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Apoptosis mechanisms of human gastric cancer cell line MKN-45 infected with human mutant p27 被引量:9
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作者 Jin-Shui Zhu Long Wang Guo-Qiang Cheng Qin Li Zu-Ming Zhu Li Zhu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第47期7536-7540,共5页
AIM: To explore the inducing effect of human mutant p27 gene on the apoptosis of the human gastric cancer cell line MKN-45 and its associated mechanisms. METHODS: The recombinant adenovirus Ad-p27mt was constructed to... AIM: To explore the inducing effect of human mutant p27 gene on the apoptosis of the human gastric cancer cell line MKN-45 and its associated mechanisms. METHODS: The recombinant adenovirus Ad-p27mt was constructed to infect the human gastric cancer cell line MKN-45. Using flow cytometry, TUNEL assay and DNA fragment analysis, we measured the apoptotic effect of Ad-p27mt on the human gastric cancer cells. RESULTS: Ad-p27mt was successfully constructed and the infection efficiency reached 100%. After 18 h of infection, we observed an apoptotic hypodiploid peak on the flow cytometer before G1-S and apoptotic characteristic bands in the DNA electrophoresis. The apoptotic rate detected by TUNEL method was significantly higher in the Ad-p27mt group (89.4±3.12%)compared to the control group (3.12±0.13%, P < 0.01).CONCLUSION: Human mutant p27 can induce apoptosis of the human gastric cancer cells in vitro. 展开更多
关键词 细胞凋亡 MKN-45 胃癌 肿瘤细胞
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Human induced pluripotent stem cells labeled with fluorescent magnetic nanoparticles for targeted imaging and hyperthermia therapy for gastric cancer
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作者 Chao Li Jing Ruan +8 位作者 Meng Yang Fei Pan Guo Gao Su Qu You-Lan Shen Yong-Jun Dang Kan Wang Wei-Lin Jin Da-Xiang Cui 《Cancer Biology & Medicine》 SCIE CAS CSCD 2015年第3期163-174,共12页
Objective: Human induced pluripotent stem(i PS) cells exhibit great potential for generating functional human cells for medical therapies. In this paper, we report for use of human i PS cells labeled with fluorescent ... Objective: Human induced pluripotent stem(i PS) cells exhibit great potential for generating functional human cells for medical therapies. In this paper, we report for use of human i PS cells labeled with fluorescent magnetic nanoparticles(FMNPs) for targeted imaging and synergistic therapy of gastric cancer cells in vivo. Methods: Human i PS cells were prepared and cultured for 72 h. The culture medium was collected, and then was coincubated with MGC803 cells. Cell viability was analyzed by the MTT method. FMNP-labeled human i PS cells were prepared and injected into gastric cancer-bearing nude mice. The mouse model was observed using a small-animal imaging system. The nude mice were irradiated under an external alternating magnetic field and evaluated using an infrared thermal mapping instrument. Tumor sizes were measured weekly. Results: iP S cells and the collected culture medium inhibited the growth of MGC803 cells. FMNP-labeled human iP S cells targeted and imaged gastric cancer cells in vivo, as well as inhibited cancer growth in vivo through the external magnetic field. Conclusion: FMNP-labeled human i PS cells exhibit considerable potential in applications such as targeted dual-mode imaging and synergistic therapy for early gastric cancer. 展开更多
关键词 红外热成像仪 多能干细胞 胃癌细胞 磁性纳米颗粒 标记 治疗 诱导 荧光
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Expression of annexin II in gastric carcinoma and its role in gastric cancer metastasis 被引量:3
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作者 Feng Han Shikha Shrestha +4 位作者 Hua Huang Huang-Yong Lv Chuan Nie Ling Lin Ming-Liang Lu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2017年第38期7009-7015,共7页
AIM To investigate the expression of annexin II in gastric carcinoma and its role in the metastasis of gastric cancer.METHODS The expression of annexin II in 51 cases of gastric carcinoma and 24 cases of adjacent tiss... AIM To investigate the expression of annexin II in gastric carcinoma and its role in the metastasis of gastric cancer.METHODS The expression of annexin II in 51 cases of gastric carcinoma and 24 cases of adjacent tissues was detected by immunohistochemistry. The relationship between annexin II and clinical features of gastric cancer was analyzed. Annexin II specific si RNA was used to inhibit the expression of annexin II in gastric cancer HGC-27 cells, and the effects of annexin II on the migration and secretion of matrix metalloproteinases(MMPs) were observed.RESULTS The positive rate of annexin II protein was 82.4% in gastric cancer tissues and 37.5% in adjacent tissues. There was significant difference between the two groups(P < 0.01); and the positive expression of annexin II was not related to the sex and age of the patients(P > 0.05). The expression of annexin IIprotein was correlated with tumor size, histological differentiation, TNM stage, Lymph node metastasis and other clinical features were significantly correlated, the difference was statistically significant(P < 0.05). Inhibition of annexin II expression, gastric cancer HGC-27 cells migration and secretion of MMPs were significantly decreased, the difference was statistically significant(P < 0.05).CONCLUSION Annexin II is highly expressed in gastric cancer tissues, annexin II protein expression is related to tumor size, histological differentiation, TNM staging, lymph node metastasis and other clinical features were significantly correlated. Annexin II high expression can promote the invasion and metastasis of gastric cancer. 展开更多
关键词 胃的癌症 Annexin II 转移 实时量的 PCR 人的胃的癌症 HGC-27 房间 矩阵 metalloproteinases
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Telomerase and hTERT: Can they serve as markers for gastric cancer diagnosis? 被引量:7
4
作者 Yong-Bo Cheng Li-Ping Guo +3 位作者 Ping Yao Xiao-Yan Ning Gulimire Aerken Dian-Chun Fang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2014年第21期6615-6619,共5页
AIM:To investigate telomerase activity and human telomerase reverse transcriptase(hTERT)expression in normal human gastric mucosal epithelial cells(nhGMECs)and fibroblasts(nhGMFs).METHODS:nhGMECs and nhGMFs were isola... AIM:To investigate telomerase activity and human telomerase reverse transcriptase(hTERT)expression in normal human gastric mucosal epithelial cells(nhGMECs)and fibroblasts(nhGMFs).METHODS:nhGMECs and nhGMFs were isolated and cultured from specimens obtained during routine surgery for bleeding peptic ulcer.Telomerase activity in nhGMFs,nhGMECs,and the tumor cell lines BGC-823,SGC-7901 and MKN-28 cells was analyzed using the telomeric repeat amplification protocol assay.hTERT protein was determined in nhGMECs,nhGMFs,BGC-823,SGC-7901 and MKN-28 cells by indirect immunofluorescence.served in nhGMECs,nhGMFs and BGC-823,SGC-7901,MKN-28 cell lines.Positive hTERT immunostaining was detected in nhGMECs,nhGMFs,BGC-823,SGC-7901and MKN-28 cell lines.CONCLUSION:The use of telomerase or hTERT as diagnostic markers for gastric cancer may require further studies. 展开更多
关键词 gastric cancer TELOMERASE human TELOMERASE REVERSE
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秦皮乙素对人胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解的影响
5
作者 贾绍华 郭浩 +1 位作者 丁海鑫 孙萌遥 《中南药学》 CAS 2024年第3期679-684,共6页
目的探讨秦皮乙素(AES)对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解的影响及相关机制。方法采用MTT法检测细胞增殖活性;采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;葡萄糖摄取量测定和乳酸含量测定实验检测细胞糖酵解情况;Wes... 目的探讨秦皮乙素(AES)对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭和糖酵解的影响及相关机制。方法采用MTT法检测细胞增殖活性;采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;葡萄糖摄取量测定和乳酸含量测定实验检测细胞糖酵解情况;Western blot法检测迁移、侵袭及糖酵解相关蛋白的表达水平。结果AES能够抑制SGC-7901细胞的增殖活力,且这种抑制效果与AES的剂量成正相关。随着AES剂量的梯度增加,SGC-7901细胞的迁移、侵袭及糖酵解能力逐渐降低(P<0.05)。AES可以下调SGC-7901细胞HIF-1α、MMP-2、MMP-9、GLUT1、LDHA蛋白的表达水平(P<0.05)。结论AES对人胃癌SGC-7901细胞增殖活性及迁移、侵袭能力有抑制作用,通过抑制人胃癌SGC-7901细胞的葡萄糖摄取及乳酸生成降低糖酵解水平。AES可能通过影响缺氧诱导因子HIF-1α抑制SGC-7901细胞迁移、侵袭及有氧糖酵解过程。 展开更多
关键词 秦皮乙素 人胃癌SGC-7901细胞 增殖 迁移 侵袭 糖酵解
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阿奇霉素对胃癌细胞增殖、凋亡及炎症因子表达水平的影响
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作者 唐悦 葛晓明 单廷 《检验医学与临床》 CAS 2024年第7期934-939,共6页
目的探讨阿奇霉素对人胃癌细胞(AGS细胞)上清液中炎症因子表达、增殖和凋亡的影响及核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用。方法体外培养AGS细胞,将其分为对照组(不进行干预)和不同水平(12.5、25.0、50.0、100.0μg/mL)阿奇霉素组... 目的探讨阿奇霉素对人胃癌细胞(AGS细胞)上清液中炎症因子表达、增殖和凋亡的影响及核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用。方法体外培养AGS细胞,将其分为对照组(不进行干预)和不同水平(12.5、25.0、50.0、100.0μg/mL)阿奇霉素组,干预24 h,筛选阿奇霉素最适水平用于后续实验。细胞分组:对照组、阿奇霉素组(50.0μg/mL阿奇霉素)、阳性药物组(50.0μg/mL 5-氟尿嘧啶)、抑制剂组(50.0μg/mL阿奇霉素+1.0μmol/L NF-κB通路抑制剂BAY11-7082)和激活剂组(50.0μg/mL阿奇霉素+1.0μmol/L NF-κB通路激动剂Prostratin),干预24 h。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞上清液中的炎症因子[白细胞介素(IL)-10及IL-1β]水平;采用5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)测定细胞增殖率;采用Hoechst33258染色试剂盒测定细胞凋亡率;采用蛋白免疫印迹(WB)法测定增殖细胞核抗原(PCNA)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及NF-κB通路相关蛋白表达水平。结果用CCK-8检测AGS细胞活力,根据实验结果选择50.0μg/mL阿奇霉素用于后续实验。与对照组比较,阿奇霉素组和阳性药物组AGS细胞上清液中IL-1β水平、细胞增殖率、PCNA表达水平、磷酸化(p)NF-κB p65/NF-κB p65和p-IκBα/IκBα明显降低(P<0.05),IL-10水平、细胞凋亡率和Caspase-3表达水平明显升高(P<0.05);与阿奇霉素组比较,抑制剂组中BAY11-7082的出现增强了阿奇霉素对AGS细胞的作用(P<0.05),激活剂组中Prostratin的出现则削弱了阿奇霉素对AGS细胞的作用(P<0.05)。结论阿奇霉素能抑制AGS细胞的炎症和增殖,并诱导其凋亡,其作用机制可能与阻滞NF-κB通路信号转导有关。 展开更多
关键词 阿奇霉素 胃癌 AGS细胞 核转录因子-ΚB 信号通路 炎症 增殖 凋亡
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miR-106a通过调控PI3K/PDK1/AKT蛋白通路调节胃癌细胞生物学行为的研究
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作者 李琦 黄广智 +3 位作者 李亚军 武斌虎 肖茜 阮彩莲 《解剖学研究》 CAS 2024年第2期132-138,共7页
目的探讨miR-106a对胃癌细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法选取AGS人胃癌细胞系,经培养后分为27个样本。所有样本随机分为miR-106a inhibitor、miR-mimic、miR-NC共计3组,分别给予miR-106a抑制剂、miR-106a模拟物及安慰剂干预。... 目的探讨miR-106a对胃癌细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法选取AGS人胃癌细胞系,经培养后分为27个样本。所有样本随机分为miR-106a inhibitor、miR-mimic、miR-NC共计3组,分别给予miR-106a抑制剂、miR-106a模拟物及安慰剂干预。观察各组细胞存活率、细胞周期、细胞侵袭、迁移及caspase活性、Bax、Bcl-2、Casepase-3蛋白相对表达量、p85β、p-PDK1、p-AKT蛋白相对表达量。结果与miR-NC组比较,miR-106a inhibitor组AGS细胞活性降低[(分别为15.01±0.97)、(69.82±2.31)%](P<0.01);miR-106a mimics组AGS细胞G0/G1期细胞比例降低(P<0.05)(分别为17.33±1.04、58.24±0.82),G2/M和S期细胞比例升高(分别为50.11±1.12、35.64±1.07和31.56±0.92、9.24±0.25);miR-106a inhibitor组AGS细胞G0/G1期细胞比例升高(分别为78.43±1.12、58.24±0.82)(P<0.05),G2/M和S期细胞比例降低(分别为33.65±0.99、35.64±1.07和19.78±0.84、9.24±0.25)(P<0.01)。与miR-NC相比,miR-106a mimics组AGS细胞的迁移、侵袭能力增强,miR-106a inhibitor组AGS细胞的迁移、侵袭能力减弱(P<0.01);与miR-NC相比,miR-106a mimics组AGS细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9活性降低,miR-106a inhibitor组AGS细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9活性升高(P<0.05);miR-NC相比,miR-106a mimics组AGS细胞Bax(分别为0.69±0.07、1.48±0.15)、Casepase-3蛋白(分别为0.37±0.04、0.91±0.09)相对表达量降低,Bcl-2蛋白相对表达量升高(分别为1.53±0.12、0.94±0.09),miR-106a inhibitor组AGS细胞Bax(分别为2.07±0.21、1.48±0.15)、Casepase-3蛋白(分别为1.23±0.12、0.91±0.09)相对表达量升高,Bcl-2蛋白相对表达量降低(P<0.05)(分别为0.65±0.07、0.94±0.09);与miR-NC相比,miR-106a mimics组AGS细胞p85β(分别为1.24±0.12、0.94±0.09)、p-PDK1(分别为2.13±0.23、1.01±0.10)、p-AKT蛋白(分别为1.14±0.11、0.72±0.06)相对表达量升高,miR-106a inhibitor组AGS细胞p85β(分别为0.69±0.07、0.94±0.09)、p-PDK1(分别为0.75±0.07、1.01±0.10)、p-AKT(分别为0.53±0.05、0.72±0.06)相对表达量降低(P<0.05)。结论miRNA-106a表达能通过调控宫颈癌细胞PI3K/PDK1/AKT蛋白通路调控其细胞生物学行为,包括降低癌细胞活力、迁移和侵袭,诱导癌细胞细胞周期停滞,抑制miRNA-106a表达可能是胃癌患者治疗的新靶点之一。 展开更多
关键词 AGS人胃癌细胞系 miR-106a 磷脂酰肌醇激酶 磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1 蛋白激酶B 癌细胞生物学行为
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X射线对胃癌细胞和人脐静脉内皮细胞LOX家族成员的不同影响
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作者 王欣怡 牛海亚 +5 位作者 邓红 杨新燕 刘一凡 王凯博 徐传皓 韩梅 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第1期7-13,共7页
目的比较不同剂量X射线对人低分化粘液样胃腺癌细胞MGC-803和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)赖氨酰氧化酶(LOX)家族成员的影响,为了解X射线辐射后不同细胞中基因和蛋白的改变提供依据。方法0、2、4、6、8和10 Gy剂量X射线辐射MGC-803和HUVEC细... 目的比较不同剂量X射线对人低分化粘液样胃腺癌细胞MGC-803和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)赖氨酰氧化酶(LOX)家族成员的影响,为了解X射线辐射后不同细胞中基因和蛋白的改变提供依据。方法0、2、4、6、8和10 Gy剂量X射线辐射MGC-803和HUVEC细胞,用细胞增殖实验检测细胞致死率并计算细胞半数致死量(LD 50),确定后序测试剂量组;Realtime PCR、Western blot、ELISA及Amplex Red过氧化氢法分别检测辐射后细胞LOX家族成员mRNA丰度、蛋白相对量、分泌量及LOX酶活性变化;Western blot方法分析X射线辐射对细胞p-p38MAPK和p-Erk1/2MAPK影响。结果X射线辐射后的LD 50胃癌MGC-803为8.2 Gy,HUVEC为6 Gy,后序试验选用0、2、4和6 Gy剂量组。MGC-803细胞经各剂量X射线辐射后LOXL1、LOXL2和LOXL4的mRNA均下调,而LOX的mRNA上调(P<0.05);2 Gy组LOX和LOXL4的蛋白和酶分泌水平低于0 Gy组(P<0.05);4 Gy组LOX、LOXL1、LOXL2和LOXL4的蛋白和分泌低于0 Gy组(P<0.05);6 Gy组LOXL1的蛋白和分泌低于0 Gy组(P<0.05);但LOXL3的mRNA、蛋白和分泌在2 Gy组均高于0 Gy组(P<0.05)。HUVEC中,2 Gy组LOXL1和LOXL3的mRNA、蛋白和酶分泌水平均显著高于0 Gy组(P<0.05);4 Gy组LOX、LOXL1、LOXL3和LOXL4的mRNA、蛋白和酶分泌水平均较0 Gy组升高(P<0.05);6 Gy组LOXL2和LOXL4的mRNA、蛋白和酶分泌水平均较0 Gy组升高(P<0.05)。2 Gy和6 Gy组HUVEC的LOX酶活性增强(P<0.05)。MGC-803细胞的2 Gy和6 Gy组p-p38、p-p42、p-p44较0 Gy组上调(P<0.05);HUVEC经各剂量辐射p-p38、p-p42和p-p44均上调(P<0.05)。结论X射线辐射对两种细胞作用不同,一定剂量X射线辐射上调HUVEC的LOX及其家族成员的产生、分泌和酶活性,下调胃癌细胞MGC-803的除LOXL3外其他成员的产生和分泌。 展开更多
关键词 X射线 赖氨酰氧化酶家族 人脐静脉内皮细胞 胃癌细胞 MAPK信号通路
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Selective inhibition of cell growth by activin in SNU-16 cells 被引量:1
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作者 Young Il Kim Hee Joo Lee +2 位作者 Inkoo Khang Byung-Nam Cho Ha Kyu Lee 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2006年第19期3000-3005,共6页
瞄准:为了调查苯丙酸诺龙是否通过 mRNA 调整人的胃的癌症房间线 SNU-16 的房间增长,在苯丙酸诺龙受体, Smads 和 p21 (CIP1/WAF1 ) 变化。方法:人的胃的癌症房间线是有教养的, RNA 被净化,并且 RT-PCRs 与为每基因的明确地设计... 瞄准:为了调查苯丙酸诺龙是否通过 mRNA 调整人的胃的癌症房间线 SNU-16 的房间增长,在苯丙酸诺龙受体, Smads 和 p21 (CIP1/WAF1 ) 变化。方法:人的胃的癌症房间线是有教养的, RNA 被净化,并且 RT-PCRs 与为每基因的明确地设计的教材被执行。在他们之中,二房间线 SNU-5 和 SNU-16 与为 24, 48 和 72 h 的苯丙酸诺龙 A 是有教养的。房间增长被 MTT 试金测量。为 SNU-16,在房间与为 24, 48 和 72 h 的苯丙酸诺龙 A 是有教养的以后,在 ActRIA, ActRIB, ActRIIA, ActRIIB, Smad2, Smad4, Smad7,和 p21 (CIP1/WAF1 ) mRNAs 的变化与 RT-PCR 被检测。结果:SNU-16 房间的增长低而另外的房间没显示出变化,由苯丙酸诺龙 A 调整了。除了苯丙酸诺龙的子单元,苯丙酸诺龙受体, Smads ,和 p21 ( CIP1/WAF1 )是的 inhibin/activin 的基础水平标签 mRNAs 被观察在人的胃的癌症房间线有微分表示模式, AGS , KATO III , SNU-1 , SNU-5 , SNU-16 , SNU-484 , SNU-601 , SNU-638 , SNU-668 ,并且 SNU-719 。有趣地, ActR IIA 和 IIB mRNAs 的显著地更高的表情在 SNU-16 房间被观察什么时候与另外的房间相比。而 ActR IIB mRNA 水平在 SNU-16 房间增加了,在苯丙酸诺龙治疗, ActR IA, IB,和 IIA mRNA 以后,层次被减少。而 Smad7 mRNA 在 24 h 严厉地增加了并且在 SNU-16 房间在 48 h 回到了起始的水平, Smad4 mRNA 为多达 48 h 增加了。另外, p21 (CIP1/WAF1 ) 的表示,核分裂抑制剂,在 SNU-16 房间在苯丙酸诺龙治疗以后在 72 h 达到顶点。结论:我们的结果建议由苯丙酸诺龙的细胞生长的抑制被 Smad7 的否定反馈效果在表明小径的苯丙酸诺龙上调整,并且通过 p21 (CIP1/WAF1 ) 被调停在 SNU-16 细胞的激活。 展开更多
关键词 细胞生长 苯丙酸诺龙 胃癌 肿瘤细胞
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A novel animal model for in vivo study of liver cancer metastasis 被引量:6
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作者 Shinsuke Fujiwara Hikaru Fujioka +7 位作者 Chise Tateno Ken Taniguchi Masahiro Ito Hiroshi Ohishi Rie Utoh Hiromi Ishibashi Takashi Kanematsu Katsutoshi Yoshizato 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2012年第29期3875-3882,共8页
AIM:To establish an animal model with human hepatocyte-repopulated liver for the study of liver cancer metastasis.METHODS:Cell transplantation into mouse livers was conducted using alpha-fetoprotein(AFP)-producing hu-... AIM:To establish an animal model with human hepatocyte-repopulated liver for the study of liver cancer metastasis.METHODS:Cell transplantation into mouse livers was conducted using alpha-fetoprotein(AFP)-producing hu-man gastric cancer cells(h-GCCs) and h-hepatocytes as donor cells in a transgenic mouse line expressing urokinase-type plasminogen activator(uPA) driven by the albumin enhancer/promoter crossed with a severe combined immunodeficient(SCID) mouse line(uPA/SCID mice).Host mice were divided into two groups(A and B).Group A mice were transplanted with h-GCCs alone,and group B mice were transplanted with h-GCCs and h-hepatocytes together.The replacement index(RI),which is the ratio of transplanted h-GCCs and h-hepatocytes that occupy the examined area of a histological section,was estimated by measuring h-AFP and h-albumin concentrations in sera,respectively,as well as by immunohistochemical analyses of h-AFP and human cytokeratin 18 in histological sections.RESULTS:The h-GCCs successfully engrafted,repopulated,and colonized the livers of mice in group A(RI = 22.0% ± 2.6%).These mice had moderately differentiated adenocarcinomatous lesions with disrupted glandular structures,which is a characteristics feature of gastric cancers.The serum h-AFP level reached 211.0 ± 142.2 g/mL(range,7.1-324.2 g/mL).In group B mice,the h-GCCs and h-hepatocytes independently engrafted,repopulated the host liver,and developed colonies(RI = 12.0% ± 6.8% and 66.0% ± 12.3%,respectively).h-GCC colonies also showed typical adenocarcinomatous glandular structures around the h-hepatocyte-colonies.These mice survived for the full 56 day-study and did not exhibit any metastasis of h-GCCs in the extrahepatic regions during the observational period.The mice with an h-hepatocyte-repopulated liver possessed metastasized h-GCCs and therefore could be a useful humanized liver animal model for studying liver cancer metastasis in vivo.CONCLUSION:A novel animal model of human liver cancer metastasis was established using the uPA/SCID mouse line.This model could be useful for in vivo testing of anti-cancer drugs and for studying the mechanisms of human liver cancer metastasis. 展开更多
关键词 动物模型 体内试验 肝癌 尿激酶型纤溶酶原激活剂 转基因小鼠 SCID小鼠 细胞移植 胃癌细胞
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Effects of human microRNA-181a-5p on proliferation and migration of gastric cancer cells 被引量:1
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作者 酒梦娜 《China Medical Abstracts(Internal Medicine)》 2016年第3期167-168,共2页
Objective To preliminarily explore the effects of human microRNA-181a on migration of gastric cancer cells and its mechanism.Methods The expression of miRNA-181a-5p in gastric cancer cell line GC9811 and peritoneal hi... Objective To preliminarily explore the effects of human microRNA-181a on migration of gastric cancer cells and its mechanism.Methods The expression of miRNA-181a-5p in gastric cancer cell line GC9811 and peritoneal high metastasis gastric cancer cell line GC9811-P were tested by quantitative real-time polymerase chain reaction(qRT-PCR).GC9811 cell line was 展开更多
关键词 down line GC microRNA Effects of human microRNA-181a-5p on proliferation and migration of gastric cancer cells
原文传递
二烯丙基二硫通过LIMK1-Cofilin1通路抑制人胃癌细胞侵袭与上皮-间质转化
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作者 马艳华 夏红 +3 位作者 刘芳 苏坚 向姝霖 苏琦 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第21期3908-3913,共6页
目的:探讨二烯丙基二硫(DADS)对人胃癌MGC803细胞侵袭与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的影响及其机制。方法:体内外实验分为MGC803细胞组与DADS处理组。MTT、划痕实验与侵袭实验检测DADS对增殖、迁移与侵... 目的:探讨二烯丙基二硫(DADS)对人胃癌MGC803细胞侵袭与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)的影响及其机制。方法:体内外实验分为MGC803细胞组与DADS处理组。MTT、划痕实验与侵袭实验检测DADS对增殖、迁移与侵袭的影响。Western Blot检测LIMK1-Cofilin1通路与EMT相关蛋白表达。相差显微镜观察MGC803细胞形态改变。裸鼠实验检测DADS对移植瘤的作用。结果:MTT显示,DADS可呈时间依赖性抑制MGC803细胞增殖(P<0.05)。划痕实验显示,DADS组细胞迁移距离(59.9±1.9)μm较MGC803组(127.1±2.0)μm明显缩短(P<0.01)。侵袭实验显示,DADS组穿膜细胞(30.0±2.6)个较MGC803组(48.3±2.5)个明显减少(P<0.01)。Western Blot显示,DADS作用6 h、12 h、24 h、48 h后,MGC803细胞LIMK1、p-LIMK1与p-Cofilin1(P<0.001),Vimentin(P<0.001)与MMP-9(P<0.001)分别呈时间依赖性下调,而E-cadherin(P=0.001)与TIMP-3明显上调(P<0.001)。相差显微镜显示,DADS处理后,纤维母细胞样细胞减少,异型性显著降低。裸鼠实验显示,DADS组移植瘤较MGC803细胞组生长缓慢(P<0.05),DADS组移植瘤重量较MGC803细胞组降低,抑瘤率为60.19%(P<0.001),Ki-67、Vimentin、Snail和CD34阳性表达均降低,E-cadherin表达增加。结论:DADS可通过LIMK1-Cofilin1通路体内外抑制MGC803细胞侵袭与EMT。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 人胃癌MGC803细胞 LIMK1-Cofilin1通路 增殖 迁移 侵袭 上皮-间质转化
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阿托伐他汀对人胃癌AGS细胞增殖、自噬和糖代谢的影响及机制
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作者 孙祥瑞 崔晨玲 +1 位作者 王畏 汪庆飞 《中国药房》 CAS 北大核心 2023年第18期2187-2191,共5页
目的探究阿托伐他汀对人胃癌AGS细胞增殖、自噬和糖代谢的影响及机制。方法通过预实验考察低、中、高浓度(12.5、25、50μmol/L)阿托伐他汀对AGS细胞活力的影响,筛选作用浓度。正式实验分为对照组(不做干预)、阿托伐他汀组(25μmol/L)... 目的探究阿托伐他汀对人胃癌AGS细胞增殖、自噬和糖代谢的影响及机制。方法通过预实验考察低、中、高浓度(12.5、25、50μmol/L)阿托伐他汀对AGS细胞活力的影响,筛选作用浓度。正式实验分为对照组(不做干预)、阿托伐他汀组(25μmol/L)、阳性对照组(50 mg/L 5-氟尿嘧啶)、抑制剂组[25μmol/L阿托伐他汀+10μmol/L磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路抑制剂LY294002]和激活剂组(25μmol/L阿托伐他汀+10μmol/L PI3K/Akt信号通路激活剂SC79),干预24 h,检测细胞糖代谢情况(葡萄糖和乳酸含量)和细胞增殖率,以及细胞中自噬相关蛋白轻链3(LC3)Ⅰ、LC3Ⅱ及PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达。结果中、高浓度阿托伐他汀均能显著抑制AGS细胞活力(P<0.05),正式实验选择25μmol/L阿托伐他汀进行后续实验。与对照组相比,阳性对照组和阿托伐他汀组细胞中葡萄糖和乳酸含量、细胞增殖率以及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值均显著降低(P<0.05),LC3Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与阿托伐他汀组相比,抑制剂能显著加强上述指标变化(P<0.05),激活剂能显著逆转上述指标变化(P<0.05)。结论阿托伐他汀可抑制人胃癌AGS细胞的糖代谢和增殖,促进细胞自噬,其作用机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路相关。 展开更多
关键词 阿托伐他汀 人胃癌AGS细胞 自噬 增殖 糖代谢
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RORα拮抗剂T0901317通过RORα/β-catenin信号促进人胃癌MGC803细胞上皮间质转化 被引量:1
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作者 张翼臻 裴大兵 +3 位作者 苏坚 刘芳 夏红 苏琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期631-637,共7页
目的 探讨RORα拮抗剂T0901317通过RORα/β-catenin信号对促进人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化(epithelial–mesenchymal transition, EMT)的影响。方法 MTT检测细胞增殖;细胞划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭。Western blot... 目的 探讨RORα拮抗剂T0901317通过RORα/β-catenin信号对促进人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化(epithelial–mesenchymal transition, EMT)的影响。方法 MTT检测细胞增殖;细胞划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭。Western blot与免疫荧光检测RORα/β-catenin信号相关分子,免疫共沉淀检测RORα蛋白与β-catenin蛋白结合。结果 MTT检测显示,T0901317处理组较MGC803细胞增殖能力呈时间依赖性增加(P<0.05)。细胞划痕和Transwell实验显示,T0901317处理组细胞迁移与侵袭能力较MGC803细胞明显增强(P<0.05)。Western blot检测显示,T0901317处理后较未处理组RORα蛋白明显下调(P<0.05),并且可上调MGC803细胞β-catenin总蛋白与核内β-catenin(P<0.05)。T0901317处理后较对照组RORα蛋白与β-catenin蛋白结合分别明显减少(P<0.05)。T0901317处理的细胞较未处理MGC803细胞的长梭形细胞增加,异型性更为明显。T0901317可明显上调MGC803细胞Rac1、TGF-β1、Vimentin的表达(P<0.05),并抑制E-cadherin的表达(P<0.05)。结论 T0901317可通过RORα/β-catenin信号促进人胃癌MGC803细胞增殖、迁移侵袭与EMT。 展开更多
关键词 RORα T0901317 人胃癌MGC803细胞 RORα/β-catenin信号 增殖 上皮-间质转化
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新疆5种香阿魏醇提物抗胃癌作用初步研究 被引量:1
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作者 伊丽米热·阿布都外力 张海英 赵生俊 《中国药业》 CAS 2023年第8期29-34,共6页
目的探讨新疆5种香阿魏(准噶尔阿魏、多伞阿魏、山地阿魏、全裂叶阿魏、荒地阿魏)醇提物的抗胃癌作用。方法以质量浓度分别为0,0.3,1,3,10μg/mL的香阿魏乙醇提取物干预成年血管标记绿色荧光转基因斑马鱼胚胎模型,荧光显微镜下观察斑马... 目的探讨新疆5种香阿魏(准噶尔阿魏、多伞阿魏、山地阿魏、全裂叶阿魏、荒地阿魏)醇提物的抗胃癌作用。方法以质量浓度分别为0,0.3,1,3,10μg/mL的香阿魏乙醇提取物干预成年血管标记绿色荧光转基因斑马鱼胚胎模型,荧光显微镜下观察斑马鱼节间血管长度并计算血管新生抑制率。以香阿魏乙醇提取物干预人胃癌细胞SGC-7901,采用划痕愈合实验检测细胞迁移情况并计算迁移率,MTT法检测细胞增殖情况并计算增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡情况并计算凋亡率,实验均设正常对照(培养基+细胞)。结果准噶尔阿魏、多伞阿魏、山地阿魏、全裂叶阿魏、荒地阿魏醇提物的模型斑马鱼胚胎节间血管新生抑制率分别为50.12%,1.14%,1.37%,7.80%,8.98%;多伞阿魏及荒地阿魏醇提物作用48 h时的细胞迁移率分别为(8.54±7.68)%及(26.88±4.95)%,均显著低于正常对照的(90.68±5.19)%(P<0.05);上述5种香阿魏醇提物对于细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为70.91,108.69,71.48,61.20,81.20μg/mL;细胞凋亡率分别为29.50%,12.30%,24.90%,33.40%,14.00%。结论新疆5种香阿魏均可有效发挥抑制血管生成、细胞迁移、细胞增殖及促细胞凋亡的作用;其中准噶尔阿魏和全裂叶阿魏醇提物的抗胃癌作用较好。 展开更多
关键词 香阿魏 新疆 转基因斑马鱼 人胃癌SGC-7901细胞 细胞凋亡
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广藿香醇下调PD-L1的表达对人胃癌细胞抗肿瘤作用的研究 被引量:1
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作者 侯坤 王振飞 《河北医药》 CAS 2023年第5期645-650,共6页
目的研究广藿香醇能否通过下调人胃癌细胞中关键促癌因子PD-L1的表达进而抑制人胃癌细胞的恶性行为以及下调PD-L1表达的机制。方法使用不同剂量的广藿香醇作用于常规培养的人胃癌细胞SGC-7901和BGC-823,用CCK-8实验、细胞划痕实验和流... 目的研究广藿香醇能否通过下调人胃癌细胞中关键促癌因子PD-L1的表达进而抑制人胃癌细胞的恶性行为以及下调PD-L1表达的机制。方法使用不同剂量的广藿香醇作用于常规培养的人胃癌细胞SGC-7901和BGC-823,用CCK-8实验、细胞划痕实验和流式细胞技术分别检测不同浓度的广藿香醇对SGC-7901和BGC-823细胞的增殖能力、迁移能力和凋亡能力的影响,用荧光定量PCR法检测SGC-7901和BGC-823细胞中PD-L1、NF-κB的mRNA表达水平的变化,用Western-blot法检测SGC-7901和BGC-823细胞中PD-L1、NF-κB的蛋白表达水平的变化。结果经实时荧光定量PCR法检测人胃正常上皮细胞GSY和胃癌细胞系细胞BGC-823、MGC-803、SGC-7901、MKN-74中mRNAPD-L1、NF-κB mRNA表达水平,最终筛选出BGC823、SGC7901进行后续实验。与对照组比较,0.08、0.1、0.3、0.5 mmol/L药物组中BGC-823、SGC-7901细胞的增殖能力显著降低,且降低幅度随加药浓度升高而增大。经计算SGC-7901的IC_(50)浓度为0.37 mmol/L,BGC-823的IC_(50)浓度为0.27 mmol/L,因此选择浓度为0.3 mmol/L、0.5 mmol/L的广藿香醇进行后续实验。与人胃癌细胞SGC-7901、BGC-823的对照组比较,广藿香醇各加药组细胞的划痕愈合率均有明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),并且0.3、0.5 mmol/L的广藿香醇对BGC823细胞的划痕愈合率的影响更为显著。经AnnexinV-FITC/PI双染后,0.3、0.5 mmol/L广藿香醇作用后能明显诱导SGC-7901、BGC-823细胞发生凋亡。加药组(广藿香醇浓度分别为0.3,0.5 mmol/L)作用于SGC-7901、BGC-823细胞24 h后,细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),并且广藿香醇对SGC-7901、BGC-823细胞的凋亡作用呈剂量依赖,与对照组比较,0.3、0.5 mmol/L加药组的两种胃癌细胞的凋亡率均显著提高(P<0.05)。在SGC-7901中,与对照组比较,广藿香醇各加药组细胞中PD-L1、NF-κB的mRNA均明显下降(P<0.05);在BGC-823中,与对照组比较,广藿香醇各加药组细胞中PD-L1、NF-κB的mRNA均明显下降(P<0.05)。在SGC-7901细胞中,与对照组比较,广藿香醇各加药组细胞中PD-L1、NF-κB的蛋白表达含量均明显下降(P<0.05);在BGC-823细胞中,与对照组比较,广藿香醇各加药组细胞中PD-L1、NF-κB的蛋白表达含量均明显下降(P<0.05)。结论广藿香醇可以通过下调PD-L1的表达抑制胃癌细胞的恶性行为,并且这种作用机制与广藿香醇抑制胃癌细胞中NF-κB的表达有关。 展开更多
关键词 广藿香醇 人胃癌细胞 恶性行为 PD-L1 NF-κB
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沉默RORα通过活化Wnt/β-catenin通路靶基因促进人胃癌细胞增殖 被引量:2
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作者 裴大兵 张翼臻 +3 位作者 刘芳 苏坚 夏红 苏琦 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第6期1408-1413,共6页
目的探讨人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体(ROR)α与Wnt/β-连环素(catenin)通路的相互作用。方法噻唑蓝(MTT)实验验证沉默RORα对胃癌细胞系MGC803的增殖作用;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹与免疫共沉淀检测敲低RORα对Wnt... 目的探讨人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体(ROR)α与Wnt/β-连环素(catenin)通路的相互作用。方法噻唑蓝(MTT)实验验证沉默RORα对胃癌细胞系MGC803的增殖作用;实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹与免疫共沉淀检测敲低RORα对Wnt/β-catenin通路相关分子与靶基因表达;荧光素酶报告检测c-Myc基因启动子活性。结果敲低RORα可显著促进胃癌细胞增殖(P<0.05)。当RORα被敲低时可显著上调Wnt1 mRNA和蛋白表达(P<0.05);但对β-catenin无明显影响(P>0.05)。免疫共沉淀提示敲低RORα可显著降低RORα与β-catenin的结合效率(P<0.05)。RORα敲低后,核内β-catenin与转录因子(TCF)-4表达水平明显升高(P<0.05)。Wnt通路下游基因Axin、c-Myc、c-Jun和基质金属蛋白酶(MMP)-9的mRNA和蛋白水平显著上调(P<0.05)。荧光素酶报告提示,敲低RORα可显著增强c-Myc启动子活性(P<0.05)。结论敲低RORα可活化Wnt/β-catenin信号通路从而促进胃癌细胞增殖。 展开更多
关键词 维甲酸相关孤核受体(ROR)α 沉默 人胃癌MGC803细胞 增殖 WNT/Β-CATENIN通路 靶基因
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MAPK通路在红托竹荪多糖诱导人胃癌MKN-45细胞凋亡中的作用机制研究
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作者 杨茜 卢海洋 +1 位作者 胡露 王忠元 《中国医院用药评价与分析》 2023年第10期1185-1189,共5页
目的:研究红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响,并基于丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路探讨其可能的作用机制。方法:体外培养MKN-45细胞,分为对照组,红托竹荪多糖低、中及高剂量组,采用终浓度分别为0、4、6及8 mg/mL的... 目的:研究红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响,并基于丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路探讨其可能的作用机制。方法:体外培养MKN-45细胞,分为对照组,红托竹荪多糖低、中及高剂量组,采用终浓度分别为0、4、6及8 mg/mL的红托竹荪多糖作用于细胞48 h后,采用细胞计数法检测红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖的影响;采用倒置显微镜观察不同浓度的红托竹荪多糖作用于人胃癌MKN-45细胞48 h后细胞形态学的变化。设立实验组的红托竹荪多糖终浓度为8 mg/mL,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染色流式细胞技术检测细胞的凋亡率;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用蛋白质印迹法检测红托竹荪多糖作用胃癌细胞后p38蛋白激酶(p38)、磷酸化p38蛋白激酶(p-p38)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、C-JUN氨基末端激酶(JNK)、磷酸化C-JUN氨基末端激酶(p-JNK)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)和活化的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白的表达,即与3-磷酸甘油醛脱氢酶(GADPH)灰度值比值。结果:作用48 h后,不同浓度的红托竹荪多糖(4、6及8 mg/mL)对人胃癌MKN-45细胞增殖的抑制率分别为(8.27±5.99)%、(21.83±5.77)%和(56.95±5.21)%;在检测的浓度范围下,随着浓度的升高,红托竹荪多糖对MKN-45细胞增殖的抑制率逐渐升高。倒置显微镜下显示,经8 mg/mL的红托竹荪多糖作用48 h后,MKN-45细胞密度与对照组相比明显减少。流式细胞术检测结果显示,与对照组相比,实验组人胃癌MKN-45细胞凋亡率显著升高(P<0.05);细胞周期结果显示,实验组G_(1)期细胞比例明显减少(P<0.05),G_(2)期细胞比例明显增多(P<0.05),S期细胞比例明显减少(P<0.05);蛋白质印迹法结果显示,与对照组相比,实验组MKN-45细胞中cleaved Caspase-3的表达有升高趋势(P<0.05),Bcl-2的表达有降低趋势(P<0.05),p-P38/P38比值、p-ERK/ERK比值与p-JNK/JNK比值均低于对照组(P<0.05),上述差异均有统计学意义。结论:红托竹荪多糖在体外能抑制人胃癌MKN-45细胞增殖并诱导细胞凋亡,使肿瘤细胞阻滞在G_(2)/M期,其作用可能通过调控MAPK信号通路实现。 展开更多
关键词 竹荪多糖 人胃癌MKN-45细胞 细胞凋亡 细胞周期 MAPK信号通路 B淋巴细胞瘤-2蛋白 半胱氨酸蛋白酶-3
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LncRNA SNHG15/miR-123/PAK5轴通过自噬对胃癌细胞活性及血管生成的影响
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作者 刘杰 刘树青 +2 位作者 梁凤 王蕾 刘永健 《解剖学研究》 CAS 2023年第3期242-250,共9页
目的探讨lncRNA SNHG15/miR-123/PAK5轴通过调节自噬对胃癌细胞活性及血管生成的机制研究。方法将胃癌SCG-823细胞分为Control组、si-NC组、si-SNHG15组、miR-NC组、miR-123组、pcDNAPAK5组。RT-PCR检测细胞中SNHG15和miR-123表达;MTT... 目的探讨lncRNA SNHG15/miR-123/PAK5轴通过调节自噬对胃癌细胞活性及血管生成的机制研究。方法将胃癌SCG-823细胞分为Control组、si-NC组、si-SNHG15组、miR-NC组、miR-123组、pcDNAPAK5组。RT-PCR检测细胞中SNHG15和miR-123表达;MTT法检测细胞增殖能力;Transwell小室法检测细胞侵袭能力;流式细胞仪检测细胞凋亡能力;Matrigel体外成管实验检测细胞血管生成能力;蛋白质印迹检测细胞中PAK5、VEGF、LC3、Beclin1、p62蛋白表达;双荧光素酶报告基因检验SNHG15和miR-123、miR-123和PAK5的靶向关系。结果与人胃黏膜细胞系GES-1相比,人胃癌细胞系中ASG、MKN-45、SCG-823细胞中SNHG15表达明显升高,miR-123表达明显降低(P<0.05);且SCG-823细胞中SNHG15表达明显高于ASG、MKN-45细胞,miR-123表达明显低于ASG、MKN-45细胞(P<0.05)。si-SNHG15组细胞增殖、侵袭及形成小管数量均明显低于Control组,细胞凋亡率高于Control组(P<0.05);si-SNHG15组细胞中VEGF、PAK5、p62蛋白表达明显低于Control组,LC3Ⅱ/LC3Ι比值及Beclin1蛋白表达明显高于Control组(P<0.05)。与miR-NC组相比,miR-123组细胞增殖、侵袭及形成小管数量均明显降低,细胞凋亡率明显增加(P<0.05);miR-123组细胞中VEGF、PAK5、p62蛋白表达明显低于miR-NC组组,LC3Ⅱ/LC3Ι比值及Beclin1蛋白表达明显高于miRNC组(P<0.05)。通过向细胞中分别转染野生型SNHG15(SNHG15-WT)、PAK5(SNHG15-WT)时,miR-123组荧光素酶活性均明显低于miR-NC组(P<0.05)。与si-SNHG15组相比,pcDNA-PAK5组细胞细胞增殖、侵袭及形成小管数量均明显升高,细胞凋亡率明显降低(P<0.05);pcDNA-PAK5组细胞中VEGF、PAK5、p62蛋白表达明显高于si-SNHG15组,LC3Ⅱ/LC3Ι比值及Beclin1蛋白表达明显低于si-SNHG15组(P<0.05)。结论lncRNA SNHG15可靶向miR-123/PAK5轴抑制胃癌细胞增殖、侵袭和血管生成,促进胃癌细胞凋亡和自噬,进而为调控自噬途径治疗胃癌提供新的思路。 展开更多
关键词 人胃癌细胞株 血管生成 自噬 lncRNA SNHG15/miR-123/PAK5轴 小核仁RNA宿主基因15 增殖
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红景天苷调控miRNA-1343-3p/MAP3K6/MMP24信号分子抑制胃癌细胞的增殖和侵袭
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作者 田雨 王小平 +3 位作者 江锋 曹晓岚 侯鑫睿 张振东 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期651-662,共12页
【目的】本研究旨在探讨红景天苷调控miR-1343-3p/MAP3K6(丝裂原激活激酶激酶激酶6)/MMP24(膜型基质金属蛋白酶24)信号分子,在抑制胃癌细胞增殖和迁移中的作用。【方法】将人胃癌细胞(MGC-803)按照红景天苷药物浓度不同分为对照组(0μmo... 【目的】本研究旨在探讨红景天苷调控miR-1343-3p/MAP3K6(丝裂原激活激酶激酶激酶6)/MMP24(膜型基质金属蛋白酶24)信号分子,在抑制胃癌细胞增殖和迁移中的作用。【方法】将人胃癌细胞(MGC-803)按照红景天苷药物浓度不同分为对照组(0μmol/mL)和低(6μmol/mL)中(12μmol/mL)高(24μmol/mL)红景天苷剂量组;CCK-8实验检测红景天苷药物对人胃癌细胞抗增殖作用;克隆形成实验检测红景天苷药物对人胃癌细胞克隆形成能力的影响;Transwell实验检测红景天苷对人胃癌细胞侵袭能力的影响;细胞划痕实验检测红景天苷对人胃癌细胞迁移能力的影响;高通量测序(RNA-seq)检测了胃癌细胞在红景天苷作用后24 h时对照组和药物组miRNA和mRNA的表达量,将具有明显差异表达的miRNA聚类并预测其靶基因。通过Gene Ontology(GO)和KEGG富集分析,预测差异表达miRNA靶基因的相关功能及相关代谢通路,并建立miRNA与靶基因mRNA间的互作网络。免疫细胞荧光检测相关靶蛋白的表达;q-PCR检测相关候选基因的转录。【结果】CCK-8细胞毒性实验表明,红景天苷抑制了MGC-803细胞的增殖(P<0.01)。细胞克隆形成实验表明,红景天苷降低了MGC-803细胞克隆形成能力(P<0.0001)。细胞侵袭实验表明,红景天苷降低了MGC-803细胞侵袭能力(P<0.0001)。划痕实验表明红景天苷降低了细胞迁移能力(P<0.0001)。高通量测序发现红景天苷作用人胃癌细胞后,有44个miRNA的表达量发生了显著差异性变化(P<0.05),生物信息学分析结果显示差异表达miRNA所对应的靶mRNA有1384个,红景天苷作用后引起抑癌因子miR-1343-3p表达明显上调(P<0.01),而受其调控与增殖和迁移相关的MAP3K6和MMP24基因转录及表达明显下调(P<0.05)。免疫荧光实验证明红景天苷降低了MAP3K6和MMP24基因的蛋白表达水平(P<0.0001)。q-PCR实验证明红景天苷降低了MAP3K6和MMP24基因的mRNA表达水平(P<0.0001),而miR-1343-3p基因的miRNA表达上调(P<0.0001)。【结论】红景天苷调控miRNA-1343-3p/MAP3K6/MMP24信号分子抑制胃癌细胞增殖和侵袭。 展开更多
关键词 微小RNA 红景天苷 胃癌细胞 差异表达 调控机制
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