Hsp22对SCA3/MJD转基因果蝇的神经保护作用研究

为了探讨Hsp22在SCA3/MJD发病机制中的作用.选用GMR-GAL4和elav-GAL4驱动子,利用经典的GAL4-UAS系统,将含有78个CAG重复扩增的ataxin-3蛋白片段(MJDtr-Q78)分别在果蝇眼睛和神经系统选择性表达,构建GMR-GAL4/UAS和elav-GAL4/UAS系统SCA3/MJD转基因果蝇模型,然后利用遗传学方法和热休克反应使Hsp22在SCA3/MJD转基因果蝇眼睛和神经系统以不同水平过表达.结果表明,Hsp22过表达显著抑制了MJDtr-Q78蛋白的神经毒性,果蝇眼睛视网膜光感受神经元变性明显缓解,果蝇存活能力也显著提高.Hsp22对SCA3/MJD具有保护作用,增强Hsp22表达对SCA3/MJD可能是一种潜在的治疗方法.

类胡萝卜素对合浦珠母贝热休克蛋白基因HSP22表达的影响

该研究获得了合浦珠母贝(Pinctada fucata)热休克蛋白22 (heat shock protein 22,PfHSP22)基因cDNA序列,全长2 187 bp,其中开放阅读框699 bp,预测编码232个氨基酸。结构预测显示PfHSP22具有小热休克蛋白家族典型结构域"α-晶体结构域"(ACD)。氨基酸序列比对结果显示,PfHSP22与缢蛏(Sinonovacula constricta)的HSP22相似性最高(54%)。进化分析显示,PfHSP22与软体动物的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR结果分析表明,常温条件下,PfHSP22在类胡萝卜素含量高的橘色组和含量低的白色组的各组织中均有表达,足中表达量最高,且橘色组均显著高于白色组(P<0.05),表明类胡萝卜素含量高低可能影响PfHSP22的基础表达量。高温胁迫时,橘色组和白色组各组织的PfHSP22表达量在前3 h基本呈现下降趋势,之后呈现出或升高或下降的复杂变化;其中橘色组一些组织的PfHSP22表达量显著升高时间晚于白色组,这可能是由类胡萝卜素含量差异引起。

十字花科植物HSP22基因同源序列的克隆与进化分析

采用PCR克隆技术,根据已报道的拟南芥的AtHSP22基因全长及其他物种同源序列设计特异引物,在十字花科植物大白菜、普通白菜、芥菜型油菜、甘蓝型油菜、花椰菜、芥菜、荠菜、萝卜3个属10个物种中成功克隆得到耐热相关基因HSP22的同源序列10条。序列比对分析表明:这些同源序列的相似性达89.3%以上,所推导的氨基酸序列相似性达92.1%以上。由进化树可直观地看出,芸薹属与荠属亲缘关系最近,首先聚为一类;其次与萝卜属、拟南芥属聚为一类。由氨基酸序列预测的高级结构存在明显差异,且无规则卷曲最多,α-螺旋均在30%以上,因而属于α结构蛋白。

Hsp22保护SCA3/MJD转基因果蝇神经的机制

目的:探索Hsp22保护SCA3/MJD转基因果蝇神经的机制。方法:利用GAL4-UAS系统,使Hsp22在SCA3/MJD转基因果蝇模型的神经系统中表达。观察果蝇的羽化率,Western blot检查线粒体复合物I亚基NDUFS3的蛋白水平。结果:Hsp22诱导不能羽化的elav-GAL4/UAS系统启动的SCA3/MJD转基因果蝇部分羽化,线粒体复合物I亚基NDUFS3蛋白表达升高。结论:Hsp22可能通过改善线粒体功能对SCA3/MJD转基因果蝇神经起保护作用。

HSP22基因研究

HSPB8(HSP22)这个基因是热休克蛋白家族成员(sHSP's),其突变与遗传性周围神经病有关。到目前为止, HSPB8的4个突变被证明引起2a型远端遗传性运动神经病(dHMN 2a;OMIM 158590)或者2L型腓骨肌萎缩症(CMT2L;OMIM #608673),这篇综述探讨了最近关于HSPB8(HSP22)的研究进展。

华贵栉孔扇贝HSP22基因的克隆及表达分析

为了解HSP22在华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)中的作用,本研究通过转录组数据分析和PCR验证获得了华贵栉孔扇贝HSP22基因cDNA序列(命名为CnHSP22),通过序列比对分析了HSP22氨基酸序列在不同贝类中的保守性,使用邻接法构建了HSP22的系统进化树,使用实时定量PCR(qRT-PCR)分析了HSP22在6种不同组织中的表达和高温刺激后在鳃组织中的表达。结果显示:该基因cDNA序列全长965 bp,开放阅读框为588 bp,编码氨基酸195个,推译的蛋白具有α晶体球蛋白结构域,CnHSP22蛋白三级结构包括8个β折叠和一些无规则卷曲。不同贝类HSP22氨基酸序列比对结果显示,α晶体球蛋白结构域非常保守。系统进化树分析结果显示,扇贝聚为一支。CnHSP22在卵巢、鳃等所检测的6种组织中均有表达,其中鳃和卵巢中的表达量显著高于其他组织中的表达量。热刺激后,CnHSP22的表达量显著上调(p<0.05)。本研究为深入探索华贵栉孔扇贝HSP22在高温环境中的作用奠定了基础。

沙鼠脑缺血再灌注损伤后Hsp22和c-fos的表达变化

目的探讨沙鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织中Hsp22和c-fos的表达变化及相应的保护机制。方法健康雄性蒙古沙鼠制作脑缺血再灌注模型,缺血10 min,再灌注6 h、1、3、7 d。采用HE染色、免疫组织化学染色法观察脑组织的病理变化,Hsp22和c-fos的表达情况。结果 (1)HE染色:脑缺血再灌注组根据时间点的不同可见胶质细胞增生、肥大,细胞间质和细胞水肿,神经元坏死;(2)免疫组化:缺血再灌注损伤后Hsp22的表达上调,于第3 d达到高峰,与对照组比较有显著差异(p<0.05),第7 d开始下降但仍高于正常组和假手术组;c-fos在脑缺血再灌注后表达明显增高,于第1 d达到高峰,与对照组比较有显著差异(p<0.05),随后逐渐减少。结论沙鼠脑缺血再灌注后脑组织Hsp22及c-fos表达上调,推测Hsp22可能通过抑制c-fos的活性而起到凋亡负性调节的作用。

高温下极低频电磁场暴露对果蝇hsp22和hsp26基因影响的研究

目的探讨在高温(35℃)条件下,极低频电磁场(extremely low frequency electromagnetic fields,ELF-EMF)对雌雄黑腹果蝇hsp22和hsp26基因表达水平的影响。方法在25、27.5、30、32.5、35℃下,1日龄雌、雄黑腹果蝇在50 Hz、3 mT ELF-EMF暴露2 h,测定其死亡率、运动能力和hsp22、hsp26表达水平;在25和35℃下,1日龄雌、雄黑腹果蝇在50 Hz、3 mT ELF-EMF暴露2、4、8、24 h,测定其hsp22、hsp26表达水平。结果在25、27.5、30、32.5、35℃下暴露2 h,温度变化对果蝇的死亡率、运动能力和hsp22、hsp26表达水平有极显著影响(P<0.01),ELF-EMF对hsp22、hsp26表达水平无显著影响(P>0.05);在25和35℃下分别暴露2、4、8、24 h,性别、温度、ELF-EMF暴露和暴露时间对hsp22、hsp26的表达水平有极显著影响,其中,温度是主要的影响因素,且若干因素间有交互作用。结论ELF-EMF可影响果蝇hsp22、hsp26的表达,且ELF-EMF可能具有降低因高温环境所致负面影响的作用,提高果蝇对高温环境的耐受能力,缓解高温环境对果蝇的损伤效应。

HSP22研究进展

HSP22是小热休克蛋白超家族成员之一,主要在脑、心肌和骨骼肌广泛表达,而在子宫、前列腺、肺和肾脏等组织表达一般。当各种物理、化学等因素刺激时,可启动HSP22 mRNA快速表达;再通过HSP22 N末端区域和(或)C末端区域特定位点的突变或磷酸化反应,不同构象间相互转化及作用,在保持伴侣活性、激酶活性、触发炎性介质释放、抗凋亡与致凋亡和保护细胞骨架等方面起主要作用。其活性下降会导致遗传性末梢运动神经病、Alzheimer病、结蛋白相关心肌病、乳腺癌及白内障等相关疾病的发生发展。由于其在生命领域的特殊功能作用,目前生物医学界对其研究广泛。本文收集近期国内外文献,从分子和细胞水平综述了HSP22在基因表达、分子结构、生物学活性及与临床疾病关系的最新研究进展,以供学习交流。

热休克蛋白22在内皮损伤致动脉粥样硬化中的作用

热休克蛋白22（heat shock protein22，HSP22）是新近在果蝇唾液腺中发现的蛋白，属于小分子热休克蛋白（sHSP）超家族成员，又称HSPB8和H11。大量研究表明，缺血缺氧、再灌注损伤、心肌冬眠和压力负荷损伤心肌时，HSP22可激活细胞内AMPK、P13K／Akt、PKC、iNOS、mTOR等通路，对各种应激损伤发挥保护作用。近年来研究发现，不良应激时，HSP22表达于血管内皮细胞并可能发挥一定保护作用，内皮细胞是动脉内膜的第一层屏障，保护血管壁免受有害物质侵袭，动脉粥样硬化是一种以内膜损伤为起始病变的血管性疾病，以上提示HSP22可能在内皮损伤致动脉粥样硬化中发挥一定的作用。本文就HSP22在损伤内皮中的相关作用作一综述。

温度对甜菜种子萌发速率和线粒体活性的影响(英文)

研究了不同温度对甜菜种子萌发速率和线粒体活性的影响。在 7,14和 2 0℃中甜菜种子萌发 5 0 %需要的时间分别是 7,3和 2 3d ;萌发 5 0 %的热时间大约是 46℃·d。在 7,14和 2 0℃萌发的种子和幼苗的线粒体中 ,总蛋白含量以及细胞色素氧化酶 (CCO)和苹果酸脱氢酶 (MDH)的活性随着萌发进程增加 ;相对分子质量大约为 1880 0 ,35 0 0 0和 36 0 0 0的蛋白质随着萌发进程降低 ;相对分子质量大约为 2 2 0 0 0的蛋白质在 7℃中逐渐增加 ,在 14和 2 0℃中则先少量增加然后下降。 2 0℃中萌发的种子和幼苗的线粒体的CCO和MDH的比活性和总活性比在 7和 14℃中高。这些结果表明 ,萌发温度显著地影响种子的萌发速率、线粒体的CCO和MDH活性以及较小相对分子质量热休克蛋白 2

热休克蛋白22的胞外释放途径及信号转导对动脉粥样硬化的影响

热休克蛋白22(HSP22)通常被认为是一个内在伴侣蛋白,通过调节肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、核因子κB(NF-κB)等细胞因子的表达,改善动脉粥样硬化。HSP22还存在于胞外,本综述以HSP22的细胞外分泌为切入点,提出HSP22可能通过溶酶体途径、外泌体途径或直接蛋白易位的方式分泌出胞;探讨胞外HSP22可能通过激活TLRs信号通路,调节细胞因子的分泌;分析HSP22通过调节炎症反应和氧化应激从而起心血管保护作用,并提出热休克蛋白诱导剂可能给动脉粥样硬化的治疗提供全新的思路。

热休克蛋白22在临床相关疾病中作用的研究进展

热休克蛋白22(heat shock protein 22,HSP22)属于小分子热休克蛋白(small HSP,sHSP)家族成员,在各种应激下诱导表达并迅速进行应答,从而增强机体对各种应激的抵抗能力。HSP22具有分子伴侣、调控凋亡、抗氧化和蛋白激酶活性等多种生物学功能,越来越多的研究表明其与心血管疾病、神经系统疾病和肿瘤等疾病的发生发展密切相关。本文将对HSP22蛋白的结构和功能及其在临床相关疾病的最新研究进展做一综述。依据目前的研究来看,在心脑血管疾病、糖尿病和肺缺血再灌注损伤等疾病中,HSP22主要通过抗氧化应激和抗调亡等作用而发挥保护作用;而HSP22的基因突变在神经退行性病变中扮演重要作用;此外,HSP22通过调节肿瘤细胞增殖和迁移而促进乳腺癌、卵巢癌等肿瘤的发生发展。通过对HSP22的进一步深入研究,有望为心血管疾病、神经系统疾病和肿瘤等复杂疾病的诊断和治疗提供新的策略。

Hsp70-H22肿瘤抗原肽复合物激活树突状细胞诱导抗肿瘤免疫的研究

目的 探讨通过树突状细胞 (DC)提呈途径降低肿瘤抗原肽用量的可行性 ,了解热休克蛋白 70 (Hsp70 )和抗原肽修饰DC作用的特点。方法 以Hsp70于体外结合抗原肽 ,并于体外修饰DC ,检测修饰后DC的代谢活性及分泌的细胞因子 ;比较修饰后DC和Hsp70 H2 2肽对淋巴细胞的激活作用 ;检测激活的淋巴细胞对H2 2瘤细胞的细胞毒作用以及注射DC和Hsp70 H2 2肽对小鼠肿瘤的抑制作用。结果 Hsp70结合 0 .15 μgH2 2肽可使 2× 10 5DC成熟 ,4× 10 3 成熟DC可激活 2× 10 6淋巴细胞 ;Hsp70结合 0 .0 0 3μg肽修饰的DC或Hsp70结合 0 .15 μg肽直接刺激 ,可激活相同数量的淋巴细胞 ,产生同样的杀瘤效果。激活DC后再回输的治疗方式与直接注射Hsp70 肽复合物的治疗方式相比 ,抗原肽的用量可以降低 5 0倍。正常肝组织来源的混合肽结合Hsp70后 ,不能使DC成熟 ,亦不能通过DC途径活化脾淋巴细胞。结论 DC提呈抗原肽激活淋巴细胞的途径能够有效降低Hsp70 肿瘤抗原肽复合物使用剂量。正常细胞的混合肽不能通过Hsp70和DC提呈激活淋巴细胞 。

热休克蛋白22减轻转化生长因子β1诱导的成纤维细胞激活

目的探讨热休克蛋白22(Hsp22)对TGFβ1刺激的心脏成纤维细胞激活的影响,以及其可能的分子机制。方法分离培养小鼠成体心脏成纤维细胞,采用TGFβ1刺激诱导成纤维细胞激活。采用不同浓度的Hsp22(1,2,4,8,10μg/mL)孵育成纤维细胞24 h,观察其对心脏成纤维细胞活化、增殖和分泌的影响;采用CCK8试剂盒检测细胞增殖活性;采用RT-PCR检测促纤维化因子的转录水平;采用免疫荧光染色检测a-SMA蛋白的表达;采用免疫印迹检测可能的信号蛋白的改变。结果CCK8结果显示,TGFβ1刺激后成纤维细胞增殖明显增加(P<0.05);TGFβ1刺激后成纤维细胞α-SMA表达增多(P<0.05),纤维化相关的基因转录明显增加(P<0.05)。1,2,4,8,10μg/mL的Hsp22均能够显著抑制成纤维细胞的增殖(P<0.05)。8μg/mL和10μg/mL的Hsp22能够抑制α-SMA表达(P<0.05),减少纤维化相关的基因的转录水平(P<0.05)。免疫印迹结果显示TGFβ1刺激后WNT和β-catenin激活水平增加,GSK3β的磷酸化增高,β-catenin的核转位增多(P<0.05);10μg/mL的Hsp22处理能够抑制WNT和β-catenin的激活水平,减少GSK3β的磷酸化表达,减少β-catenin的核转位(P<0.05),减少smad2和smad3的磷酸化水平(P<0.05)。结论Hsp22可以通过抑制WNT/β-catenin信号通路阻断TGFβ1诱导的成纤维细胞活化、增殖和分泌。

不同剂量辛伐他汀对慢性心力衰竭兔左室重塑及心功能的影响

目的:通过观察不同剂量辛伐他汀对慢性心力衰竭(CHF)左室重塑及心功能的影响,探讨辛伐他汀对慢性心力衰竭兔心肌细胞发挥保护作用的机制。方法:雄性大耳白兔60只,随机分成5组,正常对照(CON)组,慢性心力衰竭(CHF)组,低剂量辛伐他汀(SD-SIM组),中剂量辛伐他汀(MD-SIM)组,高剂量辛伐他汀(HD-SIM)组。耳缘静脉注射阿霉素(ADR),制作CHF模型。行心脏彩超检查,测量左室结构、功能,测定血流动力学指标。处死动物后,留取左心室室壁多聚甲醛固定,染色后进行免疫组化检测热休克蛋白22(HSP22)表达水平。结果:心功能检查显示,与CON组相比SD-SIM、MD-SIM、HDSIM、CHF组左心室射血分数(LVEF)明显下降(P<0.05),与MD-SIM组相比,SD-SIM组、HD-SIM组明显下降(P<0.05);与CON组相比SD-SIM、MD-SIM、HD-SIM、CHF组左室舒张末内径(LVEDD)、左室收缩末内径(LVESD)显著增加(P<0.05),与MD-SIM组相比,SD-SIM组和HD-SIM组明显增大(P<0.05);血流动力学检测显示:与CON组相比,SD-SIM组、MD-SIM组、HD-SIM组、CHF组的+dp/dtmax、-dp/dtmax及LVSP明显下降(P<0.05),SD-SIM组、HD-SIM组与MD-SIM组相比明显下降(P<0.05)。HSP22的表达:与CON组相比SD-SIM组、MD-SIM组、HD-SIM组、CHF组HSP22蛋白的表达明显增多(P<0.01),SD-SIM组、MD-SIM组、HD-SIM组与CHF组相比表达明显减少(P<0.05),其中MD-SIM组表达最少(P<0.05)。结论:辛伐他汀可明显改善慢性心力衰竭兔左室重塑,改善心功能,其中MD-SIM组效果最好,其机制可能与辛伐他汀抑制HSP22的表达有关。