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Directed Evolution of Human Cu,Zn-SOD Under Artificial Oxidant Pressures
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作者 GOU Xiao jun LI Chun lei +5 位作者 KONG Xiang duo ZHU Shi zhen ZHANG Hong ying WANG Xiao ping ZHANG Jin LIU Tian yun 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2002年第3期294-298,共5页
Cu,Zn SOD is a highly conserved enzyme and the controversy about its evolutionary possibility in the near future has been lively. In order to further our understanding of the future fate of human Cu,Zn SOD, we adopt... Cu,Zn SOD is a highly conserved enzyme and the controversy about its evolutionary possibility in the near future has been lively. In order to further our understanding of the future fate of human Cu,Zn SOD, we adopted a strategy relating to the directed evolution to study how the mutants of human Cu,Zn SOD respond to different oxidative stress. After five rounds of screening, we found a mutant that can survive under harsh pressures and DNA sequencing proves that it shows a mutation responsible for the phenomenon. However, under natural pressure, our screening comes to nothing. Then we may draw the following conclusions: the evolution of biological macromolecules in some respect depends on their surroundings and if they are too familiar with a certain environment, they may embody evolutionary inertia. 展开更多
关键词 human Cu Zn sod Directed evolution SCREENING
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化学渗透法破碎基因重组E.coli提取重组人SOD包含体和复性 被引量:5
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作者 刘建荣 王慧 +1 位作者 赵晓瑜 静天玉 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第1期96-102,共7页
以化学渗透法破碎重组大肠杆菌细胞释放重组人超氧化物歧化酶(rhSOD)包含体并对其复性。选择四种化学试剂(Triton X-100、EDTA、NaOH和SDS)对rhSOD重组大肠杆菌细胞进行破碎实验,以SDS-PAGE检测破菌效果,结果0.5%Triton X-100和10 mmol&... 以化学渗透法破碎重组大肠杆菌细胞释放重组人超氧化物歧化酶(rhSOD)包含体并对其复性。选择四种化学试剂(Triton X-100、EDTA、NaOH和SDS)对rhSOD重组大肠杆菌细胞进行破碎实验,以SDS-PAGE检测破菌效果,结果0.5%Triton X-100和10 mmol·L-1 EDTA可以较好地破碎重组大肠杆菌细胞,所提取的包含体溶解液纯度与超声法相近,可达65%左右。采用透析法复性包含体,尿素终浓度0.1 mol·L-1时rhSOD包含体复性效果优于1.0 mol·L-1,比活分别为:Triton法2800 U·mg-1,EDTA法3200 U·mg-1,超声法2800 U·mg-1,复性rhSOD纯度达85%左右。本研究建立的用于破碎重组大肠杆菌释放rhSOD包含体的Triton法和EDTA法,包含体复性后比活等于或高于超声法,与机械破菌法相比,简便有效,成本低廉,无需特殊破菌设备,为放大规模破菌提取重组大肠杆菌包含体和复性奠定了实验基础。 展开更多
关键词 重组人超氧化物歧化酶 化学渗透 细胞破碎 包含体 复性
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SOD对4℃保存人红细胞损伤的防护作用研究 被引量:4
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作者 马恩普 刘秀珍 +5 位作者 韩颖 任素萍 刘安 靳鹏 吕星 吴祖泽 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期80-83,共4页
目的 :探讨SOD对延时保存红细胞损伤防护作用的机理。方法 :取义务献血人员静脉血 ,置 4℃冰箱保存。保存前后不同时间用标准方法分别检查各项指标 ,用生物荧光素标记红细胞 ,测定 2 4h活存率。实验分 3组 :ACD和 或GMA、抗氧化剂 (SOD... 目的 :探讨SOD对延时保存红细胞损伤防护作用的机理。方法 :取义务献血人员静脉血 ,置 4℃冰箱保存。保存前后不同时间用标准方法分别检查各项指标 ,用生物荧光素标记红细胞 ,测定 2 4h活存率。实验分 3组 :ACD和 或GMA、抗氧化剂 (SOD)组。结果 :SOD组保存 75d ,无氧糖酵解率维持在保存前的 86 .2 % ,ATP为 5 6 .4% ,PK为6 4.3% ,明显高于GMA或ACD组。保存 75d整体回输后 2 4h活存率为 86 .1% ,与GMA保存 42d(89.1% )结果接近。结论 :用抗氧化剂保养液在 4℃条件下保存人血红细胞从 42d延长到 75d ,红细胞无氧糖酵解率、ATP、PK和整体回输后 2 4h活存率等均与 42d保存方相符 。 展开更多
关键词 血液保存 人红细胞损伤 超氧化物歧化酶 sod 低温保存 防护作用
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重组人EC-SOD包涵体的稀释复性及重折叠后蛋白的纯化 被引量:3
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作者 朱希强 袁勤生 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期252-255,共4页
目的确定重组人ECSOD包涵体体外稀释复性和复性后蛋白纯化的适宜方法。方法通过对pH、温度、包涵体蛋白浓度、尿素和精氨酸浓度及氧化还原对比率的定性定量分析,研究重组人ECSOD包涵体体外稀释复性的基本条件。采用金属离子亲和柱(IMAC... 目的确定重组人ECSOD包涵体体外稀释复性和复性后蛋白纯化的适宜方法。方法通过对pH、温度、包涵体蛋白浓度、尿素和精氨酸浓度及氧化还原对比率的定性定量分析,研究重组人ECSOD包涵体体外稀释复性的基本条件。采用金属离子亲和柱(IMAC)和肝素亲和柱(Heparinsepharose)对复性蛋白进行纯化,比较纯化效率的差异。结果最佳复性条件为pH8.5,尿素浓度为1.5molL,精氨酸浓度大于0.3molL,GSH∶GSSG=4∶1;复性温度及包涵体蛋白终浓度越高,复性效率越低。IMAC和Heparinsepharose亲和柱均可用来纯化复性蛋白溶液,但Heparinsepharose纯化效率较高。结论确定了重组人ECSOD包涵体体外稀释复性的最佳条件及复性后蛋白纯化的方法。 展开更多
关键词 重组人 稀释 叠后 定性定量分析 蛋白纯化 纯化效率 包涵体蛋白 蛋白浓度 氧化还原 基本条件 金属离子 尿素浓度 复性效率 蛋白溶液 IMAC 最佳条件 酸浓度 体外 对比率 亲和 GSH 温度 肝素
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人Cu,Zn-SOD基因在毕赤酵母中的表达及稳定性 被引量:3
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作者 迟春萍 隋红 +9 位作者 李雨桐 薛向光 王志武 牛灵 刘畅 王艳芳 吴晓娟 郭立君 盛军 李校堃 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期374-377,共4页
目的构建人Cu,Zn-SOD基因的真核表达载体,转化毕赤酵母,并检测表达产物的稳定性。方法根据酵母密码子偏好性,合成人Cu,Zn-SOD基因,克隆至真核表达载体pPIC9k中,转化毕赤酵母GS115。甲醇进行诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产... 目的构建人Cu,Zn-SOD基因的真核表达载体,转化毕赤酵母,并检测表达产物的稳定性。方法根据酵母密码子偏好性,合成人Cu,Zn-SOD基因,克隆至真核表达载体pPIC9k中,转化毕赤酵母GS115。甲醇进行诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。优化表达条件,并检测粗酶液的稳定性。结果经SDS-PAGE和Western blot检测,表达的目的蛋白相对分子质量为18000左右;最佳表达条件为pH6.0,甲醇浓度1.5%,持续培养96h;目的蛋白占分泌蛋白总量的27%,最高表达量为91mg/L;最佳条件下培养液上清的酶活性最高达334U/ml,粗酶对氯仿和乙醇稳定,对H2O2不稳定,对温度有一定的耐受性,pH在6和8时较稳定。结论在毕赤酵母GS115中成功表达了具备酶活性的人Cu,Zn-SOD基因。 展开更多
关键词 人Cu Zn-sod基因 真核表达 毕赤酵母 稳定性
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人SOD基因的克隆与原核表达 被引量:3
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作者 宋凯 宋继梅 《动物医学进展》 CSCD 2006年第12期91-94,共4页
超氧化物歧化酶(SOD)是机体内超氧自由基的天然清除剂,在抗衰老、抗辐射、抗逆境,消炎、抑制肿瘤和癌症,以及自身免疫疾病的治疗方面有很重要的作用。我国目前主要从血液中提取SOD,有关重组人SOD的研究较少。文章通过RT-PCR方法克隆得到... 超氧化物歧化酶(SOD)是机体内超氧自由基的天然清除剂,在抗衰老、抗辐射、抗逆境,消炎、抑制肿瘤和癌症,以及自身免疫疾病的治疗方面有很重要的作用。我国目前主要从血液中提取SOD,有关重组人SOD的研究较少。文章通过RT-PCR方法克隆得到人SOD基因,并成功构建其原核表达载体pET-16b-SOD,为通过基因重组技术生产人SOD创造了条件。 展开更多
关键词 人超氧化物歧化酶 基因克隆 原核表达
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重组人铜锌SOD的部分理化性质研究 被引量:4
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作者 高俊杰 夏文超 袁勤生 《药物生物技术》 CAS CSCD 2003年第1期43-47,共5页
对rhCu,Zn-SOD进行SDS-PAGE测定该SOD的亚基分子质量为19 ku,该酶对热稳定,在pH5左右的活力最高,对乙腈、EDTA等抑制剂敏感,但是对SDS、尿素等变性剂表现出很好的稳定性。对该酶进行光谱分析表明,在265nm和673nm具有吸收峰,原子吸收光... 对rhCu,Zn-SOD进行SDS-PAGE测定该SOD的亚基分子质量为19 ku,该酶对热稳定,在pH5左右的活力最高,对乙腈、EDTA等抑制剂敏感,但是对SDS、尿素等变性剂表现出很好的稳定性。对该酶进行光谱分析表明,在265nm和673nm具有吸收峰,原子吸收光谱分析表明每分子SOD含有2个铜原子和2个锌原子,ESR表明铜原子价态为2价。可认为该重组酶与天然Cu,Zn-SOD在理化性质和结构上基本相同。 展开更多
关键词 重组人铜锌sod 理化性质 铜锌超氧化物歧化酶
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左卡尼汀联合重组人促红素对血液透析患者MDA、SOD、GSH-Px指标的影响 被引量:4
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作者 方蔷 张裕 +1 位作者 姜东升 陈艳 《国际医药卫生导报》 2020年第20期3052-3055,共4页
目的分析血液透析患者接受左卡尼汀与重组人促红素联合干预对其氧化应激等指标的影响及临床疗效。方法借助数字双盲法将2017年10月至2019年11月本院收治的50例血液透析患者分为对照组与研究组,各25例,分别给予重组人促红素治疗、左卡尼... 目的分析血液透析患者接受左卡尼汀与重组人促红素联合干预对其氧化应激等指标的影响及临床疗效。方法借助数字双盲法将2017年10月至2019年11月本院收治的50例血液透析患者分为对照组与研究组,各25例,分别给予重组人促红素治疗、左卡尼汀与重组人促红素联合治疗,对比治疗前后氧化应激指标、贫血、铁代谢指标变化情况及临床疗效。结果治疗前,两组氧化应激指标差异无统计学意义(均P>0.05);治疗后,研究组SOD、GSH-Px高于对照组(均P<0.05),而MDA则低于对照组(P<0.05)。治疗前,两组贫血、铁代谢指标水平差异无统计学意义(均P>0.05);治疗后,研究组贫血、铁代谢指标水平均高于对照组(均P<0.05);研究组临床治疗效果高于对照组(P<0.05)。结论血液透析患者使用左卡尼汀与重组人促红素联合治疗,可有效调整其氧化应激指标,改善贫血状况,两种药物联合治疗效果确切,该模式在临床上应加大推广应用力度。 展开更多
关键词 血液透析 左卡尼汀 重组人促红素 MDA sod GSH-PX
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高效hCu,Zn-SOD-PTD融合蛋白的表达及其穿膜功能的研究 被引量:3
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作者 王晓勋 杞少华 +1 位作者 李瑞明 梁清乐 《分子诊断与治疗杂志》 2016年第2期88-93,共6页
目的探讨h Cu,Zn-SOD-PTD融合蛋白的表达及其穿膜功能。方法首先,人工设计合成蛋白转导域序列(protein transduction domain,PTD),以人胚肝组织的总RNA为模板,逆转录扩增得人铜锌超氧化物歧化酶全长c DNA序列。其次,将此序列及人工合成... 目的探讨h Cu,Zn-SOD-PTD融合蛋白的表达及其穿膜功能。方法首先,人工设计合成蛋白转导域序列(protein transduction domain,PTD),以人胚肝组织的总RNA为模板,逆转录扩增得人铜锌超氧化物歧化酶全长c DNA序列。其次,将此序列及人工合成PTD序列定向插入p ET16b载体;测序鉴定后,将构建成功的重组载体导入E.coli BL21菌株,异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,经镍柱纯化,洗脱液经SDS-PAGE检测。最后,将纯化产物与食管癌细胞(EC9706)共孵育,用激光共聚焦和流式细胞仪的方法检测蛋白穿膜能力及活性。结果测序结果与人铜锌超氧化物歧化酶全长c DNA序列相符;SDS-PAGE结果出现18.6 kd和20 kd的目的条带;激光共聚焦和流式细胞仪的方法显示蛋白可穿膜且保持活性。结论本实验成功构建了PET16b/h Cu,Zn-SOD-PTD原核表达质粒,可在大肠杆菌中稳定表达融合蛋白,融合蛋白具有穿膜且保持活性。 展开更多
关键词 蛋白转导域 人铜锌超氧化物歧化酶 生物膜 原核表达载体 内化作用
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健康成人外周血细胞Cu/Zn SOD的放免分析 被引量:2
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作者 王洛夫 赵明敏 +4 位作者 葛敏 曹炯明 程光亮 陶荣亚 傅承彬 《蚌埠医学院学报》 CAS 1990年第4期219-222,共4页
本文报道健康成人外周血细胞成分中Cu/Zn SOD的放免分析结果,红细胞Cu/Zn SOD定量为37.88±9.60ng/10~6。淋巴细胞和多形核白细胞Cu/Zn SOD,浓度分别为335.00±120.50/及189.43±139.67/10~6细胞。淋巴细胞Cu/Zn SOD量>... 本文报道健康成人外周血细胞成分中Cu/Zn SOD的放免分析结果,红细胞Cu/Zn SOD定量为37.88±9.60ng/10~6。淋巴细胞和多形核白细胞Cu/Zn SOD,浓度分别为335.00±120.50/及189.43±139.67/10~6细胞。淋巴细胞Cu/Zn SOD量>多形核白细胞,此结果同其他作者研究正常人外周血淋巴细胞SOD-1活性>多形核白细胞相符合,表明血细胞中SOD-1活性与其克分子数相关。本文还就红细胞,淋巴细胞及多形核白细胞SOD-1的生物学特性及其在某些疾病过程中的异常变化,作了简要论述。 展开更多
关键词 外周血细胞 CU/ZN sod 放免分析
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赤栀黄合剂对重症肝炎患者全血SOD活性的影响 被引量:1
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作者 李为 戴寿芝 +3 位作者 高乐 刘娅 黄辉钊 付静芬 《宁夏医科大学学报》 1992年第4期4-7,共4页
用简易邻苯三酚自氧化法测定了33例重症肝炎患者服用赤栀黄合剂前后全血SOD活性。结果:1.用药前亚急性重症肝炎患者全血SOD活性(1029.11±128.25u/gHb)明显低于健康人(1590.09±30.45u/gHb)P<0.02;2.用药后各型重症肝炎患者... 用简易邻苯三酚自氧化法测定了33例重症肝炎患者服用赤栀黄合剂前后全血SOD活性。结果:1.用药前亚急性重症肝炎患者全血SOD活性(1029.11±128.25u/gHb)明显低于健康人(1590.09±30.45u/gHb)P<0.02;2.用药后各型重症肝炎患者全血SOD活性逐渐上升,临床治愈组上升最为显著,与服药前相比有极显著性统计学意义,P<0.01。提示赤栀黄合剂有提高SOD活性,抗O 对肝细胞损伤的作用。 展开更多
关键词 重症肝炎 病毒性 赤栀黄合剂 超氧化物岐化酶 (sod)
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锌对3-吗啉-斯得酮亚胺(SIN-1)诱导的人晶状体上皮细胞Cu/Zn-SOD表达及活性的影响 被引量:3
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作者 贾义 宋萍萍 +1 位作者 周静 钟乃凤 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第1期24-27,共4页
目的研究补锌和缺锌条件下3-吗啉-斯得酮亚胺(SIN-1)对人晶状体上皮细胞铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)表达及活性的影响。方法将培养的SRA01/04细胞系分为6组:对照组、SIN-1处理组、补锌组、补锌联合SIN-1处理组、缺锌组和缺锌联合SIN-... 目的研究补锌和缺锌条件下3-吗啉-斯得酮亚胺(SIN-1)对人晶状体上皮细胞铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)表达及活性的影响。方法将培养的SRA01/04细胞系分为6组:对照组、SIN-1处理组、补锌组、补锌联合SIN-1处理组、缺锌组和缺锌联合SIN-1处理组。采用MTT法检测细胞存活率,Western blotting和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒分别检测Cu/Zn-SOD蛋白表达和活性水平的变化。结果我们选择对细胞存活率无显著影响的50μmol·L^(-1)ZnSO_4和1μmol·L^(-1)N,N,N,N-四-(2-吡啶基甲基)乙二胺作为补锌和缺锌的条件,选择对细胞存活率有显著影响的500μmol·L^(-1)SIN-1作为细胞受损的条件。在此条件下对照组、SIN-1处理组、补锌组、补锌联合SIN-1处理组、缺锌组和缺锌联合SIN-1处理组的细胞存活率分别为(100.0±1.4)%、(84.7±1.8)%、(101.2±1.6)%、(95.5±1.9)%、(100.9±2.3)%和(75.3±1.2)%,与对照组相比,SIN-1处理组和缺锌联合SIN-1处理组的细胞存活率均显著下降(均为P<0.05),与SIN-1处理组相比,补锌联合SIN-1处理组的细胞存活率显著升高(P<0.05),缺锌联合SIN-1处理组的细胞存活率则进一步下降(P<0.05)。各组的Cu/Zn-SOD蛋白相对表达量分别为1.005±0.007、0.991±0.015、1.044±0.008、0.945±0.007、1.278±0.011和0.850±0.057,Cu/Zn-SOD活性分别为(1.00±0.03)U、(0.85±0.05)U、(1.69±0.04)U、(1.35±0.05)U、(1.52±0.04)U和(1.09±0.03)U。与对照组相比,补锌组和缺锌组Cu/Zn-SOD蛋白表达量和活性均显著增加(均为P<0.05)。分别与补锌组或缺锌组相比,补锌联合SIN-1处理组和缺锌联合SIN-1处理组的Cu/Zn-SOD蛋白表达水平和活性均显著下降(均为P<0.05)。结论补锌可以通过上调Cu/Zn-SOD的表达水平和活性,保护人晶状体上皮细胞抵抗由SIN-1造成的损伤,可能对白内障的形成有抑制作用。 展开更多
关键词 人晶状体上皮细胞 铜锌超氧化物歧化酶
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人白介素-10基因转染对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中NO、SOD、MDA、GSH-Px的影响 被引量:5
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作者 董博 张一 +6 位作者 王强 杨常春 李璐 王士雷 宣海星 林其谁 周岱 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期544-548,共5页
目的观察人白介素-10(IL-10)基因转染对局灶脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物(GSH-Px)的影响,探讨其缺血脑保护的作用机制。方法实验分正常对照组、缺血对照组、人IL-10... 目的观察人白介素-10(IL-10)基因转染对局灶脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物(GSH-Px)的影响,探讨其缺血脑保护的作用机制。方法实验分正常对照组、缺血对照组、人IL-10基因转染组和空质粒组,采用Longa法建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,采用立体定向脑室内注射的方式进行转染,然后分别用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测其转染效果,氯化三苯四氮唑(TTC)染色测定脑梗死体积,Longa 5分制进行神经行为学评分,同时按照试剂盒说明分别检测脑组织中NO、SOD、MDA、GSH-Px的含量。结果(1)人IL-10基因能有效整合到大鼠脑组织中并能高效分泌人IL-10,同时人IL-10基因转染能减少脑梗死体积和降低神经行为学评分;(2)正常对照组、缺血对照组、空质粒组和人IL-10基因转染组SOD的含量分别为214.28±13.73、170.69±12.26、175.20±13.76和195.77±13.20U/mgprot。GSH-Px的含量分别为25.73±1.72、19.91±1.81、19.32±1.37和22.70±2.22U/mgprot。与正常对照组相比,缺血对照组、空质粒组和人IL-10基因转染组SOD和GSH-Px的含量明显下降(P(0.01)。人IL-10基因转染组SOD和GSH-Px的含量则较缺血对照组、空质粒组明显升高(P(0.01)。缺血对照组和空质粒组之间无显著差异(P>0.05)。(3)正常对照组、缺血对照组、空质粒组和人IL-10基因转染组MDA的含量分别为6.29±0.33、8.75±0.44、8.66±0.51和7.70±0.31nmol/mgprot。NO的含量分别为1.07±0.11、1.87±0.18、1.93±0.33和1.44±0.10μmol/gprot。与正常对照组相比,缺血对照组、空质粒组和人IL-10基因转染组MDA和NO的含量明显升高(P(0.01)。人IL-10基因转染组MDA和NO的含量则较缺血对照组、空质粒组显著下降(P(0.01)。缺血对照组和空质粒组之间无显著差异(P>0.05)。结论人IL-10基因转染能降低大鼠局灶脑缺血再灌注损伤脑组织中MDA和NO的含量,同时能提升SOD和GSH-Px的含量,可能是其发挥缺血脑保护作用的机制之一。 展开更多
关键词 人白介素-10 SA脂质体 基因转染 脑缺血再灌注损伤 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶 丙二醛 一氧化氮
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重组人铜锌SOD在脱水过程中的二级结构变化及保护剂的作用 被引量:6
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作者 葛宇 刘玲 +2 位作者 高剑英 高俊杰 袁勤生 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期156-161,共6页
用衰减全反射(ATR)傅立叶变换红外光谱技术研究了重组人铜锌SOD(rhCu,Zn-SOD)在脱水过程中的二级结构变化及保护剂的作用。结果显示,在脱水过程中,蛋白质结构发生了重排,无论是真空干燥还是冷冻干燥,子峰峰位都发生偏移,α-螺旋结构消失... 用衰减全反射(ATR)傅立叶变换红外光谱技术研究了重组人铜锌SOD(rhCu,Zn-SOD)在脱水过程中的二级结构变化及保护剂的作用。结果显示,在脱水过程中,蛋白质结构发生了重排,无论是真空干燥还是冷冻干燥,子峰峰位都发生偏移,α-螺旋结构消失,产生无规卷曲结构。糖和硼酸盐能够有效地维持酶的天然构象,其中海藻糖对冻干过程中rhCu,Zn-SOD的α-螺旋结构维持率为93%。 展开更多
关键词 傅立叶红外光谱 蛋白质 重组人铜锌S0D 二级结构 保护剂 脱水过程 α—螺旋结构
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SOD模拟化合物对人体口腔颊黏膜细胞DNA的损伤作用
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作者 吴连锋 刘英帅 +3 位作者 鲁志松 王丽 丁书茂 杨旭 《公共卫生与预防医学》 2004年第5期18-20,共3页
目的 探讨 SOD模拟化合物 (m im ics of SOD,MSOD)〔 Mn(EDTB)〕(AC)作为抗癌药物应用于临床的可行性。方法 以人体口腔颊黏膜细胞为材料 ,用彗星实验 ,通过观察尾距和尾部 DNA百分率这两项指标的变化情况检测染毒后口腔颊黏膜细胞 DN... 目的 探讨 SOD模拟化合物 (m im ics of SOD,MSOD)〔 Mn(EDTB)〕(AC)作为抗癌药物应用于临床的可行性。方法 以人体口腔颊黏膜细胞为材料 ,用彗星实验 ,通过观察尾距和尾部 DNA百分率这两项指标的变化情况检测染毒后口腔颊黏膜细胞 DNA的损伤情况。结果 检测结果表明 2 0、4 0、6 0、80 μg/ m lMSOD处理组与阴性对照组有极显著差异 (P<0 .0 1)。结论 该化合物对人体口腔颊黏膜细胞 DNA有较明显的损伤作用 ,对于它作为新的抗癌药物应用于临床应持慎重态度。 展开更多
关键词 sod模拟化合物 口腔颊黏膜细胞 DNA损伤 超氧化物歧化酶 抗癌药 口腔颊黏膜病
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白血病患者外周血细胞Cu、Zn-SOD含量变化的观察
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作者 王洛夫 赵明敏 +3 位作者 葛敏 陶荣亚 王俊和 高学熙 《安徽医科大学学报》 CAS 1993年第3期174-176,共3页
本文报告50例健康成人。32例白血病患者血RBC、LC及GC、Cu、Zn-SOD放免分析结果。健康成人血LC、Cu、Zn-SOD含量明显>GC,此与文献报道正常人LC、Cu、Zn-SOD活性>GC相一致。32例白血病患者血RBC、Cu、Zn-SOD均明显降低(P<0.05)... 本文报告50例健康成人。32例白血病患者血RBC、LC及GC、Cu、Zn-SOD放免分析结果。健康成人血LC、Cu、Zn-SOD含量明显>GC,此与文献报道正常人LC、Cu、Zn-SOD活性>GC相一致。32例白血病患者血RBC、Cu、Zn-SOD均明显降低(P<0.05),反映RBC清除胞内O(?)和维护胞膜结构完整性的功能减弱。其中53.13%白血病患者LC、Cu、Zn-SOD呈非常显著性增高(P<0.002),56.25%病人血LC、Cu、Zn-SOD水平未见明显升高。本文结果揭示淋、粒细胞白血病血细胞中Cu、Zn-SOD出现异常改变,O(?)随白血病细胞反应而产生增多,导致血细胞内Cu、Zn-SOD与O(?)平衡失调,从而自由基可损伤SOD基因表达和调节功能,表明Cu、Zn-SOD,O(?)与白血病的发生,发展有一定的内在联系。预测在抗白血病治疗中辅以SOD治疗,则将有助于控制血液肿瘤的发展。 展开更多
关键词 白血病 血红细胞 淋巴细胞 粒细胞
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脑血管疾病患者外周红细胞及其胞膜Cu/ZnSOD水平变化的观察
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作者 赵明敏 葛敏 +1 位作者 王洛夫 吴怀志 《蚌埠医学院学报》 CAS 1991年第3期153-156,共4页
本文报道50名健康人及33例脑血管疾病患者外周红细胞及其胞膜铜锌超氧化物歧化酶Cu/Zn SOD放免测定值。结果表明94%患者红细胞胞液Cu/Zn SOD呈极显著性降低(P<0.001),提示缺血性损伤病理过程中红细胞内超氧阴离子自由基(O(_2^-))产... 本文报道50名健康人及33例脑血管疾病患者外周红细胞及其胞膜铜锌超氧化物歧化酶Cu/Zn SOD放免测定值。结果表明94%患者红细胞胞液Cu/Zn SOD呈极显著性降低(P<0.001),提示缺血性损伤病理过程中红细胞内超氧阴离子自由基(O(_2^-))产生异常,胞外(O(_2^-))可通过RBC膜阴离子通道进入胞内增多,从而引起胞内SOD歧化作用而耗损增加。本文测定18例脑血栓形成患者红细胞膜Cu/ZnSOD含量未见明显变化(0.2>P>0.1),可能由于细胞间隙胞外SOD(EC-SOD)及RBC膜本身具有防御氧自由基作用有关,从而保护了RBC膜Cu/ZnSOD于平衡状态。本文还就其作用机理作了简要论述。 展开更多
关键词 脑血管病 超氧物歧化酶
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不同水平糖浓度对人脐静脉内皮细胞SOD、NOS及NO的影响 被引量:1
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作者 蒋玲 金可可 +1 位作者 郭君 王卫 《温州医学院学报》 CAS 2007年第1期24-25,共2页
目的:观察体外培养条件下,不同水平的糖浓度对血管内皮细胞一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV304,分对照组、高糖组和糖浓度递增组,使用分光光度比色法检测NOS、NO和SO... 目的:观察体外培养条件下,不同水平的糖浓度对血管内皮细胞一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞株ECV304,分对照组、高糖组和糖浓度递增组,使用分光光度比色法检测NOS、NO和SOD的吸光度,计算出活力或含量。结果:与对照组比较,高糖组NOS活力和NO含量增加,SOD活力下降;递增组NOS活力、NO含量增加及SOD活力下降幅度均较高糖组更加明显。结论:递增性高糖较持续的高糖对内皮细胞SOD的抑制作用和NOS、NO的诱导作用明显增强。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 葡萄糖 一氧化氮合酶 超氧化物歧化酶 一氧化氮
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抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体的制备与鉴定
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作者 蒋小梅 廖婷婷 +2 位作者 章崇杰 张晨阳 魏大鹏 《西部医学》 2010年第4期603-606,609,共5页
目的制备抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以人Cu/Zn SOD作为免疫原免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、斑点ELISA、... 目的制备抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定。方法以人Cu/Zn SOD作为免疫原免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立可稳定分泌抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用ELISA、斑点ELISA、Western Blot、免疫组化鉴定单克隆抗体的特性,并测定其效价、亚型及相对亲和力。结果筛选到一株可稳定分泌抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体的杂交瘤细胞株4H10H4B12,亚型鉴定重链为IgG2a,轻链为kappa链。ELISA法测定腹水效价为1∶256,000,抗体相对亲和力为1.101×109mol/L。斑点ELISA、Western Blot显示抗体能特异识别免疫原、人肝细胞株HL-7702和人红细胞中的天然Cu/Zn SOD;不与鼠Cu/Zn SOD和人Mn SOD发生交叉反应。免疫组化进一步显示了人Cu/Zn SOD均匀分布于细胞的胞浆中。结论成功制备了抗人Cu/Zn SOD单克隆抗体,为进一步研究其与腹主动脉瘤的关系奠定了基础。 展开更多
关键词 人Cu/Zn sod 单克隆抗体 腹主动脉瘤
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Antioxidant Effects of Oats Avenanthramides on Human Serum 被引量:4
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作者 LIU Sen YANG Nan +4 位作者 HOU Zhao-hua YAO Yang Lü Li ZHOU Xian-rong REN Gui-xing 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2011年第8期1301-1305,共5页
The antioxidant ability of capsules containing oats avenanthramides on human body was evaluated in present study.Healthy people were randomized to supplementation with oats-derived avenanthramides capsules or placebo ... The antioxidant ability of capsules containing oats avenanthramides on human body was evaluated in present study.Healthy people were randomized to supplementation with oats-derived avenanthramides capsules or placebo for 1 mon.Plasma lipid peroxides and antioxidant status were measured.For 8 capsules (containing 3.12 mg avenanthramides) groups,the levels of serum superoxide dismutase (SOD) and reduced glutathione hormone (GSH) were significantly increased by 8.4 and 17.9%,respectively (P0.05),and malondialdehyde (MDA) level significantly decreased by 28.1%.The total cholesterol (TC),triglyceride (TG),and low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) levels were lowered by 11.1,28.1,and 15.1%,respectively (P0.05).The high density blood lipoprotein cholesterol (HDL-C) levels in the same treat was increased by 13.2%.Based on our research,it can be concluded that oats extract containing avenanthramides possessed a high antioxidative activity on humans.It indicated that oat avenanthramides could be used to prevent hyperlipemic and angiocardiopathy. 展开更多
关键词 oats avenanthramides human serum ANTIOXIDATION sod MDA LDL-C HDL-C
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