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益气养阴散结方对A549裸鼠肿瘤脂滴相关蛋白与脂代谢相关蛋白的影响
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作者 杨雪飞 张志娣 +4 位作者 黄挺 傅晓青 叶知锋 郭俊华 刘冰 《浙江中西医结合杂志》 2023年第3期205-210,共6页
目的探讨益气养阴散结方对A549裸鼠肿瘤脂滴相关蛋白、脂代谢相关蛋白的影响。方法取4~6周龄BALB/c裸鼠30只,皮下接种A549细胞株以复制肺腺癌小鼠模型,按照随机数字表法分为五组,模型组、顺铂组和益气养阴散结方低、中、高剂量组,每组6... 目的探讨益气养阴散结方对A549裸鼠肿瘤脂滴相关蛋白、脂代谢相关蛋白的影响。方法取4~6周龄BALB/c裸鼠30只,皮下接种A549细胞株以复制肺腺癌小鼠模型,按照随机数字表法分为五组,模型组、顺铂组和益气养阴散结方低、中、高剂量组,每组6只。接种次日起给药,模型组给予生理盐水0.3 mL/d;顺铂组给予顺铂4 mg/kg,每周2次;益气养阴散结方低、中、高剂量组给予5、10、20 g/(kg·d)益气养阴散结方,连续给药8周。采用免疫印迹、免疫组化检测脂周素-1(perilipin-1)、脂滴蛋白5(LSDP5)、47kDa尾连蛋白(TIP47)、脂肪分化相关蛋白(ADRP)、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)、Delta样因子-1(DLK-1)、小窝蛋白-1(caveolin-1)等脂滴相关蛋白、脂代谢相关蛋白在肿瘤中的表达。结果30只裸鼠成瘤,成瘤率100%。在实验期内,模型组和益气养阴散结方中剂量组各死亡裸鼠1只。免疫印迹结果表明,与模型组比较,益气养阴散结方低、高剂量组显著下调脂滴相关蛋白、脂代谢相关蛋白的表达[perilipin-1:(0.76±0.23)、(0.58±0.18)比(0.93±0.22);LSDP5:(0.79±0.23)、(0.38±0.11)比(1.06±0.30);TIP47:(0.49±0.19)、(0.24±0.06)比(0.71±0.25);ADRP:(0.48±0.15)、(0.27±0.08)比(0.61±0.17);A-FABP:(0.52±0.14)、(0.31±0.09)比(0.59±0.19);DLK1:(0.75±0.23)、(0.64±0.08)比(1.07±0.21);caveolin-1:(0.60±0.25)、(0.41±0.09)比(1.09±0.31),P<0.05或P<0.01]。免疫组化结果表明,与模型组比较,益气养阴散结方中、高剂量组显著下调脂滴相关蛋白、脂代谢相关蛋白的表达[perilipin-1:(4.17±0.32)、(3.90±0.57)比(5.70±0.97);TIP47:(5.13±0.50)、(3.73±0.31)比(5.67±0.70);ADRP:(4.67±1.01)、(4.17±0.61)比(6.13±0.81);AFABP:(4.02±0.40)、(3.40±0.23)比(5.67±0.75);caveolin-1:(5.03±0.50)、(4.23±0.35)比(6.33±0.93),P<0.05或P<0.01],高剂量组下调DLK1表达[(5.10±0.40)比(7.93±0.91),P<0.01]。结论高剂量益气养阴散结方可显著降低perilipin-1、LSDP5、TIP47、ADRP、A-FABP、DLK1、caveolin-1等脂滴相关蛋白、脂代谢相关蛋白在A549裸鼠肿瘤中的表达。 展开更多
关键词 裸鼠 非小细胞肺癌 人肺腺癌细胞株a549 益气养阴散结方 脂滴相关蛋白 脂代谢相关蛋白
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转化生长因子-β1诱导A549细胞向间充质细胞转化的作用研究 被引量:14
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作者 郑金旭 张小燕 +2 位作者 端礼荣 陈炜 管淑红 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2008年第4期327-329,I0002,共4页
目的:观察重组人转化生长因子-β1(rhTGF-β1)对人肺上皮细胞株(A549)的转化作用。方法:将体外培养的A549用不同浓度的rhTGF-β1干预后,倒置显微镜观察细胞形态学的变化,用MTT法检测rhTGF-β1对A549增殖的影响。48 h收集蛋白用蛋白质印... 目的:观察重组人转化生长因子-β1(rhTGF-β1)对人肺上皮细胞株(A549)的转化作用。方法:将体外培养的A549用不同浓度的rhTGF-β1干预后,倒置显微镜观察细胞形态学的变化,用MTT法检测rhTGF-β1对A549增殖的影响。48 h收集蛋白用蛋白质印迹和间接免疫化学方法检测间充质细胞表型Fibronectin-EDA(Fn-EDA)表达变化。结果:rhTGF-β1诱导A549向间充质细胞形态转化,在体外对A549增殖无明显影响,上调间充质细胞表型Fn-EDA表达。结论:rhTGF-β1可诱导A549发生上皮细胞-间质转化(ephethlial-mesenchymal transition,EMT),支持肺上皮细胞发生EMT的观点。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β1 人肺上皮细胞株(a549) 上皮细胞-间质转化
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A549细胞对单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒的摄取作用 被引量:9
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作者 丁建潮 胡富强 袁弘 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期876-880,共5页
目的 考察单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒 (monostearinsolidlipidnanoparticles ,MSLN)经PEG2 0 0 0修饰后 ,对A5 4 9细胞摄取MSLN及J774A1细胞吞噬MSLN的影响。方法 采用溶剂扩散法制备MSLN ,测定其粒径和zeta电位 ;以罗丹明B(Rhodam... 目的 考察单硬脂酸甘油酯固体脂质纳米粒 (monostearinsolidlipidnanoparticles ,MSLN)经PEG2 0 0 0修饰后 ,对A5 4 9细胞摄取MSLN及J774A1细胞吞噬MSLN的影响。方法 采用溶剂扩散法制备MSLN ,测定其粒径和zeta电位 ;以罗丹明B(RhodamineB)为荧光标记物 ,研究A5 4 9细胞对MSLN的摄取作用和J774A1细胞对MSLN的吞噬作用。结果 MSLN的细胞毒性较低 ,A5 4 9细胞对MSLN的摄取可快速接近饱和 ,其摄取百分率与MSLN在细胞外的浓度呈负相关。结论 MSLN经PEG2 0 0 0修饰 ,可显著抑制J774A1细胞对MSLN的吞噬 ,但可增加A5 4 9细胞对MSLN的摄取。 展开更多
关键词 固体脂质纳米粒 a549人Ⅱ型肺上皮细胞 J774A1巨噬细胞 细胞摄取 细胞吞噬
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LncRNA FEZF1-AS1通过调控EZH2对肺间质细胞增殖、迁移及侵袭的作用
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作者 王春燕 王萍 +2 位作者 宋龙飞 刘永全 满君 《基础医学与临床》 2024年第1期43-50,共8页
目的研究长链非编码RNA FEZ家族锌指1-反义RNA 1(lncRNA FEZF1-AS1)调控zeste同源物增强子2(EZH2)对肺间质细胞增殖、迁移、侵袭能力及上皮细胞-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法将人肺腺癌细胞系A549分为对照组(control)和模型组... 目的研究长链非编码RNA FEZ家族锌指1-反义RNA 1(lncRNA FEZF1-AS1)调控zeste同源物增强子2(EZH2)对肺间质细胞增殖、迁移、侵袭能力及上皮细胞-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法将人肺腺癌细胞系A549分为对照组(control)和模型组[model,用转化生长因子β1(TGF-β1)20 ng/mL作用48 h,诱导成为肺间质细胞]。用Western blot检测细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的蛋白表达。RT-qPCR检测细胞中lncRNA FEZF1-AS1和EZH2基因表达。转染组细胞分为转染si NC组、si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组和si lncRNA FEZF1-AS1+OE EZH2组。CCK-8法检测细胞增殖、细胞划痕检测细胞迁移、Transwell小室法检测细胞侵袭;用Western blot检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、vimentin及EZH2的蛋白表达,用RNA免疫沉淀(RIP)测定FEZF1-AS1与EZH2的直接结合作用。结果与对照组比较,模型组E-cadherin的蛋白表达水平减少(P<0.05);N-cadherin及vimentin的蛋白表达水平升高(P<0.05);与对照组比较,模型组lncRNA FEZF1-AS1与EZH2基因的表达水平明显升高(P<0.05);与si NC组相比,si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组细胞增殖、迁移、侵袭能力降低,E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin、vimentin、EZH2蛋白表达降低(P<0.05);与si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组比较,si lncRNA FEZF1-AS1+OE EZHZ组细胞增殖、侵袭、迁移能力升高,E-cadherin蛋白表达降低,N-cadherin、vimentin、EZH2蛋白表达升高(P<0.05);RIP实验进一步证实了lncRNA FEZF1-AS1与EZH2具有结合作用。结论LncRNA FEZF1-AS1通过调控EZH2促进肺间质细胞增殖、侵袭、转移和EMT过程。 展开更多
关键词 特发性肺间质纤维化 FEZ家族锌指1-反义RNA 1(FEZF1-AS1) 上皮细胞-间充质转化(EMT) zeste基因增强子同源物2(EZH2) 人非小细胞肺癌细胞系a549
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Differential Transcriptional Responses in Corneal and Lung Epithelial Cells to Seasonal Influenza With Potential Function of LGALS9
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作者 Yang Han Ting Zhang +6 位作者 Dan Bai Changcheng Wu Beiwei Ye Jianfang Zhou Yingze Zhao George F.Gao Jun Liu 《Infectious Microbes & Diseases》 CSCD 2024年第3期141-151,共11页
Seasonal flu,primarily caused by influenza A H1N1 and H3N2 subtype viruses or influenza B viruses,is the most prevalent respiratory tract infection globally and leads to substantial morbidity andmortality annually.Des... Seasonal flu,primarily caused by influenza A H1N1 and H3N2 subtype viruses or influenza B viruses,is the most prevalent respiratory tract infection globally and leads to substantial morbidity andmortality annually.Despite the influenza virus being initially recognized as a respiratory pathogenwithwell-characterized transmission through respiratory droplets,its impact on the ocular epithelium and associated gene expression remains relatively unexplored.In this study,we investigated the transcriptional profiles of immortalized human corneal epithelial cells(HCE-S)and A549 human lung epithelial cells infected with H1N1 and H3N2 influenza virus.In comparison with A549 cells,a reduced number of differentially expressed geneswas observed in HCE-S upon influenza virus infection.Specifically,there was a significant upregulation of the genes IFI44L and OAS1,along with lower release of the CCL5/RANTES protein.Notably,our findings revealed uniquely upregulated LGALS9(encoding galectin-9)in HCE-S following infection with the 2009 pandemic H1N1 virus.Furthermore,targeted knockdown of LGALS9 in these cells resulted in a measurable decrease in viral infection,highlighting its role in the cellular responses to influenza virus and suggesting a novel avenue for antiviral therapy.Overall,our findings provide insight into the distinct mechanisms of influenza virus interactions with different epithelial cells and underscore the importance of studying the ocular surface in understanding influenza pathogenesis. 展开更多
关键词 immortalized human corneal epithelial cell line human pulmonary epithelial cell line influenza A virus transcriptome sequencing LGALS9
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甲基强的松龙对香烟烟雾提取物诱导A549细胞I-κBα的影响
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作者 彭陵 徐佩茹 +5 位作者 多力坤.木扎帕尔 张晓荣 卢晓梅 王星 阿孜古丽.吐尔逊 张亚楼 《新疆医科大学学报》 CAS 2006年第7期629-631,共3页
目的:观察香烟烟雾提取(CSE)诱导人类怖泡Ⅱ型上皮细胞A549后Ⅰ-κBα的变化及甲基强的松龙(Mp)对其的影响。方法:体外培养A549细胞系,根据条件不同将其分为3组:(1)对照组:无血清DMEM处理。(2)CSE组:10%浓度CSE处理。(3... 目的:观察香烟烟雾提取(CSE)诱导人类怖泡Ⅱ型上皮细胞A549后Ⅰ-κBα的变化及甲基强的松龙(Mp)对其的影响。方法:体外培养A549细胞系,根据条件不同将其分为3组:(1)对照组:无血清DMEM处理。(2)CSE组:10%浓度CSE处理。(3)CSE+Mp组:CSE刺激后加入0.015%甲基强的松龙处理。于不同时间段收集各组细胞裂解物后,应用免疫印迹法(Western blot)、酶联免疫法(ELISA)观察Ⅰ-κBα的变化。结果:对照组无变化,CSE组Ⅰ-κBα从处理后15min开始后减少,30min后消失,CSE+Mp组Ⅰ-κBα在15~30min内始终有本底表达,3组间Ⅰ-κBα蛋白的表达水平差异有统计学意义(P〈0.01)。结论:甲基强的松龙能使CSE刺激后A549细胞Ⅰ-κBα蛋白表达增加。 展开更多
关键词 人类肺泡Ⅱ型上皮细胞(a549) 香烟烟雾提取物(CSE) 抑制蛋白-kappag(Ⅰ-κBα) 甲基强的松龙(Mp)
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植物雌激素通过缺氧诱导因子-1α与核因子-κB下调缺氧肺泡上皮细胞膜联蛋白A1的表达 被引量:4
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作者 杨娟 李晓栩 +3 位作者 陈建 官立彬 黄瑊 白志川 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期2019-2023,共5页
目的从人肺泡上皮细胞甲酰肽受体激动剂——膜联蛋白A1(Annexin A1,AnxA1)的表达变化,探讨植物雌激素影响缺氧肺部炎症浸润的机制。方法人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)接种于60 mm培养皿中常规培养,待培养皿中细胞长满约70%,根据是否用药分为... 目的从人肺泡上皮细胞甲酰肽受体激动剂——膜联蛋白A1(Annexin A1,AnxA1)的表达变化,探讨植物雌激素影响缺氧肺部炎症浸润的机制。方法人肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549)接种于60 mm培养皿中常规培养,待培养皿中细胞长满约70%,根据是否用药分为:对照组(溶剂DMSO对照)、染料木黄酮(genistein,Gen)组、大豆苷元(daidzein,DD)组,每组细胞再根据是否缺氧再分为常氧组(N)、缺氧组(H)。Gen组、DD组于缺氧处理前分别加入Gen及DD,终浓度均为15μmol/L。缺氧组细胞置于缺氧培养箱(1%O2)24 h。取细胞培养上清及细胞裂解离心上清,结合甲酰肽受体特异性抑制剂tBoc2,通过趋化实验,检测其甲酰肽受体激动活性。用Western blot分析AnxA1、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、核因子-κB(NF-κB)在蛋白水平的变化,用RT2-PCR法分析其mRNA水平的变化。结果缺氧后的细胞冻融上清及培养上清趋化活性显著高于常氧组(P<0.05),而植物雌激素处理后,两种上清的趋化活性均显著高于对照组(P<0.05)。Western blot与RT2-PCR检测结果显示,缺氧组AnxA1在蛋白水平和mRNA水平均高于常氧组(P<0.05),两种植物雌激素不同程度地削弱了缺氧对AnxA1的上调效果,同时对HIF-1α、NF-κB的蛋白水平也产生同样的影响。结论植物雌激素削弱了缺氧对AnxA1基因表达的上调效应,其机制与HIF-1α、NF-κB信号途径有关。 展开更多
关键词 缺氧 肺泡上皮细胞 植物雌激素 膜联蛋白A1
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支气管上皮中GULP1蛋白的表达与慢性阻塞性肺疾病严重程度的关系研究 被引量:5
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作者 张扬帆 郝尧 《临床肺科杂志》 2018年第4期670-673,共4页
目的探讨支气管上皮中GULP1蛋白的表达与慢性阻塞性肺疾病患者严重程度的关系。方法选取2015年1月-2016年1月期间我院收治的100例慢性阻塞性肺疾病患者作为研究对象,设为观察组,根据其疾病进展分为轻中度组(n=64)和重度组(n=36),选取同... 目的探讨支气管上皮中GULP1蛋白的表达与慢性阻塞性肺疾病患者严重程度的关系。方法选取2015年1月-2016年1月期间我院收治的100例慢性阻塞性肺疾病患者作为研究对象,设为观察组,根据其疾病进展分为轻中度组(n=64)和重度组(n=36),选取同期非慢性阻塞性肺疾病患者作为对照组(n=50),比较不同组患者的GULP1蛋白表达阳性率,并对GULP1蛋白表达与慢阻肺分级以及肺泡巨噬细胞数量相关性进行分析。结果观察组患者支气管上皮中GULP1蛋白的表达阳性率(69.0%)显著高于对照组(2.0%)(P<0.05);重度组患者的支气管上皮中GULP1蛋白的表达阳性率(97.2%)显著高于轻中度组(53.1%)(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示支气管上皮中GULP1蛋白的表达评分与慢阻肺分级呈显著正相关(r=0.145,P=0.003);Spearman相关性分析结果显示慢阻肺患者支气管上皮中GULP1蛋白的表达与肺泡巨噬细胞数量呈显著正相关(r=0.432,P=0.015)。结论慢阻肺疾病患者支气管上皮中GULP1蛋白的表达水平显著增加,且与疾病的严重程度呈正相关,GULP1蛋白参与慢阻肺疾病调控过程可能与肺泡巨噬细胞相关,值得进一步深入研究。 展开更多
关键词 支气管上皮 GULP1蛋白 慢性阻塞性肺 肺气肿 肺泡巨噬细胞
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CD46、Nectin-4在麻疹病毒感染人肺泡上皮细胞中的作用
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作者 蔡天晶 黎志良 +1 位作者 金凌应 甘云波 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期991-994,共4页
目的:探讨CD46、Nectin-4在麻疹病毒感染人肺泡上皮细胞中的作用。以及CD46和Nectin-4之间的相互作用。方法:分为麻疹病毒感染前处理组和感染后2 h组,均用抗CD46抗体、抗Nectin-4抗体处理人肺泡上皮细胞,并设对照组。检测细胞内病毒滴... 目的:探讨CD46、Nectin-4在麻疹病毒感染人肺泡上皮细胞中的作用。以及CD46和Nectin-4之间的相互作用。方法:分为麻疹病毒感染前处理组和感染后2 h组,均用抗CD46抗体、抗Nectin-4抗体处理人肺泡上皮细胞,并设对照组。检测细胞内病毒滴度的变化,采用Western blot和Real-time PCR检测NP蛋白的表达水平,并运用免疫共沉淀检测CD46与Nectin-4的相互作用。结果:与对照组相比,麻疹病毒感染前用抗CD46抗体、抗Nectin-4抗体处理的人肺泡上皮细胞内麻疹病毒滴度显著降低,分别为对照组的48.03%和49.53%,同时用抗CD46抗体、抗Nectin-4抗体处理使病毒滴度下降为27.15%,差异均有统计学意义(P<0.01)。然而,在麻疹病毒感染2 h后用抗CD46抗体、抗Nectin-4抗体处理,人肺泡上皮细胞内麻疹病毒滴度和NP蛋白量未见显著减少。Western blot和Real-time PCR结果与上述结果一致;免疫共沉淀实验显示,CD46与Nectin-4存在相互作用。结论:CD46、Nectin-4在麻疹病毒感染肺泡上皮细胞中起到介导作用,CD46与Nectin-4可能存在协同作用,该作用对麻疹病毒的感染起到了增强效果。 展开更多
关键词 麻疹病毒 人肺泡上皮细胞 CD46 Nectin-4
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阿托伐他汀降低脂多糖诱导下人肺上皮细胞COX-2的表达 被引量:2
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作者 吴尚洁 蔡颖 赵水平 《中国医师杂志》 CAS 2004年第6期766-768,共3页
目的 评价阿托伐他汀 (atorvastatin)对脂多糖 (LPS)诱导下人肺上皮细胞环氧化酶 -2 (COX -2 )表达及蛋白分泌的影响。方法 对LPS诱导的人肺上皮细胞株 (A5 49)给予不同浓度的阿托伐他汀干预 ,同时设置对照组 ,培养 12h后用Tris法处... 目的 评价阿托伐他汀 (atorvastatin)对脂多糖 (LPS)诱导下人肺上皮细胞环氧化酶 -2 (COX -2 )表达及蛋白分泌的影响。方法 对LPS诱导的人肺上皮细胞株 (A5 49)给予不同浓度的阿托伐他汀干预 ,同时设置对照组 ,培养 12h后用Tris法处理细胞后提取RNA用于RT -PCR(reversetranscriptase -polymerasechainreaction)及留取细胞用于WesternBlot分析。结果阿托伐他汀明显降低LPS诱导下COX -2mRNA的表达及COX -2蛋白的分泌 (P <0 0 5 ) ,且表现浓度梯度的变化。结论 阿托伐他汀降低降低脂多糖 (LPS)诱导下人肺上皮细胞环氧化酶 -2 (COX -2 ) 展开更多
关键词 阿托伐他汀 脂多糖 肺上皮细胞 COX-2表达 逆转录PCR
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滨蒿总黄酮体外抗呼吸道合胞病毒活性及其对先天免疫信号通路的影响 被引量:2
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作者 马雪萍 姚华 +1 位作者 刘燕 王林林 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1588-1598,共11页
为探讨滨蒿总黄酮(ASTF)体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)活性及其对RSV感染人肺上皮细胞A549天然免疫信号通路的影响,采用细胞病变评分法和Viral ToxGlo法检测ASTF体外抗RSV的作用,Western-blotting法检测先天免疫信号通路蛋白表达水平,流式... 为探讨滨蒿总黄酮(ASTF)体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)活性及其对RSV感染人肺上皮细胞A549天然免疫信号通路的影响,采用细胞病变评分法和Viral ToxGlo法检测ASTF体外抗RSV的作用,Western-blotting法检测先天免疫信号通路蛋白表达水平,流式微球技术(CBA)和ELISA检测炎性细胞因子水平。结果显示,ASTF在体外对RSV有明显的抑制作用,且随着浓度的增加,抗病毒作用增强,呈量效关系。进一步试验发现,与RSV对照组相比,500μg/mL ASTF可显著降低先天免疫信号通路中线粒体抗病毒信号传送蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein,MAVs)、核因子κB抑制蛋白(inhibitor of NF-κB,IκBα)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、受体相互作用蛋白激酶3(receptor interacting proteins 3,RIP3)和TANK结合激酶1(TANK binding kinase 1,TBK1)的蛋白表达水平。157、500μg/mL ASTF对RSV感染A549细胞分泌的炎症因子IL-1β、IL-2、IL-6、IL-10和TNF-α的水平有明显的干预作用(P<0.05),表现出下调趋势。结果表明,ASTF通过先天免疫信号通路发挥免疫调节作用,从而达到抗RSV的效果。 展开更多
关键词 滨蒿总黄酮 呼吸道合胞病毒 人肺泡上皮细胞系a549 信号通路 炎性细胞因子
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