绒毛膜癌细胞的融合与侵袭和转移能力变化关系的研究

目的:观察人绒毛膜癌(绒癌)细胞系中BeWo细胞株在福斯考林(forskolin)诱导融合前后细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及上皮钙黏蛋白(E-cad)的表达变化,以探讨绒癌细胞融合与其浸润和转移能力变化的关系。方法:用BeWo细胞株进行培养传代,以100mmol/L浓度的forskolin作用于BeWo细胞,用逆转录聚合酶链(RT-PCR)方法检测细胞中人类内源性逆转录病毒基因编码的膜糖蛋白(Syncytin mRNA)表达量的变化;免疫印迹技术(Western blot)方法检测细胞中表达MMP-2及E-cad蛋白表达量的变化。结果:以BeWo细胞作为靶细胞,根据RT-PCR和Western blot方法中条带的形状和亮暗程度可知Syncytin基因和E-cad及MMP-2蛋白的表达呈时间依赖性,随着forskolin作用时间的增加,Syncytin基因及E-cad蛋白的表达逐渐增加,而MMP-2蛋白表达量逐渐减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Syncytin高表达与融合后绒癌细胞的浸润转移能力的改变可能有一定关系,Syncytin的检测有望成为滋养细胞肿瘤患者判定预后的有价值的指标,并为滋养细胞肿瘤的治疗开辟了新的思路。

二甲双胍诱导人胎盘绒毛癌细胞系JAR凋亡的机制初探

目的探索二甲双胍诱导人胎盘绒毛癌细胞系JAR凋亡的作用机制。方法将JAR细胞分为对照组和二甲双胍处理组(终浓度5、10、20、40、80mmol/L)处理24h后选取合适的药物浓度。激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和免疫蛋白印记(Western blot)检测凋亡相关基因AMPK,p-AMPK,mTOR,Caspase-3,Bcl-2和Bax的变化趋势。结果 40mmol/L的二甲双胍处理能够引发JAR细胞凋亡,并且激活AMPK的磷酸化并下调mTOR的蛋白水平;同时上调Caspase-3和Bax的mRNA及蛋白水平,并且下调Bcl-2的mRNA和蛋白表达,降低Bcl-2和Bax的蛋白水平比例。结论二甲双胍可能是通过AMPK/mTOR和Caspase-3及Bcl-2/Bax两个通路的共同作用诱导JAR细胞发生凋亡。

人绒毛癌细胞JAR中ERCC2的表达

目的:以人正常绒毛组织和人绒毛癌细胞JAR为研究对象,探求ERCC2表达与人绒毛癌细胞JAR发生的关系。方法:分别取人正常绒毛组织100mg,人绒毛癌细胞JAR108,提取组织中总RNA,采用RT-PCR的方法分析细胞中ERCC2表达水平。结果:ERCC2在人绒毛癌细胞JAR中表达显著低于人正常绒毛组织。结论:ERCC2在人绒毛癌细胞JAR中低表达可能是人绒毛癌细胞JAR恶变形成的基础。