RT-PCR克隆人血清白蛋白cDNA及其序列分析

为了构建人血清白蛋白cDNA橡胶树乳管特异性表达载体,提取人工流产胎儿肝脏组织总RNA,采用RT-PCR法得到其改良cDNA,T/A测序后,采用NCBI BLASTn软件分析测得的序列及由此推导的氨基酸序列,与NCBI数据库中公布的HSA cDNA及氨基酸序列比较其同源率。结果表明,两者分别达到99.6%和99.5%。这为后期橡胶树乳管特异表达载体的构建和以转基因橡胶树来表达人血清白蛋白的研究打下了坚实的前期技术工作基础。

重组人血清白蛋白-胸腺肽融合蛋白的分子设计及活性测定

应用蛋白质工程原理对胸腺肽与人血清白蛋白进行不同方式融合的分子设计,应用Insight Ⅱ软件包中的Biopolymer和Discover模块同源模建了胸腺肽Tα1、TP与人血清白蛋白融合前后的空间结构。并依据同源模建所得结果指导构建不同的重组融合蛋白毕赤酵母工程菌,表达的融合蛋白经分离纯化后进行生物活性分析,验证融合蛋白同源模建的结果。