IFNα-2b治疗323例HBeAg阳性慢性乙型肝炎的效果

目的 探讨IFNα-2b抗病毒治疗乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者的效果。方法回顾性分析2010年1月至2014年1月就诊于南昌大学第二附属医院并接受IFNα-2b治疗的323例HBeAg阳性CHB患者的临床资料,按丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平将其分为3组:ALT<2×ULN(A1组,n=111)、2×ULN≤ALT≤5×ULN(A2组,n=111)以及ALT>5×ULN(A3组,n=101)。观察临床疗效及不良反应,并比较3组间的抗病毒效果。结果 在停药时及停药后第12、24、48、72、96、144、192、240周,323例患者的HBV-DNA阴转率分别为39.9%、40.2%、39.0%、36.2%、34.1%、33.4%、31.3%、30.7%、30.7%;HBsAg阴转率分别为6.2%、6.2%、6.2%、5.9%、5.9%、5.9%、5.6%、5.6%、5.6%;HBeAg血清学转换率分别为28.2%、31.0%、32.8%、34.4%、33.7%、33.1%、32.8%、32.5%、31.6%。在各随访时间点,3组患者的HBV-DNA阴转率和HBeAg血清学转换率比较,A3组显著高于A2组,A2组显著高于A1组(P<0.05);3组患者的HBsAg阴转率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。323例患者均出现发热及类流感样症状,238例(73.7%)出现白细胞及中性粒细胞降低,35例(10.8%)甲状腺功能异常,5例(1.5%)斑秃,1例(0.3%)睡眠障碍,经过密切观察和对症处理后,患者均顺利完成疗程,各指标均基本正常。结论 IFNα-2b治疗HBeAg阳性CHB患者在停药时及停药后随访期间均表现出较好的效果,大多数患者可耐受IFNα-2b的不良反应。IFNα-2b的抗病毒效果可能与ALT水平有关。

PEG-IFNα-2b联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎的疗效及对HBeAg转阴率、免疫功能的影响

目的:分析聚乙二醇干扰素α-2b(PEG-IFNα-2b)联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎的效果及对HBeAg转阴率、免疫功能的影响。方法:选取某院2019年3月—2022年3月收治的慢性乙型肝炎患者88例作为研究对象,依据随机抽签法分成研究组与对照组,每组44例。对照组接受替诺福韦治疗,研究组接受PEG-IFNα-2b联合替诺福韦治疗,比较2组HBeAg转阴率、HBsAg转阴率、治疗前后肝功能指标[谷氨酰转肽酶(GGT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)]、免疫功能指标(CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、C3、C4)及血清炎性因子[视黄酸受体相关孤核受体(RORγt)、白细胞介素-17(IL-17)、IL-4]水平。结果:研究组HBeAg转阴率、HBsAg转阴率分别为45.45%、13.64%,高于对照组的11.36%、0,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,研究组GGT、AST、ALT、IL-4、IL-17、RORγt分别为(30.42±5.39)U/L、(31.08±6.64)U/L、(29.37±4.68)U/L、(1.32±0.42)pg/mL、(0.64±0.19)pg/mL、(0.80±0.30),均低于对照组的(56.93±8.75)U/L、(38.72±5.83)U/L、(49.61±6.42)U/L、(3.91±1.14)pg/ml、(3.01±0.87)pg/ml、(1.61±0.36),差异有统计学意义(P<0.05)。研究组CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、C3、C4分别为(66.81±8.55)%、(1.53±0.16)、(1.22±0.01)g/L、(0.42±0.07)g/L,均高于对照组的(61.03±8.49)%、(1.26±0.2)、(0.73±0.09)g/L、(0.22±0.06)g/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PEG-IFNα-2b联合替诺福韦治疗慢性乙型肝炎效果明显,可提高HBeAg、HBsAg转阴率,改善肝功能,增强免疫功能,抑制炎性反应。

伊马替尼联合重组人干扰素α-2b治疗加速期慢性髓性白血病患者的疗效及对血清MMP-2、SALL4 mRNA和AGP水平的影响

目的探讨伊马替尼联合重组人干扰素α-2b(IFNα-2b)治疗加速期慢性髓性白血病(CML)患者的疗效及对血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、婆罗双树样基因4(SALL4)mRNA和α1-酸性糖蛋白(AGP)水平的影响。方法招募2017年1月至2021年1月陕西省人民医院收治的加速期CML住院患者90例。采用随机数字表法将其分为观察组(采用伊马替尼联合IFNα-2b治疗,45例)和对照组(采用伊马替尼治疗,45例)。比较两组临床疗效和血清MMP-2、SALL4 mRNA和AGP水平以及不良反应发生情况。结果观察组治疗后获完全血液学缓解(CHR)的人数比例较对照组更高,整体疗效更优,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前血清白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E 2(PGE 2)、碱性磷酸酶(ALP)、MMP-2、SALL4 mRNA、AGP水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后IL-6、PGE 2、ALP、MMP-2、SALL4 mRNA、AGP水平均较治疗前显著降低(P<0.05),且观察组治疗后水平较对照组更低,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组血液学不良反应发生率高于对照组[22.22%(10/45)vs 6.67%(3/45);χ2=4.406,P=0.039],两组非血液学不良反应发生率比较差异无统计学意义[6.67%(3/45)vs 4.44%(2/45);χ2=0.000,P=1.000],总不良反应发生率比较差异有统计学意义[28.89%(13/45)vs 11.11%(5/45);χ2=4.444,P=0.035]。结论伊马替尼联合IFNα-2b较单用伊马替尼治疗加速期CML疗效更佳,可降低患者血清MMP-2、SALL4 mRNA和AGP水平,但可能会增加患者血液学不良反应的发生风险。

HIV-lenv,gag与IFNα-2b融合蛋白的细胞免疫

目的 将编码艾滋病病毒 (HIV -1)外膜蛋白env、核心蛋白gag与编码干扰素 (IFNα -2b)基因分别插入pSFJ16与pSFJ3 8真核表达载体 ,观察表达产物诱导机体产生细胞免疫的变化规律。方法 利用分子克隆技术构建重组质粒 ,经脂质体转染与野生型痘病毒在Cos -7细胞内同源重组 ,筛选、纯化、获得重组痘苗病毒vJ16env/IFNα -2b和vJ3 8gag/IFNα -2b。免疫小鼠后 ,检测小鼠外周血与脾淋巴细胞对ConA及Lps的反应性 ,用流式细胞仪测定小鼠脾细胞CD4+ ,CD8+ 细胞计数。结果 外周血与脾淋巴细胞对ConA ,Lps的反应性 ,实验组与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。CD4+ 及T淋巴细胞与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。CD8+ T淋巴细胞与对照组比较差异无显著性 ,但呈增高趋势。结论 重组痘苗病毒能诱导小鼠产生较强的细胞免疫。重组痘苗病毒能在体外与HIV -1env和HIV -1gag阳性血清发生特异性反应 ,具有免疫原性和免疫反应性。

IFN α-2b对白血病K562细胞增殖及FAK mRNA表达的影响

目的:研究重组人干扰素(IFN α-2b)对人慢性粒细胞白血病急变期细胞系K562细胞增殖及黏着斑激酶(FAK)mRNA表达的影响。方法:应用MTT法检测IFN α-2K562细胞的抑制率,采用RT-PCR技术检测各IFN α-2b浓度组对K562细胞FAK mRNA表达水平的影响。结果:增加IFN α-2b浓度及延长反应时间,除48 h和72 h外,抑制K562细胞增殖的比率逐渐升高;IFN α-2b作用48 h,浓度1万U/mL对抑制细胞增长的比率最高;随着IFN α-2b浓度增加,K562细胞的FAK mRNA表达增高,其中1万U/mL IFN α-2b实验组FAK mRNA表达水平最高,各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:白血病K562细胞可能存在FAK mRNA异常表达,IFN α-2b可能通过上调正常FAK mRNA的表达水平抑制K562细胞增殖。

人乳头瘤病毒11型E6基因与人IFN-α2b融合基因原核表达质粒的构建与鉴定

目的构建HPV11E6与人IFNα2b融合基因表达载体,为进一步原核表达奠定基础。方法在IFNα2b的起始密码子之前加入ccatggct,同时以编码(GGSGS)3的45个碱基序列取代其终止密码子,将改造后的人IFNα2b基因人工合成,然后将其装入质粒pET32a的NcoⅠ和BamHⅠ酶切位点之间;PCR扩增HPV11E6基因片段。将含有IFNα2b基因片段的质粒pET32a和含有BamHⅠ,EcoRⅠ酶切位点的HPV11E6同时用BamHⅠ,EcoRⅠ酶切,将酶切产物纯化回收后做连接反应,连接产物常规转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,随机挑选阳性克隆并提取质粒酶切鉴定,同时将挑选的阳性克隆菌液送公司测序。结果测序结果表明成功的将HPV11E6和人IFNα2b通过连接肽(GGSGS)3连接并装入pET32a的NcoⅠ和EcoRⅠ酶切位点之间,且基因序列与设计完全一致。结论HPV11E6与人IFNα2b融合基因表达载体的成功构建,为进一步原核表达奠定了基础。

HIV-1gag/IFNα-2b表达产物免疫小鼠的实验研究

为了将艾滋病病毒核心蛋白(gag)与干扰素(IFNα-2b)融合基因表达的融合蛋白作为免疫原免疫小鼠,观察小鼠的体液免疫和细胞免疫应答。将IFNα-2b基因片段插入到gag基因的nt531位点,经脂质体转染与血凝素阴性蚀斑筛选出重组痘苗病毒。经SDS-PAGE和Westexn blot鉴定表达产物。用重组病毒vJ38gag/IFNα-2b免疫小鼠,用ELISA方法检测血清IgG抗体含量,用流式细胞仪测定小鼠脾CD4^+、CD8^+T淋巴细胞计数。结果表明,血清IgG抗体含量逐渐增高,实验组与对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。CD4^+、T淋巴细胞计数与对照组比较差异有显著意义(P<0.05)。结论:重组痘苗病毒vJ38gag/IFNct-2b能增强小鼠的体液免疫和诱导细胞免疫。

重组人IFNα-2b融合表达及纯化工艺研究

为了利用多分子伴侣表达载体在大肠埃希氏菌中融合表达人干扰素（IFNα）-2b，并进行IFNα-2b纯化工艺研究，试验采用人工设计并合成Smt3-IFN（x-2b克隆至自行构建的P32-TrxA载体中，将重组表达质粒P32-TrxA—Smt3-IFNα-2b转化至大肠埃希氏菌（E．coil）BL21（DE3），经IPTG诱导表达、SDS—PAGE分析，在此基础上利用金属螯合层析、SUMO蛋白酶酶切、阴离子交换层析以及凝胶层析建立了IFNot-2b的纯化工艺。结果表明：重组质粒经酶切鉴定及测序证明构建正确；融合蛋白分子质量约为40ku，主要以可溶形式表达，表达量占菌体总蛋白的30％以上；纯化的IFNα-2b分子质量约为17ku，蛋白纯度达到95％以上，利用细胞病变抑制法测得干扰素的效价为1．0×10^8IU／mg。说明成功在大肠埃希氏菌中表达并经过简易工艺纯化了重组蛋白IFNα-2b。

改造IFNα-2b基因3′端提高其在大肠杆菌中表达水平

目的 :对人IFNα_2b基因的 5′端进行改造 ,从翻译水平上调控IFNα_2b基因在大肠杆菌中的表达。方法 :采用PCR方法 ,人工合成寡核苷酸引物 ,对人IFNα_2b基因进行了改造 :去除3′端非编码区 ,并增加原核系统强终止密码子。将改造后的基因片段分别克隆入原核表达载体pBV32 1,在大肠杆菌中进行表达。对表达产物进行活性效价测定。结果 :3′端删除非编码区 ,表达水平比删除前提高 4倍。结论 :IFNα_2b基因的 3′端非编码区对其在原核系统的表达具有抑制作用 ,删除该区可提高表达水平。

人干扰素IFNα-2b在果蝇细胞中的稳定表达

以人干扰素IFNα-2b全长基因的质粒为模板,PCR扩增,PCR产物克隆到表达载体获得重组质粒,经转染和筛选,得到稳定表达的果蝇S2细胞株.经CuSO4诱导表达并对表达产物进行检测,结果显示,在果蝇S2细胞中成功地进行了人干扰素IFNα-2b的蛋白表达,表达产物的大小约为26kD.并且,通过体外的抗病毒活性测定,证明所表达蛋白具有抗病毒活性.该研究为进一步利用该系统表达真核细胞蛋白,研究其结构和功能提供了重要的基础.

静脉联合应用低剂量IL-2和中等剂量IFN_(α-2b)治疗肾透明细胞癌的初步探讨

目的:探讨经静脉应用低剂量IL-2联合中等剂量的IFNα-2b在肾透明细胞癌中的应用价值及安全性。方法:IFNα-2b小剂量递增至1000万U/m2·d～2000万U/m2·d,静脉滴注7～10d,随后IFNα-2b300万U～600万U/m2,皮下注射,每周2次;静滴IFNα-2b期间IL-260～100万U/d,分次静脉推注或滴注,连续5天;以上每1月为一疗程。结果:3例肿瘤完全切除术后应用者生存4月、53月和65月迄今无复发转移;余7例带瘤生存2年以上1例,3年以上5例,5年以上1例,其中完全缓解2例,死亡1例(生存26月);副作用主要有发热、肌肉关节酸痛、食欲减退、轻度WBC下降等。结论:静脉联合应用低剂量IL-2和中等剂量IFNα-2b治疗肾透明细胞癌有效、安全,值得临床进一步研究。

Effect of IFNα-2a on Fas expression and apoptosis rate of peripheral blood cytotoxic T cells in patients with hepatitis B

Interferon(IFN) with antiviral and im-munomodulatory activities is one of the most important therapeutic agents for the treatment of chronic hepatitis. The apoptotic effect of IFN is influenced by cell type and the types of IFN, which suppresses proliferation and induces apoptosis in some cell types while inhibiting apoptosis in others. The aim of this study was to explore the effect of IFNα-2a on Fas expression and the apoptosis rate of peripheral blood cytotoxic T cells (CTLs) in patients with hepatitis B. METHODS:Peripheral blood mononuclear cells were isolated from 26 patients with hepatitis B including 16 patients with chronic hepatitis B and 10 patients with chronic severe hepatitis B. Fas expression and apoptosis rate of CTLs were analyzed with flow cytometry before and after IFNα-2a treatment. RESULTS:Before IFNα-2a treatment, Fas expression and apoptosis rate of CTLs from patients with chronic hepatitis B were significantly higher than those from patients with chronic severe hepatitis B and healthy controls respectively. No significant difference was observed between Fas expression and apoptosis rate of CTLs from patients with chronic severe hepatitis B and healthy controls. After IFNα-2a treatment,Fas expression and apoptosis rate of CTLs from different groups were compared with those before IFNα-2a treatment, showing no significant difference despite alternation of different degree. CONCLUSIONS:Activation induced cell death (AICD) exists in peripheral blood CTLs from patients with hepatitis B. No effect of IFNα-2a exerts on Fas expression and apoptosis rate of Fas in patients with hepatitis B.

Effect of Trastuzumab in Combination with IFN α-2b on HER2 and MRP1 of ACHN

To study the effect of Trastuzumab in combination with IFN α-2b on HER2 and MRP1 of ACHN in vitro, ACHN cell line of RCC was cultured by employing cell culture. The tetrazolium-based colorimetric assay was used to evaluate the growth-inhibiting effect of Trastuzumab with IFN α-2b. SP method was utilized to determine the expression of HER2 and MRP1 of the cells. Our results showed that Trastuzumab had inhibitory effect on the growth of renal tumor cells and reversing effect on the multi-drug-resistance (MDR) in RCC in a time- and dose-dependent manner. Treated with Trastuzumab with or without IFN α-2b, the expression of HER2 and MRP1 genes of RCC was decreased significantly (P<0.05). It was concluded that Trastuzumab with IFN α-2b could inhibit the proliferation of RCC and the expression of HER2 and MRP1 of ACHN and to some extent, reverse the MDR of the tumor cells.

PEG-IFNα-2a治疗HBV基因型B型或C型的疗程和剂量与HBeAg血清转换率相关

我国台湾地区长庚纪念医院肝病研究中心Liaw等进行了一项临床试验，