siRNA干扰人端粒酶逆转录酶对胃癌细胞体外增殖转移的抑制作用

目的利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术构建人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)化学合成片段,观察hTERT基因干扰后,胃癌SGC-7901细胞增殖及迁移能力的变化。方法在高表达hTERT的胃癌细胞株SGC-7901中转染hTERT siRNA,经荧光显微镜验证转染成功,实时聚合酶联反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot实验观察RNAi对hTERT基因的抑制效率;四甲基偶氮唑盐(microculture tetrazolium,MTT)实验检测胃癌细胞增殖情况,利用流式细胞仪检测细胞周期的改变,应用Transwell小室观察胃癌细胞转移能力,划痕实验检测胃癌细胞平面迁移能力。结果胃癌细胞株SGC-7901特异性hTERT基因沉默能够在基因和蛋白水平,特异地抑制hTERT的表达,抑制效率达80%以上,特异性hTERT siRNA能够抑制细胞生长,细胞的增值指数下降(P<0.05),hTERT基因干扰后细胞迁移能力减低(P<0.05)。结论hTERT基因沉默能抑制胃癌细胞增殖、迁移能力。