益生菌发酵对姜制天麻活性成分及其抗氧化活性的影响

该文采用产乳酸芽孢杆菌Bacillus sp.DU-106和植物乳杆菌Lactobacillus plantarum复合菌种发酵姜制天麻,对比发酵前后主要活性成分含量变化,并利用体外抗氧化实验和秀丽隐杆线虫模型进一步探讨益生菌发酵姜制天麻抗氧化活性的变化。实验结果显示,经发酵能够显著的提高发酵姜天麻(Fermented Gastrodia elata with ginger,FGEG)的对羟基苯甲醇和总酚含量(P<0.05),分别为5.78 mg/g和10.15 mg/g,两种物质相较于未发酵对照组分别增加了2.54倍和1.74倍。在秀丽隐杆线虫实验中,FGEG能够显著延长正常生长条件下和急性应激条件下线虫的寿命(P<0.01),同时降低线虫体内活性氧自由基含量和提高线虫体内过氧化氢酶活性、谷胱甘肽的含量,并呈现一定剂量依赖效应。同时,FGEG能够显著降低线虫体内MDA的含量和脂褐素相对含量(P<0.001),与空白组相比分别降低了87.21%和82.53%。与未发酵对照组相比,FGEG的体内体外抗氧化活性显著提高(P<0.05)。综上,经发酵后天麻对羟基苯甲醇和总酚含量显著提高,FGEG相较于未发酵样品抗氧化活性显著提升,为FGEG的开发和利用提供理论支撑。

红茶菌发酵对天麻活性成分及感官品质的影响

利用传统红茶菌菌群液态发酵天麻,研究发酵过程中其主要活性成分含量变化,并进一步分析红茶菌发酵天麻液的感官品质。结果表明,经红茶菌发酵5 d,天麻发酵液的总酸质量浓度显著上升,导致pH值下降,其中乙酸、琥珀酸有机酸质量浓度增加最为明显。红茶菌发酵也显著提高天麻多酚、总黄酮以及对羟基苯甲醇等活性成分的含量。通过电子鼻结合固相微萃取-气相色谱-质谱联用法对天麻发酵液的挥发性成分进行分析,结果表明红茶菌发酵产生多种风味物质;经感官评价得出,红茶菌发酵能够明显减少天麻不愉快气味并赋予其果香味。研究结果可为天麻食品深度开发和利用提供理论依据和技术支撑。

基于AHP法结合正交试验法优选参麻益智方水提工艺

目的优选参麻益智方最佳水提工艺。方法以溶剂倍数(A)、煎煮时间(B)、煎煮次数(C)为考察因素,以天麻素转移率、对羟基苯甲醇转移率、阿魏酸转移率和出膏率作为评价指标,多指标层次分析法(AHP)结合单因素试验和正交试验优化水提工艺。结果通过层次分析法确认各指标权重系数,通过综合评分优选出最佳水提工艺为加水提取3次,第1次10倍量水2 h,第2次8倍量水1 h,第3次8倍量水1 h。此工艺条件下的天麻素转移率为108.10%,对羟基苯甲醇转移率为39.12%,阿魏酸转移率为74.45%,出膏率为20.21%,综合评分97.68分。结论该工艺简单、稳定、提取率高,适用于工业化大生产,同时为参麻益智方的开发利用提供了试验依据。

川芎对天麻中天麻素及其代谢产物体内药动学的影响

目的考察川芎对天麻中天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛-O-β-D-吡喃葡萄糖苷体内药动学的影响。方法12只大鼠随机分为2组,分别灌胃给予大川芎方(3.9 g/kg)、天麻(0.78 g/kg)溶液(10 mL/kg),于0、0.08、0.16、0.25、0.50、0.75、1、2、4、6、8、12、24 h采血;72只大鼠随机分为2组,分别灌胃给予大川芎方(7.8 g/kg)、天麻(1.56 g/kg)溶液(10 mL/kg),采集脑组织,HPLC-MS/MS法测定天麻素及其代谢产物血药浓度,计算主要药动学参数。结果与天麻组比较,大川芎方组大鼠血浆中对羟基苯甲醇、对羟基苯甲酸C_(max)升高(P<0.01),对羟基苯甲醛-O-β-D-吡喃葡萄糖C_(max)降低(P<0.01);天麻素T_(max)、MRT_(0~24)h延长(P<0.01);天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲酸AUC_(0~24)h、AUC_(0~∞)升高(P<0.01),CL_(z/F)降低(P<0.01),对羟基苯甲醛-O-β-D-吡喃葡萄糖苷CL_(z/F)升高(P<0.05);对羟基苯甲醇V_(z/F)降低(P<0.01),而大川芎方组大鼠脑组织中C_(max)、AUC_(0~24)h、AUC_(0~∞)、V_(z/F)升高(P<0.05,P<0.01)。结论川芎配伍天麻后,可显著影响天麻素及其代谢产物在大鼠血浆、脑组织中的体内药动学。

长白山野生乌杆天麻“母麻”和“子麻”的质量对比研究

为探讨长白山野生乌杆天麻“母麻”和“子麻”药材质量差异,采用TLC法进行定性鉴别;药典法测定水分、灰分、酸不溶性灰分和浸出物含量;HPLC法测定天麻素、对羟基苯甲醇含量。结果表明,TLC专属斑点明显;“母麻”与“子麻”水分平均含量分别为8.22%和7.97%,浸出物平均含量分别为27.58%和19.61%,总灰分平均含量为3.41%和2.93%,酸不溶性灰分平均含量分别为0.21%和0.19%,天麻素平均含量分别为(3.424±0.010)mg/g和(3.535±0.322)mg/g,对羟基苯甲醇含量分别为(0.541±0.009)mg/g和(0.793±0.014)mg/g。研究发现,“母麻”的水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物含量均高于“子麻”;“子麻”的天麻素及对羟基苯甲醇含量均高于“母麻”。初步判断“子麻”药用价值更优,本实验结果可为天麻等级划分提供可靠的理论依据。

基于近红外光谱法快速同时测定天麻中4种成分含量的研究

采用近红外光谱(NIRS)技术结合偏最小二乘法(PLS)建立天麻中4种成分的快速测定方法,以更好地用于天麻的质量控制。收集来自不同产地的天麻样品共116批次。采用HPLC法测定天麻中的天麻素和对羟基苯甲醇的含量,采用HPLC-MS-MS测定巴利森苷和巴利森苷B的含量;以NIRS积分球漫反射模式采集天麻样品的NIRS图;通过PLS法建立NIRS与待测成分含量间的线性关系模型,从而实现用NIRS对待测天麻样品中4种成分含量的快速测定。天麻中天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷和巴利森苷B的NIRS预测值与实测值之间具有良好的线性关系,具有预测稳定性和准确性。结果表明NIRS法结合PLS可以快速地对天麻中的4种成分进行定量分析,为建立天麻药材和饮片的现场快速检测方法奠定了基础。

天麻安神汤鉴别和含量测定研究

目的:建立天麻安神汤主要药味的薄层鉴别和君药天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的同时测定方法,用于对该方剂进行准确质量控制和评价。方法:对天麻和首乌藤使用薄层色谱法(TLC)鉴别,含量测定采用高效液相色谱法(HPLC),Agilent TC C18色谱柱为固定相,以乙腈–0.05%磷酸溶液(3:97)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长220 nm,柱温25℃,进样量10μL,以天麻素和对羟基苯甲醇平行制备10批天麻安神汤进行测定。结果:10批样品进行含量测定结果显示,天麻素的含量为0.0311~0.0365 mg·mL^(-1),对羟基苯甲醇为0.0210~0.0245 mg·mL^(-1)。结论:对天麻安神汤君药天麻中天麻素和对羟基苯甲醇进行了同时测定,方法快速、准确、高效,为该方剂的质量精准控制提供了科学依据。

应用HPLC-DAD/MS技术评价中药天麻的质量

分析比较不同产地及不同炮制方法的天麻药材质量。天麻药材指纹图谱HPLC-DAD分析条件如下:Zorbax XDB C18色谱柱;流动相为乙腈-0.1%醋酸水梯度洗脱,检测波长为270 nm。MS分析条件:采用ESI电离源,负离子检测模式。天麻药材含量测定HPLC条件:流动相为乙腈-0.1%醋酸水等度洗脱,其余均同天麻药材指纹图谱的液相分析条件。结果表明,不同产地天麻药材具有相似的指纹图谱,原药材直接冻干的炮制方法较其他方法具有较高的相似度;指认了天麻药材指纹图谱中8个主要的色谱峰;指纹图谱相似度的分析结果与主要成分定量分析的结果基本一致。本文所建立的HPLC-DAD/MS分析方法能够对天麻药材进行全面的质量评价。

川芎对天麻指标成分在偏头痛大鼠体内药动学的影响

目的研究川芎对天麻中天麻素及天麻苷元在偏头痛大鼠体内药动学过程的影响。方法 156只大鼠被随机分为天麻组(灌胃给予天麻提取物0.484 g/kg)和川芎-天麻组(灌胃给予川芎提取物0.652 g/kg及天麻提取物0.484g/kg),先对每组大鼠皮下注射硝酸甘油注射液复制偏头痛动物模型,30 min后给予不同药物,并于给药后不同时间点取血及脑组织,采用HPLC测定天麻素及天麻苷元在血内及脑内的浓度,以DAS 2.0计算其药动学参数。结果川芎-天麻组中天麻素和天麻苷元在血中的平均滞留时间是天麻组的1.37和1.36倍,半衰期是天麻组的1.62和1.76倍,其中天麻素的清除率为天麻组的88.14%,两组相比均有统计学差异(P<0.05或0.01);川芎-天麻组中天麻苷元在脑内的药物浓度曲线下面积是天麻组的1.26倍,平均滞留时间是天麻组的1.44倍,清除率为天麻组的77.76%,与天麻组相比有统计学差异(均P<0.01)。结论川芎与天麻配伍后可显著延长天麻素、天麻苷元在血中的滞留时间和半衰期,同时也增加天麻苷元在脑中的生物利用度及滞留时间,减缓消除速率,表明川芎与天麻配伍后可显著影响天麻指标成分的血脑药动学行为,发挥协同效应。

白花曼陀罗悬浮培养细胞转化对羟基苯甲醛生成天麻素

目的研究天麻素在植物细胞的转化合成。方法利用白花曼陀罗细胞悬浮培养转化外源对羟基苯甲醛合成天麻素,并应用多种色谱技术进行分离纯化,根据转化产物的理化性质和光谱数据分析鉴定结构。结果利用白花曼陀罗细胞成功地将对羟基苯甲醛转化为天麻素(II),并得到由对羟基苯甲醛生成天麻素的转化中间体对羟基苯甲醇(I)。另外,从细胞培养物中分离得到β-D-吡喃阿洛酮糖(III)和5-正丁氧基-β-D-吡喃阿洛酮糖(IV)两种化合物。结论白花曼陀罗细胞悬浮培养能转化对羟基苯甲醛合成天麻素。

天麻成分对羟基苯甲醇抗实验性脑血栓形成及抗炎作用研究

目的观察天麻成分对羟基苯甲醇抗脑血栓形成及抗炎作用.方法本实验采用经大鼠一侧颈内动脉注射花生四烯酸诱发同侧大脑半球脑血栓形成方法评价天麻成分对羟基苯甲醇的抗实验性脑血栓形成作用;采用二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀模型、花生四烯酸、角叉菜胶诱导大鼠足趾肿胀反应模型考察了天麻成分对羟基苯甲醇的抗炎作用.结果天麻成分对羟基苯甲醇20 mg/kg和15 mg/kg组均能够降低花生四烯酸注射侧大脑伊文思蓝吸光度与脑重的比值(P<0.01);天麻成分对羟基苯甲醇30 mg/kg、20 mg/kg和15 mg/kg组均能够显著抑制二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀,抑制率分别为60.01%、52.72%、45%(P<0.01);天麻成分对羟基苯甲醇20 mg/kg组能够抑制大鼠足趾注射角叉菜胶诱导的足趾肿胀反应,抑制率为42.56%(P<0.01),对大鼠足趾注射花生四烯酸诱导的足趾肿胀反应无明显影响.结论天麻成分对羟基苯甲醇具有显著的抑制实验性脑血栓形成及抗炎作用,其抗炎作用与抑制花生四烯酸环氧合酶代谢途径有关.

对羟基苯甲醇对急性脑缺血损伤大鼠脑内炎症因子的影响

目的探讨天麻成分对羟基苯甲醇(4-hydroxybenzyl alcohol)是否通过减轻脑内炎症反应而对抗大鼠急性脑缺血损伤。方法大鼠随机分为假手术组、模型对照组、对羟基苯甲醇治疗组和地塞米松干预组,灌胃给药7 d,末次给药后采用颈内动脉注射花生四烯酸诱发同侧大脑半球脑血栓形成方法,复制大鼠急性脑缺血损伤模型,3 h后对大鼠神经功能损伤进行评分;ELISA法检测脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、血栓素A2(TXA2)、6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、半胱氨酰白三烯(Cys LTs)、白三烯B4(LTB4)的含有量。结果对羟基苯甲醇能明显减轻大鼠急性脑缺血损伤的神经功能障碍,降低脑组织中TNF-α、IL-1β的量,抑制花生四烯酸代谢环氧酶途径的炎症因子TXA2、6-keto-PGF1α的释放。结论天麻减轻大鼠急性脑缺血损伤的作用与抑制花生四烯酸代谢环氧酶途径的炎症反应与对羟基苯甲醇有关。

人参毛状根生物合成天麻素转化体系的建立

以对羟基苯甲醇转化率和天麻素含量为指标,探索适宜于人参毛状根生物合成天麻素的培养条件如底物浓度、转化持续时间和培养阶段。结果表明,B5液体培养基培养22d的人参毛状根,在含有1.000mmol·L-1对羟基苯甲醇的生物合成培养基中转化24h,合成的天麻素含量占干重的6.65%,对羟基苯甲醇转化率达到84.8%,说明以人参毛状根为反应器可以合成人参所不具有的天麻素。

曼陀罗毛状根的诱导及其悬浮培养合成天麻素初探

利用A4和R1601两种发根农杆菌菌株分别感染曼陀罗的嫩叶及嫩茎诱导产生毛状根。探讨了不同菌株、不同外植体、蔗糖预处理、外植体预培养与染菌时间以及外植体二次染菌等条件对转化频率的影响,并建立毛状根悬浮培养体系及转化外源底物对羟基苯甲醇合成天麻素。结果表明:A4转化频率高于R1601;嫩叶转化频率最高;嫩叶最佳预培养时间为4 d;最佳染菌时间为5 min。HPLC法分析表明,悬浮培养毛状根能转化外源底物对羟基苯甲醇合成天麻素。

对羟基苯甲醇对灰树花产胞外多糖的影响及其发酵动力学

通过向灰树花发酵液中添加不同质量浓度梯度的对羟基苯甲醇,分析其对灰树花菌体生长和胞外多糖合成的影响,并且进一步研究了添加对羟基苯甲醇后发酵液中菌丝体生长、残糖(还原糖)含量、胞外多糖产量、p H值、对羟基苯甲醇和天麻素含量的变化情况,并做动力学分析。结果表明:当对羟基苯甲醇添加量为200 mg/L时效果最佳,相比于空白组(未添加对羟基苯甲醇)使菌丝体生物量提高了22.73%,胞外多糖产量提高了10.24%,均显著高于空白组(P<0.05)。动力学研究结果表明:在整个发酵过程中,灰树花生长从第8天趋于稳定,葡萄糖作为碳源不断被消耗并且胞外多糖逐渐合成,到第10天二者趋于稳定。此外,对羟基苯甲醇含量减少,部分转化为天麻素。

HPLC法测定鲜天麻中多指标成分的含量

建立了高效液相色谱测定鲜天麻中天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、腺苷、巴利森苷A、4,4'-二羟基二苄基醚6种成分含量的方法。采用Agilent 1120高效液相系统,YMC-PEAK ODS-A column(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇溶液(B),梯度洗脱:0~5 min,5%B;5~65 min,5%~40%B;65~80 min,40%~100%B;分析时间80 mins;流速1 m L/min;柱温25℃;进样量50μL。其中天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、腺苷、巴利森苷A、4,4'-二羟基二苄基醚6种成分在线性范围内均具有良好的线性关系(R≥0.999 2);平均回收率在94.20%~99.68%,相对标准偏差小于1.96%。在不同品种的鲜天麻中,6种成分的量存在差异,红天麻各成分含量稍高于乌天麻。同一品种天麻中,巴利森苷类成分含量较高,腺苷和4,4'-二羟基二苄基醚含量均较低,且鲜天麻中提取的天麻素等6种成分在8 h内稳定。该方法分离效果与重复性好、快速、简便,能够为客观、全面地研究天麻药材提供参考。

灰树花发酵过程天麻成分变化的HPLC检测方法研究

建立HPLC方法对天麻醇提取物成分及灰树花发酵液进行分析。色谱柱为Agilent TC-C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为A:0.1%磷酸水和B:乙腈,以梯度洗脱:0min^35min,B:3%~30%(V/V);35min^45min,B:30%~70%(V/V)。流速1mL/min,柱温30℃,检测波长221nm。在此条件下,天麻提取液及灰树花发酵液中3种已确定的天麻成分具有良好的分离度,且线性关系良好;精密度高(RSD<5%);回收率在96%~102%之间,同时检测到经过6d发酵后发酵液中天麻素、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛质量浓度与发酵第0d相比分别下降了46.38%、11.85%和36.75%。该方法可以用于灰树花发酵过程中天麻成分变化情况的跟踪检测,为进一步探明天麻成分与灰树花代谢相互作用打下基础,同时也初步探明了灰树花对于天麻成分的利用情况。

乙酸存在下磷酸铁催化对甲酚气相选择性氧化(英文)

在乙酸存在和空气气氛下,以磷酸铁为催化剂进行了对甲酚气相选择氧化生成对羟基苯甲醛和对羟基苯甲醇的反应.考察了不同乙酸/对甲酚比和反应温度对反应产物分布的影响.结果表明,加入乙酸可抑制目标产物深度氧化,促进气相反应中高选择性地生成对羟基苯甲醛和对羟基苯甲醇.在反应温度为250℃,乙酸/对甲酚比为0.9,催化剂用量为0.35g和对甲酚流速为1.92g/h时,生成对羟基苯甲醛的选择性为34.4%,生成对羟基苯甲醇的选择性为65.6%.

不同保藏方法对鲜天麻保鲜效果比较

为明确室温敞放、微孔膜密封、真空保藏对新鲜天麻的保鲜效果,本研究通过感官观察、称量计算、高效液相色谱法对天麻外观改变、水分散失及活性成分含量进行了检测。结果表明,室温敞放天麻的水分散失严重,外观较差,但其活性成分下降较缓慢;微孔膜密封保存能较好的维持天麻外观形态及自身特性;真空保存天麻容易发生腐烂变质,不能食用。在20 d内,以上3种方法保存的天麻中活性成分含量均高于药典要求含量。新鲜天麻中天麻素与对羟基苯甲醇含量较高,具有较高的食用或药用价值;在较低温度环境条件下,敞放或微孔膜封藏均能较好的保证其含量。

UPLC-MS/MS法检测不同产地野生天麻中天麻素及对羟基苯甲醇含量

[目的]采用超高效液相色谱质谱联用法同时测定6个产地天麻中天麻素和对羟基苯甲醇含量。[方法]采用Phenomenex C18柱（50 mm ×2．1 mm，3μm），乙腈－5 mmol／L乙酸铵（0．1％甲酸）水溶液作流动相，流速0．2 mL／min；多反应监测正离子模式（MRM －Pos）。[结果]天麻素在0．1220～1220．0000 ng／mL、对羟基苯甲醇在0．5020～5020．0000 ng／mL浓度范围内呈良好的线性关系。所有样品中天麻素和对羟基苯甲醇的含量均超过《中国药典》2015年版中“天麻”含量测定要求，按照2种成分总含量排序从大到小依次为云南昭通、贵州毕节、四川雅安、重庆城口、陕西汉中、甘肃陇南。[结论]该方法精密度、重现性和分离效果好，分析快速、准确，适用于对天麻中天麻素和对羟基苯甲醇的定性、定量研究。