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人ZP3基因的RT-PCRcDNA克隆
被引量:
1
1
作者
叶志华
梁建庆
《生物技术》
CAS
CSCD
2005年第4期1-4,共4页
目的:研究人ZP3基因的结构及构建人ZP3基因原核表达系统。方法:从人卵巢组织中分离出mRNA并以此作为模版,通过RT-PCR扩增出人ZP3基因cDNA片段,然后将其克隆在pUC18质粒上,并对克隆片段进行序列分析。结果:共克隆到ZP3-A(1300bp)、ZP3-B(...
目的:研究人ZP3基因的结构及构建人ZP3基因原核表达系统。方法:从人卵巢组织中分离出mRNA并以此作为模版,通过RT-PCR扩增出人ZP3基因cDNA片段,然后将其克隆在pUC18质粒上,并对克隆片段进行序列分析。结果:共克隆到ZP3-A(1300bp)、ZP3-B(1180bp)、ZP3-C(1200bp)和ZP3-D(1080bp)4种不同长度的人ZP3基因cDNA片段,对其中最长的ZP3-A片段的测序结果表明,它包含了人ZP3基因阅读框内的全部序列,与NCBISequenceViewer中公布的人ZP3mRNA序列(NM-007155)相比较,在1275bp长的编码区内只有一个碱基不同,两者同源性达到99.92%。结论:本研究克隆到的ZP3-AcDNA片段确是人ZP3基因无疑。
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关键词
人
zp3
基因
CDNA克隆
序列
下载PDF
职称材料
人ZP3 186S突变蛋白在毕赤酵母X33细胞中的表达
2
作者
王弘駂
李质馨
+4 位作者
田洪艳
徐冶朱
辛为
林冬静
窦肇华
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第10期910-912,918,共4页
目的:利用毕赤酵母表达人ZP3186S蛋白(23~348氨基酸),为临床相关疾病的诊断提供实验材料。方法:经PCR获得编码人ZP3(23~348氨基酸)的基因,构建表达载体pPICZα-hZP3。将ZP3186位点精氨酸突变为丝氨酸构建pPICZα-hZP3186S质粒。转染...
目的:利用毕赤酵母表达人ZP3186S蛋白(23~348氨基酸),为临床相关疾病的诊断提供实验材料。方法:经PCR获得编码人ZP3(23~348氨基酸)的基因,构建表达载体pPICZα-hZP3。将ZP3186位点精氨酸突变为丝氨酸构建pPICZα-hZP3186S质粒。转染毕赤酵母X33细胞,用高浓度Zeocin筛选转染细胞,甲醇诱导目的蛋白分泌,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定人ZP3186S蛋白。结果:pPICZα-hZP3186S表达质粒经测序正确,并在毕赤酵母X33中能够高效表达。结论:毕赤酵母能够分泌性表达重组人ZP3186S蛋白(23~348氨基酸),进一步研究其生物学活性为研制不孕症诊断试剂和免疫避孕疫苗提供实验材料。
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关键词
透明带
人
zp3
蛋白
毕赤酵母
基因表达
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职称材料
题名
人ZP3基因的RT-PCRcDNA克隆
被引量:
1
1
作者
叶志华
梁建庆
机构
广东省微生物研究所
出处
《生物技术》
CAS
CSCD
2005年第4期1-4,共4页
基金
广东省科技攻关项目("重组人卵透明带-3蛋白的高效表达及其分离制备的研究"
编号:2004B10401004)
文摘
目的:研究人ZP3基因的结构及构建人ZP3基因原核表达系统。方法:从人卵巢组织中分离出mRNA并以此作为模版,通过RT-PCR扩增出人ZP3基因cDNA片段,然后将其克隆在pUC18质粒上,并对克隆片段进行序列分析。结果:共克隆到ZP3-A(1300bp)、ZP3-B(1180bp)、ZP3-C(1200bp)和ZP3-D(1080bp)4种不同长度的人ZP3基因cDNA片段,对其中最长的ZP3-A片段的测序结果表明,它包含了人ZP3基因阅读框内的全部序列,与NCBISequenceViewer中公布的人ZP3mRNA序列(NM-007155)相比较,在1275bp长的编码区内只有一个碱基不同,两者同源性达到99.92%。结论:本研究克隆到的ZP3-AcDNA片段确是人ZP3基因无疑。
关键词
人
zp3
基因
CDNA克隆
序列
Keywords
human zp3 gene
cDNA clone
sequences
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
人ZP3 186S突变蛋白在毕赤酵母X33细胞中的表达
2
作者
王弘駂
李质馨
田洪艳
徐冶朱
辛为
林冬静
窦肇华
机构
吉林医药学院组织胚胎学教研室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第10期910-912,918,共4页
基金
吉林省科技发展计划项目(200705420)
文摘
目的:利用毕赤酵母表达人ZP3186S蛋白(23~348氨基酸),为临床相关疾病的诊断提供实验材料。方法:经PCR获得编码人ZP3(23~348氨基酸)的基因,构建表达载体pPICZα-hZP3。将ZP3186位点精氨酸突变为丝氨酸构建pPICZα-hZP3186S质粒。转染毕赤酵母X33细胞,用高浓度Zeocin筛选转染细胞,甲醇诱导目的蛋白分泌,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定人ZP3186S蛋白。结果:pPICZα-hZP3186S表达质粒经测序正确,并在毕赤酵母X33中能够高效表达。结论:毕赤酵母能够分泌性表达重组人ZP3186S蛋白(23~348氨基酸),进一步研究其生物学活性为研制不孕症诊断试剂和免疫避孕疫苗提供实验材料。
关键词
透明带
人
zp3
蛋白
毕赤酵母
基因表达
Keywords
Zona pellucida
human
zp3
protein
Pichia pastoris
gene
expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人ZP3基因的RT-PCRcDNA克隆
叶志华
梁建庆
《生物技术》
CAS
CSCD
2005
1
下载PDF
职称材料
2
人ZP3 186S突变蛋白在毕赤酵母X33细胞中的表达
王弘駂
李质馨
田洪艳
徐冶朱
辛为
林冬静
窦肇华
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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