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NON-LINEAR SPECTRAL IMAGING MICROSCOPY STUDIES OF HUMAN HYPERTROPHIC SCAR
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作者 KECHENG LU SHUANGMU ZHUO +4 位作者 ZHIBIN HONG GUANNAN CHEN XINGSHAN JIANG LIQIN ZHENG JIANXIN CHEN 《Journal of Innovative Optical Health Sciences》 SCIE EI CAS 2009年第1期61-66,共6页
Skin scar is unique to humans,the major significant negative outcome sustained after thermal injuries,traumatic injuries,and surgical procedures.Hypertrophic scar in human skin is investigated using non-linear spectra... Skin scar is unique to humans,the major significant negative outcome sustained after thermal injuries,traumatic injuries,and surgical procedures.Hypertrophic scar in human skin is investigated using non-linear spectral imaging microscopy.The high contrast images and spectroscopic intensities of collagen and elastic fibers extracted from the spectral imaging of normal skin tissue,and the normal skin near and far away from the hypertrophic scar tissues in a 10-year-old patient case are obtained.The results show that there are apparent differences in the morphological structure and spectral characteristics of collagen and elastic fibers when comparing the normal skin with the hypertrophic scar tissue.These differences can be good indicators to differentiate the normal skin and hypertrophic scar tissue and demonstrate that non-linear spectral imaging microscopy has potential to noninvasively investigate the pathophysiology of human hypertrophic scar. 展开更多
关键词 Non-linear spectral imaging microscopy human hypertrophic scar collagen and elastin fibers
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CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞STATs蛋白活化的状况 被引量:6
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作者 陶灵 李世荣 +4 位作者 刘剑毅 戴霞 李喆 覃霞 毋巨龙 《中国美容医学》 CAS 2008年第4期521-523,共3页
目的:探讨CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞STATs蛋白活化的情况。方法:原代培养人增生性瘢痕成纤维细胞,将其分为:①对照组:人增生性瘢痕成纤维细胞组;②增生性瘢痕成纤维细胞外源性重组CTGF刺激组。取0min、5min、10min、20min、30min... 目的:探讨CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞STATs蛋白活化的情况。方法:原代培养人增生性瘢痕成纤维细胞,将其分为:①对照组:人增生性瘢痕成纤维细胞组;②增生性瘢痕成纤维细胞外源性重组CTGF刺激组。取0min、5min、10min、20min、30min、45min、60min、90min八个时相点,分别采用MTT检测细胞增殖,western-blot检测各组之间a-平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin,a-SMA)的变化趋势以及各时相点STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5、STAT6蛋白活化(磷酸化)情况。结果:在确定成纤维细胞增殖以及a-SMA表达变化趋势以②-①组顺序递减的前提下(P<0.05),用western-blot观测两组STATs蛋白活化情况,发现:STAT1蛋白磷酸化水平以②-①组顺序递减(P<0.01);STAT2-6均有不同程度的磷酸化,但不以②-①组顺序递减。结论:STAT1可能在CTGF促进人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和分化过程中可能发挥着重要作用,以上研究结果为抑制瘢痕纤维化及挛缩提供了新的研究方向。 展开更多
关键词 CTGF 人增生性瘢痕 成纤维细胞 STATS
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JAK-STATs通路在CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞增殖分化中的作用 被引量:14
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作者 陶灵 李世荣 +3 位作者 刘剑毅 戴霞 李喆 毋巨龙 《中国美容医学》 CAS 2008年第11期1641-1644,共4页
目的:探讨JAK-STATs是否参与CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞(human hypertrophic scar fibroblast,hHSF)增殖分化过程。方法:原代培养hHSF,将其分为①对照组:hHSF组;②CTGF刺激hHSF组。取0min、5min、10min、20min、30min、45min、60mi... 目的:探讨JAK-STATs是否参与CTGF刺激人增生性瘢痕成纤维细胞(human hypertrophic scar fibroblast,hHSF)增殖分化过程。方法:原代培养hHSF,将其分为①对照组:hHSF组;②CTGF刺激hHSF组。取0min、5min、10min、20min、30min、45min、60min、90min八个时相点,采用western-blot方法检测各时相点JAK1、JAK2、JAK3、TYK2、STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5、STAT6蛋白活化(磷酸化)情况。再对筛选出的蛋白用免疫荧光化学染色和凝胶阻滞电泳(EMSA)方法进一步验证分析其表达及活化情况,以筛选出参与CTGF调控hHSF增殖和分化的JAK-STATs信号分子。结果:通过western-blot、免疫荧光化学染色和凝胶阻滞电泳(EMSA)方法筛选出JAK1、STAT1蛋白在CTGF刺激后蛋白活化程度明显增强。结论:JAK1、STAT1可能参与了CTGF调控hHSF增殖过程。这从一定程度上揭示了CTGF调控hHSF增殖分化过程的信号转导机制,从而为抑制瘢痕纤维化提供了新的研究方向,有助于更深入地调控CTGF的促纤维化作用,为hHSF及其它纤维化疾病的研究及防治提供新的思路。 展开更多
关键词 CTGF 人增生性瘢痕成纤维细胞 STATS JAKS 增殖 分化
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过表达miR-34a脂肪干细胞外泌体调控增生性瘢痕成纤维细胞增殖及凋亡的研究 被引量:10
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作者 肖向阳 郑德义 +1 位作者 王宝云 李自力 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第6期887-893,共7页
目的探讨脂肪干细胞(ADSCs)过表达miR-34a后释放的外泌体对人增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)增殖及凋亡的影响。方法从人脂肪组织中分离原代ADSCs,流式细胞术鉴定其表面标记分子,茜素红和碱性磷酸酶染色观察其成骨分化能力;采用miR-34a过表... 目的探讨脂肪干细胞(ADSCs)过表达miR-34a后释放的外泌体对人增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)增殖及凋亡的影响。方法从人脂肪组织中分离原代ADSCs,流式细胞术鉴定其表面标记分子,茜素红和碱性磷酸酶染色观察其成骨分化能力;采用miR-34a过表达慢病毒感染ADSCs,获得miR-34a过表达的ADSCs(ADSCs/miR-34a)和阴性对照的ADSCs(ADSCs/miR-NC),然后提取各组细胞上清液中的外泌体,获得ADSCs外泌体(ExoADSCs)、miR-34a过表达的ADSCs外泌体(ExoADSCs/miR-34a)和阴性对照的ADSCs外泌体(ExoADSCs/miR-NC),利用透射电镜观察外泌体形态,Western blot检测外泌体表面标志蛋白CD81和CD63;再将得到的外泌体分别与HSF共培养,分为对照组(HSF+PBS)、ExoADSCs处理组(HSF+ExoADSCs)、ExoADSCs/miR-NC处理组(HSF+ExoADSCs/miR-NC)和ExoADSCs/miR-34a处理组(HSF+ExoADSCs/miR-34a)。采用qRT-PCR法检测各组ADSCs及外泌体中miR-34a的表达水平;MTT法检测各组HSF细胞的增殖能力;流式细胞术检测各组HSF细胞的凋亡水平。Western blot法检测各组HSF细胞凋亡相关蛋白(cleaved-Caspase-3、Bax和Bcl-2)、纤维化相关蛋白(COLⅠ、COLⅢ)及TGF-β/Smad信号通路相关蛋白(TGF-β1、p-Smad2和p-Smad3)的表达水平。结果成功分离得到ADSCs,并具有成骨分化能力;透射电镜可见直径在50~100 nm呈双层膜结构的圆形或椭圆形囊泡状小体,Western blot显示外泌体标志性蛋白CD81和CD63阳性表达;miR-34a过表达可增加ADSCs及其外泌体中miR-34a表达水平;与ExoADSCs处理组和ExoADSCs/miR-NC处理组比较,ExoADSCs/miR-34a干预可抑制HSF增殖(P <0. 05),提高其凋亡率(P <0. 05),并上调cleavedCaspase-3和Bax蛋白表达水平(P <0. 05),并下调Bcl-2、COLⅠ、COLⅢ、p-Smad2、p-Smad3和TGF-β1等蛋白表达水平(P <0. 05)。结论过表达miR-34a的ADSCs外泌体可能通过下调TGF-β/Smad信号通路抑制HSF细胞增殖,促进其凋亡。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 外泌体 MIR-34A 人增生性瘢痕成纤维细胞 增殖凋亡
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重组人内抑素对兔耳创面瘢痕组织血管内皮生长因子、转化生长因子-β_1和碱性成纤维细胞生长因子表达的影响 被引量:15
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作者 张晓明 余建 +2 位作者 黄学应 邓雪飞 李小静 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期101-105,共5页
目的观察重组人内抑素(rh Endostatin)对兔耳创面瘢痕增生及血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)表达的影响,探讨rh Endostatin抑制瘢痕增生的分子机制。方法健康新西兰大耳白兔20只,均... 目的观察重组人内抑素(rh Endostatin)对兔耳创面瘢痕增生及血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)表达的影响,探讨rh Endostatin抑制瘢痕增生的分子机制。方法健康新西兰大耳白兔20只,均分为正常对照组、模型组、生理盐水(NS)对照组、rh Endostatin(5 g/L)治疗组和醋酸曲安奈德(TA,40 g/L)对照组;除正常对照组外其余各组均进行增生性瘢痕动物模型的复制,在兔耳腹侧面制作1cm×1cm大小创面。术后第28天,rh Endostatin治疗组瘢痕皮内注射相应浓度rh Endostatin(100μl),NS对照组注射等量生理盐水,隔日1次,共6次;TA对照组瘢痕块内注入相应浓度曲安奈德(100μl),每周1次,共2次;模型组术后不接受处理。术后第47天摄片并收集瘢痕及正常皮肤标本,应用免疫组织化学方法检测VEGF、TGF-β1和b FGF的表达。结果形态学观察结果显示,术后第47天rh Endostatin治疗组瘢痕皮肤色泽变浅,变软变平,体积减小,与模型组和NS对照组比较有明显差异;免疫组织化学检测结果可见,与模型组和NS对照组相比,rh Endostatin治疗组VEGF和TGF-β1蛋白表达减少,b FGF表达增加,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 rh Endostatin能有效抑制兔耳创面瘢痕增生,其机制可能与rh Endostatin影响VEGF、TGF-β1和b FGF蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 重组人内抑素 血管内皮生长因子 转化生长因子β_1 碱性成纤维细胞生长因子 免疫组织化学SP法
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重组人干扰素α-2b抑制瘢痕成纤维细胞的增殖及迁移作用 被引量:5
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作者 王瑞 于飞 +4 位作者 刘太宾 侯秀丽 刘振东 霍晶 宋建波 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第29期4611-4615,共5页
背景:重组人干扰素α-2b是具有抗病毒、抗增殖活性、抗肿瘤、免疫调节等功能活性的细胞因子,对瘢痕组织具有一定的预防及治疗作用。目的:探索重组人干扰素α-2b作用于瘢痕成纤维细胞的效果,观察其对瘢痕成纤维细胞增殖及迁移能力的影响... 背景:重组人干扰素α-2b是具有抗病毒、抗增殖活性、抗肿瘤、免疫调节等功能活性的细胞因子,对瘢痕组织具有一定的预防及治疗作用。目的:探索重组人干扰素α-2b作用于瘢痕成纤维细胞的效果,观察其对瘢痕成纤维细胞增殖及迁移能力的影响。方法:体外培养瘢痕成纤维细胞至对数增长期,采用0,5000,10000,20000 IU/mL重组人干扰素α-2b处理48 h,通过EdU染色观察细胞增殖能力,采用划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移能力的改变,免疫印迹法检测增殖及迁移相关蛋白增殖细胞核抗原、基质金属蛋白酶2的表达水平。结果与结论:①体外细胞实验观察结果显示,同空白对照组比较,重组人干扰素α-2b处理组可明显降低EdU增殖阳性细胞数,且细胞划痕愈合率和细胞迁移数目显著下降(P<0.05),瘢痕成纤维细胞增殖相关蛋白增殖细胞核抗原和迁移相关蛋白基质金属蛋白酶2的蛋白表达水平也明显下降(P<0.05);②结果证实,重组人干扰素α-2b具有抑制瘢痕成纤维细胞增殖、降低细胞迁移率的作用。 展开更多
关键词 重组人干扰素Α-2B 增生性瘢痕 成纤维细胞 细胞迁移
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人增生性瘢痕组织中微血管内皮细胞的分离、纯化和培养 被引量:6
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作者 姜笃银 胡大海 +1 位作者 汤朝武 陈璧 《第四军医大学学报》 2000年第11期1359-1362,共4页
目的 微血管内皮细胞 (MEC)增殖和血管发生存在于很多生理和病理过程中 ,为体外重建人增生性瘢痕组织微血管内皮细胞 (HSMEC)生长模型 .方法 正常人包皮和增生性瘢痕经 1.2 5 g· L- 1 dispase和 1.2 5 g· L- 1 胰蛋白酶依... 目的 微血管内皮细胞 (MEC)增殖和血管发生存在于很多生理和病理过程中 ,为体外重建人增生性瘢痕组织微血管内皮细胞 (HSMEC)生长模型 .方法 正常人包皮和增生性瘢痕经 1.2 5 g· L- 1 dispase和 1.2 5 g· L- 1 胰蛋白酶依次消化 4℃ 2 4h后 ,机械挤压分离组织内 HSMEC和人真皮微血管内皮细胞 (HDMEC) ,经 5 0 0 0 U· L- 1 b FGF,2 0 0m L· L- 1胎牛血清的 DMEM内培养和 0 .1g· L- 1胰蛋白酶 ,0 .15 mmol· L- 1 EDTA的 TE分离、纯化 ,组织学 HE染色和 因子相关抗原免疫组化染色 ,观察 MEC的阳性细胞百分数 .结果  MEC在含 b FGF培养基中增殖旺盛 ,少量混生的成纤维细胞经 TE分离 MEC而被基本遗弃 ,3代 MEC能获得 97.0 %~ 98.0 %的纯度 ,明显高于原代培养 (P<0 .0 1) ,HSMEC形态学与 HDMEC无明显差异 .结论 低浓度b FGF和 TE细胞分离液分别对 MEC的培养和纯化有可靠作用 ,HSMEC的培养成功为烧伤创面愈合和瘢痕增生机制的研究扩展了空间 . 展开更多
关键词 增生性瘢痕 微血管内皮细胞 培养 分离 纯化
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重组人内抑素抑制创面瘢痕增生的实验研究 被引量:4
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作者 余建 张晓明 +3 位作者 黄学应 邓雪飞 李小静 焦轶 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第7期891-896,共6页
目的观察重组人内抑素(rhEndostatin)对兔耳瘢痕增生的抑制作用,探讨其部分作用机制。方法建立兔耳增生性瘢痕(HS)模型,瘢痕块内局部注射rhEndostatin(1.25、2.5、5 g/L),观察瘢痕大体形态及组织学变化,免疫组织化学检测瘢痕组织Ⅰ、Ⅲ... 目的观察重组人内抑素(rhEndostatin)对兔耳瘢痕增生的抑制作用,探讨其部分作用机制。方法建立兔耳增生性瘢痕(HS)模型,瘢痕块内局部注射rhEndostatin(1.25、2.5、5 g/L),观察瘢痕大体形态及组织学变化,免疫组织化学检测瘢痕组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达,电镜观察瘢痕组织成纤维细胞凋亡。结果与模型组和生理盐水组比较,2.5 g/L和5 g/L rhEndostatin组瘢痕平坦,面积减小,质地变软,瘢痕增生指数降低(P<0.05);微血管密度降低(P<0.05);Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平降低(P<0.05);成纤维细胞凋亡。结论rhEndostatin可抑制HS形成,该作用可能与rhEndostatin抑制血管生成,进而促进增生性瘢痕成纤维细胞(HSFs)凋亡,减少胶原的产生与沉积有关。 展开更多
关键词 重组人内抑素 增生性瘢痕
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人羊膜上皮干细胞对皮肤增生性瘢痕形成的作用 被引量:4
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作者 江兰 刘世宇 +2 位作者 李海建 余春艳 金岩 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2011年第10期747-750,782,共5页
目的探讨人羊膜上皮细胞的干细胞对皮肤增生性瘢痕形成的作用。方法从足月分娩的人胎盘中剥离羊膜,采用胰蛋白酶消化法分离人羊膜上皮干细胞(human amniotic epithelial stem cells,hAECs),并在体外使用含表皮生长因子的LG-DMEM培养基... 目的探讨人羊膜上皮细胞的干细胞对皮肤增生性瘢痕形成的作用。方法从足月分娩的人胎盘中剥离羊膜,采用胰蛋白酶消化法分离人羊膜上皮干细胞(human amniotic epithelial stem cells,hAECs),并在体外使用含表皮生长因子的LG-DMEM培养基进行培养,利用免疫荧光染色、流式细胞术和定向诱导等鉴定人羊膜上皮细胞的干细胞特性。构建兔耳全层皮肤缺损模型,左耳创面注射磷酸盐缓冲液(PBS)作为对照组,右耳创面注射羊膜上皮细胞悬液为实验组。结果实验中hAECs表达干细胞标志物SSEA-4和OCT-4,并表达间充质干细胞表面标记物,具有多向分化潜能。1个月后,兔子右耳瘢痕比左耳瘢痕薄,HE染色示:移植干细胞组有效的抑制了增生性瘢痕的形成,纤维化面积较小。在激光共聚焦细胞仪下可发现移植的hAESCs存活。结论人羊膜上皮细胞可以促进创面愈合,减少炎症反应,有效抑制兔耳创面瘢痕的形成。这可能成为瘢痕预防和治疗的新手段和切入点。 展开更多
关键词 人羊膜上皮细胞 增生性瘢痕 纤维化
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积雪草苷对HSFB miR-564及其介导的TGF-β_(1)/Smad信号通路的影响 被引量:5
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作者 王瑶 袁锐 +1 位作者 刘国良 袁星星 《中医药学报》 CAS 2021年第8期32-36,共5页
目的:探讨积雪草苷对人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)中miR-564及其介导的TGF-β_(1)/Smad信号通路中相关蛋白表达的影响。方法:HSFB分为对照组、0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.5mg/mL和1mg/mL组,其中对照组加入100μL的DMEM培养基进行培养,0.05... 目的:探讨积雪草苷对人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)中miR-564及其介导的TGF-β_(1)/Smad信号通路中相关蛋白表达的影响。方法:HSFB分为对照组、0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.5mg/mL和1mg/mL组,其中对照组加入100μL的DMEM培养基进行培养,0.05mg/mL、0.1mg/mL、0.5mg/mL和1mg/mL积雪草苷组分别加入含相应浓度AS的DMEM培养基继续培养。分别采用MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,酶联免疫吸附试验检测细胞MMP-2、COLⅠ和COLⅢ的表达水平,免疫荧光检测细胞α-SMA蛋白的表达,RT-PCR法检测细胞中miR-564的表达,Westernblot检测TGF-β_(1)/Smad信号通路中相关蛋白的表达。结果:与对照组相比,积雪草苷干预后HSFB增殖水平显著降低,凋亡水平显著增加,细胞中MMP-2、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、TGF-β_(1)、p-Smad2,p-Smad3蛋白的表达和miR-564的表达均明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),其中以1mg/mL组对HSFB作用最佳。结论:积雪草苷能够通过抑制HSFB中miR-564的表达,进而抑制TGF-β_(1)/Smad信号通路的激活,达到促进细胞凋亡、抑制细胞增殖和胶原分泌的作用。 展开更多
关键词 积雪草苷 人增生性瘢痕成纤维细胞 miR-564 TGF-β_(1)/Smad信号通路
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原代培养人增生性瘢痕成纤维细胞的生物学行为 被引量:8
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作者 杜启翠 肖文林 +2 位作者 孙桂兰 马秀兴 姚如永 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第7期1174-1179,共6页
背景:增生性瘢痕组织的形成是创面愈合过程中不可避免的,但是增生性瘢痕组织的形成产生很多不良的影响。目的:建立可靠的人增生性瘢痕成纤维细胞的原代培养方法。方法:采用组织贴壁法和消化法分别进行人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞的原代... 背景:增生性瘢痕组织的形成是创面愈合过程中不可避免的,但是增生性瘢痕组织的形成产生很多不良的影响。目的:建立可靠的人增生性瘢痕成纤维细胞的原代培养方法。方法:采用组织贴壁法和消化法分别进行人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞的原代培养,使用含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基,37℃,体积分数5%CO2,饱和湿度下培养,分别描述其生长曲线、形态及波形蛋白的表达。结果与结论:组织贴壁法人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞培养成功,20-40d可传第1代,以后每7-10d可传1代,细胞为长梭形,波形蛋白表达阳性;消化法培养人皮肤增生性瘢痕成纤维细胞成功,15-20d细胞可融合成片,细胞为长梭形,波形蛋白表达阳性。进一步证实两种方法进行人增生性瘢痕成纤维细胞的原代培养均培养成功。 展开更多
关键词 组织构建 皮肤组织构建 人增生性瘢痕 成纤维细胞 原代培养 细胞培养 贴壁法 消化法 波形 蛋白 生物学行为 细胞分裂 分裂指数 组织构建图片文章
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重组人内抑素对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响
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作者 张晓明 余建 +2 位作者 黄学应 邓雪飞 李小静 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第3期264-268,共5页
目的观察重组人内抑素(rh Endostatin)对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞(HSFs)增殖的影响,探讨rh Endostatin抑制HSFs增殖的相关机制。方法制备兔耳增生性瘢痕(HS)模型,分离、培养并鉴定兔耳HSFs;应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和流式细胞仪分别... 目的观察重组人内抑素(rh Endostatin)对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞(HSFs)增殖的影响,探讨rh Endostatin抑制HSFs增殖的相关机制。方法制备兔耳增生性瘢痕(HS)模型,分离、培养并鉴定兔耳HSFs;应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和流式细胞仪分别检测rh Endostatin对HSFs增殖和周期的影响。结果分离培养的兔耳细胞经波形蛋白免疫细胞化学染色检测呈阳性。rh Endostatin对HSFs增殖的抑制效应与浓度和作用时间呈依赖关系,测得IC50值为100 mg/L。与正常对照组细胞相比,HSFs G1期细胞比例减少(P<0.01),S期和G2/M期细胞比例增加(P<0.01);与模型组细胞相比,rh Endostatin组细胞G1期比例增加(P<0.01),S期和G2/M期细胞比例减少(P<0.01)。结论rh Endostatin可抑制兔耳HSFs增殖,该作用可能与其引起HSFs细胞周期G1期阻滞相关。 展开更多
关键词 重组人内抑素 增生性瘢痕 增殖 细胞周期 流式细胞术
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转染人转化生长因子-β_3基因对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响 被引量:1
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作者 朱小波 宋朝骏 +2 位作者 张进德 袁启智 黄硕麟 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期677-679,共3页
目的 观察转染人转化生长因子 β3 (hTGF β3 )基因对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响。方法 通过脂质体介导的方法 ,将人表皮细胞生长因子基因真核表达质粒 (pBK CMV) TGF β3 质粒转染体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞 ,采用... 目的 观察转染人转化生长因子 β3 (hTGF β3 )基因对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响。方法 通过脂质体介导的方法 ,将人表皮细胞生长因子基因真核表达质粒 (pBK CMV) TGF β3 质粒转染体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞 ,采用RT PCR法检测TGF β3 mRNA的表达 ,放射免疫 (RIA)法测定细胞培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型前胶原的浓度。结果 构建的TGF β3 质粒可成功转染成纤维细胞 ,并增强Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达 ,下调Ⅰ /Ⅲ型胶原比值。结论 转染hTGF β3 展开更多
关键词 TGF-Β3 Ⅲ型胶原 转染 瘢痕成纤维细胞 转化生长因子-Β3 基因 真核表达质粒 RNA 质粒 RT—PCR
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苦参碱对人增生性瘢痕治疗作用的临床研究 被引量:10
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作者 汤苏阳 蔡宝仁 +3 位作者 马永福 许国珍 赵晓明 李哲 《中国临床康复》 CSCD 2002年第14期2066-2067,共2页
目的研究苦参碱(Matrine,Mat)对人增生性瘢痕治疗中成纤维细胞(fibroblast,FB)增生和凋亡的影响。方法以20例患者深Ⅱ度烧伤创面愈合后增生性瘢痕为研究对象,局部注射Mat后,利用DNA末端标记技术(TdT-mediateddUTPnick-endlabelingmethod... 目的研究苦参碱(Matrine,Mat)对人增生性瘢痕治疗中成纤维细胞(fibroblast,FB)增生和凋亡的影响。方法以20例患者深Ⅱ度烧伤创面愈合后增生性瘢痕为研究对象,局部注射Mat后,利用DNA末端标记技术(TdT-mediateddUTPnick-endlabelingmethod,TUNEL),检测其FB的凋亡数量及其标记指数;利用免疫组织化学法检测其FB的增殖细胞核抗原(Proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的表达和其标记指数。结果增生性瘢痕局部注射Mat后与自身未经Mat治疗的增生性瘢痕对照组比,前者其FB凋亡数量明显增加,凋亡指数14d分别为0.32和0.07,28d分别为0.54和0.11;治疗组PCNA表达明显弱于对照组,PCNA标记指数14d分别为0.28和0.5,28d分别为0.54和0.75。结论Mat明显增加人增生性瘢痕FB的凋亡数量,降低其增殖活性,促进增生性瘢痕FB凋亡,使增生性瘢痕尽早地趋于非增生状态。 展开更多
关键词 苦参碱 人增生性瘢痕 成纤维细胞 细胞增殖 细胞凋亡 免疫组织化学法 增殖细胞核抗原
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丹参酮ⅡA微针抑制瘢痕增生的作用及机制研究 被引量:5
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作者 詹燕珊 赖建辉 +3 位作者 郭思旖 王纠 韩兵 时军 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期461-467,共7页
目的考察丹参酮ⅡA(TSA)微针对瘢痕增生的抑制作用及机制。方法(1)动物实验:将42只新西兰兔随机分成正常组、模型组、空白微针组、阳性药物组(2.5%积雪草总苷)以及丹参酮ⅡA微针(TSA-MN)低、中、高剂量组[(173.93±3.55)μg、(421.4... 目的考察丹参酮ⅡA(TSA)微针对瘢痕增生的抑制作用及机制。方法(1)动物实验:将42只新西兰兔随机分成正常组、模型组、空白微针组、阳性药物组(2.5%积雪草总苷)以及丹参酮ⅡA微针(TSA-MN)低、中、高剂量组[(173.93±3.55)μg、(421.44±6.67)μg、(619.94±12.39)μg]。通过新西兰兔耳腹侧面制备创口使其增生,得到兔耳增生性瘢痕模型,连续观察28 d;模型复制成功后给药干预,每日1次,连续21 d。采用HE染色观察增生性瘢痕组织病理形态变化,并测量瘢痕增生指数(SEI)和成纤维细胞密度;采用ELISA法检测兔血清中转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素2(IL-2)和白细胞介素4(IL-4)水平。(2)细胞实验:采用体外培养人皮肤成纤维细胞,分为空白对照组、空白微针组、丹参酮ⅡA原料药组(4μg·mL^(-1))以及丹参酮ⅡA微针高、中、低剂量组(6、4、2μg·mL^(-1))。采用Western Blot法检测人皮肤成纤维细胞中TGF-β1、Smad7蛋白表达。结果与正常组比较,模型组兔血清中的TGF-β1、IL-2、IL-4水平及兔耳增生性瘢痕组织SEI值均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,丹参酮ⅡA微针中、高剂量组兔血清的IL-2、TGF-β1水平及兔耳增生性瘢痕组织SEI值、成纤维细胞密度均明显降低(P<0.05),丹参酮ⅡA微针高剂量组兔血清的IL-4水平明显降低(P<0.05)。Western Blot实验结果表明,与空白对照组比较,丹参酮ⅡA微针中、高剂量组人皮肤成纤维细胞的TGF-β1蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),丹参酮ⅡA微针低、中、高剂量组人皮肤成纤维细胞的Smad7蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论丹参酮ⅡA微针有抑制增生性瘢痕的作用,可能与调节TGF-β1/Smad通路及其抗炎作用有关。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 微针 增生性瘢痕 TGF-β1/Smad通路 抗炎作用 新西兰兔 人皮肤成纤维细胞
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Preparation of tanshinone Ⅱ_(A) self-soluble microneedles and its inhibition on proliferation of human skin fibroblasts
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作者 Yanshan Zhan Xiaoqi Xu +4 位作者 Xi Luo Ruiping Liu Yujian Lin Ping Zhao Jun Shi 《Chinese Herbal Medicines》 CAS 2023年第2期251-262,共12页
Objective:Hypertrophic scars(HS)are a variety of skin tissue fibrosis disease that occurs in human skin,the effective therapeutic method of which is still inaccessible up to now.As a bioactive constituent of a well-kn... Objective:Hypertrophic scars(HS)are a variety of skin tissue fibrosis disease that occurs in human skin,the effective therapeutic method of which is still inaccessible up to now.As a bioactive constituent of a well-known medical plant,Salvia miltiorrhiza(Danshen in Chinese),tanshinone Ⅱ_(A)(TSA)is reported to inhibit cell proliferation in HS.Therefore,the aim of this study was to prepare TSA self-soluble microneedles to strengthen its dermal retention and break through the difficulty of significantly thickening epidermal connective tissue and stratum corneum at the HS site.The possible mechanism of action in suppressing HS was studied using human skin fibroblasts(HSF).Methods:Tanshinone Ⅱ_(A) self-dissolving microneedles(TSA-MN)was prepared using a negative mold casting method.The prescription process of microneedle was optimized by Box-Behnken effect surface method.Different media were selected to investigate the ability of transdermal absorption and in vitro release.Furthermore,according to Cell Counting Kit-8(CCK8)method as well as the Western blot method,the effect of TSA-MN on the biological characteristics of HSF was investigated.Results:With remarkable slow release effect and dermal retention,the release and transdermal properties of TSA-MN in vitro were better than both TSA and ordinary dosage forms.Its effect of HSF confirmed the essential decrease in cell motility during cell proliferation and cell migration in vitro,which plays a significant role in down-regulating the secretion of transforming growth factor-β1(TGF-β1)in HSF and increasing the expression level of Smad7.Conclusion:The prepared TSA self-soluble microneedles is helpful in solving the problem of hypertrophic scars,with a stable dermal retention effect after process optimization. 展开更多
关键词 human skin fibroblasts hypertrophic scar tanshinoneⅡ_(A) tanshinoneⅡ_(A)self-dissolving microneedles TGF-β1
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基于内质网应激PERK-ATF4-CHOP信号通路探究姜黄素对人增生性瘢痕成纤维细胞的影响及作用机制
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作者 齐郁松 卜盼盼 +2 位作者 赵皎均 田文融 马少林 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2024年第2期111-115,共5页
目的基于内质网应激PERK-ATF4-CHOP信号通路探究姜黄素(curcumin,Cur)对人增生性瘢痕成纤维细胞(human hypertrophic scar fibroblasts,HSFbs)的影响及其作用机制。方法选取自2022年2月至2023年3月,新疆医科大学第一附属医院整形美容外... 目的基于内质网应激PERK-ATF4-CHOP信号通路探究姜黄素(curcumin,Cur)对人增生性瘢痕成纤维细胞(human hypertrophic scar fibroblasts,HSFbs)的影响及其作用机制。方法选取自2022年2月至2023年3月,新疆医科大学第一附属医院整形美容外科就诊的6例增生性瘢痕患者,获取其增生性瘢痕组织,经体外培养增生性瘢痕成纤维细胞;通过CCK-8实验法检测不同浓度的Cur对HSFbs细胞增殖活性的影响,根据增殖活性结果数据分析后将实验分为空白组、1/2半抑制浓度(IC50)组、IC50组;EDU检测细胞增殖能力;流式细胞术检测Cur干预后各组细胞的凋亡能力;流式细胞术检测Cur作用24 h后细胞周期的影响;划痕实验检测Cur作用24 h后细胞的迁移能力;Western blot检测Cur作用24 h后细胞中与内质网应激相关蛋白ATF4、CHOP、Cleaved-Caspase-12表达。结果随着Cur药物浓度的逐渐增高,HSFbs的细胞增殖活性逐渐降低,且呈现出明显的浓度依赖性,其IC50值为71.33μmol/L;细胞周期实验中Cur干预HSFbs 24 h后,将大多数的HSFbs阻滞在G1期;实验分组的Cur干预24 h后显著减弱了HSFbs的迁移能力;显著促进了HSFbs的凋亡;Western blot实验后结果数据显示,Cur可以显著上调细胞中ATF4、CHOP、Cleaved-Caspase-12的蛋白表达水平。结论Cur可通过激活内质网应激PERK-ATF4-CHOP信号通路调节相关蛋白,抑制HSFbs细胞增殖及迁移,促进HSFbs细胞凋亡。 展开更多
关键词 内质网应激 PERK-ATF4-CHOP信号通路 姜黄素 人增生性瘢痕成纤维细胞
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丹参抗成纤维细胞增殖作用的分子机制研究 被引量:17
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作者 张楠楠 王倩 +4 位作者 高洁 李红艳 韩彦琪 邹敏杰 白钢 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2440-2447,共8页
目的探讨丹参抗成纤维细胞增殖作用的有效成分及分子作用机制。方法采用索氏提取法制备丹参多种提取物及萃取部位;以抗人增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)增殖的活性为导向,MTS法筛选活性部位,流式细胞仪检测细胞周期;UPLC-Q/TOF法分析丹参活... 目的探讨丹参抗成纤维细胞增殖作用的有效成分及分子作用机制。方法采用索氏提取法制备丹参多种提取物及萃取部位;以抗人增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)增殖的活性为导向,MTS法筛选活性部位,流式细胞仪检测细胞周期;UPLC-Q/TOF法分析丹参活性成分;通过反向对接预测试药抗细胞增殖的机制,RT-PCR检测caspase-3、MAP2K1、MAPK1增殖相关基因的表达水平。结果丹参石油醚提取部位有较强的抗HSF增殖的活性,能显著增加G0/G1期细胞的比例,降低增殖指数(PI),其主要活性成分为丹参酮类化合物;反向对接预测结果显示,丹参酮类化合物抗HSF增殖机制主要与调节caspase-3和MAP2K1等靶点及其相关通路有关;隐丹参酮能够上调caspase-3基因的表达,下调MAP2K1、MAPK1基因的表达,与预测结果相吻合。结论丹参抗HSF增殖作用的机制与丹参酮类成分调节MAPK、VEGF等信号通路有关。 展开更多
关键词 丹参 人增生性瘢痕成纤维细胞 MAPK1 反向对接 丹参酮
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双氢青蒿素对人增生性瘢痕成纤维细胞体外作用及其机制的研究 被引量:12
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作者 袁继龙 张鹏 肖明 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2019年第1期48-53,共6页
目的探究双氢青蒿素在体外对人增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblasts, HSFs)的作用及相关的作用机制。方法通过噻唑蓝实验检测双氢青蒿素作用24 h和48 h的细胞毒性;通过锥虫蓝染色计数活细胞检测双氢青蒿素作用24 h和48 ... 目的探究双氢青蒿素在体外对人增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblasts, HSFs)的作用及相关的作用机制。方法通过噻唑蓝实验检测双氢青蒿素作用24 h和48 h的细胞毒性;通过锥虫蓝染色计数活细胞检测双氢青蒿素作用24 h和48 h后对细胞增殖能力的影响;通过划痕实验检测双氢青蒿素对人HSFs迁移能力的影响。对双氢青蒿素作用24 h后的细胞进行AV-PI双染色,通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况。试剂盒染色后用流式细胞仪检测双氢青蒿素作用24 h后细胞周期的变化。应用Western blot对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β, TGF-β1)、半胱天冬蛋白酶3 (caspase3)、细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)和Ⅰ型胶原的蛋白表达进行定量分析。通过实时定量PCR来检测TGF-β1 m RNA的表达量。结果⑴双氢青蒿素呈时间和剂量依赖性地对人HSFs表现出明显的细胞毒性并能显著抑制人HSFs的增殖。⑵双氢青蒿素可以剂量依赖性地抑制人HSFs的迁移。⑶双氢青蒿素可以剂量依赖性地激活caspase3,从而增加人HSFs的凋亡,还可以通过抑制Cyclin D1表达将人HSFs细胞周期阻滞在G0-G1期。⑷双氢青蒿素可以剂量依赖性地抑制人HSFs内TGF-β1和Ⅰ型胶原的表达。结论双氢青蒿素可以时间和剂量依赖性地在体外抑制人HSFs的增殖并可以抑制其迁移,可以剂量依赖性地激活Caspase3来增加人HSFs的凋亡并可以通过抑制Cyclin D1表达引起人HSFs周期发生G0-G1期阻滞。双氢青蒿素的作用机制与其抑制成纤维细胞内TGF-β1和Ⅰ型胶原的表达有关。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 人增生性瘢痕成纤维细胞 转化生长因子-Β1 Ⅰ型胶原
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类人胶原蛋白疤痕修复硅凝胶(可痕TM)治疗增生性瘢痕的研究 被引量:5
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作者 张春阳 李云飞 +4 位作者 宋静卉 吴华娟 邓丽娜 陈红 李雪莉 《医药论坛杂志》 2019年第3期11-13,共3页
目的评价类人胶原蛋白疤痕修复硅凝胶(可痕^(TM))治疗增生性瘢痕的有效性和安全性。方法选取河南省人民医院门诊符合入选/排除标准的增生性瘢痕患者30例,随机数字表法分为对照组和试验组,对照组采用芭克硅胶软膏,试验组采用类人胶原蛋... 目的评价类人胶原蛋白疤痕修复硅凝胶(可痕^(TM))治疗增生性瘢痕的有效性和安全性。方法选取河南省人民医院门诊符合入选/排除标准的增生性瘢痕患者30例,随机数字表法分为对照组和试验组,对照组采用芭克硅胶软膏,试验组采用类人胶原蛋白疤痕修复硅凝胶(可痕^(TM)),持续应用3月,停止应用产品后3月继续观察效果,整个研究共6月;应用产品后的1月、2月、3月、6月来院随访检查,数码相机拍照,对瘢痕硬度、色泽、柔软度、血管分布进行检测;患者对瘢痕自觉症状进行视觉模拟评分;记录用药期间不良反应和不良事件。结果治疗后瘢痕色泽、柔软度、厚度与治疗前对比,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗前后对照组与试验组之间瘢痕色泽、柔软度、厚度对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论类人胶原蛋白疤痕修复硅凝胶(可痕^(TM))治疗增生性瘢痕有效、安全,且治疗效果与芭克硅胶软膏无差异。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 类人胶原蛋白疤痕修复硅凝胶(可痕TM) 芭克硅胶软膏
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