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SA/hI-TAC双功能融合蛋白的制备及其生物学功能鉴定 被引量:2
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作者 许晓玲 柳英 +2 位作者 陈青阁 黄通亮 高基民 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1715-1720,共6页
目的制备链亲和素连接的人干扰素诱导T细胞α趋化因子融合蛋白(SA/h I-TAC),并对其生物学功能进行鉴定。方法构建p ET24a-SA-h I-TAC/p ET21a-h I-TAC-SA表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达两种融合蛋白,用镍金属螯合层析纯化、透析复... 目的制备链亲和素连接的人干扰素诱导T细胞α趋化因子融合蛋白(SA/h I-TAC),并对其生物学功能进行鉴定。方法构建p ET24a-SA-h I-TAC/p ET21a-h I-TAC-SA表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达两种融合蛋白,用镍金属螯合层析纯化、透析复性及蛋白质印迹法(Western blot)鉴定,融合蛋白中I-TAC部分的生物学活性由淋巴细胞趋化实验检测;融合蛋白中SA的生物学活性由流式细胞仪测定。结果两种融合蛋白可在大肠杆菌BL21中被诱导表达,分别占细菌表达总蛋白量的12%和25%,经镍柱纯化后融合蛋白纯度达85%、90%,经丙烯葡聚糖凝胶S-100过滤层析后,纯度均可达到98%,融合蛋白在生物素化的MB49细胞(小鼠膀胱癌细胞)表面的修饰效率分别为91.3%、98.8%,并对淋巴细胞的趋化作用呈剂量依赖性,且h I-TAC-SA的趋化作用明显强于SA-h I-TAC。结论 SA/h I-TAC双功能融合蛋白可能应用于肿瘤局部治疗以及肿瘤疫苗。 展开更多
关键词 人干扰素诱导t细胞α趋化因子 链亲和素 融合蛋白 表面修饰
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窄谱中波紫外线对寻常性银屑病患者外周血干扰素诱导的T细胞α趋化因子表达的影响 被引量:7
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作者 樊卓 覃静净 +1 位作者 王丹丹 党云 《实用皮肤病学杂志》 2015年第2期92-94,共3页
目的探讨窄谱中波紫外线(NB-UVB)对寻常性银屑病患者外周血干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC)表达的影响。方法采用夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测正常人和寻常性银屑病患者NB-UVB治疗前后外周血I-TAC水平变化。结果寻常性银屑病患... 目的探讨窄谱中波紫外线(NB-UVB)对寻常性银屑病患者外周血干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC)表达的影响。方法采用夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测正常人和寻常性银屑病患者NB-UVB治疗前后外周血I-TAC水平变化。结果寻常性银屑病患者血清I-TAC水平明显高于正常对照组(t=21.37,P<0.05)。经NB-UVB治疗36次后,银屑病患者I-TAC水平较治疗前明显下降(t=18.23,P<0.05),且治疗前后银屑病患者银屑病皮损面积严重度指数(PASI)评分与血清I-TAC水平呈正相关(r=0.293,P<0.05)。结论 NB-UVB可降低寻常性银屑病患者外周血I-TAC水平,在银屑病的发病过程中I-TAC可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 银屑病 寻常性 中波紫外线 窄谱 t细胞α趋化因子 干扰素诱导
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重组人干扰素α-2b凝胶联合ALA-PDT疗法对尖锐湿疣患者血清T细胞亚群、GM-CSF水平变化及生活质量的影响 被引量:26
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作者 贺迎霞 张庆田 +3 位作者 王冬梅 杨璐 赵敏 宋静 《中国性科学》 2019年第1期127-131,共5页
目的探究重组人干扰素α-2b凝胶联合5-氨基酮戊酸(ALA)光动力(PDT)疗法对尖锐湿疣患者血清T细胞亚群、粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子(GM-CSF)水平变化及生活质量的影响。方法选取2014年10月~2017年4月我院86例尖锐湿疣患者,依据治疗方... 目的探究重组人干扰素α-2b凝胶联合5-氨基酮戊酸(ALA)光动力(PDT)疗法对尖锐湿疣患者血清T细胞亚群、粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子(GM-CSF)水平变化及生活质量的影响。方法选取2014年10月~2017年4月我院86例尖锐湿疣患者,依据治疗方案不同分组,各43例。对照组予以ALAPDT疗法治疗,试验组予以ALA-PDT疗法联合重组人干扰素α-2b凝胶治疗。统计观察两组治疗效果、不良反应情况,并对比治疗前、疗程结束后两组血清T细胞亚群、GM-CSF水平及生活质量评分变化情况。结果试验组治疗总有效率90. 70%(39/43)远高于对照组72. 09%(31/43),差异具有统计学意义(P <0. 05);两组治疗前血清T细胞亚群CD4^+、CD4^+/CD8^+、CD8^+、CD3^+、GM-CSF水平差异无统计学意义(P>0. 05),相较于对照组,治疗后试验组血清T细胞亚群CD4^+、CD4^+/CD8^+、CD8^+、CD3^+均较高,GM-CSF水平较低,差异具有统计学意义(P <0. 05);试验组不良反应发生率20. 93%(9/43)与对照组13. 95%(6/43)相比,差异无统计学意义(P> 0. 05);两组治疗前生活质量评分差异无统计学意义(P> 0. 05),相较于对照组,治疗后试验组生活质量评分较高,差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论对尖锐湿疣患者联合采用重组人干扰素α-2b凝胶、ALA-PDT疗法治疗,可有效调节血清T细胞亚群水平,降低血清GM-CSF水平,显著改善患者生活质量,效果较为显著,且安全性较高。 展开更多
关键词 重组人干扰素Α-2B凝胶 ALA-PDt疗法 尖锐湿疣 t细胞亚群 GM-CSF 生活质量
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中国人群优势HLA-A分子限制性甲胎蛋白T细胞表位谱研究
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作者 杨松 朱苏月 +4 位作者 吴怡 孙万亮 刘中 沈传来 鲁正 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期752-761,共10页
目的研究被13种中国人群优势人类白细胞抗原A(human leukocyte antigen A,HLA-A)分子限制的甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)T细胞表位谱。方法利用多种T细胞表位预测数据库,虚拟预测AFP抗原被13种HLA-A分子限制的候选表位肽。采用多肽... 目的研究被13种中国人群优势人类白细胞抗原A(human leukocyte antigen A,HLA-A)分子限制的甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)T细胞表位谱。方法利用多种T细胞表位预测数据库,虚拟预测AFP抗原被13种HLA-A分子限制的候选表位肽。采用多肽-肝癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)共刺激试验(多肽-PBMCs试验)和胞内细胞因子染色验证候选表位肽的免疫原性。利用表达特定HLA-A分子的12种HMy2.CIR细胞株进行HLA-A分子的多肽竞争结合试验,分析每种HLA-A分子与相应表位肽的亲和力和交叉限制性。结果通过对67例AFP阳性肝细胞癌患者进行多肽-PBMCs共刺激试验,从42种候选表位肽中获得20种能刺激患者CD8^(+)T细胞反应的阳性表位肽。HLA-A分子的多肽竞争结合试验显示,与特定HLA-A分子呈高、中、低亲和力的表位肽分别有22、13和6种候选表位肽,另有10种无亲和力;20种经多肽-PBMCs共刺激实验验证的阳性表位肽均呈现与相应HLA-A分子的高或中亲和力结合,且多数肽能与多种HLA-A分子交叉结合。结论通过肝细胞癌患者的T细胞功能性试验获得20种被中国人群优势HLA-A分子限制的AFP特异性CD8^(+)T细胞表位肽,并初步明确了这些表位肽与对应HLA-A分子的交叉结合能力。本研究为设计中国人群普适性的AFP特异性T细胞检测系统和肝癌多肽疫苗等提供了较为系统的基础数据。 展开更多
关键词 肝细胞癌 甲胎蛋白 t细胞表位 人类白细胞抗原A 抗原特异性t细胞
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I-TAC/CXCR3生物轴对甲状腺癌病理生物学行为的影响
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作者 卜春艳 顾桂源 +1 位作者 孟宇澄 曹斌 《生物技术》 CAS 2023年第6期751-755,共5页
[目的]探究干扰素诱导T细胞α亚族/CXC趋化因子受体3(I-TAC/CXCR3)生物轴对甲状腺癌TPC-1细胞增殖、转移能力的影响。[方法]将体外培养的甲状腺癌细胞株TPC-1按处理方式不同分为对照组、I-TAC刺激组(100 ng/mL I-TAC)、I-TAC中和组(CXCR... [目的]探究干扰素诱导T细胞α亚族/CXC趋化因子受体3(I-TAC/CXCR3)生物轴对甲状腺癌TPC-1细胞增殖、转移能力的影响。[方法]将体外培养的甲状腺癌细胞株TPC-1按处理方式不同分为对照组、I-TAC刺激组(100 ng/mL I-TAC)、I-TAC中和组(CXCR3中和抗体+100 ng/mL I-TAC)、CXCR3抑制组(15μg/mL CXCR3抑制剂AMG 487),RT-PCR、CCK-8、流式细胞术、Transwell实验、划痕实验、Western Blot检测各组细胞CXCR3 mRNA表达、细胞增殖、凋亡、侵袭、转移及I-TAC、CXCR3蛋白表达。[结果]与对照组比较,I-TAC刺激组CXCR3 mRNA表达(0.52±0.06 vs 0.91±0.02)、细胞增殖水平(1.13±0.17 vs 1.98±0.14)、穿膜细胞数(37.05±7.14 vs 57.41±9.62)、迁移距离(142.7±20.5 vs 376.2±31.9)增加,凋亡水平(5.52±0.73 vs 3.07±0.52)降低,CXCR3抑制组CXCR3 mRNA表达、细胞增殖水平、穿膜细胞数、迁移距离降低,凋亡水平升高(P<0.05);与I-TAC刺激组比较,I-TAC中和组CXCR3 mRNA表达(0.91±0.02 vs 0.49±0.05)、细胞增殖水平(1.98±0.14 vs 1.67±0.19)、穿膜细胞数(57.41±9.62 vs 32.93±6.58)、迁移距离(376.2±31.9 vs 143.6±21.3)降低,凋亡水平升高(3.07±0.52 vs 5.44±0.82,P<0.05)。[结论]I-TAC/CXCR3生物轴激活可促进甲状腺癌细胞的增殖、侵袭和转移,抑制其凋亡,阻断I-TAC/CXCR3生物轴相互作用或许能成为治疗甲状腺癌的新方法。 展开更多
关键词 趋化因子配体人干扰素诱导t细胞α亚族 CXC趋化因子受体3 甲状腺癌 病理生物学行为
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人甲胎蛋白对荷H-22肝癌小鼠免疫功能的影响 被引量:5
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作者 王兴旺 胥彬 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1997年第4期224-226,共3页
作者通过体外实验观察人甲胎蛋白(AFP)对荷H-22肝癌小鼠免疫功能的影响.结果表明,人AFP抑制单向混合淋巴细胞反应和白介素6的生成,并促进抑制性T细胞的诱生.
关键词 人甲胎蛋白 肝癌 抑制性t细胞 白介素6
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