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Preparation of tanshinone Ⅱ_(A) self-soluble microneedles and its inhibition on proliferation of human skin fibroblasts
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作者 Yanshan Zhan Xiaoqi Xu +4 位作者 Xi Luo Ruiping Liu Yujian Lin Ping Zhao Jun Shi 《Chinese Herbal Medicines》 CAS 2023年第2期251-262,共12页
Objective:Hypertrophic scars(HS)are a variety of skin tissue fibrosis disease that occurs in human skin,the effective therapeutic method of which is still inaccessible up to now.As a bioactive constituent of a well-kn... Objective:Hypertrophic scars(HS)are a variety of skin tissue fibrosis disease that occurs in human skin,the effective therapeutic method of which is still inaccessible up to now.As a bioactive constituent of a well-known medical plant,Salvia miltiorrhiza(Danshen in Chinese),tanshinone Ⅱ_(A)(TSA)is reported to inhibit cell proliferation in HS.Therefore,the aim of this study was to prepare TSA self-soluble microneedles to strengthen its dermal retention and break through the difficulty of significantly thickening epidermal connective tissue and stratum corneum at the HS site.The possible mechanism of action in suppressing HS was studied using human skin fibroblasts(HSF).Methods:Tanshinone Ⅱ_(A) self-dissolving microneedles(TSA-MN)was prepared using a negative mold casting method.The prescription process of microneedle was optimized by Box-Behnken effect surface method.Different media were selected to investigate the ability of transdermal absorption and in vitro release.Furthermore,according to Cell Counting Kit-8(CCK8)method as well as the Western blot method,the effect of TSA-MN on the biological characteristics of HSF was investigated.Results:With remarkable slow release effect and dermal retention,the release and transdermal properties of TSA-MN in vitro were better than both TSA and ordinary dosage forms.Its effect of HSF confirmed the essential decrease in cell motility during cell proliferation and cell migration in vitro,which plays a significant role in down-regulating the secretion of transforming growth factor-β1(TGF-β1)in HSF and increasing the expression level of Smad7.Conclusion:The prepared TSA self-soluble microneedles is helpful in solving the problem of hypertrophic scars,with a stable dermal retention effect after process optimization. 展开更多
关键词 human skin fibroblasts hypertrophic scar tanshinoneⅡ_(A) tanshinoneⅡ_(A)self-dissolving microneedles TGF-β1
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神经肽P物质诱导高糖条件下人皮肤成纤维细胞分泌MCP-1的分子机制 被引量:6
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作者 贾志刚 方勇 +4 位作者 姚敏 俞为荣 徐鹏 贾一韬 倪涛 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1302-1306,共5页
目的探讨神经肽P物质(SP)诱导高糖培养环境中的人皮肤成纤维细胞分泌单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的分子机制。方法采用高糖DMEM培养基培养人皮肤成纤维细胞,加入同一浓度(10 nmol/L)SP孵育不同时间,Western blotting检测细胞中核因子κB(... 目的探讨神经肽P物质(SP)诱导高糖培养环境中的人皮肤成纤维细胞分泌单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的分子机制。方法采用高糖DMEM培养基培养人皮肤成纤维细胞,加入同一浓度(10 nmol/L)SP孵育不同时间,Western blotting检测细胞中核因子κB(NF-κB)抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化IκBα(p-IκBα)和磷酸化NF-κB亚单位p65(p-NF-κBp65)的表达,免疫荧光方法观测细胞p-NF-κBp65表达和转位情况。将高糖DMEM培养基培养人皮肤成纤维细胞分为对照组、SP组和SP+NF-κB抑制剂(MG132)组(以MG132预处理细胞60 min),Western blotting检测各组细胞内p-NF-κBp65的表达,ELISA方法测定细胞培养上清液中MCP-1的浓度。结果随着SP作用时间的延长,成纤维细胞IκBα的表达量显著减少,p-IκBα的表达量显著增加(P<0.05);同时p-NF-κBp65的表达量在SP作用后显著增加(P<0.05),并保持递增趋势;免疫荧光染色激光共聚焦显微镜观察证实SP作用后细胞胞核内p-NF-κBp65表达增强。与SP组比较,SP+MG132组细胞p-NF-κBp65表达及细胞培养上清液中MCP-1浓度均显著降低(P<0.05)。结论 SP促进人皮肤成纤维细胞分泌MCP-1的作用机制可能与NF-κB信号通路激活有关。 展开更多
关键词 P物质 人皮肤成纤维细胞 核因子κB 单核细胞趋化蛋白1
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人皮肤成纤维细胞体外转染Brg1基因的实验研究 被引量:1
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作者 屈悦 邓辰亮 +4 位作者 万伟东 茅广宇 丁志 杨松林 郑江红 《组织工程与重建外科杂志》 2013年第2期89-92,共4页
目的探讨重组Brg1基因转染人皮肤成纤维细胞的可行性,以及转染对细胞增殖和活性的影响。方法体外重组Brg1基因,借助真核表达载体系统,转入体外培养的人皮肤成纤维细胞;通过流式细胞仪检测报告基因表达,并确定细胞转染效率;应用Realtime ... 目的探讨重组Brg1基因转染人皮肤成纤维细胞的可行性,以及转染对细胞增殖和活性的影响。方法体外重组Brg1基因,借助真核表达载体系统,转入体外培养的人皮肤成纤维细胞;通过流式细胞仪检测报告基因表达,并确定细胞转染效率;应用Realtime PCR比较转染前后Brg1 mRNA的表达;MTT法检测Brg1基因对细胞增殖能力的影响。结果Brg1基因转染后,(73.0±6.7)%的被转染细胞表达报告基因;Brg1 mRNA在转染组、转染空载体组、未转染组细胞中的表达分别为(6.23±1.18)、(1.11±0.22)和(1.52±0.12),转染组Brg1 mRNA相对表达量较未转染组及转染空载体组明显增高(P<0.01);细胞的增殖能力在Brg1基因转染前后无显著差异。结论人皮肤成纤维细胞可作为Brg1转染的靶细胞,转染Brg1基因对人成纤维细胞的增殖能力无显著影响。 展开更多
关键词 染色质重构复合物核心催化亚基 转染 人皮肤成纤维细胞 诱导性多潜能干细胞
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MC1-R在人病理性瘢痕组织中的表达及临床意义
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作者 刘毅 蔡琼珠 +3 位作者 吴小雅 杨习端 陈超明 黄华森 《中外医学研究》 2021年第4期69-71,共3页
目的:探究正常人、病理性瘢痕患者皮肤及瘢痕标本内黑色素皮质素受体1(MC1-R)含量变化差异,为病理性瘢痕的临床治疗寻找新靶点。方法:收集2018年9月-2019年10月湛江中心人民医院整形外科手术标本,包括增生性瘢痕15例,瘢痕疙瘩10例,以及... 目的:探究正常人、病理性瘢痕患者皮肤及瘢痕标本内黑色素皮质素受体1(MC1-R)含量变化差异,为病理性瘢痕的临床治疗寻找新靶点。方法:收集2018年9月-2019年10月湛江中心人民医院整形外科手术标本,包括增生性瘢痕15例,瘢痕疙瘩10例,以及来自术中弃用的正常皮肤样本20例。采用免疫组化法对三组样本MC1-R的表达和定位差异进行评估。结果:在正常皮肤中,MC1-R阳性表达多位于表皮基底层和皮肤附属器周围;在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中,MC1-R阳性表达见于表皮基底层和真皮层中成纤维细胞聚集处;正常皮肤组MC1-R阳性表达百分比为(53±10)%,高于增生性瘢痕组的(45±7)%和瘢痕疙瘩组的(32±9)%,且增生性瘢痕组MC1-R阳性表达百分比高于瘢痕疙瘩组,差异均有统计学意义(F=3.007,P<0.001)。结论:皮肤成纤维细胞内MC1-R表达水平与瘢痕形成存在一定关系,MC1-R不足的成纤维细胞可能更有助于病理性瘢痕的形成。 展开更多
关键词 黑色素皮质素受体1 病理性瘢痕 成纤维细胞 瘢痕疙瘩 免疫组化 人皮肤组织
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人参多糖的分离纯化及其对UVB致皮肤损伤的保护作用 被引量:2
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作者 聂梅 黎鹏 +2 位作者 汤静洁 张平军 黄冬婷 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第16期412-419,共8页
以药食同源中药材人参为原材料,通过超声辅助热水法提取人参多糖(Ginseng polysaccharides,GPS),经酶解法去除淀粉和蛋白质,再经DEAE-52纤维素柱层析分离纯化得到精制人参多糖(GPS-1)。通过高效凝胶渗透色谱、红外光谱和核磁共振波谱测... 以药食同源中药材人参为原材料,通过超声辅助热水法提取人参多糖(Ginseng polysaccharides,GPS),经酶解法去除淀粉和蛋白质,再经DEAE-52纤维素柱层析分离纯化得到精制人参多糖(GPS-1)。通过高效凝胶渗透色谱、红外光谱和核磁共振波谱测定了GPS-1的相对分子质量、单糖构成和结构特征,另外研究了GPS-1对人皮肤成纤维细胞(Human skin fibroblasts,HFF-1)存活率和HFF-1中活性氧(Reactive oxygen,ROS)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathion peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、金属蛋白酶1(Metalloproteinase 1,MMP-1)和金属蛋白酶9(Metalloproteinase 9,MMP-9)的影响。结果表明,GPS-1为均一性多糖,多糖纯度为95.13%,重均分子量为2.104 kDa,由α-D-葡萄糖、α-D-半乳糖醛酸、α-D-阿拉伯糖、α-D-岩藻糖、α-D-核糖、β-D-甘露糖和β-D-阿拉伯糖构成。GPS-1可保护UVB照射下的HFF-1细胞活性,质量浓度为200μg/mL的GPS-1溶液即可显著抑制MMP-1和MMP-9的表达(P<0.01),显著提升SOD和GSH-Px的含量(P<0.01),显著降低ROS和MDA的含量(P<0.01),为人参多糖的分离纯化以及在开发抗衰老产品的应用提供了科学依据。 展开更多
关键词 人参多糖 分离纯化 中波紫外线(UVB) 抗衰老 人皮肤成纤维细胞(hff-1)
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重组贻贝黏蛋白的体外抗氧化及抗炎活性评价 被引量:2
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作者 张娅 王蓉 +4 位作者 侯增淼 曾亮 乔保坤 黄文涛 杨鹭 《山东化工》 CAS 2023年第18期171-176,共6页
试验旨在探究重组贻贝黏蛋白的体外抗氧化能力,并采用IFN-γ诱导的人皮肤成纤维细胞(HFF-1)炎症模型评价其抗炎作用。首先,以谷胱甘肽(GSH)作为对照,评价不同质量浓度重组贻贝黏蛋白的体外抗氧化能力。此外,采用不同浓度的重组贻贝黏蛋... 试验旨在探究重组贻贝黏蛋白的体外抗氧化能力,并采用IFN-γ诱导的人皮肤成纤维细胞(HFF-1)炎症模型评价其抗炎作用。首先,以谷胱甘肽(GSH)作为对照,评价不同质量浓度重组贻贝黏蛋白的体外抗氧化能力。此外,采用不同浓度的重组贻贝黏蛋白或不同浓度IFN-γ及IFN-γ(10 ng/mL)+重组贻贝黏蛋白(30μg/mL)处理HFF-1细胞,动态观察细胞增殖、肿瘤坏死因子(TNF-α)的释放以及重组贻贝黏蛋白对炎性细胞因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)和人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC)表达的影响。结果表明:重组贻贝黏蛋白具有较强的还原力,主要对1,1-二苯基-^(2-)三硝基苯肼自由基(·DPPH)和羟自由基(·OH)的清除起作用,而对超氧阴离子(·O^(2-))几乎不起作用。此外,重组贻贝黏蛋白显著促进细胞增殖,且重组贻贝黏蛋白的加入可在蛋白水平和mRNA水平显著抑制IFN-γ诱导的IL-6、IL-8和MDC的表达(P≤0.05)。总之,重组贻贝黏蛋白可一定程度上发挥抗氧化和抗炎作用,从而促进伤口愈合。这均与重组贻贝黏蛋白可清除·DPPH和·OH等自由基,具有较强的还原力以及对IFN-γ诱导的HFF-1细胞促炎介质有抑制作用有关。 展开更多
关键词 重组贻贝黏蛋白 创面愈合 抗氧化 炎症 人皮肤成纤维细胞(hff-1)
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UVA诱导人皮肤成纤维细胞光老化模型中miR-222的调节作用
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作者 宋健文 吴凌 +2 位作者 宋建驷 王博 宫惠琳 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期674-677,共4页
目的探讨miR-222在长波紫外线(UVA)诱导的光老化模型中的调节作用。方法分离并培养人皮肤成纤维细胞(HDFs),用0,2.5,5.0和7.5J不同剂量UVA辐射诱导光老化模型,用实时定量PCR和Western-blot分别检测miR-222和基质金属蛋白酶1(MMP1)的表... 目的探讨miR-222在长波紫外线(UVA)诱导的光老化模型中的调节作用。方法分离并培养人皮肤成纤维细胞(HDFs),用0,2.5,5.0和7.5J不同剂量UVA辐射诱导光老化模型,用实时定量PCR和Western-blot分别检测miR-222和基质金属蛋白酶1(MMP1)的表达情况。用miR-222的功能模拟物和miR-222的功能抑制物分别转染HDFs,检测MMP1表达情况。对HDFs细胞分别转染miR-222功能模拟物、miR-222阴性对照物、miR-222功能抑制物和miR对照的功能抑制物,转染24h后予UVA辐射诱导光老化模型,检测MMP1表达情况。结果 HDFs经不同剂量UVA辐射后,MMP1表达与对照组相比显著升高(P<0.01),同时miR-222表达与对照组相比显著降低(P<0.01)。miR-222转染HDFs后再予UVA辐射,miR-222转染组MMP1表达显著低于miR对照组(t=5.616,P<0.05),而miR-222抑制物转染组MMP1表达与miR对照组相比无显著的改变。结论人皮肤成纤维细胞光老化模型中UVA辐射可导致miR-222表达降低,从而上调MMP1表达。 展开更多
关键词 长波紫外线 光老化 人皮肤成纤维细胞 MIR-222 基质金属蛋白酶-1
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补骨脂素对人皮肤成纤维细胞衰老相关基因的调控作用 被引量:9
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作者 胡中花 祁永华 +5 位作者 熊辉 徐红丹 高晓波 刘国良 张宁 刘海洋 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期751-754,共4页
目的研究补骨脂素对人皮肤成纤维细胞(ESF-1)衰老相关基因的影响。方法以雌二醇为阳性对照,采用MTT法检测补骨脂素高、中、低剂量组(100,10,1μmol·L-1)对细胞增殖的影响,用RT-PCR技术检测补骨脂素作用于ESF-1细胞后对衰老相关基... 目的研究补骨脂素对人皮肤成纤维细胞(ESF-1)衰老相关基因的影响。方法以雌二醇为阳性对照,采用MTT法检测补骨脂素高、中、低剂量组(100,10,1μmol·L-1)对细胞增殖的影响,用RT-PCR技术检测补骨脂素作用于ESF-1细胞后对衰老相关基因Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)及基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)mRNA表达水平的影响。结果补骨脂素中剂量组的作用与雌二醇相似,能使ESF-1细胞的增殖明显提高,同时使ColⅠ、ColⅢ、T I M P-1、TIMP-2 mRNA的表达水平显著增强,MMP-1 mRNA的表达水平显著降低。结论补骨脂素具有促E S F-1细胞增殖的作用,可促进胶原蛋白合成,提示其具有潜在的抗皮肤衰老作用。 展开更多
关键词 补骨脂素 成纤维细胞 抗皮肤衰老 Ⅰ型胶原蛋白 Ⅲ型胶原蛋白 基质金属蛋白酶1 基质金属蛋白酶抑制剂1 基质金属蛋白酶抑制剂2
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黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞胶原蛋白及衰老相关基因的影响 被引量:3
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作者 崔力文 张加玲 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第3期710-714,共5页
目的研究黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)胶原蛋白合成及衰老相关基因的影响。方法体外培养HSF细胞,通过CCK-8(cell counting kit-8)法筛选黑咖啡提取物安全剂量;实验分为样品组和空白对照组,用ELISA技术检... 目的研究黑咖啡提取物对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblast,HSF)胶原蛋白合成及衰老相关基因的影响。方法体外培养HSF细胞,通过CCK-8(cell counting kit-8)法筛选黑咖啡提取物安全剂量;实验分为样品组和空白对照组,用ELISA技术检测黑咖啡提取物对细胞中Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)和基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1, MMP-1)含量的影响,用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)技术检测黑咖啡提取物作用后细胞中ColⅠ和MMP-1 mRNA的表达水平。结果与空白对照组比较,黑咖啡提取物可抑制HSF细胞中MMP-1合成(P<0.05),促进ColⅠ合成(P<0.05);使ColⅠmRNA表达水平升高(P<0.01),而MMP-1 mRNA表达水平降低(P<0.01)。结论黑咖啡提取物通过促进ColⅠ和抑制MMP-1表达,对胶原蛋白代谢具有改善和调节作用,可延缓皮肤衰老。 展开更多
关键词 黑咖啡 人皮肤成纤维细胞 Ⅰ型胶原蛋白 基质金属蛋白酶-1
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组蛋白脱乙酰酶6抑制剂Tubastatin A对人皮肤成纤维细胞增殖和运动的影响及其分子机制 被引量:1
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作者 张灿 张琼 +2 位作者 张均辉 王凡 张家平 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期853-859,共7页
目的探讨组蛋白脱乙酰酶6(HDAC6)抑制剂Tubastatin A对人皮肤成纤维细胞(HSF)增殖及运动性的影响及其可能的分子机制。方法采用实验研究方法。取对数生长期HSF,按随机数字表法分为阴性对照组及1μmol/L Tubastatin A组、5μmol/L Tubast... 目的探讨组蛋白脱乙酰酶6(HDAC6)抑制剂Tubastatin A对人皮肤成纤维细胞(HSF)增殖及运动性的影响及其可能的分子机制。方法采用实验研究方法。取对数生长期HSF,按随机数字表法分为阴性对照组及1μmol/L Tubastatin A组、5μmol/L Tubastatin A组、10μmol/L Tubastatin A组。阴性对照组加入含终体积分数0.1%二甲基亚砜的DMEM培养液(以下简称完全培养液),其余3组分别加入含相应终物质的量浓度Tubastatin A的完全培养液。常规培养24 h后,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法和5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色检测细胞增殖活力;在活细胞工作站下观察细胞3 h内运动范围,计算细胞曲线运动速度;采用蛋白质印迹法检测胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的蛋白表达量,并计算p-ERK1/2与ERK1/2比值,以此表示ERK1/2活性。CCK-8法行细胞增殖活力检测样本数为6,其余实验样本数为3。对数据行单因素方差分析及LSD检验。结果培养24 h后,CCK-8法和EdU染色显示,与阴性对照组比较,1μmol/L Tubastatin A组、5μmol/L Tubastatin A组、10μmol/L Tubastatin A组细胞增殖活力均显著下降(P<0.01)。培养24 h后,CCK-8法显示,与1μmol/L Tubastatin A组比较,10μmol/L Tubastatin A组细胞增殖活力显著下降(P<0.05);EdU染色显示,与1μmol/L Tubastatin A组比较,5μmol/L Tubastatin A组、10μmol/L Tubastatin A组细胞增殖活力显著下降(P<0.05或P<0.01)。观察3 h内,1μmol/L Tubastatin A组、5μmol/L Tubastatin A组、10μmol/L Tubastatin A组细胞运动范围较阴性对照组明显缩小。观察3 h内,阴性对照组细胞曲线运动速度为(0.780±0.028)μm/min,明显快于1μmol/L Tubastatin A组、5μmol/L Tubastatin A组、10μmol/L Tubastatin A组细胞的(0.594±0.023)、(0.469±0.028)、(0.391±0.021)μm/min(P<0.01);1μmol/L Tubastatin A组细胞曲线运动速度明显快于5μmol/L Tubastatin A组和10μmol/L Tubastatin A组(P<0.01);5μmol/L Tubastatin A组细胞曲线运动速度明显快于10μmol/L Tubastatin A组(P<0.05)。培养24 h后,与阴性对照组比较,1μmol/L Tubastatin A组、5μmol/L Tubastatin A组、10μmol/L Tubastatin A组细胞ERK1/2的活性显著下降(P<0.01);与1μmol/L Tubastatin A组比,5μmol/L Tubastatin A组和10μmol/L Tubastatin A组细胞ERK1/2的活性显著下降(P<0.01);与5μmol/L Tubastatin A组比较,10μmol/L Tubastatin A组细胞ERK1/2的活性显著下降(P<0.05)。结论HDAC6抑制剂Tubastatin A可能通过抑制ERK1/2活性,从而抑制HSF增殖及运动。 展开更多
关键词 细胞增殖 细胞运动 组蛋白脱乙酰酶6 Tubastatin A 人皮肤成纤维细胞 胞外信号调节激酶1/2
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