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Human umbilical cord Wharton's jelly-derived oligodendrocyte precursor-like cells for axon and myelin sheath regeneration 被引量:8
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作者 Hong Chen Yan Zhang +1 位作者 Zhijun Yang Hongtian Zhang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2013年第10期890-899,共10页
Human umbilical mesenchymal stem cells from Wharton's jelly of the umbilical cord were induced to differentiate into oligodendrocyte precursor-like cells in vitro. Oligodendrocyte precursor cells were transplanted in... Human umbilical mesenchymal stem cells from Wharton's jelly of the umbilical cord were induced to differentiate into oligodendrocyte precursor-like cells in vitro. Oligodendrocyte precursor cells were transplanted into contused rat spinal cords. Immunofluorescence double staining indicated that transplanted cells survived in injured spinal cord, and differentiated into mature and immature oligodendrocyte precursor cells. Biotinylated dextran amine tracing results showed that cell transplantation promoted a higher density of the corticospinal tract in the central and caudal parts of the injured spinal cord. Luxol fast blue and toluidine blue staining showed that the volume of residual myelin was significantly increased at 1 and 2 mm rostral and caudal to the lesion epicenter after cell transplantation. Furthermore, immunofluorescence staining verified that the newly regenerated myelin sheath was derived from the central nervous system. Basso, Beattie and Bresnahan testing showed an evident behavioral recovery. These results suggest that human umbilical mesenchymal stem cell-derived oligodendrocyte precursor cells promote the regeneration of spinal axons and myelin sheaths. 展开更多
关键词 neural regeneration stem cells spinal cord injury Wharton's jelly human umbilical mesenchymalstem cells oligodendrocyte precursor-like cells AXON myelin sheath nerve repair grants-supportedpaper NEUROREGENERATION
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局灶性脑缺血模型大鼠转录因子Olig1的表达变化及其在髓鞘修复中的作用
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作者 王苏平 赵红 +2 位作者 王得新 张拥波 高晓玉 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1086-1089,共4页
目的探讨Olig1在局灶性脑缺血后不同时间点的表达变化及其参与髓鞘修复的可能机制。方法线栓法建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,使用免疫组化和Western blot的方法观察脑缺血后1d、3d、7d、14d和28d Ol... 目的探讨Olig1在局灶性脑缺血后不同时间点的表达变化及其参与髓鞘修复的可能机制。方法线栓法建立大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,使用免疫组化和Western blot的方法观察脑缺血后1d、3d、7d、14d和28d Olig1的表达变化。碱性髓鞘蛋白(myelin basic protein,MBP)是髓鞘的组成成分,用作髓鞘的标志物,检测脑缺血后上述各时间点MBP的表达变化。结果正常大鼠Olig1广泛分布于脑白质和灰质,如皮层、胼胝体和纹状体等区域,典型地沿着神经纤维成束状排列。正常大鼠Olig1主要位于少突胶质细胞的胞浆,脑缺血后Olig1由胞浆移至细胞核。Olig1的表达在脑缺血后1d下降,3d回到正常水平并维持此水平到脑缺血后28d。MBP蛋白表达在脑缺血后1d至28d逐渐下降。结论 Olig1在脑缺血的初期表达下降,抑制了神经的再生,针对Olig1的表达规律进行干预将为脑缺血后髓鞘的修复提供理论依据。 展开更多
关键词 脑缺血 少突胶质细胞 Olig1 髓鞘再生 少突胶质前体细胞
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中枢神经系统髓鞘再生的分子机制和脱髓鞘疾病的潜在治疗药物 被引量:3
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作者 邓鑫 金宇晨 +3 位作者 邢琨 禹洁 邓斯颖 张媛 《陕西师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期21-35,共15页
脱髓鞘疾病是以神经髓鞘脱失为主、神经元胞体及轴突相对损伤较轻为特征的一组疾病。正常生理条件下,髓鞘脱失后机体会自发地进行髓鞘再生,但在病理条件下,该过程会因多种因素被抑制,导致髓鞘再生不完全或失败,使脱髓鞘发展,病情持续加... 脱髓鞘疾病是以神经髓鞘脱失为主、神经元胞体及轴突相对损伤较轻为特征的一组疾病。正常生理条件下,髓鞘脱失后机体会自发地进行髓鞘再生,但在病理条件下,该过程会因多种因素被抑制,导致髓鞘再生不完全或失败,使脱髓鞘发展,病情持续加重。中枢神经系统髓鞘再生过程涉及少突胶质细胞前体细胞(oligodendrocyte precursor cell,OPC)、少突胶质细胞(oligodendrocyte,OL)、小胶质细胞(microglia,MG)和星形胶质细胞(astrocyte,AST)等细胞之间的相互作用,受到Wnt/β-catenin、Notch、RTK受体等多条信号通路的调控。本文在介绍中枢神经系统髓鞘再生过程与脱髓鞘疾病的基础上,详细综述了上述髓鞘再生的细胞基础和分子机制,并总结了脱髓鞘疾病在潜在治疗药物方面的最新研究进展,从而为中枢神经系统髓鞘再生机制以及脱髓鞘疾病的治疗现状和治疗药物提供更加清晰的认识。 展开更多
关键词 中枢神经系统髓鞘再生 少突胶质细胞前体细胞(opc) 分子机制 脱髓鞘疾病 治疗药物
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树鼩大脑皮层少突胶质前体细胞的分离鉴定 被引量:1
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作者 李明学 黎晓慧 +5 位作者 黄鑫 王璇 张志成 袁园 陆彩霞 孙晓梅 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第4期260-266,共7页
目的建立树鼩大脑皮层少突胶质前体细胞(OPCs)的体外分离、原代培养方法,以及鉴定技术。方法新生48 h内给树鼩施行安死术后采集大脑,去除脑膜和脑干,留下大脑皮层,然后使用胰酶和DNase I联合消化大脑皮层,分离细胞原代培养。通过采用化... 目的建立树鼩大脑皮层少突胶质前体细胞(OPCs)的体外分离、原代培养方法,以及鉴定技术。方法新生48 h内给树鼩施行安死术后采集大脑,去除脑膜和脑干,留下大脑皮层,然后使用胰酶和DNase I联合消化大脑皮层,分离细胞原代培养。通过采用化学分离法和差速贴壁法从原代培养中获得较为纯化的OPCs。对纯化和定向分化的细胞分别进行硫酸软骨素蛋白多糖4(NG2)、髓鞘碱性蛋白(MBP)细胞免疫荧光染色鉴定。结果纯化后的OPCs,胞体圆形或椭圆形,折光性强,有两极或三极突起,经NG2细胞免疫荧光染色,细胞纯度达97%左右。加入分化培养液后,OPCs可分化发育成熟,经MBP细胞免疫荧光染色为阳性。结论成功建立了树鼩大脑皮层OPCs的体外分离纯化培养方法。 展开更多
关键词 少突胶质前体细胞(opcs) 大脑皮层 原代细胞培养 分离纯化 树鼩
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补阳还五汤含药血清对少突胶质前体细胞分化的影响 被引量:5
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作者 罗金鑫 黄勇 《广州中医药大学学报》 CAS 2018年第6期1073-1078,共6页
【目的】观察补阳还五汤含药血清对体外培养SD大鼠少突胶质前体细胞(OPCs)分化为少突胶质细胞(OLs)的影响。【方法】体外培养SD大鼠OPCs,并用免疫组化检测鉴定细胞;将24只SD大鼠随机分为低、中、高补阳还五汤含药血清组及空白血清组,制... 【目的】观察补阳还五汤含药血清对体外培养SD大鼠少突胶质前体细胞(OPCs)分化为少突胶质细胞(OLs)的影响。【方法】体外培养SD大鼠OPCs,并用免疫组化检测鉴定细胞;将24只SD大鼠随机分为低、中、高补阳还五汤含药血清组及空白血清组,制备含药血清;各组血清培养OPCs 6 d后,采用免疫组化法检测各组细胞中髓鞘碱性蛋白(MBP)蛋白表达情况。【结果】各组含药血清干预细胞培养6 d后,低、中、高补阳还五汤含药血清组及空白血清组MBP阳性率分别为(0.431±0.038)、(0.646±0.048)、(0.251±0.029)、(0.083±0.028)。与空白组比较,低、中、高剂量组细胞MBP阳性率均增高(P<0.01);与低剂量组和高剂量组比较,中剂量组细胞MBP阳性率增高(P<0.01)。【结论】补阳还五汤含药血清可促进SD大鼠OPCs分化为OLs。 展开更多
关键词 补阳还五汤 含药血清 少突胶质前体细胞 少突胶质细胞 分化 脊髓损伤 细胞培养
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肿瘤坏死因子α(TNF-α)体外抑制人少突胶质细胞前体细胞的迁移 被引量:2
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作者 何滢 杨印祥 +3 位作者 周海鹏 汪兆艳 王倩 栾佐 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期585-589,共5页
目的探究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对移植的人成体神经干细胞(NSC)来源少突胶质细胞前体细胞(OPC)迁移能力的影响。方法流式细胞术检测人OPC血小板来源生长因子受体α(PDGFRα)、 ST8α-N-乙酰神经酰胺α2,8-唾液酸转移酶1(ST8SIA1/A2B5)... 目的探究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对移植的人成体神经干细胞(NSC)来源少突胶质细胞前体细胞(OPC)迁移能力的影响。方法流式细胞术检测人OPC血小板来源生长因子受体α(PDGFRα)、 ST8α-N-乙酰神经酰胺α2,8-唾液酸转移酶1(ST8SIA1/A2B5)的表达。培养OPC并采用(0、 10、 100、 200)ng/mL TNF-α处理18 h并设置空白对照组,采用CCK-8法检测OPC活性,采用TranswellTM迁移实验检测OPC的迁移能力。结果人成体NSC来源OPC特异性表达PDGFRα(87.9%)和A2B5(40.0%)。10 ng/mL TNF-α处理不影响OPC存活率,(100、 200)ng/mL TNF-α处理明显降低OPC存活率。与对照组相比,10 ng/mL TNF-α明显减少OPC的迁移。结论 TNF-α抑制培养的OPC迁移。 展开更多
关键词 人少突胶质细胞前体细胞(opc) 迁移 肿瘤坏死因子α(TNF-α) 移植
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人胎脑神经干细胞来源少突胶质前体细胞冻存方法的优化
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作者 刘畅 杨印祥 +3 位作者 汪兆艳 王倩 叶豆 栾佐 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期248-254,共7页
目的通过改变不同因素条件优化人胎脑神经干细胞来源的少突胶质前体细胞(OPC)冻存方法,进一步提高复苏活率。方法比较使用消化和机械吹打两种方法收集人OPC,采用人多能干细胞(hPSC)无血清冻存液、含930 mL/L胎牛血清(FBS)和70 mL/L二甲... 目的通过改变不同因素条件优化人胎脑神经干细胞来源的少突胶质前体细胞(OPC)冻存方法,进一步提高复苏活率。方法比较使用消化和机械吹打两种方法收集人OPC,采用人多能干细胞(hPSC)无血清冻存液、含930 mL/L胎牛血清(FBS)和70 mL/L二甲基亚砜(DMSO)的冻存液分别冻存细胞,比较两组冻存前后活率。择优后比较4种不同冻存液(含70 mL/L DMSO和930 mL/L FBS的冻存液,含70 mL/L DMSO、300 mL/L FBS的OPC完全培养基,含70 mL/L DMSO、300 mL/L FBS、0.2 mol/mL海藻糖的OPC完全培养基,含70 mL/L DMSO、100 mL/L FBS、300 mL/L羟乙基淀粉溶液的OPC完全培养基)、冻存速率(冻存盒慢速降温和液氮气相快速降温)及冷冻保存时间3个因素对复苏活率的影响。在优选后的冻存方案基础上,复苏后7 d,使用免疫荧光细胞化学染色法比较OPC特异性标志物血小板源性生长因子受体α(PDGFRα)、ST8α-N-乙酰神经酰胺α2,8-唾液酸转移酶1(ST8SIA1/A2B5)、硫酸软骨素蛋白聚糖4(CSPG4/NG2)、增殖相关KI-67抗原(ki67)表达。结果消化组收集细胞,冻存前后活率明显高于机械组;快速降温4组复苏活率均低于30%且无法继续培养,慢速降温4组复苏活率均较高。使用消化法收集细胞,冻存细胞数为2×10^6/mL;使用含海藻糖的冻存液,慢速降温冻存,复苏活率最高;可达(75.73±6.66)%。与对照组相比,复苏后培养组增殖倍数、ki67表达无明显差异,两组均表达PDGFRα、A2B5、NG2。短期和长期储存组复苏活率无明显差别。结论消化液收集OPC,使用含海藻糖的冻存液慢冻快融的方法,适用于人胎脑神经干细胞诱导OPC冷冻保存,复苏后不影响细胞增殖和标志物表达,储存时间对复苏活率无影响。 展开更多
关键词 神经干细胞 少突胶质细胞前体细胞(opc) 冻存 海藻糖 无血清冻存液
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缺血缺氧模型小鼠少突胶质前体细胞GluR2磷酸化水平的变化
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作者 甄飞 姚瑞芹 邱振 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2023年第6期671-676,共6页
目的:研究缺血缺氧性脑损伤(HIBI)模型小鼠少突胶质前体细胞(OPCs)中磷酸化谷氨酸受体2[p-GluR2(S880)]表达变化。方法:利用右侧颈总动脉结扎并缺氧90 min方法建立C57BL/6新生小鼠HIBI模型,采用高架十字迷宫和旷场实验评估小鼠的焦虑样... 目的:研究缺血缺氧性脑损伤(HIBI)模型小鼠少突胶质前体细胞(OPCs)中磷酸化谷氨酸受体2[p-GluR2(S880)]表达变化。方法:利用右侧颈总动脉结扎并缺氧90 min方法建立C57BL/6新生小鼠HIBI模型,采用高架十字迷宫和旷场实验评估小鼠的焦虑样行为,通过免疫荧光方法检测HIBI模型小鼠脑组织中p-GluR2(S880)、少突胶质细胞标记物4(O4)和髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达变化,用Western Blot检测p-GluR2(S880)和MBP的表达水平。结果:与假手术组相比,HIBI术后90 d小鼠有显著的焦虑样行为(P<0.05);MBP蛋白表达在HIBI术后14及28 d组明显减少;p-GluR2(S880)蛋白表达在HIBI术后各个时间点表达上调(P<0.05),HIBI组小鼠脑组织中O4与p-GluR2(S880)共标的阳性细胞数目显著升高(P<0.05)。结论:OPCs中p-GluR2(S880)表达上调可能导致HIBI模型小鼠成髓鞘障碍。 展开更多
关键词 谷氨酸受体2 缺血缺氧 脑白质损伤 少突胶质前体细胞 小鼠
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髓鞘修复与多发性硬化 被引量:2
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作者 曾彦英 顾冰洁 《国际免疫学杂志》 CAS 2007年第6期439-443,共5页
多发性硬化(MS)是以中枢神经系统炎性脱髓鞘为特征的自身免疫性疾病,神经功能障碍与髓鞘和轴索损伤有关。MS 动物模型研究认为:髓鞘修复是治疗 MS 极有前景的途径。中枢神经系统存在少突胶质细胞前体细胞(OPCs),在髓鞘修复和再生过程起... 多发性硬化(MS)是以中枢神经系统炎性脱髓鞘为特征的自身免疫性疾病,神经功能障碍与髓鞘和轴索损伤有关。MS 动物模型研究认为:髓鞘修复是治疗 MS 极有前景的途径。中枢神经系统存在少突胶质细胞前体细胞(OPCs),在髓鞘修复和再生过程起关键作用。由于 MS 病人 OPC 分化受抑制,因此,在髓鞘再生过程中调控 OPCs 分化是髓鞘修复的重点。另外,移植外源性的髓鞘形成细胞促进髓鞘修复和神经再生,是修复 MS 脱髓鞘和轴索损伤的重要途径。 展开更多
关键词 多发性硬化 髓鞘修复 少突胶质细胞前体细胞
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二甲双胍(Metformin)在少突胶质前体细胞分化中的作用和机制 被引量:1
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作者 谈沛林 张莹 +4 位作者 张竣 高笑 王树坤 侯琳 袁增强 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1-9,共9页
目的:研究二甲双胍(metformin)在少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cell,OPC)分化过程中的作用,并对其分子机制进行初步探讨。方法:使用免疫吸附法直接分离纯化OPC后诱导培养,通过免疫荧光染色对细胞进行鉴定。在不同浓度二... 目的:研究二甲双胍(metformin)在少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cell,OPC)分化过程中的作用,并对其分子机制进行初步探讨。方法:使用免疫吸附法直接分离纯化OPC后诱导培养,通过免疫荧光染色对细胞进行鉴定。在不同浓度二甲双胍处理OPC后,使用CCK8检测细胞活性;通过免疫荧光染色、流式细胞分析、实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测二甲双胍对OPC分化中细胞数量、mRNA和蛋白质水平的影响。结果:使用免疫吸附法可分离出高纯度OPC;CCK8检测结果显示在100μmol/L浓度以内,二甲双胍对细胞无毒性;免疫荧光染色结果显示,二甲双胍处理OPC后,PDGFRα^(+)OLIG2^(+)阳性细胞数明显增加,且MBP^(+)细胞数显著增加;流式细胞分析结果显示,PDGFRα^(+)细胞数显著增加;实时荧光定量PCR结果显示,OPC分化相关基因Mag、Mbp等的mRNA水平显著增加;蛋白质印迹结果显示,分化相关蛋白OLIG2和MBP表达增加。机制上,少突胶质细胞系Oli-neu、OPC分别经二甲双胍处理5 min后,RAS、p-MEK、p-ERK蛋白量显著增加。结论:二甲双胍通过RAS-MEK-ERK信号通路促进少突胶质前体细胞的分化。 展开更多
关键词 二甲双胍 少突胶质前体细胞 脱髓鞘疾病
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