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Amnion epithelial cells——a novel therapy for ischemic stroke? 被引量:3
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作者 Megan A.Evans Brad R.S.Broughton +5 位作者 Grant R.Drummond Henry Ma Thanh G.Phan Euan M.Wallace Rebecca Lim Christopher G.Sobey 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第8期1346-1349,共4页
Stroke is a leading cause of death and disability and new therapies are desperately needed. Given the complex nature of ischemic brain injury, it has been postulated that cell-based therapies may be useful. However, c... Stroke is a leading cause of death and disability and new therapies are desperately needed. Given the complex nature of ischemic brain injury, it has been postulated that cell-based therapies may be useful. However, cell resources, invasive extraction procedures, immunological rejection, tumorigenesis and ethical challenges make it unlikely that many stem cell types could serve as a practical source for therapy. By contrast, these issues do not pertain to human amnion epithelial cells(h AECs), which are placenta-derived stem cells. We recently assessed the effects of systemically delivered hAECs on stroke outcome using four animal models of stroke. We demonstrated that when injected intravenously after ischemia onset, hAECs migrate preferentially to the spleen and injured brain to limit apoptosis and inflammation, and attenuate early brain infiltration of immune cells, progression of infarction and systemic immunosuppression and to ultimately ameliorate functional deficits. When administration of hAECs is delayed by 1-3 days poststroke, long-term functional recovery can still be enhanced in young and aged mice of either sex. Moreover, our proof-of-principle findings suggest that h AECs are effective at limiting post-stroke infarct development in non-human primates. Overall, the results suggest that hAECs could be a viable clinical stroke therapy. 展开更多
关键词 ischemic stroke cerebral infarction stem cells human amnion epithelial cells INFLAMMATION IMMUNOSUPPRESSION brain repair MOUSE non-human primate
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人参皂苷Rg1联合人羊膜间充质干细胞移植治疗卵巢功能不全的效用及机制
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作者 祝叶 张青云 +2 位作者 莫晓莉 张林 何连利 《现代妇产科进展》 北大核心 2023年第3期201-206,213,共7页
目的:评估人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1)联合人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)移植治疗卵巢功能不全(POI)的疗效优势。方法:共使用40只大鼠,随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、单纯hAD-MSCs治疗(hAD-MSCs)组和hAD-MSCs联合Rg1治疗(h... 目的:评估人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1)联合人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)移植治疗卵巢功能不全(POI)的疗效优势。方法:共使用40只大鼠,随机分为对照(Control)组、模型(Model)组、单纯hAD-MSCs治疗(hAD-MSCs)组和hAD-MSCs联合Rg1治疗(hAD-MSCs+Rg1)组,每组10只,其中5只用于采集卵巢和血液等组织样本,另5只进行卵母细胞诱导和卵母细胞线粒体功能测定相关实验。模型组构建放疗辐射诱导的POI大鼠模型。结果:与Control组相比,Model组大鼠卵巢存在较大程度的卵泡耗竭和器质性病变,初级卵泡、次级卵泡、窦卵泡和排卵前卵泡均减少,卵巢指数下降,血清FSH升高,E2降低,卵巢组织TUNEL阳性细胞数量增加,ROS水平上升,卵母细胞线粒体膜电势降低,ATP生成量减少(P<0.05)。与单纯hAD-MSCs组相比,hAD-MSCs+Rg1联合组POI大鼠卵巢组织卵泡耗竭和器质性病变明显缓解,初级卵泡、次级卵泡、窦卵泡和排卵前卵泡明显增加,卵巢指数回升显著,血清FSH降低,E2回升,卵巢组织TUNEL阳性细胞数量明显下降,ROS水平明显降低,卵母细胞线粒体膜电势回升,ATP生成量回升显著(P<0.05)。结论:Rg1通过增强hAD-MSCs移植改善卵母细胞线粒体功能的机制并缓解POI大鼠模型疾病进展。 展开更多
关键词 人参皂苷RG1 人羊膜间充质干细胞 放疗 卵巢功能不全
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人类羊膜细胞表达神经干细胞特异性蛋白研究 被引量:8
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作者 蔡哲 潘琳 +5 位作者 舒峻 张岚 郭艳茹 耿同超 牟亮 左萍萍 《中国康复理论与实践》 CSCD 2005年第12期965-967,i0001,共4页
目的利用神经干细胞特异性标志蛋白鉴定人类羊膜组织中多分化潜能神经前体细胞的存在。方法利用免疫组织化学法检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中巢蛋白(nestin)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、musashi-1、波形蛋白(vi mentin)和PSA-N... 目的利用神经干细胞特异性标志蛋白鉴定人类羊膜组织中多分化潜能神经前体细胞的存在。方法利用免疫组织化学法检测人类羊膜组织和培养人类羊膜细胞中巢蛋白(nestin)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、musashi-1、波形蛋白(vi mentin)和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白的表达。结果人羊膜组织中存在nestin/GFAP双阳性细胞,此外,还表达musashi-1、vi mentin和PSA-NCAM等神经干细胞特异性标志蛋白;培养羊膜细胞中存在vi mentin和PSA-NCAM阳性细胞,以及nestin/GFAP双阳性细胞。结论羊膜组织和培养羊膜细胞中有神经干细胞特异性标记蛋白的表达。 展开更多
关键词 人类羊膜细胞 神经前体细胞 巢蛋白 MUSASHI-1
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大气中不同粒径颗粒物诱导人羊膜FL细胞UDS的研究 被引量:4
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作者 原福胜 邢权 马亚萍 《环境与健康杂志》 CAS CSSCI CSCD 北大核心 1994年第2期49-51,共3页
本研究以诱导人羊膜细胞UDS为指标,对太原市大气不同粒径的颗粒物提取液进行了致突变性检验,结果表明,不同粒径颗粒物的提取液均可产生一定的遗传毒性,尤以3.3μm以下的颗粒物的遗传毒性较强。
关键词 大气监测 颗粒物 人羊膜细胞 UDS
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体外培养人羊膜间充质细胞的神经生物学特点 被引量:5
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作者 胡景伟 蔡哲 +10 位作者 周忠蜀 张岚 舒峻 潘琳 黄小杰 徐波 向青 贺春 徐杨 高艳 崔晓慧 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1070-1073,1086,I0002,共6页
目的:探讨体外培养人羊膜间充质细胞(hAMCs)的神经生物学特征。方法:应用MTS分析法、BrdU掺人法和增殖细胞核抗原(PCNA)的免疫荧光染色.探讨体外培养hAMCs的增殖活性。利用免疫细胞化学法检测hAMCs中间充质细胞标记(STRO-1、Vimentin)... 目的:探讨体外培养人羊膜间充质细胞(hAMCs)的神经生物学特征。方法:应用MTS分析法、BrdU掺人法和增殖细胞核抗原(PCNA)的免疫荧光染色.探讨体外培养hAMCs的增殖活性。利用免疫细胞化学法检测hAMCs中间充质细胞标记(STRO-1、Vimentin)、神经干细胞标记蛋白(Nestin、PSA-NCAM)、神经细胞标记蛋白(β-tubulin-Ⅲ、TH)和神经分化相关蛋白(math-1、mash-1)的表达。结果:MTS分析法显示hAMCs在接种后第6-8天增殖速度最快,第8-24天活细胞数基本保持稳定;BrdU和PCNA的免疫荧光染色结果显示体外培养hAMCs中具有大量BrdU和PCNA阳性细胞存在;体外培养的hAMCs表达间充质干细胞特异性标记物STRO-1和Vimentin,也表达神经干细胞标记物Nestin和PSA-NCAM,同时还可见神经元特异性标记物β-tubulin-Ⅲ和TH,以及神经元分化相关蛋白math-1和mash-1的表达;体外培养hAMCs中存在有TH/BrdU和β-tubulin-Ⅲ/BrdU双阳性细胞。结论:体外培养的hAMCs表达间充质干细胞、神经干细胞、神经元的特异性标记蛋白,同时具有增殖活性:hAMCs表达神经元分化相关蛋白。 展开更多
关键词 人羊膜间充质细胞 神经细胞 增殖
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调控人羊膜上皮细胞AQP8表达的cAMP-PKA信号转导通路研究 被引量:4
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作者 漆洪波 路炜 段赵宁 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2010年第2期81-86,共6页
目的:研究调控人羊膜上皮细胞AQP8表达的cAMP-PKA信号转导通路。方法:用RNA转录抑制剂ACT-D、蛋白合成抑制剂Cycloheximide(CHX)及蛋白激酶A抑制剂H-89处理被8-Br-cAMP诱导的WISH细胞。采用Western blot技术定量WISH细胞AQP8蛋白表达水... 目的:研究调控人羊膜上皮细胞AQP8表达的cAMP-PKA信号转导通路。方法:用RNA转录抑制剂ACT-D、蛋白合成抑制剂Cycloheximide(CHX)及蛋白激酶A抑制剂H-89处理被8-Br-cAMP诱导的WISH细胞。采用Western blot技术定量WISH细胞AQP8蛋白表达水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测WISH细胞AQP8 mRNA的表达。结果:8-Br-cAMP处理组WISH细胞AQP8 mRNA和蛋白表达水平分别为0.083±0.007和0.144±0.008,与对照组的0.026±0.003;0.027±0.004比较,差异有统计学意义(P<0.05)。ACT-D处理组WISH细胞AQP8 mRNA的表达水平为0.021±0.004,低于对照组的0.026±0.003,差异有统计学意义(P<0.05)。ACT-D+8-Br-cAMP处理组WISH细胞的AQP8 mRNA表达水平为0.031±0.006,明显低于8-Br-cAMP处理组,但高于ACT-D处理组,差异均有统计学意义(P<0.05)。H-89处理组WISH细胞AQP8 mR-NA和蛋白表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。H-89+8-Br-cAMP处理组WISH细胞AQP8 mRNA和蛋白表达水平均明显低于8-Br-cAMP处理组,但高于H-89处理组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CHX处理组WISH细胞AQP8 mRNA和蛋白的表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。CHX+8-Br-cAMP处理组WISH细胞AQP8 mRNA和蛋白表达水平均明显低于8-Br-cAMP处理组,但高于CHX处理组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:ACT-D、CHX和H-89抑制cAMP诱导的人羊膜上皮细胞AQP8 mRNA和蛋白表达增加的效应,cAMP可能是通过PKA信号转导途径在基因转录、蛋白合成等多个水平调控人羊膜上皮细胞AQP8表达。 展开更多
关键词 人羊膜上皮细胞 水通道蛋白8 信号转导通路 CAMP
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两种人羊膜细胞的表型鉴定和分化潜能测定(英文) 被引量:4
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作者 王佳萍 欧阳桂芳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期146-153,共8页
本研究旨在分离、培养和表型鉴定两种人羊膜细胞并分析其多向分化潜能。羊膜中可分离出来源于外胚层的羊膜上皮细胞和来源于中胚层的羊膜间充质细胞。用流式细胞术和免疫荧光法对其进行表型鉴定,同时用免疫荧光法分析其多向分化潜能。... 本研究旨在分离、培养和表型鉴定两种人羊膜细胞并分析其多向分化潜能。羊膜中可分离出来源于外胚层的羊膜上皮细胞和来源于中胚层的羊膜间充质细胞。用流式细胞术和免疫荧光法对其进行表型鉴定,同时用免疫荧光法分析其多向分化潜能。结果表明:两种人羊膜细胞阳性表达HLA-A,B,C和间充质干细胞的标志(CD29,CD73,CD44,CD59,CD90,CD105,CH166),不表达造血干细胞的标志(CD31,CD34,CD45,HLA-DR),弱表达协同刺激分子(CD40,CD40L,CD80,CD86),且这些表型的表达量在第3-7代都维持稳定。免疫荧光法显示羊膜上皮细胞表达角蛋白19,不表达波形蛋白,而羊膜间充质细胞则相反。对其多向分化潜能测定显示,羊膜间充质细胞更好地向心肌细胞分化,而羊膜上皮细胞更好地向神经细胞分化。结论:从羊膜中可分离出羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞,两种细胞的表型相似,多向分化潜能却不同。羊膜上皮细胞具有更好的外胚层分化潜能,而羊膜间充质细胞更好地向中胚层分化。此结论对细胞治疗有很好的指导作用。 展开更多
关键词 羊膜上皮细胞 羊膜间充质细胞 免疫表型 分化潜能
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EGF对hAMSCs基因表达谱影响及生物信息学分析 被引量:3
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作者 庞希宁 李彩虹 +5 位作者 施萍 王竟 刘晓玉 张涛 张殿宝 赵峰 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第11期1391-1397,共7页
目的探讨表皮生长因子(EGF)对人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)基因表达谱影响及分子机制。方法采用基因表达谱测序(Illumina RNA-Seq)技术和生物信息学分析方法,对100 ng/mL EGF干预前后的hAMSCs基因表达测序比对,确定hAMSCs基因表达谱,RT-... 目的探讨表皮生长因子(EGF)对人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)基因表达谱影响及分子机制。方法采用基因表达谱测序(Illumina RNA-Seq)技术和生物信息学分析方法,对100 ng/mL EGF干预前后的hAMSCs基因表达测序比对,确定hAMSCs基因表达谱,RT-PCR检测进行验证。结果筛选出差异表达基因104个(FDR≤0.001和|log2Ratio|≥1),其中上调差异表达基因56个,下调差异表达基因48个;GO生物学过程富集分析26个生物学过程具有显著性差异(P≤0.05);KEGG信号通路富集分析细胞因子与细胞因子相互作用信号通路具有显著性差异(Q≤0.05),RT-PCR检测验证与基因表达谱结果一致。结论 EGF干预hAMSCs引起基因表达谱的变化,显著差异表达的基因和信号通路可能在hAMSCs增殖和迁移及促进创伤修复过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 表皮生长因子 人羊膜间充质干细胞 基因表达谱 测序 生物信息学
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携带XylE基因的穿梭质粒诱变分析系统在诱变剂检测中的应用 被引量:1
9
作者 邱晓云 古祝芳 +2 位作者 卢大儒 邱信芳 薛京伦 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1995年第6期321-324,共4页
以邻苯二酚氧化酶基因-xylE为靶基因,以新霉素抗性基因neo为选择基因构建的pESnx穿梭质粒转染人羊膜细胞FL,得到一株携带有完整的自主复制型pESnx质粒的G418抗性细胞株FESl.7。经测定该细胞株平均每细... 以邻苯二酚氧化酶基因-xylE为靶基因,以新霉素抗性基因neo为选择基因构建的pESnx穿梭质粒转染人羊膜细胞FL,得到一株携带有完整的自主复制型pESnx质粒的G418抗性细胞株FESl.7。经测定该细胞株平均每细胞含有质粒26个拷贝,且在8个月的传代培养中保持稳定,pESnx质粒在FES1.7细胞内xylE基因的自发突变率仅4.3×10-5。因此由FES1.7细胞构成的系统可在人体细胞中进行诱变检测。该系统灵敏度高,可对低效诱变剂在人体中引起的基因突变进行检测,而且特别适合于研究人体细胞中基因突变的分子机制。利用此EBV-xylE穿梭质粒诱变分析系统我们已对EMS进行了诱变分析,对于FEs1.7细胞,189uMEMS诱发的xylE基因突变超过自发突变频率达22倍。EMS处理细胞24小时能引起细胞内的质粒在xylE基因座位上发生缺失突变。 展开更多
关键词 诱发突变 诱变剂 靶基因 穿梭质粒 诱变检测
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人羊膜上皮细胞在大鼠受损肝组织中分化为肝细胞 被引量:1
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作者 宫黎明 方宁 +4 位作者 陈代雄 万卫红 章涛 余丽梅 赵春华 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第9期998-1003,共6页
目的探讨人羊膜上皮细胞在大鼠损伤肝原位植活及向肝细胞分化。方法用胰蛋白酶消化法从羊膜组织中分离人羊膜上皮细胞(hAECs),用流式细胞术和免疫荧光染色进行表型分析和细胞鉴定。腹腔注射D-氨基半乳糖溶液建立大鼠肝损伤模型,随机分为... 目的探讨人羊膜上皮细胞在大鼠损伤肝原位植活及向肝细胞分化。方法用胰蛋白酶消化法从羊膜组织中分离人羊膜上皮细胞(hAECs),用流式细胞术和免疫荧光染色进行表型分析和细胞鉴定。腹腔注射D-氨基半乳糖溶液建立大鼠肝损伤模型,随机分为hAECs移植组和对照组,每组20只。造模后24 h用微量注射器于肝左、中、右叶3点分别移植L-DMEM悬浮的hAECs悬液50μL(约1×106个细胞),对照组注射等量L-DMEM。于移植后48 h、1、2和4周处死各实验组5只大鼠,取肝脏制备冰冻切片,用免疫荧光双染色检查hAECs在受损肝原位的植活、分布及其向肝细胞分化的标志物表达。结果 1)FCM分析和免疫荧光染色结果显示,所分离的hAECs表达CD29、CD166及CK19,几乎不表达CD44、CD80、CD86、HLA-DR及波形蛋白;2)免疫荧光双染色结果显示,hAECs移植后1周主要定植于肝小叶且表达AFP,至2周表达CK18,至4周表达Alb。结论 hAECs在大鼠受损肝组织中能被植活且可分化为肝细胞,提示hAECs移植在临床肝病的治疗方面可能具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 人羊膜上皮细胞 移植 分化 肝细胞 肝损伤
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人羊膜间充质干细胞静脉移植后在心肌梗死大鼠体内的定植及分化 被引量:2
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作者 王钰莹 方宁 +3 位作者 陈代雄 余丽梅 刘祖林 万雪 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1583-1586,共4页
目的观察大鼠心肌梗死(MI)后经静脉移植的人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)在体内的定植、分化及对心功能的影响。方法SD大鼠随机分为hAD-MSCs移植组,模型组和假手术组各12只。分离hAD-MSCs用流式细胞仪和免疫组化染色鉴定其表型特征。制模... 目的观察大鼠心肌梗死(MI)后经静脉移植的人羊膜间充质干细胞(hAD-MSCs)在体内的定植、分化及对心功能的影响。方法SD大鼠随机分为hAD-MSCs移植组,模型组和假手术组各12只。分离hAD-MSCs用流式细胞仪和免疫组化染色鉴定其表型特征。制模后1 w经舌下静脉移植Brdu标记的hAD-MSCs,于移植后6 w将大鼠心脏取出并切片行组织病理学、免疫组织化学、双重免疫荧光染色等检测,以观察植入的细胞在MI区的定植、分化,在肝、脾中的分布情况。结果分离的hAD-MSCs具有典型的间充质干细胞表型特征,高表达CD44和波形蛋白;静脉移植后6 w,心脏MI区、肺脏和脾脏中均可见Brdu阳性细胞,但在肝脏中未见阳性细胞,移植的hAD-MSCs表达心肌特异蛋白连接蛋白-43和α-辅肌动蛋白。移植后6 w,移植组大鼠心功能没有进一步恶化。结论 hAD-MSCs经静脉移植能够定植于大鼠MI区域,可分化为心肌细胞,并改善心功能。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 心肌梗死 细胞移植
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血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞利于超长随意皮瓣的成活 被引量:11
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作者 金文虎 周爱婷 +3 位作者 吴中桓 范振海 王达利 魏在荣 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第21期3349-3356,共8页
背景:研究证实血管内皮生长因子能够诱导新生血管形成,人羊膜间充质干细胞也可通过多种机制改善皮瓣移植的缺血再灌注损伤。因此,用血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞为促进皮瓣成活提供了可能。目的:探索局部应用血管内皮生... 背景:研究证实血管内皮生长因子能够诱导新生血管形成,人羊膜间充质干细胞也可通过多种机制改善皮瓣移植的缺血再灌注损伤。因此,用血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞为促进皮瓣成活提供了可能。目的:探索局部应用血管内皮生长因子基因修饰人羊膜间充质干细胞对超长比例随意皮瓣成活的影响。方法:将30只成年SD大鼠随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组10只,在其背部左右分别构建2 cm×8 cm超长缺血随意皮瓣模型,皮瓣蒂部位于髂棘水平,分别为Ⅰ-left,Ⅰ-right,Ⅱ-left,Ⅱ-right,Ⅲ-left,Ⅲ-right。皮瓣掀起后即刻,Ⅰ-left、Ⅱ-left注射0.5m LLG-DMEM培养基划分为对照组,Ⅰ-right、Ⅲ-left注射0.5m L细胞浓度为1×10~9 L^(-1)的人羊膜间充质干细胞悬液划分为实验组1,Ⅱ-right、Ⅲ-right注射0.5 mL细胞浓度为1×109L-1转染血管内皮生长因子基因的人羊膜间充质干细胞悬液划分为实验组2,每个皮瓣共注射5点,每点注射0.1m L。移植后即刻、24,48h以及4,7d,激光多普勒血流监测仪监测皮瓣中部和蒂部的血流灌注值,移植后7d观察各组皮瓣的成活率,取成活皮瓣组织通过组织学观察各组皮瓣毛细血管密度,荧光显微镜观察人羊膜间充质干细胞在皮瓣内的分布及存活状况,Westernblot检测皮瓣组织中血管内皮生长因子蛋白水平。结果与结论:①实验组2皮瓣成活率、血流灌注值、皮瓣毛细血管密度明显高于实验组1及对照组,实验组1皮瓣成活率、血流灌注值、皮瓣毛细血管密度明显高于对照组,差异有显著性意义(P <0.05);②在荧光显微镜下观察发现,实验组1、实验组2皮瓣组织内有CM-Dil标记的人羊膜间充质干细胞;③各组皮瓣组织血管内皮生长因子蛋白表达均呈阳性,实验组2皮瓣组织血管内皮生长因子蛋白表达明显高于实验组1及对照组,实验组1皮瓣组织血管内皮生长因子蛋白表达明显高于对照组,差异有显著性意义(P <0.05);④结果证实,在超长随意皮瓣中、远部位应用人羊膜间充质干细胞可明显改善皮瓣成活率;人羊膜间充质干细胞经血管内皮生长因子基因转染后能够分泌更多的血管内皮生长因子蛋白,进而促进超长随意皮瓣血管新生,提高皮瓣成活率。 展开更多
关键词 超长缺血随意皮瓣模型 人羊膜间充质干细胞 血管内皮生长因子 基因转染 皮瓣成活率
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人羊膜间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后NGF、BDNF和Nogo-A mRNA表达的影响 被引量:2
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作者 喻皇飞 马晶晶 +4 位作者 方宁 余丽梅 章涛 刘祖林 陈代雄 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期924-929,共6页
目的:观察人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植对大鼠脊髓损伤后神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)及轴突生长抑制因子(Nogo-A)mRNA表达的影响。方法:成年雌性SD大鼠24只,随机分成hAMSCs移植组(12只)、磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(1... 目的:观察人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植对大鼠脊髓损伤后神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)及轴突生长抑制因子(Nogo-A)mRNA表达的影响。方法:成年雌性SD大鼠24只,随机分成hAMSCs移植组(12只)、磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(12只)。体外分离培养、鉴定hAMSCs,并以终浓度为10μg/ml 4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)荧光染料标记hAMSCs。在建立大鼠T11脊髓全横断损伤模型后,立即以微量注射器吸取约3×106个hAMSCs悬液于横断损伤处头尾两端原位移植,对照组注射相同体积的PBS液。分别于术后3d、7d利用荧光显微镜观察hAMSCs存活情况,并采用RT-PCR分析损伤脊髓段NGF mRNA、BDNF mRNA及Nogo-A mRNA的表达。结果:术后3d和7d hAMSCs移植组均可观察到植入的hAMSCs在宿主脊髓组织内存活。术后3d、7d,hAMSCs移植组NGF mRNA的表达均高于对照组(P<0.05,P<0.01),Nogo-A mRNA的表达均低于对照组(P<0.05);术后3d时hAMSCs移植组BDNF mRNA的表达与对照组比较无显著性差异(P>0.05),但术后7d其表达高于对照组(P<0.05)。结论:hAMSCs移植可上调大鼠受损脊髓组织内NGF mRNA和BDNF mRNA的表达、下调Nogo-A mRNA的表达,有利于促进脊髓损伤后的功能修复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 移植 人羊膜间充质干细胞 神经营养因子 大鼠
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人羊膜间充质细胞定向分化的研究进展 被引量:2
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作者 宋秀军 江其生 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期600-601,604,共3页
人羊膜间充质细胞源自胎盘羊膜组织,具有间充质干细胞特性和多向分化潜能。在不同生长因子的调节下,人羊膜间充质细胞可分化成内、中、外三个胚层来源的细胞,如神经细胞、成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肝样细胞等。并且人羊膜间充质... 人羊膜间充质细胞源自胎盘羊膜组织,具有间充质干细胞特性和多向分化潜能。在不同生长因子的调节下,人羊膜间充质细胞可分化成内、中、外三个胚层来源的细胞,如神经细胞、成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肝样细胞等。并且人羊膜间充质细胞具有比骨髓间充质干细胞更强的扩增能力和免疫原性低等优势,在组织工程及细胞替代治疗等再生医学领域具有广阔的应用前景。本文就人羊膜间充质细胞分离培养、生物学特性及多向分化潜能方面作一综述。 展开更多
关键词 羊膜 人羊膜间充质细胞 分化
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羊膜对人脐血干细胞分化为多巴胺能神经元的作用 被引量:7
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作者 李荣平 季凤清 +4 位作者 孙海梅 王丹妮 曾小蓓 赵春礼 杨慧 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期790-794,共5页
目的探讨羊膜上皮细胞对人脐血干细胞定向分化为多巴胺能神经元的作用。方法体外分离、原代培养人羊膜上皮细胞,通过高速离心制备成条件培养液(CM)对P1代脐血干细胞进行诱导,倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,应用免疫荧光染色和免疫... 目的探讨羊膜上皮细胞对人脐血干细胞定向分化为多巴胺能神经元的作用。方法体外分离、原代培养人羊膜上皮细胞,通过高速离心制备成条件培养液(CM)对P1代脐血干细胞进行诱导,倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,应用免疫荧光染色和免疫印迹法检测其酪氨酸羟化酶(TH)及多巴胺转运体(DAT)蛋白的表达情况。结果P1代脐血干细胞经羊膜上皮细胞条件培养液诱导后,TH及DAT阳性细胞率明显高于对照组,与对照组比较有显著性差异(P<0.01),免疫印迹分析结果与免疫荧光染色结果一致。结论羊膜上皮细胞能诱导人脐血间充质干细胞定向分化为多巴胺能神经元。 展开更多
关键词 干细胞 诱导分化 多巴胺能神经元 羊膜上皮细胞 免疫组织化学 人脐带血
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体外定向诱导人胚胎干细胞分化为表皮样干细胞的研究 被引量:13
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作者 撒亚莲 李海标 黄绍良 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期97-99,103,T001,共5页
[目的]探索体外定向诱导人胚胎干细胞(hES细胞)分化为表皮样干细胞的条件,为研究其定向分化机理及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础.[方法]将人胚胎干细胞单独(对照组)或与人羊膜上皮面向上全铺或半铺布半孔底共培养4~5 d,观察其... [目的]探索体外定向诱导人胚胎干细胞(hES细胞)分化为表皮样干细胞的条件,为研究其定向分化机理及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础.[方法]将人胚胎干细胞单独(对照组)或与人羊膜上皮面向上全铺或半铺布半孔底共培养4~5 d,观察其形态变化并分别用β1整合素,CK15及CK19免疫组化检测人胚胎干细胞向表皮样干细胞的分化.[结果]人胚胎干细胞与人羊膜共培养4~5 d后,在人羊膜上皮面形成表皮样干细胞集落,表达高水平的表皮干细胞特异标记物β1整合素、CK15和CK19.在无羊膜覆盖处,细胞贴壁生长,形成单层表皮样细胞,细胞呈多边形,排列紧密,大部分细胞表达β1整合素.对照组大量细胞死亡,未见β1整合素阳性细胞.[结论]在体外人羊膜可定向诱导人胚胎干细胞分化为表皮样干细胞,并提示在羊膜上皮面的细胞克隆可能是表皮样干细胞,而贴壁生长的细胞可能大部分是表皮样瞬间放大细胞. 展开更多
关键词 胚胎干细胞 表皮干细胞 分化 羊膜 免疫组织化学
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金属化合物诱发人羊膜FL细胞非程序性DNA合成的研究 被引量:1
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作者 原福胜 邢权 《卫生毒理学杂志》 CSCD 1994年第1期17-19,共3页
以人羊膜FL细胞非程序性DNA合成为观察指标,对6种金属化合物进行了遗传毒性检测,其中重铬酸钾、氯化镍、醋酸铅、硫酸锰和硫酸镉可诱发非程序性DNA合成(UDS)增加,表明这些金属化合物在一定剂量时对人体遗传物质具有致... 以人羊膜FL细胞非程序性DNA合成为观察指标,对6种金属化合物进行了遗传毒性检测,其中重铬酸钾、氯化镍、醋酸铅、硫酸锰和硫酸镉可诱发非程序性DNA合成(UDS)增加,表明这些金属化合物在一定剂量时对人体遗传物质具有致突变作用。 展开更多
关键词 DNA 金属化合物 人羊膜FL细胞
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人羊膜上皮细胞分离的正交法研究
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作者 张岚 舒峻 +4 位作者 蔡哲 付桂香 徐杨 高艳 崔晓惠 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期352-354,共3页
目的:研究人羊膜上皮细胞(hAECs)分离的适宜条件。方法:采用正交试验的方法,以L9(34)正交表安排影响hAECs分离的几个主要因素,每组实验所得细胞计数并培养24h后,收集悬浮细胞计算细胞贴壁率,培养7d计算扩增细胞数,以此为指标分析各因素... 目的:研究人羊膜上皮细胞(hAECs)分离的适宜条件。方法:采用正交试验的方法,以L9(34)正交表安排影响hAECs分离的几个主要因素,每组实验所得细胞计数并培养24h后,收集悬浮细胞计算细胞贴壁率,培养7d计算扩增细胞数,以此为指标分析各因素对hAECs分离的影响。结果:胰蛋白酶的浓度及消化次数对细胞得量均有显著影响(P<0.05)。结论:应用正交试验法得出hAECs分离的适宜条件为:胰蛋白酶液与羊膜组织体积比为1∶1,胰蛋白酶浓度0.25%,消化时间10min/time,消化4次。 展开更多
关键词 人羊膜 上皮细胞 分离方法 正交试验法
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胚胎干细胞源性表皮干细胞对小鼠全层皮肤缺损的修复 被引量:8
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作者 刘爱军 黄锦桃 李海标 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期296-299,共4页
目的研究129小鼠胚胎干细胞(ES cell)源性表皮干细胞在同种小鼠全层皮肤缺损的生长和分化,探讨ES细胞源性表皮干细胞对全层皮肤缺损的修复作用。方法以生物膜为载体,将羊膜诱导后带有核荧光标记的ES细胞源性表皮干细胞直接覆盖小鼠全层... 目的研究129小鼠胚胎干细胞(ES cell)源性表皮干细胞在同种小鼠全层皮肤缺损的生长和分化,探讨ES细胞源性表皮干细胞对全层皮肤缺损的修复作用。方法以生物膜为载体,将羊膜诱导后带有核荧光标记的ES细胞源性表皮干细胞直接覆盖小鼠全层皮肤缺损创面。术后1-8周连续取材,HE染色,β1整合素、CK15、CK19、CK10、CEA免疫组织化学和荧光双标显色。结果术后2周,创面完全长合,较厚的新生皮覆盖创面,基底层细胞增生,形成许多大小不一的细胞柱伸向真皮层,真皮层中可见管腔样结构,免疫荧光双标显示,1-3周新生表皮中可见核标记的细胞呈β1整合素、CK15阳性,真皮层中带有核标记的管状或泡状结构呈β1整合素、CK15阳性;4周后新生表皮开始变薄,基底层细胞呈CK19、CK10阳性,汗腺样结构呈CEA阳性,6-8周新生表皮下可见毛囊样、汗腺样、皮脂腺样等结构。结论ES细胞源性表皮干细胞植入小鼠全层皮肤缺损创面,可修复缺损的表皮,并在其下真皮层内具有分化为汗腺样、毛囊样和皮脂腺样结构的潜能。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 表皮干细胞 定向分化 皮肤附属结构 免疫组织化学 人羊膜 小鼠
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体外共培养诱导人羊膜间充质干细胞分化为眼表上皮细胞的研究
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作者 文晔 沙翔垠 +3 位作者 宋莉 刘志平 彭娟 谢莉菲 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期797-801,共5页
背景 人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)在体外能诱导分化为多种体细胞,但目前有关hAMSCs分化为眼表细胞的研究鲜有报道. 目的 探讨体外共培养诱导hAMSCs向眼表细胞分化的可能性及其分化机制.方法 本研究经广州医科大学第二附属医院伦理委... 背景 人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)在体外能诱导分化为多种体细胞,但目前有关hAMSCs分化为眼表细胞的研究鲜有报道. 目的 探讨体外共培养诱导hAMSCs向眼表细胞分化的可能性及其分化机制.方法 本研究经广州医科大学第二附属医院伦理委员会批准,在健康产妇的知情同意下从人胎盘中分离hAMSCs并进行培养,采用流式细胞术计数分析CD44、CD45、CD73、CD90在培养细胞中的表达以鉴定细胞,此外通过成骨诱导分化实验和成脂诱导分化实验对培养细胞进行体外分化鉴定.在患者知情同意下获取眼科手术中弃用的人眼球结膜组织,用组织块培养法分离和培养人球结膜成纤维细胞(hBCFs),将hAMSCs与hBCFs在Transwell培养体系中进行共培养,分为hAMSCs培养组和hAMSCs与hBCFs共培养组,用含质量分数5%胎牛血清(FBS)的DMEM高糖/F12培养基培养7d,采用免疫荧光技术检测hAMSCs中对上皮细胞角蛋白19(CK19)的表达,评价hAMSCs向眼表细胞分化的程度,并检测hAMSCs中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,评价其分化过程与间质上皮化转换(MET)过程的关系.结果 传代至3~7代的hAMSCs均为细长形,但随着传代增加,细胞体积增大,细胞中CD44、CD73、CD90表达呈强阳性,但不表达CD45.经成骨或成脂诱导分化后3~4周,细胞中茜素红S(ARS)染色或油红O染色阳性.hAMSCs与hBCFs共培养后1周,hAMSCs形态由细长形变为类上皮细胞型,共培养组的部分细胞中CK19表达阳性,所有细胞α-SMA表达呈微弱阳性,而hAMSCs细胞培养组可见呈绿色荧光的α-SMA阳性细胞,但不表达CK19. 结论 通过体外共培养可诱导hAMSCs向人眼表细胞分化,其分化机制可能与MET过程相关. 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞 共培养 诱导 分化 眼表细胞
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