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脯氨酰寡肽酶抑制剂S17092对脂质超载人肝细胞株LO2脂质沉积的改善作用及其机制
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作者 舍玲 丁永年 +1 位作者 纪文静 阿孜古力·阿不来提 《山东医药》 CAS 2021年第21期9-12,共4页
目的观察脯氨酰寡肽酶(POP)抑制剂S17092对脂质超载人肝细胞株LO2脂质沉积的改善作用,并探讨其机制。方法将LO2细胞随机分为3组,对照组LO2细胞用1%无脂肪酸(FFA)的1640培养基培养,模型组LO2细胞用FFA制备脂质超载模型后再用1640培养基培... 目的观察脯氨酰寡肽酶(POP)抑制剂S17092对脂质超载人肝细胞株LO2脂质沉积的改善作用,并探讨其机制。方法将LO2细胞随机分为3组,对照组LO2细胞用1%无脂肪酸(FFA)的1640培养基培养,模型组LO2细胞用FFA制备脂质超载模型后再用1640培养基培养,实验组LO2细胞制备脂质超载模型后再加入含S17092的1640培养液培养。各组细胞继续培养24 h后,采用油红O染色法观察各组细胞内脂质沉积情况,采用Bio-Rad蛋白质测定法检测各组细胞内甘油三酯(TG),采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞内POP、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)mRNA。结果油红O染色结果显示,与对照组相比,模型组LO2细胞内含有大量的红染颗粒,而实验组较模型组红染颗粒相对较少。对照组、模型组、实验组细胞内TG水平分别为(1.995±0.221)pmole/μL、(2.910±0.030)pmole/μL、(2.573±0.113)pmole/μL,组间相比,P均<0.05。与对照组相比,模型组、实验组细胞中POP、SREBP-1c、FAS、ACC1、SCD1 mRNA相对表达量明显升高(P均<0.05);与模型组相比,实验组细胞中POP、SREBP-1c、FAS、ACC1、SCD1 mRNA相对表达量明显降低(P均<0.05)。结论POP抑制剂S17092可改善脂质超载LO2细胞的脂质沉积,其机制可能与抑制SREBP-1c及其靶基因的表达有关。 展开更多
关键词 脯氨酰寡肽酶抑制剂 脯氨酰寡肽酶抑制剂S17092 脯氨酰寡肽酶 人肝细胞株lo2 非酒精性脂肪肝病 固醇调节元件结合蛋白-1C
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细胞珠蛋白过表达对人肝细胞株LO-2脂质代谢的影响初探 被引量:2
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作者 刘诗俐 王哲彦 +2 位作者 李珍 王萍 董文其 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期242-250,共9页
目的:通过建立体外肝细胞株LO-2脂肪变性模型,初步探究细胞珠蛋白对非酒精性脂肪肝中脂质沉积、炎性因子表达及NF-κB通路的影响及相关分子机制.方法:通过含有浓度200μmol/L油酸、100μmol/L棕榈酸的高脂培养基诱导人正常肝细胞株LO-2... 目的:通过建立体外肝细胞株LO-2脂肪变性模型,初步探究细胞珠蛋白对非酒精性脂肪肝中脂质沉积、炎性因子表达及NF-κB通路的影响及相关分子机制.方法:通过含有浓度200μmol/L油酸、100μmol/L棕榈酸的高脂培养基诱导人正常肝细胞株LO-2脂肪沉积,以LO-2-GFP-CYGB为实验组,LO-2-GFP为对照组探究CYGB对LO-2脂质沉积的影响,通过油红O染色检测脂质沉积情况,GPO-PAP法检测细胞内甘油三酯水平,COD-PAP法检测细胞内胆固醇水平,通过RT-qPCR检测脂质生成相关基因ACACA、ACACB、FASN、ACSS1、ACSS2、ACSS3的mRNA表达水平,蛋白质免疫印迹法检测细胞炎性因子IL-1β,IL-6,TNF-α的表达水平,以及核转录因子-κB(NF-κB p65),磷酸化P65(NF-κB PP65)表达水平,用含浓度60,90μmol/L NF-κB抑制剂PDTC与高脂成分的培养基处理LO-2细胞48 h后检测细胞内甘油三酯和胆固醇水平.结果:LO-2经过高脂处理48 h后,两组细胞甘油三酯及胆固醇水平均上升,而实验组低于对照组(P<0.05),90μmol/L NF-κB抑制剂PDTC处理后,甘油三酯和总胆固醇水平与未加入PDTC相比表现下调(P<0.05);炎症相关因子IL-1β,IL-6和TNF-α在实验组中表达均低于对照组(P<0.05);与对照组相比,实验组经高脂处理24 h后NF-κB信号通路受到抑制(P<0.05).结论:CYGB下调LO-2细胞甘油三酯和总胆固醇水平,抑制炎性因子表达,抑制NF-κB信号通路,缓解LO-2脂质沉积. 展开更多
关键词 细胞珠蛋白 非酒精性脂肪肝 lo-2 NF-ΚB
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黄芪多糖和黄芪总甙调控LX-2细胞因子分泌 被引量:19
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作者 李淑萍 许晓燕 +5 位作者 孙箴 周林福 羊正纲 陈峰 朱海红 陈智 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2007年第6期543-548,共6页
目的:用黄芪多糖和黄芪总甙对LX-2细胞分泌的与纤维化相关的主要细胞因子进行研究,以探讨黄芪抗纤维化的确切分子机制。方法:不同浓度的黄芪多糖和黄芪甙作用于LX-2细胞,以Real Time Cell Electronics Sensing技术实时检测细胞增殖状态... 目的:用黄芪多糖和黄芪总甙对LX-2细胞分泌的与纤维化相关的主要细胞因子进行研究,以探讨黄芪抗纤维化的确切分子机制。方法:不同浓度的黄芪多糖和黄芪甙作用于LX-2细胞,以Real Time Cell Electronics Sensing技术实时检测细胞增殖状态;分别再以25μg/ml和300μg/ml的黄芪多糖和黄芪总甙作用LX-2细胞24 h,提取细胞mRNA,以荧光定量PCR测定转化生长因子1(TGF-β1)、肝细胞生长因子(HGF)、基质金属蛋白酶2(MMP2)及基质金属蛋白酶9(MMP9)mRNA的变化。结果:300μg/ml的黄芪多糖可抑制LX-2的增殖(P<0.05,94.7 h),但不同浓度的黄芪总甙对LX-2细胞均有促进增殖的作用(P<0.05);25μg/ml的黄芪多糖和黄芪总甙在TGF-β1促进分泌的同时,也上调其它抗纤维化因子,其中黄芪多糖对MMP2的上调(104.9倍)、黄芪总甙对IL-10的上调(550.65倍)最为显著;300μg/ml的黄芪多糖可抑制TGF-β1及HGF、MMP9、IL-10的表达,但仍然上调MMP2的表达,300μg/ml的黄芪总甙也可抑制TGF-β1的表达,但对抗纤维化因子MMP2、MMP9及IL-10仍有明显的上调作用。结论:低浓度(25μg/ml)和高浓度(300μg/ml)的黄芪多糖和黄芪总甙可通过不同的分子机制调控肝星状细胞因子的分泌而发挥抗纤维化作用;黄芪多糖主要以促进MMP2分泌为主,而黄芪总甙则主要通过上调MMP2、MMP9及IL-10的分泌而发挥作用。高剂量的黄芪多糖和总甙抗纤维化效果优于低剂量组。 展开更多
关键词 黄芪多糖/投药和剂量 黄芪甙/投药和剂量 细胞因子类 LX-2细胞 细胞因子 肝纤维化
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纳米磁性靶向药囊对人肝癌裸鼠移植瘤bcl-2/bax蛋白表达的影响 被引量:6
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作者 肖宝来 王剑明 +1 位作者 郑建伟 邹声泉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第20期3041-3044,共4页
目的观察纳米磁性5-Fu药囊靶向治疗人肝癌裸鼠移植瘤对肿瘤细胞凋亡bcl-2及bax蛋白表达的影响。方法透射电镜观察各组移植瘤形态学特征,免疫组化SABC法测定bcl-2和bax蛋白表达水平。结果电镜观察可见B组(5-Fu)和D组(纳米磁性5-Fu药囊加... 目的观察纳米磁性5-Fu药囊靶向治疗人肝癌裸鼠移植瘤对肿瘤细胞凋亡bcl-2及bax蛋白表达的影响。方法透射电镜观察各组移植瘤形态学特征,免疫组化SABC法测定bcl-2和bax蛋白表达水平。结果电镜观察可见B组(5-Fu)和D组(纳米磁性5-Fu药囊加内磁场)肿瘤组织大量癌细胞凋亡。B和D组bcl-2蛋白表达水平低于A组(生理盐水对照)、C组(纳米磁性5-Fu药囊)和E组(纳米磁小体加内磁场)(P<0.01),D组bcl-2蛋白表达水平低于B组(P<0.01);B组和D组bax蛋白表达水平高于其他三组(P<0.01),D组bax蛋白表达水平高于B组(P<0.01)。结论纳米磁性5-Fu药囊靶向治疗能够降低bcl-2蛋白表达,增加bax蛋白表达,促进人肝癌裸鼠移植瘤细胞凋亡,提高5-Fu抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 肝肿瘤 细胞株 BCL-2 BAX 纳米磁性5一-Fu药囊
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吴茱萸碱调控微管蛋白聚集阻滞HepG-2细胞周期 被引量:6
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作者 高世勇 刘溪 季宇彬 《哈尔滨商业大学学报(自然科学版)》 CAS 2011年第4期513-516,共4页
研究吴茱萸碱对人肝癌细胞HepG-2的细胞周期阻滞作用及其机制.MTT法检测吴茱萸碱(Evodiamine)对人肝癌HepG-2细胞的细胞毒作用;流式细胞仪分析吴茱萸碱对HepG-2细胞周期的影响;免疫荧光染色法,经激光共聚焦显微镜(CLSM)观察检测吴茱萸碱... 研究吴茱萸碱对人肝癌细胞HepG-2的细胞周期阻滞作用及其机制.MTT法检测吴茱萸碱(Evodiamine)对人肝癌HepG-2细胞的细胞毒作用;流式细胞仪分析吴茱萸碱对HepG-2细胞周期的影响;免疫荧光染色法,经激光共聚焦显微镜(CLSM)观察检测吴茱萸碱对HepG-2细胞内微管蛋白α-tubulin聚合形态的影响.吴茱萸碱对人肝癌细胞HepG-2的IC50为19.62μmol/L;吴茱萸碱可将HepG-2细胞阻滞于G2/M期;免疫荧光,激光共聚焦显微镜观察可知,吴茱萸碱可显著改变微管蛋白聚合态发生,使细胞内微管呈束状分布,干扰纺锤体形成.实验表明吴茱萸碱通过影响微管蛋白的聚集状态,将HepG-2细胞周期阻滞于G2/M期. 展开更多
关键词 吴茱萸碱 细胞周期 人肝癌细胞HEPG-2 微管蛋白α-tubulin
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MTT法测定稀土离子对BEL-7402及K562细胞的毒性及增殖毒性 被引量:6
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作者 红枫 黄沛力 +1 位作者 王夔 李荣昌 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期597-599,共3页
用MTT法测定稀土离子在不同浓度、不同培养液中,与BEL 7402和K562细胞作用不同时间,对细胞的毒性和增殖毒性。结果表明,在含10%小牛血清培养液中,仅个别稀土离子在较高浓度时对BEL 7402细胞增殖有较弱的抑制作用;对于K562细胞,稀土离子... 用MTT法测定稀土离子在不同浓度、不同培养液中,与BEL 7402和K562细胞作用不同时间,对细胞的毒性和增殖毒性。结果表明,在含10%小牛血清培养液中,仅个别稀土离子在较高浓度时对BEL 7402细胞增殖有较弱的抑制作用;对于K562细胞,稀土离子在低浓度时对细胞增殖即表现出较强的抑制作用(P<0.05)。当培养液不含小牛血清时,较低浓度的稀土离子即可抑制BEL 7402细胞的增殖(P<0 05)。 展开更多
关键词 细胞生物学 癌细胞 白血病细胞 肝癌细胞 MTT法 稀土
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解氏肝癌2号方对肝癌H22荷瘤小鼠作用的研究 被引量:2
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作者 崔佳 朱成功 +1 位作者 赵莹莹 解建国 《现代中西医结合杂志》 CAS 2014年第33期3655-3657,3661,共4页
目的研究解氏肝癌2号方对肝癌H22荷瘤小鼠的抗肿瘤及免疫调节作用。方法建立H22肝癌小鼠模型,随机分为模型组、解氏肝癌2号方组、中药半枝莲组和白细胞介素-2(IL-2)组共4组,每组10只,并予第2天始给予相应药物灌胃。第15天处死小鼠,取出... 目的研究解氏肝癌2号方对肝癌H22荷瘤小鼠的抗肿瘤及免疫调节作用。方法建立H22肝癌小鼠模型,随机分为模型组、解氏肝癌2号方组、中药半枝莲组和白细胞介素-2(IL-2)组共4组,每组10只,并予第2天始给予相应药物灌胃。第15天处死小鼠,取出肿瘤,称取瘤质量,计算抑瘤率、胸腺指数、脾指数等指标,并通过免疫组化的方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。结果 1解氏肝癌2号方组与IL-2组体质量增加更为明显。2解氏肝癌2号方组的抑瘤率与中药半枝莲组相仿,二者均显著高于IL-2组。3解氏肝癌2号方组与IL-2组的胸腺指数和脾脏指数无明显差异,均明显高于中药半枝莲组及模型组。4解氏肝癌2号方组Bcl-2水平与中药半枝莲组相仿,低于模型组和IL-2组,模型组最高;而Bax水平正好相反,解氏肝癌2号方组与中药半枝莲组均高于模型组和IL-2组,模型组最低。结论解氏肝癌2号方能明显改善小鼠的一般生活状态,增加小鼠体质量,对肿瘤有明显抑制作用,并且下调肝癌H22荷瘤小鼠的凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,上调Bax的表达,能够明显改善机体免疫功能,减轻恶性肿瘤对机体的损害,减轻病痛,使人体与癌肿长期共存,互不侵犯。本实验为临床"带瘤生存"理念提供了坚实的理论基础。 展开更多
关键词 原发性肝癌 解氏肝癌2号方 H22细胞株 BCL-2 BAX
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兔肝Vx-2移植癌改良模型的建立 被引量:6
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作者 李广琪 陈毓秀 +1 位作者 康军 张洪新 《武警医学院学报》 CAS 2007年第4期369-372,共4页
【目的】建立稳定的兔Vx-2移植性肝癌模型,探讨不同植瘤方式的成功率。【方法】60只新西兰白兔随机分3组,每组20只。第1组,将Vx-2瘤细胞(5×107个)经肝动脉灌注入兔的肝脏;第2组,将Vx-2瘤细胞(5×107个)经肝包膜接种于2组兔的... 【目的】建立稳定的兔Vx-2移植性肝癌模型,探讨不同植瘤方式的成功率。【方法】60只新西兰白兔随机分3组,每组20只。第1组,将Vx-2瘤细胞(5×107个)经肝动脉灌注入兔的肝脏;第2组,将Vx-2瘤细胞(5×107个)经肝包膜接种于2组兔的肝左叶;第3组,将瘤组织块(约含106-108个瘤细胞)经肝包膜植入肝左叶。观察:1.不同方式植瘤的成活率;2.B超测定肝内肿瘤7、10、14、17、21 d时的大小,并计算肿瘤生长率;3.大体及镜下(光镜和电镜)瘤组织形态特征。【结果】3组植瘤成活率分别为7/20、10/20、19/20,改良组植瘤成活率最高(P<0.05),瘤体呈指数性生长。病理学表明该瘤在肝组织中呈浸润式生长,其性状与移植于兔其它部位的Vx-2鳞状细胞癌特征相似。【结论】成功建立了兔Vx-2移植性肝癌模型,瘤组织块种植方式成功率明显高于动脉途径和细胞液注射方式,为肝癌介入治疗的基础及临床研究提供了成熟的大型实验动物模型。 展开更多
关键词 肝癌 模型 Vx-2细胞系
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利用bcl-2抗Fas凋亡特性联合Fas抗体促进人鼠嵌合肝中人肝细胞的增殖 被引量:1
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作者 蒋黎 兰林 +2 位作者 李俊刚 王宇明 刘国栋 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期2445-2447,2450,I0003,共5页
目的移植bcl-2转基因HepaRG细胞到小鼠体内,并联合使用Jo2抗体诱导鼠肝细胞凋亡策略,促进人鼠嵌合肝中人肝细胞的增殖。方法SCID鼠经脾移植2×106bcl-2转基因HepaRG细胞,移植后1d始腹腔注射0.2mg/kgJo2抗体,每周1次,持续10周为实验... 目的移植bcl-2转基因HepaRG细胞到小鼠体内,并联合使用Jo2抗体诱导鼠肝细胞凋亡策略,促进人鼠嵌合肝中人肝细胞的增殖。方法SCID鼠经脾移植2×106bcl-2转基因HepaRG细胞,移植后1d始腹腔注射0.2mg/kgJo2抗体,每周1次,持续10周为实验组;移植未转染bcl-2基因的HepaRG细胞,同样给予Jo2抗体腹腔注射为对照1组,移植未转染bcl-2基因的HepaRG细胞,未腹腔注射Jo2抗体为对照2组,建立人鼠嵌合肝动物模型。从2周开始,后4、8、12、16、20、24周,分别采用免疫组化、免疫荧光和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时相点实验组和对照组嵌合肝中肝组织人清蛋白以及人清蛋白mRNA,并用酶联免疫法(ELISA)定量检测鼠血清人清蛋白的含量。结果实验组和对照组小鼠均能存活至24周,鼠肝组织和血清中均能检测到清蛋白的表达。实验组肝组织和血清人清蛋白的表达均可持续到24周,人血清清蛋白高峰值为95.32ng/mL,出现在16周;而对照1组肝组织和血清人清蛋白的表达可持续到20周,人血清清蛋白高峰值为42.37ng/mL,出现在12周;对照2组肝组织和血清人清蛋白的表达可持续到12周,人血清清蛋白高峰值为22.91ng/mL,出现在8周。结论利用bcl-2抗Fas凋亡特性,转染bcl-2基因的HepaRG细胞移植并联合小剂量Jo2抗体腹腔注射SCID鼠,有利于人鼠嵌合肝中人肝细胞的增殖和存活。 展开更多
关键词 BCL-2 HepaRG细胞 Fas抗体/Jo2 MAB 移植 人鼠嵌合肝/动物模型
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α-亚麻酸和花生四烯酸对Nrf 2和Ⅰ相代谢酶CYP7A1表达的影响 被引量:3
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作者 张金铭 张秀英 +1 位作者 郝丽红 马丽梅 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第11期1-4,共4页
为了检测α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)和花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对于人肝癌细胞系(HepG2细胞)中核转录因子Nrf 2和Ⅰ相代谢酶胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)的mRNA和蛋白质表达的影响,并探究CYP7A1是否受Nrf 2的调控,试验以不... 为了检测α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)和花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对于人肝癌细胞系(HepG2细胞)中核转录因子Nrf 2和Ⅰ相代谢酶胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)的mRNA和蛋白质表达的影响,并探究CYP7A1是否受Nrf 2的调控,试验以不同浓度的ALA和AA诱导HepG2细胞24 h,之后采用Real-time PCR法和Western-blot法分别检测HepG2细胞内Nrf 2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量。结果表明:当使ALA浓度为0.25,0.5,1 mmol/L作用于HepG2细胞时,Nrf 2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量相比于细胞对照均呈剂量依赖性升高(P<0.01);当使AA浓度为0.25,0.5,1 mmol/L作用于HepG2细胞时,Nrf 2的mRNA和蛋白质的表达量相比于细胞对照呈剂量依赖性升高(P<0.01),但CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量相比于细胞对照则呈剂量依赖性减少(P<0.01)。说明不同剂量的ALA和AA对Nrf 2和CYP7A1的mRNA和蛋白质的表达量影响不同,Nrf 2和CYP7A1呈正相关或负相关。 展开更多
关键词 胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1) 核转录因子Nrf 2 α-亚麻酸(ALA) 花生四烯酸(AA) 人肝 癌细胞系(HepG2)
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RhBMP-2通过抑制PI3K/Akt信号通路对肝细胞癌SK-Hep-1细胞增殖影响的体外研究 被引量:1
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作者 刘书中 钱列 +4 位作者 冯帆 刘祖德 沈洪兴 王以朋 劳立峰 《中国实验诊断学》 2018年第10期1817-1821,共5页
目的探讨体外条件下rhBMP-2对肝细胞癌SK-Hep-1细胞系增殖能力的影响及其作用机制。方法无血清条件下,不同浓度的rhBMP-2处理肝癌SK-Hep-1细胞,通过MTT法检测不同浓度的rhBMP-2对细胞增殖能力的影响。利用流式细胞分析技术检测细胞周期... 目的探讨体外条件下rhBMP-2对肝细胞癌SK-Hep-1细胞系增殖能力的影响及其作用机制。方法无血清条件下,不同浓度的rhBMP-2处理肝癌SK-Hep-1细胞,通过MTT法检测不同浓度的rhBMP-2对细胞增殖能力的影响。利用流式细胞分析技术检测细胞周期,通过Real-time PCR检测不同浓度的rhBMP-2对p21、cyclin E表达的影响,应用Western blot技术检测不同浓度的rhBMP-2处理对p21、cyclin E蛋白水平及对PI3K/Akt磷酸化水平的影响。结果无血清条件下,不同浓度的rhBMP-2处理细胞,研究发现rhBMP-2可显著抑制肝癌SK-Hep-1的增殖能力。无血清条件下,不同浓度的rhBMP-2处理细胞24小时,发现rhBMP-2可增加G1期细胞所占比率。rhBMP-2可显著促进p21的表达,显著抑制cyclin E的表达,并显著抑制PI3K/Akt信号通路的磷酸化过程。结论研究证实在体外条件下rhBMP-2通过抑制PI3K/Akt信号通路的磷酸化过程对肝细胞癌SK-Hep-1细胞增殖能力发挥显著抑制作用,从基础水平进一步论证了rhBMP-2的临床应用不能显著增加肝癌的患病风险,为脊柱融合手术及骨不连等骨科疾病的治疗中应用rhBMP-2提供了一定的理论基础。 展开更多
关键词 RHBMP-2 PI3K/AKT 肝癌 SK-Hep-1细胞系 细胞增殖
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The Effect of Targeted Magnetic Nanopaticles on Hepatoma and the Expression of bcl-2/bax Protein 被引量:2
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作者 王剑明 肖宝来 +1 位作者 郑建伟 邹声泉 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2008年第4期443-446,共4页
The effect of targeted magnetic nanoparticles on hepatoma and the underlying mechanism were examined. Nude mice transplanted with a human hepatoma cell line (HepG2 cells) were randomized into 5 groups, including: ... The effect of targeted magnetic nanoparticles on hepatoma and the underlying mechanism were examined. Nude mice transplanted with a human hepatoma cell line (HepG2 cells) were randomized into 5 groups, including: (1) group A, receiving normal saline, (2) group B, receiving 5-fluorouracil (5-Fu), (3) group C, receiving magnetic nanoparticles containing 5-Fu, (4) group D, consisting of treatment with magnetic nanoparticles containing 5-Fu and inside magnetic field and (5) group E, receiving pure magnetic nanoparticles and inside magnetic field. Morphological features of transplanted tumors in mice in each group were observed under transmission electron microscope (TEM). The expression of bcl-2/bax protein was immunohistochemically detected by SABC method. The results showed that a large number of apoptotic tumor cells were found in group B and group D under TEM. The expression of bcl-2 protein was significantly decreased and the expression of bax protein increased significantly in both group B and D as compared with those in group A, C and E (P〈0.01 for all). The decrease in bcl-2 and the increase in bax were more in group D as compared with group B (P〈0.01). It is concluded that the targeted magnetic nanoparticles containing 5-Fu can improve the chemotherapeutic effect of 5-Fu by decreasing bcl-2 expression, increasing bax expres- sion and inducing apoptosis of the liver cancer cells. 展开更多
关键词 liver neoplasms cell line bcl-2 BAX magnetic nanoparticles 5-Fu
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RhBMP-2对肝癌SK-Hep-1细胞生长影响的体内研究
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作者 刘书中 钱列 +5 位作者 冯帆 刘祖德 沈洪兴 杨絮飞 王以朋 劳立峰 《中国实验诊断学》 2018年第5期886-889,共4页
目的探讨在体内条件下rhBMP-2对肝细胞癌SK-Hep-1细胞生长能力的影响及其作用机制。方法将16只雌性裸鼠平均分为实验组(8只)和对照组(8只),构建裸鼠背部皮下成瘤模型。实验组成瘤方案为SK-Hep-1细胞+rhBMP-2+Matrigel+PBS,对照组成瘤方... 目的探讨在体内条件下rhBMP-2对肝细胞癌SK-Hep-1细胞生长能力的影响及其作用机制。方法将16只雌性裸鼠平均分为实验组(8只)和对照组(8只),构建裸鼠背部皮下成瘤模型。实验组成瘤方案为SK-Hep-1细胞+rhBMP-2+Matrigel+PBS,对照组成瘤方案为等量SK-Hep-1细胞+Matrigel+PBS,分别于6周龄裸鼠皮下注射,每周测量实验组及对照组裸鼠成瘤大小,测算体积。9周后处死全部裸鼠,测量实验组及对照组裸鼠皮下瘤体重量,并取肿瘤组织行免疫组化检测裸鼠荷瘤组织中ki-67表达情况。结果实验组裸鼠皮下瘤体体积、重量均较对照组低,差异具有统计学意义(P<0.01),免疫组化检测显示rhBMP-2处理可显著降低瘤体组织中ki-67的表达水平。结论研究证实在体内条件下rhBMP-2对肝癌SK-Hep-1细胞生长能力发挥显著抑制作用,可能由rhBMP-2抑制肝细胞癌SK-Hep-1细胞增殖过程而导致。从基础水平进一步论证了rhBMP-2的临床应用不能显著增加肝癌的患病风险,为脊柱融合手术及骨不连等骨科疾病的治疗中应用rhBMP-2提供了一定的理论基础。 展开更多
关键词 RHBMP-2 肝癌 SK-Hep-1细胞系 细胞增殖 体内试验
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二苯乙烯苷对正常人肝细胞增殖的抑制率及影响因素研究 被引量:9
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作者 李娜 马致洁 +10 位作者 孟雅坤 王亚 李晓菲 涂灿 张雅铭 牛明 赵艳玲 肖小河 康廷国 游云 王伽伯 《中国药物警戒》 2015年第7期385-388,共4页
目的以L-02细胞为载体,考察不同因素(谷胱甘肽、过氧化氢、温度等)对不同质量浓度的二苯乙烯苷(300μg·m L-1、600μg·m L-1、1 200μg·m L-1,分别相当于740μmol·L-1、1 480μmol·L-1、2 960μmol·L-1)... 目的以L-02细胞为载体,考察不同因素(谷胱甘肽、过氧化氢、温度等)对不同质量浓度的二苯乙烯苷(300μg·m L-1、600μg·m L-1、1 200μg·m L-1,分别相当于740μmol·L-1、1 480μmol·L-1、2 960μmol·L-1)肝细胞增殖抑制率的影响。方法培养的人肝L-02细胞分别给以经不同组合方式(与谷胱甘肽或H2O2组合给药)或不同处理方式(与H2O2组合于不同温度蒸干重溶)处理的二苯乙烯苷,采用MTS法检测二苯乙烯苷对人肝L-02细胞的吸光度,并通过公式计算抑制率,比较各组抑制率差异值。结果低浓度二苯乙烯苷(300μg·m L-1)对肝细胞增殖几乎无抑制作用;中浓度(600μg·m L-1)呈现一定抑制作用,加入谷胱甘肽(GSH)后抑制作用消失;高浓度二苯乙烯苷(1 200μg·m L-1)随着GSH加入量的增加,抑制率显著下降,与阳性对照药野百合碱(MCT)(1600μg·m L-1,相当于4.92×103μmol·L-1)表现一致。二苯乙烯苷3个浓度对肝细胞增殖的抑制率(6%、25%和82%)有显著性差异,而加入不同体积分数的H2O2(0.5%和1%)对抑制率的影响变化不大。二苯乙烯苷经水溶解并于不同温度(常温、50℃和90℃)及p H 3条件下蒸干,所得样品对L-02细胞增殖的抑制率与未经处理的二苯乙烯苷组比较,没有明显变化。结论二苯乙烯苷在一定浓度范围内对肝细胞增殖有不同程度的抑制作用,且该作用与氧化或水解关系不大,具体机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 二苯乙烯苷 何首乌 谷胱甘肽 肝损伤 L-02细胞
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过氧化氢对大鼠肝卵圆细胞内游离钙含量的影响 被引量:2
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作者 施广璞 杜洪震 +2 位作者 刘子文 刘旭 吴元德 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期281-284,共4页
目的研究小剂量(800nmol/L)过氧化氢H2O2诱导培养的大鼠肝卵圆细胞(WB细胞)胞质内游离钙犤Ca2+犦i含量的变化及其机制。方法以800nmol/LH2O2刺激WB细胞,采用Fluo-3/AM作为荧光指示剂,以激光共聚焦扫描显微镜测定不同条件下犤Ca2+犦i荧... 目的研究小剂量(800nmol/L)过氧化氢H2O2诱导培养的大鼠肝卵圆细胞(WB细胞)胞质内游离钙犤Ca2+犦i含量的变化及其机制。方法以800nmol/LH2O2刺激WB细胞,采用Fluo-3/AM作为荧光指示剂,以激光共聚焦扫描显微镜测定不同条件下犤Ca2+犦i荧光值的改变以反映犤Ca2+犦i含量的变化。结果(1)小剂量H2O2可引起犤Ca2+犦i升高,约300s后达到高峰,800s后恢复正常,过氧化氢酶(CAT)可抑制此变化;(2)细胞在无钙外环境下,相同浓度的H2O2不引起犤Ca2+犦i变化;(3)钙拮抗剂心痛定(nifedipine)不能抑制犤Ca2+犦i荧光值的升高,而蒽-9-羧酸(A9C)则可抑制此变化。结论小剂量H2O2刺激WB细胞可诱使犤Ca2+犦i含量升高,其机制可能是H2O2引起细胞膜上非选择性阳离子通道开放使胞外Ca2+进入胞内,造成胞浆内犤Ca2+犦i含量增高。 展开更多
关键词 过氧化氢 肝卵圆细胞 激光共聚焦扫描显微镜 肝癌 发病机制
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眼镜蛇毒细胞毒素在体外对人癌细胞的毒性作用(MTT法) 被引量:7
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作者 杨丽娟 刘广芬 王晴川 《福建医科大学学报》 1997年第1期17-19,共3页
目的测定眼镜蛇毒细胞毒素(CV-CTX)对人癌细胞株的细胞抑制作用,以期能简便准确地反映其抗癌活性。方法应用溴化二苯四偶氮盐(MTT)法测定在CV-CTX作用下体外培养的人胃癌细胞株(SGC-7901)和人肝癌细胞株... 目的测定眼镜蛇毒细胞毒素(CV-CTX)对人癌细胞株的细胞抑制作用,以期能简便准确地反映其抗癌活性。方法应用溴化二苯四偶氮盐(MTT)法测定在CV-CTX作用下体外培养的人胃癌细胞株(SGC-7901)和人肝癌细胞株(SMC)的存活情况和其量效关系。结果(1)SMC、SGC-7901的活细胞数与其分解MTT的量成正线性关系。(2)CV-CTX对SMC、SGC-7901癌细胞株的细胞抑制作用呈良好的量效关系,IC50分别为2.45和1.24μg/ml。结论(1)用MTT法测定癌细胞的增殖和衰减是可靠的。(2)应用MTT法证实CV-CTX对体外培养的人癌细胞的杀伤程度可作为其抗癌活性指标。 展开更多
关键词 眼镜蛇毒 细胞毒素 胃癌 癌细胞株 肝癌
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NS-398对HGF诱导的肝癌细胞株MMP-7,MMP-9,TIMP-1表达的影响 被引量:1
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作者 殷积彬 刘铁夫 +2 位作者 孟祥宁 赵丽莉 刘晓川 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第23期2301-2305,共5页
目的:研究选择性COX-2抑制剂NS-398对肝癌细胞株MMP和TIMP表达的影响,探讨选择性COX-2抑制剂降低肿瘤细胞侵袭力的机制.方法:以不同浓度的NS-398(0,20,40,60, 80μmol/L)作用于HGF诱导的HepG2细胞,免疫组化法观察细胞中MMP-7,MMP-9,TIM... 目的:研究选择性COX-2抑制剂NS-398对肝癌细胞株MMP和TIMP表达的影响,探讨选择性COX-2抑制剂降低肿瘤细胞侵袭力的机制.方法:以不同浓度的NS-398(0,20,40,60, 80μmol/L)作用于HGF诱导的HepG2细胞,免疫组化法观察细胞中MMP-7,MMP-9,TIMP-1的蛋白质表达,ELISA法检测细胞外培养液中MMP-7,MMP-9,TIMP-1的含量,RT-PCR法分析3种蛋白酶的mRNA转录水平.结果:NS-398作用细胞48 h后,发现MMP-7, MMP-9,TIMP-1的蛋白质表达程度均下降, NS-398作用于HepG2细胞后,MMP-7在培养液中的含量和其在细胞内的mRNA相对水平分别为8.2±0.6,5.8±0.8,4.3±0.8,2.7±0.4, 1.7±0.4μg/L和0.58±0.06,0.42±0.03,0.37±0.01,0.36±0.01,0.33±0.01:MMP-9在培养液中未检出,其细胞内mRNA相对水平分别为0.32±0.02,0.23±0.02,0.21±0.01,0.17±0.01,0.13±0.01;TIMP-1在培养液中的含量和其在细胞内的mRNA相对水平分别为39.0±0.9,29.5±2.8,25.0±0.9,16.8±0.4,11.8±0.3μg/L和0.19±0.02,0.17±0.02,0.16±0.01, 0.13±0.01.0.结论:选择性COX-2抑制剂能够抑制MMP和TIMP基因转录,使TIMP/MMP比例失衡,这可能是其降低肿瘤细胞侵袭力的机制之一. 展开更多
关键词 COX-2抑制剂 肝细胞生长因子 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶抑制剂 侵袭力 肝癌细胞株
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As_(2)O_(3)对大鼠BRL-3A和RH-35细胞TRβ1和Cyclin D1因子的影响 被引量:1
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作者 王炼 王雪飞 +6 位作者 刘丹 耿敏杰 郭志伟 崔娜 刘建平 夏雅娟 杨英 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期741-747,共7页
为了探明As_(2)O_(3)对大鼠肝脏细胞系BRL-3A和肝癌细胞系RH-35中TH信号通路的关键调控因子TRβ1和TRβ1的下游因子Cyclin D1的影响,采用qRT-PCR、Western blot技术检测2种细胞中TRβ1和Cyclin D1的基因和蛋白表达变化。结果显示:(1)与... 为了探明As_(2)O_(3)对大鼠肝脏细胞系BRL-3A和肝癌细胞系RH-35中TH信号通路的关键调控因子TRβ1和TRβ1的下游因子Cyclin D1的影响,采用qRT-PCR、Western blot技术检测2种细胞中TRβ1和Cyclin D1的基因和蛋白表达变化。结果显示:(1)与对照组相比,As_(2)O_(3)作用BRL-3A细胞12h,1.563μmol/L组TRβ1蛋白表达显著降低(P<0.01)、Cyclin D1表达显著升高(P<0.01);6.250μmol/L组TRβ1表达明显降低(P<0.05)、Cyclin D1表达显著降低(P<0.01)。As_(2)O_(3)作用24h,1.563μmol/L组TRβ1蛋白表达明显升高(P<0.05);6.250μmol/L组TRβ1显著升高(P<0.01),Cyclin D1的表达显著降低(P<0.01)。As_(2)O_(3)作用48h,6.250μmol/L组TRβ1蛋白表达显著升高(P<0.01),各组Cyclin D1表达均显著降低(P<0.01)。基因表达结果与蛋白表达结果基本一致。(2)与对照组相比,As_(2)O_(3)作用RH-35细胞12h,各组TRβ1蛋白表达量显著升高(P<0.01)。As_(2)O_(3)作用RH-3524h,1.563μmol/L组TRβ1蛋白表达量明显升高(P<0.05),其余组显著升高(P<0.01)。As_(2)O_(3)作用48h,3.125和6.250μmol/L组TRβ1蛋白表达显著升高(P<0.01),1.563μmol/L组明显降低(P<0.05)。As_(2)O_(3)作用RH-3512,24,48h,各组Cyclin D1蛋白表达量均显著降低(P<0.01)。基因结果与蛋白结果基本一致。表明As_(2)O_(3)随着作用时间的增加,引起大鼠肝脏细胞系BRL-3A和肝癌细胞系RH-35TRβ1的水平异常,进而干扰Cyclin D1的水平。 展开更多
关键词 三氧化二砷 大鼠肝脏细胞系BRL-3A 大鼠肝癌细胞系RH-35 甲状腺激素受体β1 细胞周期蛋白D1
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NS-398对肝癌细胞系HepG2环氧合酶-2表达的影响 被引量:2
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作者 吴青 常薇 +2 位作者 朱长才 范丽蓉 宋世震 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期260-263,共4页
目的研究环氧合酶.2(COX-2)抑制剂氮.2,环己氧4,硝基苯一甲基磺胺(NS-398)对肝癌细胞株HepG2细胞体外抗肿瘤作用,探讨其抗癌作用的分子机理。方法分别用100、200、300、400μmol/L NS-398处理HepG2细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MT... 目的研究环氧合酶.2(COX-2)抑制剂氮.2,环己氧4,硝基苯一甲基磺胺(NS-398)对肝癌细胞株HepG2细胞体外抗肿瘤作用,探讨其抗癌作用的分子机理。方法分别用100、200、300、400μmol/L NS-398处理HepG2细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定肿瘤细胞增殖抑制率,流式细胞仪(FCM)榆测细胞周期的改变及凋亡百分比的变化,用Westen blotting检测COX.2蛋白的表达,用放射免疫测定法检测NS.398对HepG2细胞前列腺素E2(PGE2)释放水平。结果NS.398呈剂量依赖性的方式抑制HepG2细胞增殖,并诱导其凋亡,细胞周期分析表明,随着浓度增大,S期细胞明显减少,有G1期细胞累积现象,24h时半数有效剂量(IC50)为300μmo/L。NS.398明显抑制COX-2的活性和表达。随着浓度的增加,其COX-2蛋白表达逐渐降低,100、200、300、400μmol/L NS-398组灰度值分别为1515.1±127.2、1023.5±108.4、691±94.3和493.6±86.6,与对照组1822±157.4相比差异有统计学意义(t值分别为3.736、1.623、1.810、2.587,P〈0.01)。NS-398可明显抑制HepG细胞PGE2释放水平,其吸光度值(4值)分别为0.70±0.02、0.48±0.02、0.29±0.01和0.18±0.01,与对照组比较0.03±0.01差异有统计学意义。结论NS.398对肝癌细胞增殖有抑制作用并诱导其捌亡,可能与细胞G-期阻滞以及通过抑制COX-2活性,抑制COX-2下游产物PGE2表达有关。 展开更多
关键词 环氧合酶2 细胞系 肝肿瘤 凋亡
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康莱特诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的实验研究 被引量:2
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作者 李昌生 王正华 +2 位作者 韩冰 吴力群 卢云 《国际外科学杂志》 2008年第1期23-25,F0003,共4页
目的探讨康莱特注射液(KLT)诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用机制。方法用不同浓度的KLT培养肝癌细胞HepG2,应用流式细胞仪检测HepG2凋亡细胞的发生,应用ELISA法检测相关凋亡蛋白Bcl-2的变化。结果流式细胞术证实KLT可诱导肝癌细胞HepG... 目的探讨康莱特注射液(KLT)诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用机制。方法用不同浓度的KLT培养肝癌细胞HepG2,应用流式细胞仪检测HepG2凋亡细胞的发生,应用ELISA法检测相关凋亡蛋白Bcl-2的变化。结果流式细胞术证实KLT可诱导肝癌细胞HepG2凋亡(P〈0.01),且具有时间、剂量依赖关系。KLT处理组HepG2细胞中Bcl-2蛋白的表达分别为(16.91±0.20)units/ml、(10.78±1.41)units/ml和(7.66±0.64)units/ml,对照组为(22.65±2.83)units/ml。结论KLT可诱导肝癌细胞HepG2凋亡;且KLT诱导HepG2细胞凋亡过程中,Bcl-2蛋白表达的下调对调控细胞凋亡有重要作用。 展开更多
关键词 康莱特 肝癌细胞HEPG2 BCL-2
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