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化瘀明目方含药血清对高糖诱导的HRMECs功能紊乱模型血管形成的作用及机制研究
1
作者
马孝秋
左韬
+1 位作者
马贤德
赵磊
《中药新药与临床药理》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第12期1668-1677,共10页
目的探究化瘀明目方含药血清对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(Human retinal microvascular endothelial cells,HRMECs)血管形成的影响及可能机制。方法CCK-8法筛选合适的糖浓度和含药血清体积分数,建立单纯高糖因素诱导的HRMECs功...
目的探究化瘀明目方含药血清对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(Human retinal microvascular endothelial cells,HRMECs)血管形成的影响及可能机制。方法CCK-8法筛选合适的糖浓度和含药血清体积分数,建立单纯高糖因素诱导的HRMECs功能紊乱模型。将HRMECs分为6组,正常对照组予以正常ECM培养基(含5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖)+10%空白血清;甘露醇对照组、模型组在正常对照组基础上分别加入19.5 mmol·L^(-1)甘露醇、19.5 mmol·L^(-1)D-葡萄糖;化瘀明目方低、中、高剂量组在模型组基础上分别加入10%低、中、高剂量含药血清(不加空白血清)。克隆实验检测细胞集落形成数,Transwell实验检测细胞迁移数,管腔形成实验检测细胞成管数,免疫荧光实验、Western Blot实验和RT-PCR实验检测第八因子(FactorⅧ)、血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)、细胞分化因子(CD34)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)蛋白及mRNA表达水平。结果与正常对照组比较,模型组能够促进HRMECs集落形成(P<0.01)、细胞迁移(P<0.01)、管腔形成(P<0.01),FactorⅧ、CD31、CD34、VEGFA、VEGFR2蛋白及mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,化瘀明目方低、中、高剂量含药血清抑制HRMECs集落形成(P<0.05,P<0.01)、细胞迁移(P<0.01)、管腔形成(P<0.05,P<0.01),FactorⅧ、CD31、CD34、VEGFA、VEGFR2蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01);正常对照组与甘露醇对照组间各项检测的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论化瘀明目方含药血清能够抑制高糖诱导下HRMECs细胞的增殖、迁移和管腔形成,预防或减轻血管新生,其机制可能与调控VEGFA/VEGFR2信号通路有关。
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关键词
化瘀明目方
糖尿病视网膜病变
人视网膜微血管内皮细胞(
hrmecs
)
血管新生
高糖
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题名
化瘀明目方含药血清对高糖诱导的HRMECs功能紊乱模型血管形成的作用及机制研究
1
作者
马孝秋
左韬
马贤德
赵磊
机构
辽宁中医药大学第二临床学院
辽宁中医药大学附属第二医院
辽宁中医药大学教学实验中心
出处
《中药新药与临床药理》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第12期1668-1677,共10页
基金
国家自然科学基金项目(82104714)
国家中医药管理局“中医药循证能力建设项目”(2019XZZX-YK008)。
文摘
目的探究化瘀明目方含药血清对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(Human retinal microvascular endothelial cells,HRMECs)血管形成的影响及可能机制。方法CCK-8法筛选合适的糖浓度和含药血清体积分数,建立单纯高糖因素诱导的HRMECs功能紊乱模型。将HRMECs分为6组,正常对照组予以正常ECM培养基(含5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖)+10%空白血清;甘露醇对照组、模型组在正常对照组基础上分别加入19.5 mmol·L^(-1)甘露醇、19.5 mmol·L^(-1)D-葡萄糖;化瘀明目方低、中、高剂量组在模型组基础上分别加入10%低、中、高剂量含药血清(不加空白血清)。克隆实验检测细胞集落形成数,Transwell实验检测细胞迁移数,管腔形成实验检测细胞成管数,免疫荧光实验、Western Blot实验和RT-PCR实验检测第八因子(FactorⅧ)、血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)、细胞分化因子(CD34)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)蛋白及mRNA表达水平。结果与正常对照组比较,模型组能够促进HRMECs集落形成(P<0.01)、细胞迁移(P<0.01)、管腔形成(P<0.01),FactorⅧ、CD31、CD34、VEGFA、VEGFR2蛋白及mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,化瘀明目方低、中、高剂量含药血清抑制HRMECs集落形成(P<0.05,P<0.01)、细胞迁移(P<0.01)、管腔形成(P<0.05,P<0.01),FactorⅧ、CD31、CD34、VEGFA、VEGFR2蛋白及mRNA表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01);正常对照组与甘露醇对照组间各项检测的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论化瘀明目方含药血清能够抑制高糖诱导下HRMECs细胞的增殖、迁移和管腔形成,预防或减轻血管新生,其机制可能与调控VEGFA/VEGFR2信号通路有关。
关键词
化瘀明目方
糖尿病视网膜病变
人视网膜微血管内皮细胞(
hrmecs
)
血管新生
高糖
Keywords
Huayu Mingmu Recipe
diabetic retinopathy
humanretinall
microvascular
endothelial
cells
(
hrmecs
)
angiogenesis
high glucose
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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作者
出处
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1
化瘀明目方含药血清对高糖诱导的HRMECs功能紊乱模型血管形成的作用及机制研究
马孝秋
左韬
马贤德
赵磊
《中药新药与临床药理》
CAS
CSCD
北大核心
2023
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