胃泌素对人胃癌细胞MKN45增殖及骨桥蛋白表达的影响研究

目的探讨胃泌素(Gastin)对人胃癌细胞MKN45增殖及骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法人胃癌细胞MKN45依药物干预进行分组,共分为三组,浓度10^(-6)mol/L的胃泌素组、胃泌素(10^(-6)mol/L)+丙谷胺(10^(-2)mol/L)联合组、不加药物培养液的对照组,均培养24 h、48 h。培养结束后取其上清液,应用酶标仪检测光密度值,连续3次。采用放射免疫法(RIA)检测OPN的表达,应用MTT法测定人胃癌细胞MKN45增殖情况。结果浓度10^(-6)mol/L的胃泌素对人胃癌细胞MKN45的增殖较对照组及联合组有明显的促进作用,差异有显著性(P<0.05);在胃癌细胞株MKN45培养液中测出OPN,随着培养时间的增加,OPN表达也有所增加,胃泌素组较对照组及联合组比较,可明显增加MKN45中的OPN含量,差异有显著性(P<0.05)。结论胃泌素会促进人胃癌细胞MKN45增殖,并促使OPN的表达,提示胃泌素促人胃癌细胞MKN45作用与OPN表达有一定关系;而其受体拮抗剂丙谷胺则可以对这种促进作用产生明显抑制作用。

顺铂对人胃癌细胞系p53及其异构体△133p53蛋白表达的影响

目的探讨顺铂对MKN45胃癌细胞系p53及其异构体△133p53蛋白表达的影响及临床意义。方法 PRMI1640血清培养的MKN45胃癌细胞系分为不同浓度梯度顺铂实验组及未加药物对照组。应用免疫细胞化学法检测p53蛋白表达情况。结果免疫细胞化学结果显示DDP组药物血清作用后,△133p53随着药物浓度增加,表达呈减少趋势,△133p53在胃癌组织中的表达呈负相关关系(P<0.01)。结论在顺铂诱导胃癌细胞系MKN45生长抑制的实验中,△133p53异构体蛋白表现出与野生型p53蛋白相反的趋势,并提示△133p53异构体蛋白本身可以作为肿瘤生物学行为的重要预测因子。

高压氧联合多柔比星处理对人低分化胃癌MKN45细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨高压氧(HBO)联合多柔比星(DOX)对人低分化胃癌MKN45细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:体外培养人胃癌MKN45细胞完成后,按照实验设计将细胞分为4组:对照组、DOX组、HBO组和HBO+DOX组。对照组加入DMSO培养基,DOX组加入终质量浓度为2 mg/L DOX溶液;HBO组则在高压氧舱(0.25 MPa)中暴露培养90 min,HBO+DOX组先在高压氧舱暴露培养90 min后再用2 mg/L DOX溶液处理。利用CCK-8法检测HBO+DOX处理对胃癌MKN45细胞的增殖抑制作用,利用流式细胞术检测胃癌MKN45细胞的凋亡率,Western blotting实验检测胃癌MKN45细胞内凋亡蛋白及JNK/STAT3信号通路相关蛋白的表达水平。结果:HBO+DOX组MKN45细胞存活率明显低于对照组和HBO组(P<0.01),也低于PTX组(P<0.05)。HBO+DOX组MKN45细胞凋亡率明显高于对照组和HBO组(P<0.01),也高于PTX组(P<0.05)。与对照组和HBO组比较,DOX组和HBO+DOX组MKN45细胞内Bad、caspase-3、PARP蛋白表达明显升高,Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.01);DOX组PARP蛋白表达明显低于HBO+DOX组(P<0.05)。与对照组和HBO组比较,DOX组和HBO+DOX组MKN45细胞内p-JNK蛋白表达明显降低,且HBO+DOX组低于DOX组(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,DOX组和HBO+DOX组MKN45细胞内p-STAT3蛋白表达明显升高(P<0.05)。与对照组、HBO组和DOX组比较,HBO+DOX组MKN45细胞内耐药性相关蛋白P-gp明显降低(P<0.01)。结论:HBO处理能够增强DOX对人胃癌MKN45细胞的增殖抑制作用及促凋亡作用,其作用机制可能是通过调节MKN45细胞中的JNK/STAT3信号通路来实现的。

黄芪多糖抑制人胃癌MKN45、MGC-803细胞生长的作用机制

目的:探讨黄芪多糖抑制人胃癌细胞MKN45、MGC-803生长的作用机制。方法:将人胃癌细胞MKN45、MGC-803置于RPMI1640培养基中做传代培养,分为对照组、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组和黄芪多糖(astragalus polysaccharides,APS)组。对照组采用1640培养基培养,5-FU组给予不同质量浓度的5-FU培养,黄芪多糖组给予不同质量浓度的黄芪多糖培养,采用四甲基偶氮噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验检测细胞生长抑制情况,使用流式细胞仪检测细胞周期,使用荧光显微镜观察细胞凋亡情况。结果:(1)培养24 h,APS质量浓度≥10.0 g·L^(-1)、5-FU质量浓度≥0.05 g·L^(-1)时,MKN45、MGC-803细胞受抑制作用均比较明显;培养48 h,APS质量浓度≥5.0 g·L^(-1)、5-FU质量浓度≥0.025 g·L^(-1)时,MKN45、MGC-803细胞受抑制作用均比较明显;(2)细胞培养48 h后,5-FU组和APS组MKN45、MGC-803细胞周期均改变,停留在G0/G1期的细胞比例显著高于对照组,处于S期和G2/M期细胞明显少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);(3)培养48 h后,5-FU组和APS组MKN45、MGC-803细胞凋亡率均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芪多糖可以抑制胃癌细胞MKN45、MGC-803的生长,其作用机制可能是使细胞停留在GO/G1期并诱导细胞发生凋亡。

番荔枝内酯体外抑制人胃癌细胞活性研究

目的探究番荔枝内酯对人胃癌细胞体外活性的影响。方法分别采用MTT实验、黏附实验和划痕实验考察番荔枝内酯对4种人胃癌细胞AGS、MKN45、BGC823和SGC7901生长活性、黏附能力和迁移能力的影响。结果番荔枝内酯抑制人胃癌细胞AGS、MKN45、BGC823和SGC7901的生长并呈剂量依赖性,其IC50值分别为5.32、6.25、5.46、4.43μg/mL;抑制人胃癌细胞黏附能力并呈剂量依赖性;抑制人胃癌细胞的迁移能力并呈剂量依赖性。结论番荔枝内酯体外可以有效抑制人胃癌细胞的活性,有望被开发成治疗胃癌的候选药物。