人白细胞介素12的cDNA克隆及双顺反子腺病毒载体的构建

目的 :克隆中国人IL 12的 p40和p35亚基cDNA ,构建含hIL 12双顺反子的腺病毒载体。 方法 :采用RT PCR从上海地区人骨髓有核细胞中克隆IL 12的双亚基cDNA ,并插入质粒 pCI中进行全基因序列分析。利用质粒 p△ElsplA和IRES序列构建同时表达p35和 p40亚基的腺病毒载体。酶切鉴定构建物中基因插入的正确性。结果 :上海地区人骨髓有核细胞中IL 12的 p40和p35cDNA基因同已报道的北京地区人DC细胞中IL 12的 p40和国外报道的NKSF ,CLMF的 p40和p35序列各有异同 ,构建的IL 12双亚基同时表达的腺病毒载体酶切鉴定正确。 结论 :人IL 12的 p40和 p35基因可能存在多态性 ,同时表达IL 12双亚基的腺病毒载体构建成功 ,对开展人IL 12基因治疗肿瘤具有重要意义。