抗人重组SCF单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定

本研究利用PEX31B作为载体,在大肠杆菌表达出重组人SCF融合蛋白。用该蛋白作为抗原,免疫BALB/c小鼠。通过鼠-鼠杂交瘤技术,成功地获得4株分泌抗人重组SCF单克隆抗体(下称单抗)的杂交瘤细胞系。经检测,它们所分泌的抗体亚类均为IgG1,免疫印迹试验和抗体特异性鉴定证实,4株单抗均能特异性地识别可溶性SCF。抗SCF单抗杂交瘤细胞系的建立,为深入研究SCF的生物学特性、功能以及SCF产品的纯化,提供了有力的工具。

干细胞因子的研究及其应用

人干细胞因子 (hSCF)是新近发现的重要造血细胞因子 ,它是酪氨酸激酶受体c Kit的配体。SCF主要作用于早期造血干细胞、原始造血祖细胞 ,并且诱导这些细胞的存活、增殖和分化。SCF单独使用生物学作用低 ,但它与其它细胞因子具有强的协同作用。在临床Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期研究中 ,SCF和G CSF联合应用 ,与单独使用G CSF比较 ,CD34+ 细胞数增加 2～ 3倍。安进公司采用基因重组技术在大肠杆菌中生产的重组人SCF (r methSCF )商品名为STEMGENTM。SCF临床使用 ,包括体内干细胞扩增治疗 (exvivo)和用于基因治疗的体外培养造血干细胞。SCF与G CSF联合使用刺激扩增外周血干 祖细胞 (PBPC) ,可用于干 祖细胞移植 ,以增加患者所需PBPC的比例 ,减少收集PBPC的次数。本综述主要介绍了人SCF的功能 。

咳嗽变异性哮喘从肝论治的实验研究

目的以敏咳清颗粒、止咳颗粒对体外培养的人胚肺成纤维细胞(lung fibroblast,LFB)产生干细胞因子(stem cellfactor,SCF)与转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)的影响为依据探讨咳嗽变异性哮喘从肝论治的辨证思路。方法把以药测证的方法应用于实验研究,将常规培养LFB分为空白组、模型组、对照组、敏咳清高浓度组、敏咳清低浓度组、止咳颗粒高浓度组、止咳颗粒低浓度组,加入肝素刺激后分别加入对应的含药血清,采用ELISA法检测各组对LFB表达SCF及TGF-β1的影响。结果 敏咳清颗粒高、低剂量组与止咳颗粒高、低剂量组分别相比较有显著性差异(P<0.05),且敏咳清颗粒可以剂量依赖地抑制LFB产生SCF、TGF-β1。结论 敏咳清颗粒与止咳颗粒相比,能显著降低LFB表达SCF及TGF-β1,揭示了咳嗽变异性哮喘从肝论治的部分分子生物学基础。

抗苗勒氏管激素(AMH)对离体人卵巢黄素化颗粒细胞干细胞因子(SCF)表达负调控的研究

目的:研究人卵巢黄素化颗粒细胞中抗苗勒氏管激素(AMH)对干细胞因子(SCF)表达的影响。方法:收集15例年龄<35岁因男方因素行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者的卵巢颗粒细胞,经原代培养,加入不同浓度基因重组人抗苗勒氏管激素(rhAMH),分别于培养的第4日与第6日采用实时定量PCR(RT-PCR)和免疫组织化学检测空白对照组与各实验组SCFmRNA及蛋白的表达。结果:RT-PCR和免疫组织化学均证实人卵巢黄素化颗粒细胞在不同浓度rhAMH干预后,SCFmRNA及蛋白的表达显著减少(P<0.05),其中15 ng/ml rhAMH抑制作用最明显;实验组第4日与第6日颗粒细胞表达SCFmRNA及蛋白无明显差异(P>0.05)。结论:AMH可有效抑制人卵巢黄素化颗粒细胞SCF mRNA及蛋白的表达。