基于网络药理学并辅以生物学验证探讨固肠止泻丸治疗炎症后肠易激综合征内脏痛敏的分子机制

目的基于网络药理学并辅以生物学验证探讨固肠止泻丸治疗炎症后肠易激综合征(post-inflammation irritable bowel syndrome,PI-IBS)内脏痛觉敏感的分子机制。方法经ADME参数过滤分析从固肠止泻丸中筛选出96个活性成分,利用抗PI-IBS的上市药物上传到PharmMapper中进行抗PI-IBS疾病靶标预测。活性成分与预测疾病靶标的二者进行分子对接验证,用Cytoscape软件构建成分-靶标网络;借助CluoGO插件对固肠止泻丸治疗PI-IBS内脏痛觉敏感的相关靶标进行生物学通路分析,最后以TNBS诱导PI-IBS大鼠模型为研究材料,采用低、中、高不同剂量GCZX干预,然后从内脏痛觉阈值、结肠EC细胞数量,及若干关键细胞因子、关键靶标蛋白表达等多种指标,进行动物、细胞、分子等多个层面的验证性实验。验证前期计算机模拟结果的可靠性。结果计算机模拟实验预测结果表明,89个活性药效分子作用于39个关键靶标,其中核心靶标为TPH1、TNF-α、IL-6、IFN-γ、MAO-A、IL-10,且靶标主要作用于5-HT信号通路上。生物学验证实验结果表明,经GCZX的干预后,显著降低了TNBS诱导的PI-IBS大鼠的内脏痛觉敏感度、结肠嗜铬细胞数目,且有效调控了结肠组织内TPH、5-HT、5-HIAA及细胞炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10的表达,以及SERT蛋白表达量无显著变化。结论固肠止泻丸的药效分子可能主要通过调节5-HT信号通路发挥药效,并主要作用于6个核心靶标。本研究为进一步开展固肠止泻丸治疗PI-IBS作用机制的研究提供了新思路和新方法。