天然生物材料壳聚糖支架上人胚肺成纤维细胞的生长

采用不同粒度的硅胶粒子作为致孔剂 ,按硅胶和壳聚糖重量比 9∶1,制备了三组不同孔径的壳聚糖多孔支架 .以无孔壳聚糖支架为参照 ,对多孔支架的有效孔径、吸水性进行了比较 .结果表明 :孔径大小由硅胶尺寸控制 ,吸水性随孔径增大而增大 .为研究支架孔径大小对其生物相容性的影响 ,在系列支架上进行了人胚肺成纤维细胞的培养 .细胞种植 1d后 ,多孔支架上的细胞粘附较多 ,而无孔支架上的细胞伸展情况较好 ;细胞培养 5d后 ,所有支架上细胞伸展情况良好 ,孔径越大的支架上细胞增殖越多 .

枇杷叶三萜酸对TGF-β_1刺激的人胚肺成纤维细胞转分化及ERK通路的影响

目的研究枇杷叶三萜酸(Triterpene acids of loquat,TAL)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激人胚肺成纤维细胞转分化、胶原合成及ERK通路的影响。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(HFL-Ⅰ),MTT比色法测定TAL对HFL-Ⅰ细胞的增殖抑制率。RT-PCR检测每组中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(CⅠ)、Ⅲ型胶原(CⅢ)mRNA的水平,Western blot检测各组细胞中p-ERK1/2和ERK1/2表达水平。结果 TAL呈剂量和时间依赖性抑制HFL-Ⅰ细胞的增殖(P<0.05),并能够降低CⅠ、CⅢ、α-SMA、CTGF的过度表达(P<0.05);Western blot结果显示TAL能降低TGF-β1刺激组p-ERK1/2的表达,而对ERK1/2的表达没有差异。结论 TAL能抑制HFL-Ⅰ的增殖,同时也能使活化后HFL-Ⅰ中的α-SMA生成减少,CTGF、胶原和p-ERK1/2表达降低。

沙利度胺抑制TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞系转分化为肌成纤维细胞

目的研究沙利度胺(THD)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-F)向肌成纤维细胞(MF)转分化和对已分化MF的作用。方法体外培养HFL-F,以TGF-β1(5μg/L)诱导HFL-F向MF转分化,通过碱水解法测定羟脯氨酸含量(HYP),免疫印迹法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,半定量RT-PCR测定α-SMAmRNA和Ⅲ型胶原(COLⅢ)mRNA,观察THD(50μg/L)对HFL-F向MF转分化的过程及已分化MF的影响。结果TGF-β1诱导HFL-F 96 h,诱导分化同时加入THD可抑制HYP含量增高和COLⅢ mRNA表达上调(P<0.05),可抑制α-SMA蛋白表达增加,但对于α-SMA mRNA表达没有影响。TGF-β1诱导HFL-F 96 h后再加入THD可抑制COLⅢ mRNA的表达(P<0.05),但对HYP含量、α-SMA蛋白表达量和α-SMA mRNA表达无明显影响。结论TGF-β1可诱导HFL-F向MF转分化,THD可抑制这一过程中α-SMA蛋白与胶原合成。对TGF-β1诱导下已分化的MF,THD可抑制其COLⅢ mRNA的表达。

COX-2基因对TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞生长及Notch信号通路的影响及其作用机制

目的探讨抑制环氧合酶-2(COX-2)基因表达对TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞系MRC-5活力、胶原合成和转化及Notch信号通路的影响。方法将MRC-5细胞分为对照组、TGF-β1组、NC组和COX-2-siRNA组,各组细胞处理48 h,Western blotting检测COX-2、胶原合成相关的COL-Ⅰ和COL-Ⅲ、 EMT标志物α-SMA及Notch信号通路受体Notch1及配体Jagged1的蛋白表达;CCK8法检测各组细胞活力。结果 TGF-β1组COX-2的表达显著高于对照组,COX-2-siRNA组COX-2的表达显著低于TGF-β1组(P<0.05),NC组COX-2的表达与TGF-β1组差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,TGF-β1组细胞活力及COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、Notch1和Jagged1的蛋白表达均显著升高(P<0.05),与TGF-β1组比较,COX-2-siRNA组细胞活力及COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA、Notch1和Jagged1的蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论抑制COX-2基因表达中可能通过降低MRC-5细胞活力、抑制细胞胶原合成和转化,并下调Notch信号通路,从而对肺纤维化起保护作用。

人胚肺成纤维细胞饲养兔角膜上皮和内皮细胞的体外培养

目的 研究人胚肺成纤维饲细胞体外培养兔角膜上皮和内皮细胞。方法 人胚肺成纤维细胞系细胞，经丝裂霉素Ｃ处理成饲细胞。兔角膜上皮和内皮细胞组织块原代培养，消化接种于人胚肺饲细胞瓶传代培养。体外培养的角膜上皮和内皮细胞行常规病理形态学检查，角膜上皮细胞行角蛋白、内皮细胞行神经烯醇化酶免疫组化染色检测。结果人胚肺成纤维细胞形态均一，易于分辨，经丝裂霉素处理后失去增殖能力。角膜上皮和内皮细胞原代培养５～７天，细胞密集，经人胚肺饲细胞共培养５代，细胞无衰老现象。检测角膜上皮细胞角蛋白、内皮细胞神经烯醇化酶表达阳性，人胚肺饲细胞表达阴性。结论 人胚肺饲细胞能够明显增强角膜上皮和内皮细胞的体外生存能力，提高细胞的增殖能力。

JAK-STAT通路参与CTGF诱导人胚肺成纤维细胞转分化的研究

目的研究JAK-STAT信号通路在重组人结缔组织生长因子(recombinant human,CTGF)诱导人胚肺成纤维细胞(HFL-I)转分化过程中的作用。方法将体外培养的HFL-I分为正常对照组、CTGF组及CTGF+JAK-STAT特异性抑制剂通路抑制剂AG490组,选取不同时相点,Western blotting测定平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、磷酸化蛋白(p-STAT3)和总蛋白STAT3的蛋白表达,RT-PCR检测STAT3 mRNA表达。结果正常体外培养的HFL-I有微量的p-STAT3、α-SMA表达,加入20ng/ml CTGF诱导15min后p-STAT3水平明显升高(P<0.05),30min时升至顶峰后逐渐减弱;诱导24h后α-SMA表达显著升高(P<0.05)。AG490 50μmol/L预处理60min,p-STAT3和α-SMA表达明显抑制(P<0.05或P<0.01)。结论 CTGF诱导HFL-I转分化为肌成纤维细胞,JAK-STAT通路参与上述过程,其特异性抑制剂AG490可有效抑制该效应。

姜黄素对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡及细胞外基质的影响

目的:研究A549与肺泡上皮细胞共培养条件下姜黄素对经转化生长因子β1(TGF-β1)刺激的人胚肺成纤维细胞生长、凋亡及分泌细胞外基质的影响,为姜黄素抗纤维化提供实验依据。方法:将利用与肺泡上皮细胞来源的A549细胞进行transwell跨室共培养的人胚肺成纤维细胞分为5组:对照组、模型组、不同浓度姜黄素(5、10、20μmol·mL-1)进行干预的治疗组。CCK-8法检测吸光值,计算细胞抑制率;流式细胞仪测定细胞凋亡率;Western blot法测定凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达;ELISA法测定细胞外基质Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)、层黏蛋白(LN)、透明质酸(HA)的分泌。结果:姜黄素对人胚肺成纤维细胞有抑制作用,呈剂量依赖式。姜黄素处理组细胞凋亡率较对照组、模型组明显增加(P<0.01)。与模型组相比,姜黄素治疗组Bcl-2蛋白的表达明显减弱,而Bax蛋白的表达明显增强,Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)、层黏蛋白(LN)、透明质酸(HA)浓度下降。结论:姜黄素能抑制TGF-β1刺激的与A549细胞共培养的人胚肺成纤维细胞的增殖,降低细胞外基质的形成,促进其凋亡,具有抗肺纤维化作用,可能机制为通过下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达来实现。

羟基喜树碱对人胚肺成纤维细胞HFL1生长的影响

目的观察羟基喜树碱(HCPT)对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HFL1)的增殖抑制和促凋亡作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测不同浓度的HCPT对HFL1细胞作用24h、48h、72h的增殖抑制效果,计算细胞生长抑制率和半数抑制量(IC50),确定HCPT抑制HFL1细胞增殖的最佳给药浓度和最佳作用时间;姬姆萨染色观察细胞形态学变化;流式细胞仪分析细胞周期;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA梯度。对所得数据用SPSS 15.0软件进行统计分析。结果 HCPT对HFL1细胞增殖有明显的抑制作用,在0.008-32mg/L范围内呈时间和剂量依赖性;与对照组比较,各实验组24h、48h、72h A值及细胞生长抑制率差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。HCPT作用HFL1细胞48h时的IC50为0.466mg/L,故确定48h、0.5mg/L为最佳作用时间和最佳给药浓度;0.5mg/L HCPT作用HFL1细胞24h后,G0/G1期细胞所占比例为(50.46±3.91)%;作用72h后,G0/G1期细胞所占比例为(88.19±2.13)%,与对照组比较,其余各组各期细胞所占比例差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);姬姆萨染色显示,HFL1细胞形态发生明显变化;琼脂糖凝胶电泳可见明显的DNA梯度带形成。结论 HCPT对体外培养的HFL1细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,可能是一种潜在的抗肺纤维化的药物。

N-乙酰半胱氨酸对转化生长因子β1诱导人胚肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响

目的研究 N-乙酰半胱氨酸(NAC)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-F)向肌成纤维细胞(MF)转化过程的影响和对已分化 MF 的作用。方法体外培养 HFL-F,以 TGF-β1(5μg/L)诱导 HFL-F向 MF 转化,测定细胞羟脯氨酸(HYP)含量,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、α-SMA 和Ⅲ型胶原(COLⅢ)mRNA 表达水平,观察 NAC(10μg/L)对 HFL-F 向 MF 转化过程及对已分化 MF 细胞的影响。结果 TGF-β1诱导 HFL-F 96 h,诱导同时加入 NAC 可抑制 HYP 含量增高、COL Ⅲ mRNA(P 均<0.05)和α-SMA 表达上调,但是对α-SMA mRNA 表达水平无显著性影响(P>0.05)。TGF-β1诱导 HFL-F 96 h后再加入 NAC 对 HYP 含量、α-SMA 蛋白质、α-SMA 和COL Ⅲ mRNA 表达量均无显著影响(P 均>0.05)。结论 TGF-β1可诱导 HFL-F 向 MF 转化,NAC 可抑制α-SMA 蛋白质与胶原蛋白合成。对已分化的 MF,NAC 对 COL Ⅲ和α-SMA 在转录水平与转录后水平的表达均无显著影响。

含何首乌血清对人胚肺二倍体成纤维细胞端粒酶活性的影响

目的观察含何首乌血清对人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)超氧化物歧化酶(SOD)活性、c-myc mRNA表达及端粒活性的影响。方法采用含何首乌血清对2BS细胞株进行处理,用黄嘌呤氧化酶法检测SOD活性,RT-PCR检测c-myc mRNA表达,TRAP-ELISA检测端粒酶活性。结果与正常对照组相比,用药组2BS细胞SOD活性明显增加(P<0.05),c-myc mRNA表达无变化,端粒酶活性显著增加(P均<0.05)。结论含何首乌血清对2BS细胞具有抗衰老作用,其机理可能与促进自由基的清除和激活端粒酶活性有关。

纤维连接蛋白诱导人胚胎肺纤维细胞增殖的MAPK信号转导通路研究

目的探讨纤维连接蛋白(FN)诱导人胚胎肺纤维细胞(HFL1)增殖的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路。方法采用不同浓度FN刺激HFL1,观察细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂PD98059、p38蛋白激酶抑制剂SB203580对FN诱导HFL1增殖作用的影响。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况。结果FN对HFL1诱导增殖作用呈剂量依赖性升高趋势,在50ng/ml时作用显著;PD98059和SB203580可抑制FN诱导的HFL1细胞增殖。结论FN诱导HFL1的细胞增殖可以通过MAPK信号转导途径实现。

人白细胞介素11cDNA的克隆、融合表达及活性测定

取人胎肺做原代培养细胞 ,PMA诱导后 ,利用RT PCR技术 ,扩增出了去掉N端信号肽序列的IL 11cDNA ;经序列分析表明 ,该序列与文献报道序列高度同源 ,仅 3个核苷酸有变化 ,氨基酸序列完全一致。将此IL 11cDNA克隆入硫氧还蛋白基因融合表达载体 pTRXFUS的trxA基因 3′末端 ,利用其 3′端的蛋白肠激酶切点 ,构建符合读码框的融合基因。该融合蛋白在大肠杆菌中表达量达 2 0 %以上。用IL 6依赖细胞株 7TD1及MTT法测定生物学活性 ,达 2 5 6× 10 5u/mL菌液 ,对融合蛋白进行了Westernblot测定 ,并对表达条件作了初步研究。

姜黄素对与A549细胞共培养的肺成纤维细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制

目的明确姜黄素对与A549细胞共培养的人胚肺成纤维细胞氧化应激水平的影响,进一步探讨姜黄素在防治肺纤维化方面可能的作用机制,寻求姜黄素干预肺纤维化的具体靶点。方法将利用与A549细胞进行Transwell跨室共培养的人胚肺成纤维细胞分为5组:对照组、转化生长因子β1(TGF-β1,5 ng/mL)处理组、不同浓度姜黄素(5、10及20μmol/L)进行干预的治疗组。应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组细胞培养上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α);分光光度法检测细胞培养上清液丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平;流式细胞仪测定细胞内的活性氧(ROS);Western blot法检测核蛋白核转录因子κB(NF-κB)的表达。结果 TGF-β1处理组细胞TNF-α浓度、ROS水平、MDA浓度及核内蛋白NF-κB表达均明显升高(P<0.01),SOD水平明显下降(P<0.01),说明人胚肺成纤维细胞在TGF-β1刺激下氧化应激水平明显升高。不同浓度姜黄素干预后TNF-α浓度、ROS水平、MDA浓度及核内蛋白NF-κB表达均明显降低(P<0.01),SOD水平明显上升(P<0.01)。结论低浓度姜黄素能够降低TGF-β1刺激的与A549细胞共培养的人胚肺成纤维细胞氧化应激水平,并显著增加SOD的表达,提示姜黄素可能通过降低氧化应激水平干预肺纤维化的发生、发展。

羟基喜树碱对人胚肺成纤维细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨羟基喜树碱(HCPT)对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HFL1)增殖与凋亡的影响。方法:常规培养HFL1细胞,以未加HCPT的HFL1为对照组,以不同浓度梯度(0.008～32 mg/L)HCPT处理的HFL1作为实验组,采用MTT法检测HCPT干预24、48、72 h后HFL1的增殖情况;光学显微镜观察干预后细胞的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;透射电镜下观察细胞凋亡的改变。结果:HCPT对HFL1有明显的抑制作用,在一定程度上呈现剂量-时间依赖性;HCPT处理组HFL1凋亡率较阴性对照组显著升高(F=399.51,P<0.01),并呈药物浓度依赖性。HCPT 0.5 mg/L作用HFL1 48 h,透射电镜下可见细胞缩小,核仁消失,染色质浓聚的凋亡状态。结论:HCPT在体外通过抑制细胞增殖和促进细胞凋亡来抑制HFL1的生长。

雷帕霉素诱导自噬抑制大鼠尿道损伤后纤维化的作用机制研究

目的探究雷帕霉素(Rapa)对大鼠尿道狭窄形成和成纤维细胞的影响及其作用机制。方法构建大鼠尿道狭窄模型(SD雄性大鼠,体质量250~300 g),采用随机数字表法分为阴性对照组、阳性对照组和Rapa组,每组10只。术后14 d取大鼠尿道组织,行HE染色观察尿道组织形态学变化,Masson染色检测胶原变化;免疫组化法观察α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。将HLF-1细胞分为对照组,Rapa组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)+Rapa组。应用transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞的周期和凋亡情况,Western blotting检测LC3的表达。结果HE染色发现Rapa组大鼠尿道组织狭窄程度较阳性对照组明显减轻,Masson及免疫组化染色结果显示,阳性对照组和Rapa组大鼠损伤尿道组织中胶原和α-SMA表达均较阴性对照组大鼠增加,但Rapa组胶原和α-SMA表达显著低于阳性对照组。与对照组相比,Rapa组HLF-1细胞迁移、侵袭能力逐渐减弱,呈剂量依赖关系(均P<0.05),而加入3-MA干预后,Rapa对HLF-1迁移、侵袭和能力的抑制作用减弱(均P<0.05)。流式细胞术及Western blotting结果显示,与对照组相比,Rapa组细胞凋亡明显增加(均P<0.05),且细胞LC3表达呈剂量依赖性增多(均P<0.05)。结论雷帕霉素可以缓解大鼠尿道组织损伤后纤维化,并抑制HLF-1细胞迁移和侵袭能力,诱导HLF-1细胞的凋亡,其效应可能是通过诱导细胞自噬来实现的。

苦参碱对血管紧张素Ⅱ诱导HFL-I增殖和胶原合成的影响

目的:研究苦参碱(matrine,Mat)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人胚肺成纤维细胞(HFL-I)增殖和胶原合成的影响,探讨其抑制纤维化的机制。方法:以AngⅡ诱导HFL-I为研究对象,不同浓度的Mat作用48 h后,采用四氮唑盐(MTT)法检测Mat对HFL-I增殖的影响;羟脯氨酸测定HFL-I胶原合成量。结果:在一定范围内,苦参碱以浓度依赖性方式抑制AngⅡ诱导的HFL-I增殖和胶原合成(P<0.01)。结论:苦参碱通过抑制AngⅡ诱导的HFL-I增殖和胶原合成增加,从而发挥有效的抗纤维化作用。

胸腺细胞分化抗原-1DNA甲基化在硫酸铍致人胚肺成纤维细胞纤维化中作用研究

目的通过观察硫酸铍刺激人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞)所致胸腺细胞分化抗原-1(Thy-1)DNA甲基化改变情况,探讨Thy-1在硫酸铍致肺纤维化中的作用。方法建立离体MRC-5细胞培养实验模型,以终浓度分别为1.0、10.0和100.0μmol/L的硫酸铍染毒(设为低、中、高剂量组),对照组不作染毒处理;另设甲基化转移酶抑制剂5-氮杂胞苷(AZC)干预组(予终浓度为10.0μmol/L硫酸铍和10.0μmol/L AZC处理)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)干预组(予终浓度为10.0μmol/L硫酸铍和0.5μmol/L TSA处理)。分别在染毒24、48和72 h后收集细胞,采用实时定量式聚合酶链式反应检测胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Thy-1的mRNA相对表达水平,巢式降落式甲基化特异性聚合酶链式反应检测Thy-1 DNA甲基化水平。结果在24 h时间点,MRC-5细胞中胶原蛋白ⅢmRNA相对表达水平呈随染毒剂量增加而增加的趋势(P<0.05);在48和72 h时间点,MRC-5细胞中胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ和α-SMA的mRNA相对表达水平均呈随染毒剂量增加而增加的趋势(P<0.05);3个剂量组MRC-5细胞上述3个指标均呈随着染毒时间的增加而增加趋势(P<0.05)。3个剂量组MRC-5细胞Thy-1 mRNA相对表达水平均低于对照组(P<0.05),高剂量组MRC-5细胞Thy-1 mRNA相对表达水平低于低剂量组(P<0.05)。中、高剂量组Thy-1 DNA甲基化水平均高于对照组(P<0.05),3个剂量组Thy-1 DNA甲基化水平呈随染毒剂量增加而增加趋势(P<0.05)。2个干预组MRC-5细胞Thy-1 DNA甲基化水平均高于对照组(P<0.05),但与中剂量组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论硫酸铍刺激可导致MRC-5细胞纤维化的发生;该过程中Thy-1 DNA甲基化程度升高,Thy-1 mRNA表达水平降低,可能是硫酸铍致肺纤维化的重要机制之一。

固本防哮饮含药血清对IL-4刺激的人胚肺成纤维细胞中ADAM33、ETS1表达的影响

目的:研究固本防哮饮含药血清对白细胞介素-4(IL-4)刺激的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)中解整合素金属蛋白酶(ADAM)33和E26转录因子(ETS)1表达的影响,探讨其可能的抗哮喘作用机制。方法:制备固本防哮饮含药血清,以IL-4刺激MRC-5细胞,采用固本防哮饮含药血清进行干预,24h后收集细胞,Real-time RT-PCR法检测各组细胞中ADAM33、ETS1 mRNA的表达;Western Blot法检测各组细胞中ADAM33、ETS1蛋白的表达;免疫荧光技术检测ADAM33和ETS1在细胞亚结构的定位及相对表达。结果:固本防哮饮含药血清能显著降低IL-4刺激的MRC-5细胞中ADAM33、ETS1 mRNA的高表达(P<0.01),且孟鲁司特钠含药血清对ADAM33 mRNA的下调作用显著优于固本防哮饮组(P<0.01),固本防哮饮含药血清对ETS1 mRNA的下调作用优于孟鲁司特钠组(P<0.05)。固本防哮饮含药血清能降低IL-4刺激的MRC-5细胞中ADAM33蛋白的高表达(P<0.05)和ETS1蛋白的高表达(P<0.01)。ADAM33、ETS1蛋白主要在细胞膜和细胞质中表达,而固本防哮饮含药血清能显著降低IL-4刺激的MRC-5细胞中ADAM33、ETS1平均荧光强度(P<0.01)。结论:固本防哮饮可通过调控ADAM33、ETS1的表达,减轻气道高反应性以及气道重塑,防治支气管哮喘。

白藜芦醇对人肺细胞株放射损伤的保护作用及其机制研究

目的探讨白藜芦醇对X射线照射后人支气管上皮细胞HBE和人胚肺成纤维细胞MRC5损伤的保护作用及可能机制。方法培养HBE和MRC5细胞,分为4个组:对照组(Vehicle)、白藜芦醇组(resveratrol,Res)、X射线照射组(RT+Vehicle)、白藜芦醇和X射线联合组(RT+Res)。Res(终浓度5μmol/L)为X射线前2h给药,X射线(20Gy,8.33Gy/min,照射144s)照射后,分别对各组细胞的形态、超微结构、生长活力、DNA损伤、凋亡情况进行观察;同时检测胞内的活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(SOD)活性、总谷胱甘肽(GSH)含量。结果 X射线能对HBE和MRC5细胞造成明显的损伤。白藜芦醇能有效地减轻X射线对细胞形态和超微结构的破坏,缓解X射线对细胞活力的影响和DNA的损伤,降低X射线照射后细胞的凋亡、降低细胞ROS的水平和MDA的含量,增加细胞总GSH的含量和总SOD的活性。结论白藜芦醇对HBE和MRC5细胞的放射损伤具有保护作用,其机制与减轻氧化应激损伤有关。

地塞米松对人胚肺成纤维细胞中糖皮质激素受体的影响

目的研究经脂多糖处理后人胚肺成纤维细胞中糖皮质激素受体的表达及地塞米松对其的影响。方法人胚肺成纤维细胞经脂多糖处理后，给予地塞米松进行干预，行细胞病理学检查及细胞增殖实验，检测培养细胞上清液中羟脯胺酸含量，采用免疫组织化学及Western blot法检测细胞中糖皮质激素受体的表达。结果应用地塞米松后，人胚肺成纤维细胞病理变化减轻，细胞的增殖明显减少，细胞上清液中羟脯胺酸含量显著下降，糖皮质激素受体表达增加，与脂多糖组比较差异均有统计学意义。结论地塞米松可减轻脂多糖所致人胚肺成纤维细胞的纤维化反应，其作用机制可能与上调糖皮质激素受体有关。