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人牙髓细胞与PLGA微球材料复合构建后的形态学观察
1
作者
王冠华
邹慧儒
+3 位作者
连小丽
代晓华
颜艳
张林朴
《医学理论与实践》
2023年第12期1988-1990,1987,共4页
目的:观察不同浓度的人牙髓细胞(HDPCs)在可注射聚乳酸/羟基乙酸(PLGA)微球支架上的黏附生长,通过形态学观察进一步探讨PLGA微球作为组织工程支架材料用于牙髓组织再生的可行性。方法:取第4代HDPCs以3种不同浓度(2×10^(5)细胞/ml、...
目的:观察不同浓度的人牙髓细胞(HDPCs)在可注射聚乳酸/羟基乙酸(PLGA)微球支架上的黏附生长,通过形态学观察进一步探讨PLGA微球作为组织工程支架材料用于牙髓组织再生的可行性。方法:取第4代HDPCs以3种不同浓度(2×10^(5)细胞/ml、1×10^(5)细胞/ml、5×10^(4)细胞/ml)接种于PLGA微球,在不同的时间点应用倒置显微镜下观察细胞与材料复合生长的情况,体外培养8周后,终止培养,常规固定、石蜡包埋,组织学切片,分别应用免疫组织化学染色检测牙本质涎磷蛋白(DSPP)、牙本质基质蛋白(DMP-1)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)三种蛋白表达情况,并对阳性率进行统计。同时应用扫描电镜观察超微结构。结果:通过显微镜特异性观察细胞在材料表面的黏附状况,结果显示随着时间的推移细胞的生长状况整体较为良好。免疫组化结果显示牙髓组织与HDPCs-微球复合体三种蛋白表达均为阳性,将细胞最高浓度组三种蛋白的阳性率进行统计学分析,结果显示无统计学差异(P>0.05)。在培养8周之后通过显微镜观察细胞和微球之间的融合度较高,但微球局部有凹陷。通过形态学观察细胞与PLGA微球材料复合生长良好,结合前期定量检测结果显示PLGA微球有利于牙髓细胞黏附生长。结论:支架材料PLGA微球能够应用在组织工程化牙髓—牙本质复合体的构建,但下一步需要对微球材料进行改性,希望能够更加全面的将其应用于组织工程牙髓—牙本质复合体的构建之中,这也在临床中有极其重要的应用价值和实践意义。
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关键词
人牙髓细胞
PLGA微球材料
牙髓—牙本质复合体
牙本质涎磷蛋白
牙本质基质蛋白
Ⅰ型胶原
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职称材料
人成牙本质细胞样细胞的原代培养
被引量:
15
2
作者
王捍国
肖明振
+1 位作者
赵守亮
郝建军
《牙体牙髓牙周病学杂志》
CAS
2002年第2期55-58,共4页
目的 :培养人原代成牙本质细胞。方法 :取引产的 8月龄死胎 ,剥离乳磨牙胚牙乳头 ,组织块法培养。然后采用滤纸片法挑取了 3个与成牙本质细胞形态相似的细胞克隆 ,扩大培养。对培养细胞从形态学、矿化结节、碱性磷酸酶 (alkalinephospha...
目的 :培养人原代成牙本质细胞。方法 :取引产的 8月龄死胎 ,剥离乳磨牙胚牙乳头 ,组织块法培养。然后采用滤纸片法挑取了 3个与成牙本质细胞形态相似的细胞克隆 ,扩大培养。对培养细胞从形态学、矿化结节、碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase,ALP)活性、人牙本质基质蛋白 - 1(humandentinmatrixprotein- 1,hDMP - 1)和人牙本质涎磷蛋白 (humandentinsialophosphoprotein ,hDSPP)在mRNA水平上的表达等方面进行鉴定。结果 :有一个克隆来源的细胞呈梭形、有单侧较长细胞突起 ,未见核极化 ,同时它们具矿化功能 ,表达人成牙本质细胞特异性标志hDMP - 1、hDSPPmRNA。结论 :该培养细胞为人成牙本质细胞样细胞 ,为进一步的有关研究奠定了基础。
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关键词
成牙本质细胞
细胞培养
人牙本质基质蛋白-1
人牙本质涎磷蛋白
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职称材料
EMPs对人牙髓干细胞增殖分化影响的实验研究
3
作者
朱吉坤
崔玲玲
+2 位作者
张桂荣
李济强
刘继辉
《临床口腔医学杂志》
2014年第4期218-220,共3页
目的:将人牙髓干细胞(human Dental Pulp Stem Cells,hDPSCs)与釉基质蛋白(Enamel Matrix Proteins,EMPs)按一定浓度结合,测定牙本质涎磷蛋白(dentin sialoprotein,DSPP)、波形蛋白(vimentin)、碱性磷酸酶(alkaline phophatase,ALP)的表...
目的:将人牙髓干细胞(human Dental Pulp Stem Cells,hDPSCs)与釉基质蛋白(Enamel Matrix Proteins,EMPs)按一定浓度结合,测定牙本质涎磷蛋白(dentin sialoprotein,DSPP)、波形蛋白(vimentin)、碱性磷酸酶(alkaline phophatase,ALP)的表达,阐述EMPs对人牙髓干细胞增殖分化的影响。方法:分别将浓度为100μg/mL、200μg/mL的EMPs加入培养中的人牙髓干细胞中,分别于3 d、5 d、7 d、9 d、11 d对细胞进行免疫组化染色,检测细胞爬片DSPP、vimentin、ALP的表达。结果:未经EMPs诱导的人牙髓干细胞DSPP少量细胞阳性表达,vimentin表达阴性,ALP表现低活性。经200μg/mL的EMPs诱导5 d后,人牙髓干细胞DSPP、vimentin染色呈阳性表达,ALP活性明显增加。结论:EMPs对人牙髓干细胞增殖及分化具有促进作用,200μg/mL的浓度效果最为显著。
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关键词
釉基质蛋白
人牙髓干细胞
牙本质涎磷蛋白(DSPP)
波形蛋白(vimentin)
碱性磷酸酶(ALP)
原文传递
人牙本质涎磷蛋白启动子驱动LacZ报告基因在人牙胚间充质细胞中表达
4
作者
林美珍
蒋梅琴
+2 位作者
李水琴
林妍
黄义德
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第8期1133-1144,共12页
牙本质涎磷蛋白(DSPP)的表达是细胞向成牙本质细胞分化的标志。试图分析人DSPP启动子及构建人DSPP启动子驱动的Lac Z基因表达的报告体系,从而方便快捷检测细胞是否向成牙本质细胞分化。为了建立能表达DSPP的细胞体系,分离了人牙胚间充...
牙本质涎磷蛋白(DSPP)的表达是细胞向成牙本质细胞分化的标志。试图分析人DSPP启动子及构建人DSPP启动子驱动的Lac Z基因表达的报告体系,从而方便快捷检测细胞是否向成牙本质细胞分化。为了建立能表达DSPP的细胞体系,分离了人牙胚间充质细胞,并用地塞米松诱导培养液进行诱导,结果显示,该诱导培养液能有效地诱导人牙胚间充质细胞DSPP基因的表达。利用双荧光素酶报告系统对4段人DSPP基因5′上游区域(-4 000-+54、-2 500-+54、-1 447-+54和-1 027-+54)进行分析,结果显示-2 500-+54区域的启动子活性最高。5′上游区从?2 500 bp延长到?4 000 bp时,启动子活性下降;5′上游区从-2 500 bp缩短至-1 447 bp时,启动子活性下降;再次将-1 447 bp缩短至-1 027 bp时,启动子活性进一步下降。结果暗示在-4 000 bp至-2 500 bp区域存在转录抑制元件,-2 500 bp至-1 027 bp区域存在转录激活元件。用-2 500-+54启动子区域和Lac Z基因构建ph DSPP-Lac Z慢病毒报告载体,并分别在人牙胚间充质细胞和永生化人牙胚间充质细胞系ih EDMC4上检测ph DSPP-Lac Z报告载体的功能,通过X-Gal染色,结果显示在2种细胞牙向分化过程中均可检测到Lac Z基因的表达。研究构建的ph DSPP-Lac Z慢病毒报告载体可为诱导人源细胞牙向分化、牙齿发育、牙齿再生工程等研究中DSPP的表达检测提供一种更加便捷的手段。
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关键词
牙本质涎磷蛋白
启动子
人牙胚间充质细胞
LACZ基因
原文传递
题名
人牙髓细胞与PLGA微球材料复合构建后的形态学观察
1
作者
王冠华
邹慧儒
连小丽
代晓华
颜艳
张林朴
机构
天津市口腔功能重建重点实验室、天津市口腔医院、南开大学医学院
出处
《医学理论与实践》
2023年第12期1988-1990,1987,共4页
基金
天津市卫生健康委科技人才培育项目(RC20105)。
文摘
目的:观察不同浓度的人牙髓细胞(HDPCs)在可注射聚乳酸/羟基乙酸(PLGA)微球支架上的黏附生长,通过形态学观察进一步探讨PLGA微球作为组织工程支架材料用于牙髓组织再生的可行性。方法:取第4代HDPCs以3种不同浓度(2×10^(5)细胞/ml、1×10^(5)细胞/ml、5×10^(4)细胞/ml)接种于PLGA微球,在不同的时间点应用倒置显微镜下观察细胞与材料复合生长的情况,体外培养8周后,终止培养,常规固定、石蜡包埋,组织学切片,分别应用免疫组织化学染色检测牙本质涎磷蛋白(DSPP)、牙本质基质蛋白(DMP-1)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)三种蛋白表达情况,并对阳性率进行统计。同时应用扫描电镜观察超微结构。结果:通过显微镜特异性观察细胞在材料表面的黏附状况,结果显示随着时间的推移细胞的生长状况整体较为良好。免疫组化结果显示牙髓组织与HDPCs-微球复合体三种蛋白表达均为阳性,将细胞最高浓度组三种蛋白的阳性率进行统计学分析,结果显示无统计学差异(P>0.05)。在培养8周之后通过显微镜观察细胞和微球之间的融合度较高,但微球局部有凹陷。通过形态学观察细胞与PLGA微球材料复合生长良好,结合前期定量检测结果显示PLGA微球有利于牙髓细胞黏附生长。结论:支架材料PLGA微球能够应用在组织工程化牙髓—牙本质复合体的构建,但下一步需要对微球材料进行改性,希望能够更加全面的将其应用于组织工程牙髓—牙本质复合体的构建之中,这也在临床中有极其重要的应用价值和实践意义。
关键词
人牙髓细胞
PLGA微球材料
牙髓—牙本质复合体
牙本质涎磷蛋白
牙本质基质蛋白
Ⅰ型胶原
Keywords
human
dental pulp cells
PLGA microspheres material
Dental pulp-
dentin
e complex
dentin
sialophosphoprotein
dentin
matrix protein
CollagenⅠ
分类号
R781.3 [医药卫生—口腔医学]
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职称材料
题名
人成牙本质细胞样细胞的原代培养
被引量:
15
2
作者
王捍国
肖明振
赵守亮
郝建军
机构
第四军医大学口腔医学院
出处
《牙体牙髓牙周病学杂志》
CAS
2002年第2期55-58,共4页
基金
全军"十五"计划基金重点课题 ( 0 12 0 89)
国家自然科学基金资助项目 ( 39970 792 )
国家教育部回国人员启动基金资助项目 ( 2 0 0 0HG0 0 3)
文摘
目的 :培养人原代成牙本质细胞。方法 :取引产的 8月龄死胎 ,剥离乳磨牙胚牙乳头 ,组织块法培养。然后采用滤纸片法挑取了 3个与成牙本质细胞形态相似的细胞克隆 ,扩大培养。对培养细胞从形态学、矿化结节、碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase,ALP)活性、人牙本质基质蛋白 - 1(humandentinmatrixprotein- 1,hDMP - 1)和人牙本质涎磷蛋白 (humandentinsialophosphoprotein ,hDSPP)在mRNA水平上的表达等方面进行鉴定。结果 :有一个克隆来源的细胞呈梭形、有单侧较长细胞突起 ,未见核极化 ,同时它们具矿化功能 ,表达人成牙本质细胞特异性标志hDMP - 1、hDSPPmRNA。结论 :该培养细胞为人成牙本质细胞样细胞 ,为进一步的有关研究奠定了基础。
关键词
成牙本质细胞
细胞培养
人牙本质基质蛋白-1
人牙本质涎磷蛋白
Keywords
odontoblast
cell culture
huamn
dentin
matrix protein-1
human dentin sialophosphoprotein
分类号
R780.2 [医药卫生—口腔医学]
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职称材料
题名
EMPs对人牙髓干细胞增殖分化影响的实验研究
3
作者
朱吉坤
崔玲玲
张桂荣
李济强
刘继辉
机构
沈阳市口腔医院正畸科
辽宁医学院附属第一医院口腔科
出处
《临床口腔医学杂志》
2014年第4期218-220,共3页
文摘
目的:将人牙髓干细胞(human Dental Pulp Stem Cells,hDPSCs)与釉基质蛋白(Enamel Matrix Proteins,EMPs)按一定浓度结合,测定牙本质涎磷蛋白(dentin sialoprotein,DSPP)、波形蛋白(vimentin)、碱性磷酸酶(alkaline phophatase,ALP)的表达,阐述EMPs对人牙髓干细胞增殖分化的影响。方法:分别将浓度为100μg/mL、200μg/mL的EMPs加入培养中的人牙髓干细胞中,分别于3 d、5 d、7 d、9 d、11 d对细胞进行免疫组化染色,检测细胞爬片DSPP、vimentin、ALP的表达。结果:未经EMPs诱导的人牙髓干细胞DSPP少量细胞阳性表达,vimentin表达阴性,ALP表现低活性。经200μg/mL的EMPs诱导5 d后,人牙髓干细胞DSPP、vimentin染色呈阳性表达,ALP活性明显增加。结论:EMPs对人牙髓干细胞增殖及分化具有促进作用,200μg/mL的浓度效果最为显著。
关键词
釉基质蛋白
人牙髓干细胞
牙本质涎磷蛋白(DSPP)
波形蛋白(vimentin)
碱性磷酸酶(ALP)
Keywords
enamel matrix proteins (EMPs):
human
dental pulp stem cells (hDPSCs)
dentin
sialophosphoprotein
(DSPP)
vimentin
alkaline phophatase (ALP)
分类号
R813.1 [医药卫生—放射医学]
原文传递
题名
人牙本质涎磷蛋白启动子驱动LacZ报告基因在人牙胚间充质细胞中表达
4
作者
林美珍
蒋梅琴
李水琴
林妍
黄义德
机构
福建师范大学生命科学学院福建省发育与神经生物学重点实验室
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第8期1133-1144,共12页
基金
福建省教育厅重点项目(No.JA12061)资助~~
文摘
牙本质涎磷蛋白(DSPP)的表达是细胞向成牙本质细胞分化的标志。试图分析人DSPP启动子及构建人DSPP启动子驱动的Lac Z基因表达的报告体系,从而方便快捷检测细胞是否向成牙本质细胞分化。为了建立能表达DSPP的细胞体系,分离了人牙胚间充质细胞,并用地塞米松诱导培养液进行诱导,结果显示,该诱导培养液能有效地诱导人牙胚间充质细胞DSPP基因的表达。利用双荧光素酶报告系统对4段人DSPP基因5′上游区域(-4 000-+54、-2 500-+54、-1 447-+54和-1 027-+54)进行分析,结果显示-2 500-+54区域的启动子活性最高。5′上游区从?2 500 bp延长到?4 000 bp时,启动子活性下降;5′上游区从-2 500 bp缩短至-1 447 bp时,启动子活性下降;再次将-1 447 bp缩短至-1 027 bp时,启动子活性进一步下降。结果暗示在-4 000 bp至-2 500 bp区域存在转录抑制元件,-2 500 bp至-1 027 bp区域存在转录激活元件。用-2 500-+54启动子区域和Lac Z基因构建ph DSPP-Lac Z慢病毒报告载体,并分别在人牙胚间充质细胞和永生化人牙胚间充质细胞系ih EDMC4上检测ph DSPP-Lac Z报告载体的功能,通过X-Gal染色,结果显示在2种细胞牙向分化过程中均可检测到Lac Z基因的表达。研究构建的ph DSPP-Lac Z慢病毒报告载体可为诱导人源细胞牙向分化、牙齿发育、牙齿再生工程等研究中DSPP的表达检测提供一种更加便捷的手段。
关键词
牙本质涎磷蛋白
启动子
人牙胚间充质细胞
LACZ基因
Keywords
dentin
sialophosphoprotein
(DSPP)
promoter
human
dental mesenchymal cells
LacZ gene
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人牙髓细胞与PLGA微球材料复合构建后的形态学观察
王冠华
邹慧儒
连小丽
代晓华
颜艳
张林朴
《医学理论与实践》
2023
0
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职称材料
2
人成牙本质细胞样细胞的原代培养
王捍国
肖明振
赵守亮
郝建军
《牙体牙髓牙周病学杂志》
CAS
2002
15
下载PDF
职称材料
3
EMPs对人牙髓干细胞增殖分化影响的实验研究
朱吉坤
崔玲玲
张桂荣
李济强
刘继辉
《临床口腔医学杂志》
2014
0
原文传递
4
人牙本质涎磷蛋白启动子驱动LacZ报告基因在人牙胚间充质细胞中表达
林美珍
蒋梅琴
李水琴
林妍
黄义德
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
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