10-羟基喜树碱不同载体材料纳米粒的研究进展

10-羟基喜树碱(10-hydroxycampothecin,10-HCPT)是从植物喜树中提取的一种天然生物碱,通过靶向肿瘤细胞内拓扑异构酶I而显示出较强的抗肿瘤活性,但是10-HCPT的溶解度低、稳定性差和副作用大,严重限制了药物在临床上的应用。为了提高10-HCPT的溶解度和稳定性,同时实现“减毒增效”的作用,目前已经开发了多种10-HCPT纳米递送系统。本文重点综述采用不同的有机材料和无机材料制备的10-HCPT纳米粒、无载体10-HCPT纳米制剂的研究进展,为更优良的10-HCPT制剂开发提供参考。

羟基喜树碱对口腔鳞癌细胞株的抗癌作用

背景与目的:研究已显示羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)对多种恶性肿瘤具有良好的治疗效果,但对口腔鳞癌的治疗研究还很少,本文研究羟基喜树碱对口腔鳞癌细胞株(Tca8113细胞株)的体内外抗瘤作用及其作用机制。方法:采用MTT法及FCM(flowcytometry)检测HCPT对Tca8113细胞株的体外细胞毒作用及对细胞周期的影响;Tca8113细胞株裸鼠移植瘤经HCPT处理后观察肿瘤的生长状态,计算倍增时间和抑瘤率。结果:HCPT对Tca8113细胞具有强的杀伤作用,其IC50为2μmol/L;FCM检测显示低浓度HCPT处理后可将细胞先后阻滞在S期和G2+M期,高浓度的HCPT则诱导细胞凋亡,细胞凋亡率随药物浓度和作用时间延长明显上升;与对照组比较,HCPT组移植瘤生长减慢,倍增时间延长,两组间肿瘤体积存在显著性差异(P<0.001),接种后28天其抑瘤率达69.6%。结论:HCPT对口腔鳞癌细胞具有强的细胞毒作用,对Tca8113移植瘤生长有显著抑制作用,其机制与阻断细胞周期及诱导细胞凋亡有关。

羟基喜树碱、平阳霉素、顺铂单独及联合应用对人舌癌细胞活性的影响

目的 :观察体外应用羟基喜树碱 (HCPT)、平阳霉素 (PYM )、顺铂 (DDP)三种药物单用和两两联合应用对人舌癌Tca8113细胞的生长抑制作用。方法 :采用MTT法、细胞计数法、软琼脂克隆形成法及HE染色法 ,研究用药前后细胞增殖活性及形态的变化。结果 :⑴三种药单用及两药合用对细胞均有很好的抑制作用 ,且以HCPT和PYM合用最强。⑵HCPT和PYM单用和合用可使细胞的群体倍增时间显著延长 ,克隆形成率显著降低 ,形态发生明显的变化。结论

以羟基喜树碱为基础的联合方案对实验性鼻咽癌抗瘤作用的研究

目的：探讨以拓扑异构酶 I抑制剂羟基喜树碱（ 10- hydroxycampothecin,HCPT）为基础的联合方案对实验性鼻咽癌 (nasopharyngeal carcinoma,NPC)的抗瘤作用。方法：以人 NPC细胞株 CNE2的体外和裸鼠移植瘤为模型，研究 HCPT与顺铂（ cisplatin,DDP）或（和） 5-氟尿嘧啶（ 5- fluorouracil,5- FU）联合作用的抗瘤效果。细胞毒测定用 MTT法，体内抗瘤模型为 CNE2裸鼠移植瘤模型。结果： HCPT、 DDP和 5- FU对 CNE2的 IC50分别为 14.2、 17.2及 49.2μ mol/L。 HCPT与 DDP合用具有明显的协同抗 NPC作用。 HCPT与 5- FU合用虽较单药抗瘤作用优，但未见明显的相加或协同作用。 HCPT＋ DDP＋ 5- FU三药合用较两药合用效果更优，且毒性可以耐受。结论： HCPT＋ DDP或 HCPT＋ DDP＋ 5- FU具有协同抗 NPC肿瘤作用，可试用于临床。

miR-506在人结肠癌羟基喜树碱多药耐药中的功能研究

目的探讨miR-506在人结肠癌羟基喜树碱多药耐药中的潜在作用。方法首先通过PCR从基因组DNA中克隆出包含miR-506前体的片段,将其连接至miRNA表达载体pMIF-cGFP-Zeo中,测序进行验证。将构建成功的pMIF-miR-506转染至低表达miR-506的亲本细胞SW1116中,加入含G418的选择性培养基进行选择性培养。运用RT-PCR验证稳定转染pMIF-miR-506的SW1116细胞株中的miR-506的表达情况,MTT法检测稳定转染pMIF-miR-506的SW1116细胞株和亲本细胞SW1116对羟基喜树碱的敏感性差异,Annexin V/PI检测各自对羟基喜树碱的凋亡情况。结果测序结果表明hsa-miR-506的前体序列被成功地构建至miRNA表达载体pMIF-cGFP-Zeo中。TaqMan荧光定量PCR技术检测发现,相比亲本细胞SW1116,稳定表达绿色荧光的SW1116细胞克隆中miR-506的含量显著升高,约为33.7±8.3倍。细胞增殖试验表明稳定转染pMIF-miR-506的SW1116细胞株的IC50为(280±13)μg/L,而对照组SW1116的IC50为(152±12)μg/L。同时还发现在相同浓度的羟基喜树碱作用下,亲本细胞SW1116较稳定转染pMIF-miR-506的SW1116细胞株的凋亡细胞比率增高(150μg/L:7.8%±1.7%vs5.4%±1.2%;300μg/L:33.6%±3.9%vs18.2%±4.7%)。结论成功地构建了过表达miR-506的载体pMIF-miR-506;过表达miR-506能够增加SW1116对羟基喜树碱的抵抗性。

平阳霉素、羟基喜树碱联合应用对Acc-M细胞活性的影响

目的 观察体外应用羟基喜树碱(HCPT)、平阳霉素(PYM)两种药物单用和联合应用对人腺样囊性癌Acc-M细胞的生长抑制作用。方法 采用MTT法研究用药前后细胞增殖活性的影响。结果 两种药单用及合用对细胞均有很好的抑制作用,且以HCPT和PYM合用最强。HCPT和PYM单用和合用可使细胞的群体倍增时间显著延长,以联合用药为佳。结论 HCPT、PYM单独及联合用药均对Acc-M细胞在体外有很好的抑制作用且以联合应用效果更佳。

羟基喜树碱、平阳霉素对人舌癌细胞的抑制作用及端粒酶活性的影响

目的 :观察体外羟基喜树碱、平阳霉素单独和联合应用对人舌癌Tca 8113细胞的生长抑制及端粒酶活性的影响。方法 :采用MTT法、软琼脂克隆形成法、透射电镜观察法、流式细胞术 ,TRAP PCR ELISA法研究。结果 :羟基喜树碱、平阳霉素单用及合用对Tca 8113细胞均有很好的抑制作用 ,且以合用效果最强 ,羟基喜树碱、平阳霉素使Tca 8113细胞的克隆形成率降低 ,超微结构、细胞周期发生明显变化 ,抑制端粒酶活性且有一定的时间依赖性。结论 :羟基喜树碱、平阳霉素对人舌癌Tca 8113细胞在体外有很好的抑制作用且联合应用效果更佳。

联合化疗对腺样囊性癌细胞作用的实验研究

目的观察体外应用羟基喜树碱(HCPT)、平阳霉素(PYM)两种药物单用和两两联合应用对人腺样囊性癌Acc-M细胞的生长抑制作用.方法采用MTT法研究用药前后细胞增殖活性的影响,用流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期变化.结果①两种药单用及两药合用对细胞均有很好的抑制作用,且以HCPT和PYM合用最强.②HCPT和PYM单用和合用可使细胞的群体倍增时间显著延长,克隆形成率降低,细胞凋亡率增加,以联合用药为佳.结论HCPT、PYM单独及联合用药均对Acc-M细胞在体外有很好的抑制作用且与以联合应用效果更佳.

羟基喜树碱/GA-PEI-PLGA纳米粒的制备及其工艺优化

目的制备包载羟基喜树碱(HCPT)的甘草次酸修饰的PEI-PLGA(GA-PEI-PLGA)纳米粒。方法采用超声乳化-减压溶剂挥发法制备HCPT/GA-PEI-PLGA纳米粒。在单因素实验基础上,选取药物/载体比、油相/水相体积比、超声时间、超声功率为考察因素,以包封率和载药量为考察指标,通过正交设计实验对载药纳米粒的制备工艺进行优化,并对其粒径及Zeta电位进行测定。结果超声乳化-减压溶剂挥发法成功制得HCPT/GA-PEI-PLGA纳米粒,其中药物/载体比对载药纳米粒制备的影响最大。优化后的处方工艺为:药物/载体比3∶10、油相/水相体积比1∶9、超声功率570 W、超声时间15 min。制得的载药纳米粒包封率高达(87.52±3.91)%,载药量为(20.10±4.72)%;平均粒径(218.1±3.23)nm,Zeta电位为(34.98±3.56)m V。结论超声乳化-减压溶剂挥发法适于制备HCPT/GA-PEI-PLGA纳米粒,制得的载药纳米粒包封率和载药量较高、粒径分布均匀、稳定性好。

羟基喜树碱/GA-PEI-PLGA纳米粒的体外释放特性考察

目的考察载羟基喜树碱(HCPT)的甘草次酸(GA)修饰PEI-PLGA(HCPT/GA-PEI-PLGA)纳米粒的体外释药特性。方法应用乳化-溶剂挥发法制备HCPT/GA-PEI-PLGA纳米粒。采用动态透析法,考察载药纳米粒在0.5%吐温80的磷酸盐缓冲液(p H 7.4)中的释放特性,并与游离药物进行比较;对载药纳米粒的释药模型进行拟合。结果 8 h时,HCPT/GA-PEI-PLGA纳米粒中HCPT的累积释放率约为43%,显著低于游离药物的累积释放率(约80%);48 h时,载药纳米粒中HCPT的累积释放率为82%,而游离HCPT已释放完全(累积释放率达97%)。由此可见,经GA-PEI-PLGA纳米粒包载后,HCPT表现出一定的缓释作用。模型拟合结果表明,HCPT/GA-PEI-PLGA纳米粒的体外释药曲线与Higuchi模型拟合度最好,拟合方程为Q=0.1296t 1/2-0.0069(R2=0.9624)。结论 GA-PEI-PLGA纳米粒可延缓HCPT的释放,药物释放符合Higuchi方程。

羟基喜树碱-聚乙二醇固体分散体的稳定性

为提高难溶药物羟基喜树碱(HCPT)的溶出度,研究了以聚乙二醇(PET)为载体的HCPT-PET固体分散体的稳定性。采用溶剂-熔融法制备了HCPT-PEG固体分散体。在相对湿度75%、温度25℃下,测定了溶出度、吸湿增重和晶体形态。结果表明:HCPT在快速冷却时以无定型态,缓慢冷却时以微晶态存在于载体中。相对分子质量6 000的PEG 6000的固体分散体的稳定性,比PEG 2000更好;高的载体/药物质量比也可提高稳定性。