox比例风险模型对预后因素进行单变量和多变量分析。术后随访2年,统计患者术后肝转移发生情况,并采用受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清METTL3 mRNA、miR-23a-3p对CRC术后肝转移的预测价值。结果CRC组织中METTL3 mRNA、miR-23a-3p水平均高于癌旁组织(P<0.05);国际抗癌联盟肿瘤通用分期(Tumor node metastasis,TNM)Ⅲ期CRC患者METTL3 mRNA水平高于Ⅱ期,低分化CRC患者METTL3 mRNA水平高于中-高分化(P<0.05);TNMⅢ期CRC患者miR-23a-3p水平高于Ⅱ期,发生淋巴转移CRC患者METTL3 mRNA水平高于未发生淋巴转移CRC患者(P<0.05);单因素及多因素Cox分析显示,TNM分期Ⅲ期、低分化、淋巴转移、METTL3 mRNA及miR-23a-3p高水平是CRC术后肝转移的独立危险因素(P<0.05);ROC分析结果显示,血清METTL3 mRNA、miR-23a-3p单独及联合预测CRC术后肝转移的曲线下面积(Area under the curve,AUC)分别为0.748(0.669~0.816)、0.778(0.701~0.842)、0.882(0.818~0.930),二者联合检测预测CRC术后肝转移的效能高于单独检测(Z=2.387、2.027,P均<0.05)。结论CRC组织中METTL3、miR-23a-3p表达均异常升高,METTL3与TNM分期、分化程度相关,miR-23a-3p与TNM分期、淋巴转移相关,METTL3、miR-23a-3p联合对预测CRC术后肝转移具有更高价值。

miR-23a-3p与miR-182在结直肠癌患者外周血中的异常表达及其临床意义

目的探讨miR-23a-3p与miR-182在结直肠癌患者外周血中的异常表达及其临床意义。方法选取2021年6月至2022年6月我院收治的30例结直肠癌患者为观察A组,30例结直肠良性肿瘤患者为观察B组,同期30名健康体检者为对照组。采集观察A组、观察B组治疗前空腹静脉血以及对照组体检时空腹静脉血,使用实时荧光定量PCR仪测定miR-23a-3p、miR-182水平;比较miR-23a-3p、miR-182单独及联合检测对结直肠癌的诊断效能;分析结直肠癌临床因素与miR-23a-3p、miR-182的关系。结果观察A组、观察B组的miR-23a-3p、miR-182水平高于对照组(P<0.05);观察A组的miR-23a-3p、miR-182水平高于观察B组(P<0.05)。miR-23a-3p、miR-182联合检测诊断结直肠癌的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、曲线下面积(AUC)大于miR-23a-3p、miR-182单独检测。不同家族史、淋巴结转移、病灶大小、临床分期的结直肠癌患者miR-23a-3p、miR-182水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论家族史、淋巴结转移、病灶大小及临床分期与结直肠癌患者miR-23a-3p、miR-182水平有密切联系,且miR-23a-3p与miR-182检测在结直肠癌临床诊断中均具备一定价值,二者联合应用可提高结直肠癌早期诊断的准确性。

Androgen Receptor Promotes Lung Cancer Metastasis by Modifying the miR23a-3p/EPHB2 Pathway

Objective This study aimed to investigate the reasons behind the lower survival rates in male lung cancer patients than in female lung cancer patients.Methods Through various techniques,such as Argonaute immunoprecipitation,luciferase assays,and ChIP,this study confirmed the positive effects of androgen receptor(AR)on lung cancer cell invasion across different in vitro cell lines and in vivo mouse models.Results The findings suggest that AR enhanced the invasion of lung cancer cells by modifying EPHB2 signals at the protein expression level,which in turn required changes in miRNA-23a-3p.Restoring miRNA-23a-3p could counteract the intensified invasion of lung cancer cells mediated by AR.Conclusion This study revealed that AR may facilitate the lung cancer matastasis by modulating miRNA-23a-3p/EPHB2 signaling and that targeting this signaling pathway could provide new approaches to inhibit lung cancer metastasis.

艾滋病患者血清miR-210-5p、miR-23a-3p和miR-296-5p的检测意义分析

目的研究艾滋病(AIDS)患者血清微小RNA(miR)-210-5p、miR-23a-3p及miR-296-5p的检测意义。方法选取2020年5月至2023年5月鹤壁市传染病医院收治的100例AIDS患者作为研究对象,设为AIDS组。另选取同期健康志愿者100例设为参考组。比较两组血清miR-210-5p、miR-23a-3p及miR-296-5p水平。根据AIDS患者预后将AIDS组分为预后不良组、预后良好组,比较两组血清miR-210-5p、miR-23a-3p、miR-296-5p水平。采用多因素Logistic回归分析AIDS患者预后不良的影响因素。结果AIDS组血清miR-210-5p、miR-23a-3p水平均高于参考组,miR-296-5p水平低于参考组,差异具有统计学意义(P<0.05)。预后不良组血清miR-210-5p、miR-23a-3p水平均高于预后良好组,miR-296-5p水平低于预后良好组,差异具有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,miR-210-5p、miR-23a-3p水平升高及miR-296-5p水平降低均是AIDS患者预后不良的危险因素(P<0.05)。结论AIDS患者血清miR-210-5p、miR-23a-3p水平异常升高,miR-296-5p水平异常降低,其均对AIDS患者的预后具有一定的评估作用。

miR-23a-3p、ZNF395水平与妊娠期高血压病人胎儿生长受限的关系

目的:探讨妊娠期高血压病人胎盘组织微小RNA-23a-3p(miR-23a-3p)、锌指蛋白395(ZNF395)水平与胎儿生长受限的关系。方法:选取120例妊娠期高血压病人作为研究对象,根据孕期胎儿生长状况将其分为正常对照组(95例)和胎儿生长受限组(25例)。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测胎盘组织中miR-23a-3p表达水平,免疫组化法检测ZNF395蛋白表达水平,收集新生儿体重、胎盘重量等一般资料;采用Pearson法及Spearman法分析胎儿生长受限病人胎盘组织miR-23a-3p、ZNF395水平与新生儿体重、胎盘重量的相关性;采用单因素及多因素Logistic回归分析胎儿生长受限的影响因素。结果:胎儿生长受限组胎盘组织ZNF395蛋白阳性率、新生儿体重、胎盘重量低于正常对照组,miR-23a-3p水平高于正常对照组(P<0.05)。胎儿生长受限病人胎盘组织miR-23a-3p与ZNF395水平呈负相关(P<0.05);新生儿体重、胎盘重量与miR-23a-3p呈负相关(P<0.05),与ZNF395呈正相关(P<0.05)。miR-23a-3p是胎儿生长受限的独立危险因素(P<0.05),ZNF395是胎儿生长受限的保护因素(P<0.05)。结论:胎儿生长受限病人胎盘组织中miR-23a-3p高表达,ZNF395低表达,miR-23a-3p可能通过下调ZNF395表达影响胎儿生长发育。

胃癌组织miR-23a-3p、miR-361-5p表达与PI3K/AKT/mTOR信号通路和预后的关系研究

目的探讨胃癌组织微小核糖核酸(miR)-23a-3p、miR-361-5p表达与磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路和预后的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测120例胃癌患者胃癌组织与癌旁组织中miR-23a-3p、miR-361-5p、PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达。Pearson相关分析胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达与PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达的相关性,以及分析miR-23a-3p、miR-361-5p表达与胃癌患者临床病理特征的关系。Kaplan-Meier生存分析胃癌组织中不同miR-23a-3p、miR-361-5p表达与胃癌患者生存预后的关系。单因素及多因素COX回归分析影响胃癌患者生存预后因素。结果相比于癌旁组织,胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达明显较低,而PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达明显较高,差异有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达与PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达呈负相关(均P<0.05)。不同肿瘤TNM分期、肿瘤分化程度、术后辅助化疗及淋巴结转移的胃癌患者胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。miR-23a-3p低表达胃癌患者3年总体生存率为46.77%(29/62),低于miR-23a-3p高表达胃癌患者3年总体生存率[81.03%(47/58)],差异有统计学意义(Log-Rankχ^(2)=30.243,P<0.001)。miR-361-5p低表达胃癌患者3年总体生存率为50.79%(32/63),低于miR-361-5p高表达胃癌患者3年总体生存率[77.19%(44/57)],差异有统计学意义(Log-Rankχ^(2)=24.932,P<0.001)。单因素及多因素Cox回归分析结果显示,TNM分期Ⅲ期、有淋巴结转移、无术后辅助化疗、miR-23a-3p低表达、miR-361-5p低表达是影响胃癌患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论胃癌患者胃癌组织中miR-23a-3p、miR-361-5p表达降低,二者表达与PI3K/AKT/mTOR信号通路有关,是潜在的胃癌预后相关的肿瘤标志物。

川芎提取物通过miR-23a-3p/SNCA轴对帕金森综合征模型MPP^(+)诱导的SH-SY5Y细胞的影响

目的探究川芎提取物对MPP^(+)诱导的SH-SY5Y细胞和帕金森综合征的影响。方法1-甲基-4苯基吡啶离子(MPP^(+))干预SH-SY5Y建立帕金森综合征细胞模型(SH-SY5Y-MPP^(+)),川芎提取物干预后检测细胞增殖、凋亡以及miR-23a-3p、SNCA的表达情况。另观察调控miR-23a-3p、SNCA表达后SH-SY5Y-MPP^(+)的变化,双荧光素报告酶验证miR-23a-3p与SNCA的关系。结果SH-SY5Y-MPP^(+)的细胞增殖能力明显低于SH-SY5Y,而凋亡率则高于SH-SY5Y(P<0.05)。川芎提取物干预下,SH-SY5Y-MPP^(+)的增殖能力、Bcl-2、SNCA蛋白升高,凋亡率与miR-23a-3p、Bax蛋白降低(P<0.05)。沉默miR-23a-3p与升高SNCA均可以促进SH-SY5Y-MPP^(+)的增殖能力,抑制凋亡;而升高miR-23a-3p与沉默SNCA则反之(P<0.05)。在线靶基因预测网站发现,miR-23a-3p与SNCA存在可结合的互补位点,双荧光素报告酶显示SNCA-wt的萤火活性在转染了miR-23a-3p模拟物序列后受到了明显的抑制(P<0.05)。在升高miR-23a-3p后,SH-SY5Y-MPP^(+)中SNCA蛋白表达降低,而沉默miR-23a-3p则反之(P<0.05)。拯救实验显示,川芎提取物对SH-SY5Y-MPP^(+)的干预效果被升高miR-23a-3p或沉默SNCA完全逆转(P>0.05);升高miR-23a-3p对SH-SY5Y-MPP^(+)产生的影响则升高SNCA逆转(P>0.05)。结论川芎提取物通过调控miR-23a-3p/SNCA轴影响MPP^(+)诱导的SH-SY5Y生物学行为改变,未来可能是治疗帕金森综合征的新方向。

miR-23a-3p调控痛风性关节炎细胞自噬的作用机制

目的探究miR-23a-3p对痛风性关节炎(GA)滑膜细胞自噬的影响。方法电镜观察滑膜细胞的变化,自噬双标腺病毒实验观察细胞内自噬流,Western Blot检测LC3B和p62蛋白的表达量。结果电镜结果显示,模型组和对照组相比线粒体明显减少,线粒体模糊不清,粗面内质网、糖原颗粒明显减少,自噬体明显增多;而和模型组相比,模型+miR-23a-3p mimics组线粒体明显皱缩,线粒体膜模糊不清,内质网减少,自噬体大量存在。自噬双标腺病毒实验结果显示,与对照组相比,图像中黄色斑点、红色斑点显著增多,即自噬小体、自噬溶酶体显著增多(P<0.05);而和模型组相比,模型+miR-23a-3p mimics组黄色斑点、红色斑点显著增多,即自噬小体、自噬溶酶体增加(P<0.05)。WB结果显示,与模型组比较,对照组中LC3B的蛋白表达显著降低(P<0.05),P62的蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型+miR-23a-3p mimics组比较,对照组、模型组、模型+miR-23a-3p NC组中LC3B的蛋白表达显著降低(P<0.05),P62的蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论miR-23a-3p可以促进GA滑膜细胞的自噬反应,升高LC3B表达,降低P62表达。

黄芩苷通过miR-23a-3p/PTEN/PI3K/AKT/mTOR抑制痛风性关节炎成纤维样滑膜细胞炎症反应机制探究

目的:探究黄芩苷(baicalin)通过微RNA-23a-3p/磷酸酶与紧张素同源物/磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(miR-23a-3p/PTEN/PI3K/AKT/mTOR)抑制痛风性关节炎(GA)成纤维样滑膜细胞(FLS)炎症反应的机制。方法:提取GA患者和正常人外周血辅助性T淋巴细胞(CD4^(+)T),购买正常人FLS,应用单钠尿酸盐结晶液刺激正常人FLS构建GA-FLS模型,细胞迁移(transwell)进行CD4^(+)T细胞与GA-FLS共培养,构建miR-23a-3p模拟物(miR-23a-3p mimics)转染至GA-FLS中;黄芩苷作用24 h、48 h和72 h后,细胞计数8(CCK8)检测细胞活力并选取最佳作用浓度和时间;实验分为正常组(GA-FLS)、对照组(CD4^(+)T+GA-FLS)、模型组(GA-CD4^(+)T+GA-FLS)、黄芩苷组(GA-CD4^(+)T+GA-FLS+100μg/ml Baicalin)、miR-23a-3p-NC组(GA-CD4^(+)T+GA-FLS+miR-23a-3p-NC)、miR-23a-3p mimics组(GA-CD4^(+)T+GA-FLS+miR-23a-3p mimics)、黄芩苷miR-23a-3p mimics组(GA-CD4^(+)T+GAFLS+miR-23a-3p mimics+100μg/ml Baicalin);实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和免疫印迹(WB)检测miR-23a3p、PTEN、PI3K、AKT、mTOR的表达,酶联免疫吸附(ELISA)测定检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)的表达。结果:CCK8检测结果显示黄芩苷最佳作用浓度和时间为100μg/ml、48 h。RT-qPCR和WB检测结果显示:模型组miR-23a-3p mRNA、PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA的表达较正常组、对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);而PTEN mRNA组表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);与miRNA-23a-3p-NC组相比,miR-23a-3p mimics组miRNA-23a-3p mRNA、PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA的表达明显上升,PTEN mRNA的表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);与miR-23a3p mimics组相比,黄芩苷miR-23a-3p mimics组miRNA-23a-3p mRNA、PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA的表达明显下调,PTEN mRNA的表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.01)。ELISA检测结果显示:模型组TNF-α、IL1β、IL-6的表达较正常组、对照组明显升高,而IL-10表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);与miRNA-23a3p-NC组相比,miRNA-23a-3p mimics组TNF-α、IL-1β、IL-6的表达明显上升,IL-10表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);与miR-23a-3p mimics组相比,黄芩苷miR-23a-3p mimics组TNF-α、IL-1β、IL-6的表达明显下调,IL-10表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:黄芩苷可通过下调miR-23a-3p,抑制PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活,降低痛风性关节炎成纤维样滑膜细胞炎症反应。

CircSERPINE2靶向miR-23a-3p调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制

目的:探讨CircSERPINE2对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法:选取于武汉市第四医院就诊的44例RA患者和健康体检者的外周血,培养滑膜成纤维细胞(FLSs)和RA滑膜成纤维细胞(RA-FLSs),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CircSERPINE2和miR-23a-3p表达水平;将RA-FLSs随机分为NC组、pcDNACircSERPINE2组、pcDNA组、anti-miR-23a-3p组、anti-miR-NC组、miR-23a-3p+pcDNA-CircSERPINE2组、miR-NC+pcDNA-CircSERPINE2组;CCK-8检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移数和侵袭数;双荧光素酶报告实验检测CircSERPINE2和miR-23a-3p的靶向关系。结果:RA患者外周血中CircSERPINE2表达水平低于健康体检者,而miR-23a-3p表达水平高于健康体检者(P<0.05)。与FLSs比较,RA-FLSs中CircSERPINE2表达水平降低,而miR-23a-3p表达水平升高(P<0.05)。过表达CircSERPINE2或抑制miR-23a-3p表达,细胞活性降低,迁移和侵袭细胞数减少(P<0.05)。CircSERPINE2靶向调控miR-23a-3p。miR-23a-3p过表达可逆转CircSERPINE2过表达对RA-FLSs的影响。结论:CircSERPINE2过表达可通过靶向调控miR-23a-3p抑制RA滑膜成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭。

肺结核患者外周血miR-23a-3p的表达及其对患者诊断及预后评估的价值分析

目的:探究miR-23a-3p在肺结核(PTB)患者中的表达及其对PTB患者的诊断和预后的价值。方法:将2020年6月至2021年6月本院传染病科收治的98例PTB患者设为PTB组,同期另选取92例健康志愿者作为健康组。采用qRT-PCR法检测受试者外周血miR-23a-3p、核转录因子SP1(SP1)和干扰素调节因子1(IRF1)的表达;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-23a-3p对PTB的诊断价值和预后价值;采用Pearson相关系数分析PTB患者外周血miR-23a-3p与SP1、IPF1之间的相关性;对PTB患者完成6个月随访,采用Kaplan-Meier法分析miR-23a-3p与PTB患者预后关系;Cox回归分析影响PTB患者预后的危险因素。结果:与健康组相比,PTB组患者miR-23a-3p水平显著降低,SP1和IPF1表达显著升高(P<0.05);ROC曲线显示,外周血miR-23a-3p诊断PTB的曲线下面积(AUC)为0.861(95%CI:0.809~0.913),灵敏度和特异度分别为85.70%和70.70%;Pearson相关系数分析显示,PTB患者外周血miR-23a-3p的表达与SP1表达和IPF1表达均呈负相关(r值分别为-0.570、-0.435,均P<0.05),PTB患者SP1表达与IPF1表达呈正相关(r=0.524,P<0.05);随访期间,患者预后良好87例,预后不良11例;ROC曲线显示,miR-23a-3p预测PTB患者预后的AUC为0.881(95%CI:0.790~0.971),灵敏度和特异度分别为72.70%和92.00%;与预后良好组相比,预后不良组miR-23a-3p水平显著降低,SP1和IPF1表达显著升高(P<0.05);Kaplan-Meier分析结果显示,miR-23a-3p高表达PTB患者复发率明显低于miR-23a-3p低表达患者;Cox回归分析显示,肺部空洞、痰液MTB培养阳性、miR-23a-3p低表达、SP1高表达、IPF1高表达是影响PTB患者预后的危险因素。结论:PTB患者外周血miR-23a-3p表达明显降低,其低表达是影响PTB患者预后的危险因素,对PTB诊断和预后判断均具有良好的价值。

槲皮素通过生长抑制特异性基因5调节微小RNA-23a-3p和磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路抑制垂体神经内分泌肿瘤的增殖机制

目的:探讨槲皮素对垂体神经内分泌肿瘤(PitNETs)生长的抑制作用及其可能机制。方法:通过Starbase工具预测生长抑制特异性基因5(GAS5)与微小RNA-23a-3p(miR-23a-3p)结合情况,双荧光素酶报告实验和RNA免疫沉淀测定GAS5和miR-23a-3p之间的结合关系。体外培养人垂体瘤细胞系RC-4B/C,分为对照组(Control)、槲皮素组(Quercetin)、GAS5抑制组(Si-GAS5)和槲皮素+si-GAS5组(Quercetin+si-GAS5),对比分析槲皮素对GAS5、miR-23a-3p及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响,以及人垂体瘤复苏细胞(RC-4B/C)生长和侵袭能力的影响。结果:Starbase工具预测GAS5与miR-23a-3p结合,双荧光素酶报告实验和RNA免疫沉淀测定揭示了GAS5和miR-23a-3p之间的直接结合。槲皮素促进GAS5的表达,抑制miR-23a-3p和PI3K/AKT的表达,抑制RC-4B/C细胞的增殖和侵袭(均P<0.05);下调GAS5、miR-23a-3p表达增多,促进RC-4B/C细胞的增殖和侵袭(均P<0.05);槲皮素可以逆转GAS5下调引起的miR-23a-3p、PI3K/AKT表达增加,抑制RC-4B/C细胞的增殖和侵袭(均P<0.05)。结论:槲皮素可能通过促进GAS5表达竞争性抑制miR-23a-3p,降低了PI3K/AKT,抑制垂体神经内分泌肿瘤的生长。

miRNA-23a-3p和TLR4在急性脑出血患者血清中的表达及临床意义

目的探究微小RNA-23a-3p(miR-23a-3p)、Toll样受体4(TLR4)在急性脑出血(ACH)患者血清中的水平及其临床意义。方法选取2020年1月至2022年3月西安宝石花长庆医院收治的110例ACH患者为ACH组,并纳入同期110例健康体检者为对照组。采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定两组受检者的血清miR-23a-3p表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组受检者的血清核因子κB(NF-κB)、TLR4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用Pearson法分析ACH患者血清miR-23a-3p、TLR4水平与TNF-α、NF-κB的相关性;比较不同预后ACH患者一般资料及血清miR-23a-3p、TLR4、TNF-α、NF-κB水平;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-23a-3p、TLR4水平对ACH患者预后的评估价值。结果ACH组患者血清miR-23a-3p、TLR4、TNF-α、NF-κB水平分别为2.29±0.67、(32.94±10.98)μg/L、(51.28±21.37)pg/mL、(17.34±6.19)ng/mL,明显高于对照组的1.01±0.30、(17.46±5.82)μg/L、(20.31±8.47)pg/mL、(8.50±3.04)ng/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);ACH患者血清miR-23a-3p、TLR4水平与TNF-α、NF-κB均呈正相关(r=0.377、0.538、0.403、0.572,P<0.05),且血清miR-23a-3p表达水平与TLR4也呈正相关(r=0.581,P<0.05);预后不良组ACH患者NIHSS评分、脑出血体积、血清miR-23a-3p、TLR4、TNF-α、NF-κB水平明显高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05);血清miR-23a-3p、TLR4预测ACH患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.857、0.868,截断值分别为2.37μg/L、34.52μg/L,敏感度分别为76.9%、78.8%,特异性分别为87.9%、86.2%;miR-23a-3p、TLR4联合预测ACH患者预后的AUC为0.941,敏感度为90.4%,特异性为89.7%。结论ACH患者血清miR-23a-3p、TLR4水平较高,miR-23a-3p与TLR4呈正相关,且miR-23a-3p、TLR4联合检测可较好地预测ACH患者预后,为临床预测ACH患者预后提供新策略。

CircACTR2调节miR-23a-3p/TBL1X轴对高糖诱导的滋养层细胞损伤的影响

目的探讨环状RNA肌动蛋白相关蛋白2(circACTR2)调节miR-23a-3p/转导素β1X连锁蛋白(TBL1X)轴对高糖诱导的滋养层细胞损伤的影响。方法将人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/Svneo分为NG组(5.5 mmol/L葡萄糖)、HG组(25 mmol/L葡萄糖)、si-NC组(25 mmol/L葡萄糖+转染si-NC)、si-circACTR2组(25 mmol/L葡萄糖+转染si-circACTR2)、si-circACTR2+inhibitor-NC组(25 mmol/L葡萄糖+si-circACTR2和inhibitor-NC共转染)、sicircACTR2+miR-23a-3p inhibitor组(25 mmol/L葡萄糖+si-circACTR2和miR-23a-3p inhibitor共转染)。实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中circACTR2、miR-23a-3p的表达;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移;酶联免疫吸附试验检测丙二醛(MDA)水平和乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western blot检测细胞中TBL1X、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、胱天蛋白酶3(caspase-3)的表达。双萤光素酶报告基因实验分别验证circACTR2、TBL1X和miR-23a-3p的靶向关系。结果与NG组相比,HG组HTR-8/Svneo细胞miR-23a-3p表达、增殖能力、划痕愈合率、PCNA、MMP-2、MMP-9表达、SOD活性降低,circACTR2、TBL1X和caxpase-3表达、MDA含量、LDH活性、凋亡率升高(P<0.05);与HG组和si-NC组相比,si-circACTR2组HTR-8/Svneo细胞中miR-23a-3p表达、增殖能力、划痕愈合率、PCNA、MMP-2、MMP-9表达、SOD活性升高,circACTR2、TBL1X和caxpase-3表达、MDA含量、LDH活性、凋亡率降低(P<0.05);在敲低circACTR2的基础上,下调miR-23a-3p可明显减弱circACTR2敲低对高糖诱导的HTR-8/Svneo细胞的增殖和迁移的促进作用,增强细胞凋亡和氧化应激能力。双萤光素酶报告基因实验结果显示,circACTR2靶向负调控miR-23a-3p表达,miR-23a-3p靶向负调控TBL1X表达。结论敲低circACTR2可调控miR-23a-3p/TBL1X轴,进而通过抑制高糖诱导的滋养层细胞损伤来发挥保护作用。

miR-182、miR-23a-3p联合cTnI、CK-MB、Myo在急性心肌梗死早期诊断中的应用价值

目的探讨微小RNA(miR)-182、miR-23a-3p联合肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌红蛋白(Myo)在急性心肌梗死(AMI)早期诊断中的应用价值。方法选取80例AMI病人作为AMI组,40名健康体检者作为对照组。采集AMI组发病后1~2 h、2~4 h、4~8 h、8~12 h空腹静脉血,对照组体检时采集空腹静脉血,使用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定miR-182、miR-23a-3p表达,采用胶体金免疫层析法测定cTnI、CK-MB、Myo含量。结果AMI组不同时间血清miR-182、miR-23a-3p表达均低于对照组,AMI组不同时间cTnI、CK-MB、Myo含量均高于对照组(P<0.05)。AMI组不同时间miR-182、miR-23a-3p、cTnI、CK-MB、Myo阳性检出率均高于对照组(P<0.05)。AMI病人发病后1~2 h血清miR-182、miR-23a-3p、cTnI灵敏度均高于80%,其中miR-23-3p灵敏度最高,为92.5%,cTnI特异度最高,为87.5%;miR-182与miR-23a-3p联合检测灵敏度和特异度分别为90.0%和85.0%,均高于cTnI、CK-MB、Myo三者联合诊断的88.8%和82.5%,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论miR-182、miR-23a-3p可作为AMI早期诊断的新型标志物,联合cTnI、CK-MB、Myo有利于提高AMI病人早期诊断的准确度。

miR-23a-3p对MPP +诱导的帕金森病细胞模型的功能机制

目的探讨微小RNA-23a-3p(miRNA-23a-3p)对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导帕金森病细胞模型增殖及凋亡的影响。方法用不同浓度的MPP+诱导SH-SY5Y细胞建立帕金森病细胞模型,采用CCK-8法检测SH-SY5Y细胞存活率,筛选MPP+适宜作用浓度。采用qRT-PCR法检测细胞中miRNA-23a-3p的表达。将SH-SY5Y细胞分为control组MPP++miR-23a-3p组、MPP++miR-con组、MPP++miR-23a-3p+pcDNA-control组、MPP++miR-23a-3p+pcDNA-SNCA组,采用qRT-PCR法检测转染效果。流式细胞术检测miRNA-23a-3p对SH-SY5Y细胞凋亡的影响;双荧光素酶报告实验检测miRNA-23a-3p与SNCA的靶向关系;Western印迹法检测Bax、Bcl-2、SNCA蛋白表达。检测细胞中ROS水平及LDH活力。结果MPP+处理后SH-SY5Y细胞存活率显著降低(P<0.05),miRNA-23a-3p的表达水平显著降低(P<0.05),选取4 mmol/L MPP+进行后续研究;与control组相比,MPP+组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),ROS水平与Bax表达水平显著升高(P<0.05),LDH活性明显增强(P<0.05),而Bcl-2表达水平显著降低(P<0.05);上调SH-SY5Y细胞中miRNA-23a-3p表达可明显提高细胞存活率及Bcl-2表达水平(P<0.05),而明显降低ROS水平、Bax表达水平、LDH活性及细胞凋亡率(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实SNCA是miRNA-23a-3p的靶基因;SNCA过表达可逆转miR-23a-3p对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞存活率、凋亡率、细胞毒性的作用。结论上调miR-23a-3p表达可通过靶向抑制SNCA的表达进而对MPP+诱导的帕金森病细胞模型发挥保护作用。

七氟醚通过lncRNA MEG3调控miR-23a-3p对肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究七氟醚对肺癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法采用七氟醚处理肺癌A549细胞,CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术评估细胞凋亡,Western blot检测B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。实时定量PCR(qRT-PCR)检测长链非编码RNA(lncRNA)MEG3和微小RNA(miR)-23a-3p的表达。qRT-PCR分析人正常肺粘膜GES-1细胞和肺癌A549细胞中MEG3和miR-23a-3p表达。生物信息学预测与双荧光素酶活性实验检测肺癌细胞A549中MEG3与miR-23a-3p的靶向关系。在A549细胞中转染si-MEG3或miR-23a-3p,并分别给予七氟醚处理,采用上述方法进行细胞增殖与凋亡检测。结果七氟醚明显降低细胞A549的活力、Bcl-2蛋白水平和miR-23a-3p表达量,显著提高细胞的凋亡率、Bax蛋白表达量和MEG3表达量(P<0.05)。与GES-1细胞比较,A549细胞MEG3表达量明显减少,miR-23a-3p表达量显著增加(P<0.05)。MEG3靶向调控miR-23a-3p的表达。七氟醚通过MEG3抑制miR-23a-3p的表达。敲减MEG3或过表达miR-23a-3p后,七氟醚对A549细胞增殖和Bcl-2蛋白表达的抑制作用,以及对细胞凋亡和Bax蛋白表达的促进作用被逆转。并且,七氟醚对A549细胞miR-23a-3p表达的抑制作用被敲减MEG3所逆转。结论七氟醚通过lncRNA MEG3调控miR-23a-3p的表达,抑制肺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡。

抑制miR-23a-3p表达对人白血病细胞株HL-60侵袭和迁移的调节作用

目的探讨抑制miR-23a-3p表达对人白血病细胞株HL-60侵袭和迁移的影响及其分子机制。方法转染miR-23a inhibitor到HL-60细胞抑制miR-23a-3p的表达。HL-60细胞分为3组:HL-60组(阴性对照组)、scramble组(转染对照组)和miR-23a inhibitor组。qRT-PCR技术检测MMP-9和VEGF mRNA水平,Transwell实验检测细胞侵袭,划痕实验分析细胞迁移。Western blot法检测MMP-9和VEGF蛋白表达。结果转染scramble后HL-60细胞miR-23a-3p表达无明显变化。转染miR-23a inhibitor后HL-60细胞miR-23a-3p表达显著下降(P<0.01)。scramble组与阴性对照组每个视野下的侵袭细胞数目差异无统计学意义。miR-23a inhibitor组每个视野下的侵袭细胞数目显著低于阴性对照组(P<0.01)。scramble组与阴性对照组细胞迁移无明显差异。与阴性对照组相比,miR-23a inhibitor组细胞迁移显著降低(P<0.01)。转染scramble不会影响MMP-9和VEGF的表达。miR-23a inhibitor组MMP-9和VEGF的mRNA水平显著低于阴性对照组(P<0.01)。与阴性对照组相比,miR-23a inhibitor组MMP-9和VEGF的蛋白水平显著下降(P<0.001)。结论抑制miR-23a-3p表达可减弱人白血病细胞株HL-60的侵袭和迁移。

hsa-miR-23a-3p靶向TGFβ2对急性淋巴细胞白血病CEM/C1细胞增殖、凋亡、侵袭及细胞骨架重组的影响

目的:探究hsa-miR-23a-3p靶向转化生长因子β2(TGFβ2)对急性淋巴细胞白血病细胞株CEM/C1增殖、凋亡、侵袭及细胞骨架重组的影响。方法:将CEM/C1细胞随机分为4组:Control组、mimic组、pcDNA-TGFβ2组和mimic+TGFβ2组,采用Lipofectamine 2000分别转染mimic对照、miR-23a-3p mimic、TGFβ2过表达质粒及共转染miR-23a-3p mimic+TGFβ2过表达质粒。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-23a-3p、TGFβ2表达;荧光素酶报告实验验证miR-23a-3p与TGFβ2的靶向关系;克隆形成实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell检测细胞侵袭;微管形成实验检测细胞微管形成的结节数;Western blotting法检测Ki67、Survivin、Caspase-3、Bax、Bcl-2、VEGF蛋白表达。结果:与Control组相比,mimic组miR-23a-3p表达、细胞凋亡率、Caspase-3蛋白表达量和Bax/Bcl-2比值升高,TGFβ2 mRNA表达、克隆形成率、微管形成结节数及Ki67、Survivin、VEGF蛋白表达量降低,侵袭细胞数减少(均P<0.05),pcDNA-TGFβ2组与mimic组各指标变化相反(均P<0.05);与pcDNA-TGFβ2组比较,mimic+TGFβ2组克隆形成率、微管形成结节数和Ki67、Survivin、VEGF蛋白表达量降低,细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达量及Bax/Bcl-2比值升高,侵袭细胞数减少(均P<0.05)。荧光素酶报告实验证实miR-23a-3p和TGFβ2存在靶向关系。结论:hsa-miR-23a-3p通过靶向下调TGFβ2表达抑制人白血病细胞增殖、侵袭、细胞骨架重组,促进细胞凋亡。

mir-23a-3p及CXCL12在艾滋病患者血清中的表达水平及临床意义

目的探讨mir-23a-3p及CXCL12在艾滋病患者血清中的表达水平及临床意义。方法选取2015年1月至2016年12月该院收治的艾滋病患者70例为研究组,选取同期健康体检人员70例为对照组,对比两组研究对象血清中mir-23a-3p及CXCL12表达情况。结果研究组患者mir-23a-3p过表达情况显著高于对照组研究对象,差异有统计学意义(P<0.05);研究组患者CXCL12过表达情况显著高于对照组研究对象,差异有统计学意义(P<0.05)。结论艾滋病患者血清当中普遍存在着mir-23a-3p及CXCL12的过表达,临床上可以作为病情诊断及预后评估的重要指标,需要引起医务人员的重视。