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Trichloroethylene Induces Biphasic Concentration-dependent Changes in Cell Proliferation and the Expression of SET-Associated Proteins in Human Hepatic L-02 Cells 被引量:1
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作者 HONG Wen Xu YE Jin Bo +10 位作者 CHEN Mou Tong YAN Yan ZHOU Gui Feng YANG Xi Fei YANG Liang REN Xiao Hu HUANG Hai Yan ZHOU Li HUANG Xin Feng ZHUANG Zhi Xiong LIU Jian Jun 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2013年第7期618-621,共4页
Trichloroethylene (TCE) is a major pollutant that affects both occupational and general environments. The liver is an important target organ of TCEE. Substantial efforts and remarkable progress into understanding TC... Trichloroethylene (TCE) is a major pollutant that affects both occupational and general environments. The liver is an important target organ of TCEE. Substantial efforts and remarkable progress into understanding TCE cytotoxicity have been made in cultured liver cells. However, the molecular mechanisms by which TCE induces hepatotoxicity are not well understood. SET (also known as protein phosphatase 2A inhibitor, 12PP2A, or template-activating factor-I, TAF-D is a nuclear protein that regulates histone modification, gene transcription, DNA replication, nucleosome assembly, 展开更多
关键词 SET As TCE Trichloroethylene Induces Biphasic Concentration-dependent Changes in cell Proliferation and the Expression of SET-Associated Proteins in human Hepatic l-02 cells
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雷公藤甲素对人肝细胞L-02氧化损伤的初步研究 被引量:8
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作者 姚金成 刘颖 +5 位作者 胡领 张陆勇 饶健 曾令贵 江振洲 何玲 《中南药学》 CAS 2012年第8期561-564,共4页
目的研究雷公藤甲素对正常人肝细胞株L-02细胞凋亡和活性氧生成的影响。方法体外培养L-02细胞,MTT法检测雷公藤甲素对L-02细胞的毒性作用,H2DCFH-DA探针流式细胞仪检测细胞中ROS生成量,并测定细胞SOD活性、MDA含量及LDH释放量的变化。... 目的研究雷公藤甲素对正常人肝细胞株L-02细胞凋亡和活性氧生成的影响。方法体外培养L-02细胞,MTT法检测雷公藤甲素对L-02细胞的毒性作用,H2DCFH-DA探针流式细胞仪检测细胞中ROS生成量,并测定细胞SOD活性、MDA含量及LDH释放量的变化。结果雷公藤甲素诱导L-02细胞中ROS生成,且随时间的延长而增多,至12h时达峰值(P<0.01);同时,雷公藤甲素也能诱导细胞中MDA含量及LDH释放量的增加,诱导SOD活性的降低。结论雷公藤甲素体外诱导人正常肝细胞L-02细胞凋亡可能与其促进活性氧生成有关。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 人肝细胞株l-02 凋亡 活性氧
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灯盏乙素拮抗硒对人肝细胞L-02毒性的研究 被引量:3
3
作者 王红 刘琼 +1 位作者 Ali A bdella 徐辉碧 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期413-415,共3页
目的 研究灯盏乙素拮抗硒对人肝细胞株 L- 0 2毒性作用。方法 采用噻唑蓝 (MTT)法研究灯盏乙素和硒对 L - 0 2细胞生长的作用 ;倒置荧光显微镜观察细胞形态变化 ;测定丙二醛 (MDA )、巯基含量和总抗氧化能力等氧化还原相关生化指标。... 目的 研究灯盏乙素拮抗硒对人肝细胞株 L- 0 2毒性作用。方法 采用噻唑蓝 (MTT)法研究灯盏乙素和硒对 L - 0 2细胞生长的作用 ;倒置荧光显微镜观察细胞形态变化 ;测定丙二醛 (MDA )、巯基含量和总抗氧化能力等氧化还原相关生化指标。结果  0 .5 mm ol/ L 灯盏乙素与细胞作用 4 8h时达到促细胞生长最佳条件 ,且可以显著拮抗 1,5μm ol/ L硒对 L - 0 2细胞生长的抑制作用 ;灯盏乙素和硒共同处理的细胞与仅用硒处理的细胞相比 ,细胞损伤程度明显减轻 ,MDA含量显著降低 ,巯基含量及体系抗氧化能力均显著增高。结论 灯盏乙素通过抗脂质过氧化和提高细胞抗氧化能力拮抗硒对 L - 0 2细胞的毒性。 展开更多
关键词 灯盏乙素 人肝细胞L—02 脂质过氧化
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去甲肾上腺素对人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞L-02增殖、凋亡的影响 被引量:1
4
作者 施媛萍 罗光华 +2 位作者 郑璐 魏江 于洋 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第47期5-8,共4页
目的观察去甲肾上腺素(NE)对人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞L-02增殖、凋亡的影响。方法体外培养HepG2细胞和L-02细胞,分别加入不同浓度NE处理,继续培养,采用MTT法观察细胞增殖情况,HE染色和Annexin V-FITC/PI染色法观察细胞形态学变化... 目的观察去甲肾上腺素(NE)对人肝癌细胞HepG2和人正常肝细胞L-02增殖、凋亡的影响。方法体外培养HepG2细胞和L-02细胞,分别加入不同浓度NE处理,继续培养,采用MTT法观察细胞增殖情况,HE染色和Annexin V-FITC/PI染色法观察细胞形态学变化,流式细胞术观察细胞凋亡情况。结果经0.1、1、10、50μmol/L NE处理24、48 h,HepG2细胞OD值显著下降(P均<0.05),L-02细胞OD值无明显变化。10μmol/L NE作用于HepG2细胞可见典型的凋亡形态学改变,胞质收缩、深染,核染色质浓缩;L-02细胞在NE作用前后形态学均无明显改变。HepG2细胞加入10μmol/L NE后部分细胞呈绿色(为早期凋亡表现),加入50μmol/L NE后部分细胞膜呈绿色,细胞核呈红色(为晚期凋亡表现);L-02细胞均未显示有荧光。0.1、1、10μmol/L NE作用于HepG2细胞24 h后,其凋亡率均显著高于对照组(0μmol/L NE),且呈剂量依赖关系(P均<0.05);而上述浓度NE作用于L-02细胞24 h后,其凋亡率较对照组先增高后降低(P均<0.05)。结论 NE可以抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,而对L-02细胞增殖和凋亡没有影响,提示其在特定类型肝癌临床治疗中具有潜在价值。 展开更多
关键词 去甲肾上腺素 人肝癌细胞HEPG2 人正常肝细胞l-02 细胞增殖 细胞凋亡
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莲房原花青素对乙醇诱导的人胚肝细胞株L-02氧化损伤的保护作用 被引量:2
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作者 杜宏 黄家钿 +5 位作者 王艳芳 张茵 刘志杏 陈慧玲 龙香娥 张玲 《海峡药学》 2015年第1期218-221,共4页
目的研究莲房原花青素(LSPC)对乙醇诱导的人胚肝细胞株L-02氧化损伤的保护作用。方法观察200mmol·L-1乙醇,5、10、25mg·L-1的LSPC,5、10、25mg·L-1的LSPC与200mmol·L-1乙醇共同作用于肝细胞L-02 24h后,运用单细胞... 目的研究莲房原花青素(LSPC)对乙醇诱导的人胚肝细胞株L-02氧化损伤的保护作用。方法观察200mmol·L-1乙醇,5、10、25mg·L-1的LSPC,5、10、25mg·L-1的LSPC与200mmol·L-1乙醇共同作用于肝细胞L-02 24h后,运用单细胞凝胶电泳(SCGE)实验和微核实验(MNT)观察DNA和染色体损伤情况,用流式细胞术(FCM)分析凋亡率的变化以及活性氧探针(2,7-二氯荧光素)探测细胞内活性氧(ROS)水平的变化。结果 LSPC组与正常对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。纯乙醇组与正常对照组比较,差异有显著性意义,与乙醇组相比,5mg·L-1和10mg·L-1LSPC能显著降低olive尾矩(OTM)、微核率(MNF)、凋亡率和ROS的水平(均P<0.05),但高剂量组(25mg·L-1)对乙醇引起的肝细胞损伤保护作用不明显。结论适量浓度的莲房原花青素对乙醇诱导的肝细胞L-02的氧化损伤有保护作用。其机制可能与LSPC的抗氧化活性有关。 展开更多
关键词 莲房 原花青素 人胚肝细胞株 抗氧化 ROS SCGE 微核实验
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沉默HerpUD1基因表达提高人肝L-02细胞对放射处理的敏感性
6
作者 张乃宁 杨彦勇 +2 位作者 马莉 张情 宋立华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期272-277,共6页
目的:利用RNA干扰技术沉默人肝L-02细胞内可诱导的同型半胱氨酸内质网应激泛素样结构域1(homocysteine-inducible,endoplasmic reticulum stress-inducible,ubiquitin-like domain member 1,HerpUD1)基因表达,探讨其对人肝L-02细胞的辐... 目的:利用RNA干扰技术沉默人肝L-02细胞内可诱导的同型半胱氨酸内质网应激泛素样结构域1(homocysteine-inducible,endoplasmic reticulum stress-inducible,ubiquitin-like domain member 1,HerpUD1)基因表达,探讨其对人肝L-02细胞的辐射增敏作用。方法:根据HerpUD1基因序列设计shRNA片段,构建靶向HerpUD1基因的shRNA表达载体,稳定转染L-02细胞,采用real-time PCR和Western blotting检测转染后细胞中HerpUD1 mRNA及蛋白的表达。以8 Gy X射线照射转染后细胞,Hoechst荧光染色观察细胞的凋亡情况。结果:成功构建靶向HerpUD1的真核表达干扰载体,并建立稳定转染shHerpUD1的L-02细胞株。在稳定转染的L-02细胞中,shHerpUD1-1420干扰片段干扰效果最好,与pGPU6-NC组(阴性对照组)相比,shHerpUD1-1420组HerpUD1 mRNA表达显著下降[(0.15±0.05)vs(1.00±0.08),P<0.05],其蛋白水平的表达也显著降低[(0.19±0.01)vs(1.62±0.08),P<0.01]。转染后细胞经8 Gy X射线照射后24 h,L-02-shHerpUD1-1420组细胞凋亡率显著高于L-02-NC组(阴性对照组)[(10.23±3.37)%vs(6.89±1.49)%,P<0.01],而L-02-NC组与L-02-Neo组相比则无显著差异(P>0.05)。结论:HerpUD1基因表达沉默显著增加X射线辐射引起的L-02细胞凋亡,具有辐射增敏作用。 展开更多
关键词 RNA干扰 HerpUD1基因 内质网膜蛋白 人肝l-02细胞 放射处理 增敏作用
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甘草提取物对雷公藤甲素损伤后人肝L-02细胞中UGT1A、MRP2表达的影响 被引量:10
7
作者 张靖 胡骞 +1 位作者 谭亲友 朱胜楠 《中国药房》 CAS 北大核心 2018年第1期65-68,共4页
目的:考察甘草提取物(GE)对雷公藤甲素(TP)损伤后人肝L-02细胞中尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A(UGT1A)、多药耐药相关蛋白2(MRP2)表达的影响,研究甘草对TP的减毒机制。方法:采用MTT法测定0(空白对照)、40、80、160 nmol/L TP分别培养L-0... 目的:考察甘草提取物(GE)对雷公藤甲素(TP)损伤后人肝L-02细胞中尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A(UGT1A)、多药耐药相关蛋白2(MRP2)表达的影响,研究甘草对TP的减毒机制。方法:采用MTT法测定0(空白对照)、40、80、160 nmol/L TP分别培养L-02细胞12、18、24 h后的细胞存活率。将L-02细胞分为空白对照组(空白培养基)、模型对照组(80 nmol/L TP)和GE预处理组(分别以30、60、90 mg/L GE预处理24 h后再加入80 nmol/L TP),继续培养18 h后,采用MTT法检测各组的细胞存活率。在上述分组(GE预处理组的GE浓度为60 mg/L)基础上增设利福平(RIF)组(阳性对照,10μmol/L RIF预处理24 h后再加入80nmol/L TP),培养24 h后,检测各组细胞中UGT1A、MRP2蛋白表达。结果:TP对细胞活性的抑制作用与浓度和时间呈正相关。与空白对照组比较,模型对照组的细胞存活率明显降低(P<0.05),细胞中MRP2蛋白表达明显减弱(P<0.01)。与模型对照组比较,30、60、90 mg/L GE预处理组的细胞存活率均明显升高(P<0.01);60 mg/L GE预处理组细胞中UGT1A和MRP2蛋白表达均明显增强(P<0.01)。结论:GE预处理可减轻TP对人肝L-02细胞的损伤,其减毒机制可能与提高细胞中UGT1A、MRP2的表达有关。 展开更多
关键词 甘草提取物 雷公藤甲素 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A 多药耐药相关蛋白2 人肝L—02细胞
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BDE-209对人正常肝L-02细胞生长和凋亡的影响
8
作者 朱婷婷 陆永奋 +6 位作者 齐秀娟 黄毅 孟海涛 尹东高 孙滔滔 邓臣 吴德生 《北京大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第5期966-970,共5页
采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)和Hoechst 33342/PI等,分析十溴联苯醚(BDE-209)对人正常肝L-02细胞增殖和凋亡的影响。结果显示,在不同浓度水平(0~70μg/mL)的BDE-209中暴露24小时后,细胞增殖抑制率随着BDE-209浓度的升高而升高。经SPS... 采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)和Hoechst 33342/PI等,分析十溴联苯醚(BDE-209)对人正常肝L-02细胞增殖和凋亡的影响。结果显示,在不同浓度水平(0~70μg/mL)的BDE-209中暴露24小时后,细胞增殖抑制率随着BDE-209浓度的升高而升高。经SPSS-Probit-Logit法计算,得出BDE-209对人正常肝L-02细胞24小时的IC50为127.08±24.93μg/mL。在不同浓度水平(0~15μg/mL)的BDE-209中暴露24小时后,与对照组相比,各剂量组细胞未出现明显的细胞形态变化,仅在15μg/mL剂量组观察到细胞减少的现象。凋亡染色后,荧光显微镜检发现,随着BDE-209浓度升高,亮蓝、淡粉染色细胞数量增大,人正常肝L-02细胞的凋亡率增高。与对照组相比,各剂量组差异均具有统计学意义。分析结果表明,BDE-209可引起人正常肝L-02细胞增殖受到抑制,并诱导细胞凋亡率增加。 展开更多
关键词 BDE-209 人肝l-02细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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雷公藤甲素诱导肝细胞L-02凋亡的作用机制研究 被引量:12
9
作者 姚金成 刘颖 +5 位作者 胡领 张陆勇 饶健 曾令贵 江振洲 何玲 《中国药房》 CAS CSCD 2013年第11期964-967,共4页
目的:研究雷公藤甲素诱导肝细胞L-02凋亡的作用机制。方法:体外培养L-02细胞,MTT法检测雷公藤甲素对L-02细胞的毒性作用,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态的改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Westernblot法检测人抗兔p53、B细胞淋巴瘤... 目的:研究雷公藤甲素诱导肝细胞L-02凋亡的作用机制。方法:体外培养L-02细胞,MTT法检测雷公藤甲素对L-02细胞的毒性作用,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态的改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Westernblot法检测人抗兔p53、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)与线粒体、胞浆中细胞色素C(Cyt-c)的表达。结果:不同浓度雷公藤甲素(60、120、180nmol/L)与同样浓度(120nmol/L)不同作用时间(12、24、48h)作用L-02细胞,雷公藤甲素对细胞的抑制作用与浓度或时间呈正相关;Hoechst33258染色可见细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变;Westernblot法显示120nmol/L雷公藤甲素作用后,细胞p53、Bax与胞浆中Cyt-c表达显著增强(P<0.05),而Bcl-2与线粒体中Cyt-c表达显著减弱(P<0.05)。结论:雷公藤甲素体外可诱导L-02细胞凋亡,其作用机制可能与Bcl-2与线粒体中Cyt-c表达下调和p53、Bax与胞浆中Cyt-c表达上调有关。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 人肝细胞l-02 凋亡
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雷公藤甲素诱导肝细胞L-02凋亡的机制 被引量:8
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作者 姚金成 刘颖 +5 位作者 胡领 张陆勇 饶健 曾令贵 江振洲 何玲 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期698-703,共6页
目的:探讨雷公藤甲素对人正常肝细胞L-02细胞的凋亡诱导作用及细胞线粒体呼吸链复合体抑制剂对细胞凋亡的影响。方法:采用Annexin V-FITC/PI双染色法检测雷公藤甲素对L-02细胞的凋亡作用,JC-1染色观察细胞线粒体膜电位的变化,线粒体呼... 目的:探讨雷公藤甲素对人正常肝细胞L-02细胞的凋亡诱导作用及细胞线粒体呼吸链复合体抑制剂对细胞凋亡的影响。方法:采用Annexin V-FITC/PI双染色法检测雷公藤甲素对L-02细胞的凋亡作用,JC-1染色观察细胞线粒体膜电位的变化,线粒体呼吸链复合体抑制剂对细胞活性氧释放及细胞凋亡的影响。结果:流式细胞仪检测结果显示,雷公藤甲素对细胞增殖的抑制作用与浓度、时间呈正相关;JC-1染色可见经雷公藤甲素作用的细胞线粒体膜电位降低;加入细胞线粒体呼吸链抑制剂后,与单用雷公藤甲素组比较,雷公藤甲素+rotenone组细胞活性氧释放水平显著降低(P<0.05),同时抑制剂合用组细胞凋亡百分率显著降低(P<0.05)。结论:雷公藤甲素体外可诱导L-02细胞凋亡,机制可能是与公藤甲素上调经线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅲ产生的活性氧有关。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 人肝细胞株l-02 凋亡 线粒体 活性氧
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雷公藤甲素对Caspase诱导人肝细胞L-02凋亡机制的研究 被引量:5
11
作者 姚金成 刘颖 +5 位作者 胡领 张陆勇 饶健 曾令贵 江振洲 何玲 《中国药房》 CAS CSCD 2012年第43期4036-4038,共3页
目的:研究雷公藤甲素诱导正常人肝细胞株L-02细胞凋亡的机制。方法:体外培养L-02细胞。MTT法检测雷公藤甲素的细胞毒性作用;Annexin V-FITC/PI双染法检测雷公藤甲素对L-02细胞的凋亡诱导作用;测定细胞基质中半胱天冬氨酸酶(Caspase)8、C... 目的:研究雷公藤甲素诱导正常人肝细胞株L-02细胞凋亡的机制。方法:体外培养L-02细胞。MTT法检测雷公藤甲素的细胞毒性作用;Annexin V-FITC/PI双染法检测雷公藤甲素对L-02细胞的凋亡诱导作用;测定细胞基质中半胱天冬氨酸酶(Caspase)8、Caspase9与Caspase3活性的变化及加入Caspase抑制剂Z-DEVD-FMK后对细胞凋亡的影响。结果:雷公藤甲素能显著诱导L-02细胞的凋亡,其作用呈明显的量效关系与时间依赖性;120nmol·L-1雷公藤甲素作用L-02细胞24h使Caspase3的活性显著增强;加入Z-DEVD-FMK后,能有效抑制雷公藤甲素诱导的细胞凋亡。结论:雷公藤甲素体外诱导正常人肝细胞株L-02细胞凋亡可能与上调Caspase3、9的活性有关。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 人肝细胞株l-02 细胞凋亡 半胱天冬氨酸酶
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氯化两面针碱对肝、肾的毒性及酸性成纤维细胞生长因子对其的保护作用研究 被引量:7
12
作者 韦敏 刘丽敏 +1 位作者 李丹妮 刘华钢 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1338-1341,共4页
目的:观察氯化两面针碱在体外对人胚肝细胞L-02,人胚肾细胞293的毒性作用,及酸性成纤维细胞生长因子(aF-GF)对氯化两面针碱引起的肝、肾细胞损伤的保护作用。方法:采用MTT法检测不同浓度氯化两面针碱对人肝、肾细胞的毒性,及加入aFGF后... 目的:观察氯化两面针碱在体外对人胚肝细胞L-02,人胚肾细胞293的毒性作用,及酸性成纤维细胞生长因子(aF-GF)对氯化两面针碱引起的肝、肾细胞损伤的保护作用。方法:采用MTT法检测不同浓度氯化两面针碱对人肝、肾细胞的毒性,及加入aFGF后对肝、肾细胞的IC50值的影响。采用紫外分光光度法测定培养上清液中的SOD、MDA、LDH值。结果:aFGF可明显提高人胚肝细胞L-02、人胚肾细胞293的IC50值。aFGF保护组与氯化两面针碱损伤组的SOD、MDA和LDH测定结果有显著性差异(P<0.05)。结论:氯化两面针碱对人胚肝细胞L-02和人胚肾细胞293有一定毒性,加入aFGF后,可明显减轻氯化两面针碱对人胚肝细胞L-02和人胚肾细胞293的毒性作用。 展开更多
关键词 氯化两面针碱 人胚肝细胞l-02 人胚肾细胞293 毒性 酸性成纤维细胞生长因子
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雷公藤甲素对人肝细胞L-02肝药酶活性的影响 被引量:7
13
作者 姚金成 刘颖 +5 位作者 胡领 张陆勇 饶健 曾令贵 江振洲 何玲 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第20期1597-1600,共4页
目的:研究雷公藤甲素对正常人肝细胞株L-02细胞的损伤作用及其对肝CYP3A及CYP2E1蛋白表达量的影响。方法:体外培养L-02细胞,MTT法检测雷公藤甲素对L-02细胞的损伤,试剂盒测定培养基上清液中AST、ALT及AKP活性,Western-blot测定细胞中CY... 目的:研究雷公藤甲素对正常人肝细胞株L-02细胞的损伤作用及其对肝CYP3A及CYP2E1蛋白表达量的影响。方法:体外培养L-02细胞,MTT法检测雷公藤甲素对L-02细胞的损伤,试剂盒测定培养基上清液中AST、ALT及AKP活性,Western-blot测定细胞中CYP3A及CYP2E1蛋白的含量。结果:雷公藤甲素对L-02细胞有损伤作用,且随雷公藤甲素浓度的增加或孵育时间的延长,其损伤作用增强,同时,培养基中AST、ALT及AKP的活性增强;雷公藤甲素诱导细胞中CYP3A蛋白表达减弱,CYP2E1蛋白表达增强。结论:雷公藤甲素体外对人正常肝细胞L-02细胞有损伤作用,且能影响肝CYP450酶系的表达。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 人肝细胞株l-02 损伤 肝CYP450酶
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雷公藤甲素对人肝细胞L-02钙离子及P38MAPK磷酸化的影响 被引量:5
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作者 姚金成 刘颖 +5 位作者 胡领 张陆勇 饶健 曾令贵 江振洲 何玲 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期760-763,共4页
目的:研究雷公藤甲素对正常人肝细胞株L-02细胞凋亡诱导的作用及对细胞内钙离子及p38MAPK磷酸化的影响。方法:体外培养L-02细胞,Fluo-3AM标记与PI法观察雷公藤甲素对细胞的损伤作用,并测定雷公藤甲素作用下L-02细胞内钙离子浓度及Phosph... 目的:研究雷公藤甲素对正常人肝细胞株L-02细胞凋亡诱导的作用及对细胞内钙离子及p38MAPK磷酸化的影响。方法:体外培养L-02细胞,Fluo-3AM标记与PI法观察雷公藤甲素对细胞的损伤作用,并测定雷公藤甲素作用下L-02细胞内钙离子浓度及Phospho-p38与Total-p38的含量。结果:雷公藤甲素体外诱导L-02细胞损伤,随着孵育时间的延长,细胞内钙离子浓度升高,至9h时达峰值(P<0.01),12h时有所下降(P<0.05);同时,雷公藤甲素促进细胞中P38MAPK的磷酸化(P<0.01),但对Total-p38无影响。结论:细胞内钙离子的释放及p38MAPK的磷酸化可能参与了雷公藤甲素引起的L-02细胞毒性。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 人肝细胞株l-02 凋亡 钙离子 MAPK
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山豆根主要成分苦参碱诱导人正常肝细胞L-02凋亡及其对细胞周期的影响 被引量:7
15
作者 耿娅 邵珍 +2 位作者 王清然 符胜光 邓中平 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期790-797,共8页
目的:探索山豆根主要成分苦参碱诱导人肝(实质)细胞L-02凋亡的作用及其对细胞周期的影响。方法:以人肝细胞株L-02为模型,应用CCK8法以及流式细胞仪检测山豆根提取物(water extracts of sophorae tonkinensis radix et rhizoma,WE-SRR)... 目的:探索山豆根主要成分苦参碱诱导人肝(实质)细胞L-02凋亡的作用及其对细胞周期的影响。方法:以人肝细胞株L-02为模型,应用CCK8法以及流式细胞仪检测山豆根提取物(water extracts of sophorae tonkinensis radix et rhizoma,WE-SRR)及苦参碱(matrine,MT)在不同时间与浓度对L-02细胞增殖的影响以及作用15 h后对L-02凋亡及细胞周期的影响。结果:WE-SRR及MT均能时间及剂量依赖性抑制L-02细胞增殖。12和18 mg·m L-1WE-SRR及1. 67和2 mg·m L-1MT可诱导早期凋亡,而20 mg·m L-1WESRR组则表现为诱导晚期凋亡。所有浓度WE-SRR均可引起G2/M期细胞比例升高,且18和20 mg·m L-1WE-SRR组S期细胞比例升高; MT组低浓度时G0/G1期细胞比例明显升高,高浓度(2 mg·m L-1)时G2/M期细胞、S期细胞比例均明显升高。结论:WE-SRR及MT对人正常肝细胞L-02具有细胞毒性,其机制包括抑制增殖、诱导凋亡和细胞周期阻滞。MT和WE-SRR对细胞的影响变化趋势一致,推测MT是WE-SRR的主要毒性物质成分之一。 展开更多
关键词 山豆根提取物 苦参碱 人正常肝细胞l-02 细胞凋亡 细胞周期
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蛋白激酶Cα对人正常肝和肝癌细胞中Ha-ras基因表达的影响 被引量:3
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作者 冯怡 柳惠图 高萍 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期781-785,共5页
运用基因转染技术 ,将蛋白激酶C(PKCα)cDNA正向插入的真核表达重组质粒pXJ4 1 PKCα ,导入人正常肝细胞 (L 0 2 ) ,经蛋白质免疫印迹等检验 ,表明成功构建了稳定过表达PKCα的人正常肝细胞模型 (LT3) ,用LT3和表达反义PKCα的人肝癌细... 运用基因转染技术 ,将蛋白激酶C(PKCα)cDNA正向插入的真核表达重组质粒pXJ4 1 PKCα ,导入人正常肝细胞 (L 0 2 ) ,经蛋白质免疫印迹等检验 ,表明成功构建了稳定过表达PKCα的人正常肝细胞模型 (LT3) ,用LT3和表达反义PKCα的人肝癌细胞HT6为细胞模型 ,通过RT PCR ,蛋白质印迹 (Westernblot)等分析和进一步运用自行构建的真核表达质粒prasGL3,进行荧光素酶活性检测表明 :过表达PKCα可以促进L 0 2细胞的增殖速率 ,并引起Ha ras基因转录水平上升和Ha ras启动子活性升高 ;反之 ,表达反义PKCα的BEL 74 0 2细胞增殖被抑制 ,Ha ras基因转录水平下降 ,Ha ras启动子活性降低 .通过实验我们首次观察到 ,PKCα亚类对Ha ras癌基因表达的影响与其对Ha ras启动子活性的作用有关 ,PKCα可能参与了对Ha 展开更多
关键词 蛋白激酶CΑ 人正常肝 肝癌细胞 HA-RAS 基因表达
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黄曲霉毒素的细胞毒性及机制 被引量:5
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作者 徐明芳 耿梦梦 《乳业科学与技术》 2018年第3期1-9,共9页
以正常人肝细胞(L-02细胞)为研究对象,根据细胞增殖率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量等指标的变化研究黄曲霉毒素B_1(aflatoxin B_1,AFB_1)的毒性作用及氧化应激损伤,选用VC作为AFB_1损... 以正常人肝细胞(L-02细胞)为研究对象,根据细胞增殖率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量等指标的变化研究黄曲霉毒素B_1(aflatoxin B_1,AFB_1)的毒性作用及氧化应激损伤,选用VC作为AFB_1损伤肝细胞的保护剂,通过比色法测定细胞的相对存活率,从细胞周期的变化和细胞凋亡率研究AFB_1引起L-02细胞凋亡的程度及机制。结果表明:根据AFB_1的半数细胞抑制率(inhibition of cell,IC)(IC_(50))值,选择AFB_1组的暴露质量浓度为40?μg/m L,VC的质量浓度选择在细胞活性最高区域的0.025~0.250 mg/m L;当VC质量浓度≥0.5 mg/m L时,细胞活性与AFB_1损伤组相近;对于L-02细胞,VC处理组及VC+AFB_1处理组细胞的ROS水平较空白对照组高,但较AFB_1处理组低,表明添加VC能够帮助L-02细胞降低胞内MDA水平、减小拮抗氧化损伤;通过细胞凋亡及细胞周期检测,发现AFB_1造成L-02细胞中晚期凋亡的细胞所占比例较大,添加VC能有效抑制细胞凋亡的发生;在细胞周期的检测中发现,AFB_1能够造成L-02细胞发生G_0/G1期阻滞;添加VC后,各细胞周期指标与空白对照组接近。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 液态乳 风险评估 人胚胎肝细胞(l-02细胞) 氧化应激
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三七总黄酮对高血脂大鼠血脂的影响 被引量:34
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作者 赵文萃 张宁 +2 位作者 周慧琴 刘春梅 张琦 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期143-147,共5页
目的:研究三七总黄酮的降血脂作用及机制。方法:Wistar大鼠建立高血脂动物模型,随机分为正常组,高血脂模型组,三七总黄酮高、中、低剂量组(200,100,50 mg·kg-1),辛伐他丁组(8 mg·kg-1),连续ig给药6周,生化法检测大鼠血液和肝... 目的:研究三七总黄酮的降血脂作用及机制。方法:Wistar大鼠建立高血脂动物模型,随机分为正常组,高血脂模型组,三七总黄酮高、中、低剂量组(200,100,50 mg·kg-1),辛伐他丁组(8 mg·kg-1),连续ig给药6周,生化法检测大鼠血液和肝脏组织中总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量。采用脂肪乳诱导肝L-02细胞脂肪变性,分为正常组、模型组、三七总黄酮低、中、高剂量组(100,300,500μmol·L-1)和辛伐他汀(100μmol·L-1)组,共培养24 h,生化法测定TG和TC含量,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测二脂酰甘油酰基转移酶(DGAT),羟甲基戊二酸单酰辅酶(HMG-Co A),胆固醇7α-羟化酶(CYP7A),肝脏甘油三脂脂肪酶(HTGL)含量。结果:大鼠实验中,与正常组比较,模型组大鼠的血脂升高(P<0.01);与高血脂模型组比较,三七总黄酮高剂量能抑制大鼠肝脏指数(P<0.05),高、中剂量能明显降低血清TC,TG,LDL-C含量(P<0.05,P<0.01),提高HDL-C含量(P<0.05,P<0.01),并且能够抑制大鼠肝组织TC,TG的含量(P<0.05)。细胞实验中,三七总黄酮中、高剂量可明显降低脂肪化细胞TC,TG含量(P<0.05,P<0.01);降低DGAT,HMG-Co A活性(P<0.01);明显升高CYP7A,HTGL活性(P<0.05,P<0.01)。结论:三七总黄酮具有较好的降血脂作用,可能与其降低DGAT,HMG-Co A活性,升高CYP7A,HTGL活性有关。 展开更多
关键词 三七总黄酮 高血脂大鼠 人肝l-02细胞 血脂
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槲皮素在人肝微粒体和细胞株中对细胞色素P4501A1活性的影响 被引量:6
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作者 朱燕萍 金念祖 +3 位作者 周建伟 茅力 赵人琤 童建 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期233-234,共2页
细胞色素P450 1A1(CYP 1A1)与癌症的关系十分密切,许多化学致癌物均需经CYP 1A1代谢活化后才能发挥其致癌作用.槲皮素(Quercetin,Que)具有抗炎、抗过敏、抗肿瘤等多种生物活性及药理作用.啮齿类动物实验显示槲皮素能抑制致癌剂、促癌剂... 细胞色素P450 1A1(CYP 1A1)与癌症的关系十分密切,许多化学致癌物均需经CYP 1A1代谢活化后才能发挥其致癌作用.槲皮素(Quercetin,Que)具有抗炎、抗过敏、抗肿瘤等多种生物活性及药理作用.啮齿类动物实验显示槲皮素能抑制致癌剂、促癌剂的致癌、促癌作用[1].但由于人肝标本的缺乏,故以往对槲皮素的抗癌作用研究主要集中在细胞或动物实验上.我们对人肝L-02细胞和人肝组织的9乙氧基-3异吩噁唑酮-0-脱乙基酶(EROD)活性进行了比较,初步探讨细胞株和人肝组织在生物学实验上是否存在一定程度的差异. 展开更多
关键词 槲皮素 细胞色素P450 肝微粒体 CYP 细胞株 促癌剂 化学致癌物 啮齿类动物 生物活性 抗肿瘤
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