小鼠抗人CD160分子单克隆抗体制备及其生物学功能初步分析

CD160分子是糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白,是免疫超家族新成员,与其特异性配体HVEM分子结合所提供的共刺激信号在T细胞的增殖,活化,细胞因子产生和B细胞增殖,活化,分泌抗体产生等方面发挥着重要的调节作用。目前,市面上效果较好的IgG亚型的CD160抗体并不多,通过常规的基因克隆技术,基因重组技术,小鼠免疫技术以及经典的B淋巴细胞杂交瘤技术,获得能持续稳定分泌特异性鼠抗人CD160分子的IgG亚型单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用westen blot和竞争结合抑制实验,对获得的杂交瘤细胞进行生物特性方面的鉴定;采用间接免疫荧光法和流式细胞术分析CD160在健康人PBMC中T细胞表面的表达;T细胞增殖实验表明,此株单抗对于T细胞的体外增殖具有抑制作用。为进一步研究CD160分子的生物学效应提供了新的工具。

NK/T细胞淋巴瘤的病理组织学、免疫表型及基因研究

目的 筛选高效、方便、经济的对NK/T细胞淋巴瘤更进一步分类与诊断的检测方法。方法 收集了诊断为NK/T细胞淋巴瘤的 34例患者石腊包埋标本 ,2 7例发生于结外 ,7例发生在淋巴结。用多种抗体研究其免疫表型。EB病毒EBER探针原位杂交方法检测病毒感染。PCR方法检测T细胞受体β和γ基因的克隆性重排。 结果 在 34例结外淋巴瘤患者中 ,18例CD56阳性 ,16例TIA 1阳性。2例皮肤淋巴瘤患者中所有的瘤细胞Ki 6 7均阳性。在EB病毒RNA检测中 ,12例发生于上呼吸消化道的病例阳性 ,包括鼻部的 9例 ,以及鼻外的 3例。同样在 2例胃肠道淋巴瘤及 1例皮肤淋巴瘤患者中检测到EBER。 2 2例上呼吸消化道淋巴瘤患者中有 2例检测到了TCRβ或γ基因克隆性重排 ,所有胃肠道和皮肤淋巴瘤患者均检测到了TCR基因重排。 2例其他部位结外淋巴瘤及 7例结内淋巴瘤患者中有 5例显示TCR基因的克隆性重排。结论 大多数上呼吸消化道NK/T细胞淋巴瘤起源于NK细胞 ,只有一小部分为T细胞来源。然而 ,在皮肤及胃肠道中 ,NK样T细胞肿瘤更多见。在淋巴结中 ,NK细胞淋巴瘤很少。由于NK及NK样T细胞淋巴瘤的组织学改变相似 ,在进行NK细胞标志物、细胞毒性颗粒蛋白检测的同时必须检测TCR基因重排才会得到准确诊断。TCR的基因重排检测仍是鉴别NK和NK?