新生大鼠下丘脑神经元原代培养及形态学

目的：优化下丘脑神经元体外培养方法，观察神经元形态学特点及生长规律。方法：取SD新生鼠，剥离下丘脑，机械吹打法制成单细胞悬液，接种，24h后换为Neurobasal培养基；神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学法计数阳性细胞；H-E染色、Nissl染色。结果：原代培养神经元6～8h内开始贴壁，培养5～7d突起增粗增长，连接成网，以多极神经元为主，胞体呈三角形、梭形、椭圆形；经NSE鉴定为神经元并且纯度约90％；细胞核大而圆，H-E染色胞核深蓝色，胞质红色，胞体可见尼氏颗粒。结论：改良后培养下丘脑的方法具有稳定的可重复性，可应用于下丘脑神经元培养实验及建立神经毒性研究模型。