诱导性低温复苏对失血性休克大鼠肠组织Ca^(2+)/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅰ表达影响

目的探讨诱导性低温复苏对失血性休克大鼠肠组织Ca^(2+)/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅰ(CaMKⅠ)表达的影响。方法选取成年雄性Wistar大鼠30只,随机分为假手术组(n=6)、常温复苏组(n=12)以及低温复苏组(n=12)。假手术组仅进行外科插管及相关手术操作,不建立失血性休克模型;常温复苏组及低温复苏组每只大鼠放血25 ml/kg,构建失血性休克模型,休克60 min后分别采取38℃和32℃复苏并维持60 min,复苏结束后将大鼠体温恢复至38℃并监测血流动力学3 h。大鼠复苏3 h后,3组均随机选取50%的大鼠处死,取小肠黏膜、肠系膜淋巴结及血液,剩余大鼠进行72 h生存分析。采用定量聚合酶链式反应(PCR)及蛋白质印迹法分别检测3组大鼠肠黏膜中CaMKⅠmRNA及蛋白表达情况,应用酶联免疫吸附试剂盒检测大鼠血清炎性因子表达情况,同时,进行细菌移位检测。结果复苏3 h后,低温复苏组大鼠的心率和平均动脉压(MAP)均低于常温复苏组,而心输出量、每搏量和射血分数均高于常温复苏组,差异有统计学意义(P<0.05)。设定72 h为观察终点,假手术组大鼠于观察终点时全部存活,低温复苏组大鼠的生存时间为(63.50±9.59)h,明显长于常温复苏组的(46.83±19.59)h,差异有统计学意义(P<0.05)。在液体复苏3 h后,低温复苏组CaMKⅠmRNA表达水平、灰度值均明显低于常温复苏组,差异有统计学意义(P<0.05);常温复苏组与低温复苏组CaMKⅠmRNA、蛋白表达水平均明显高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。假手术组大鼠血清中CaMKⅠ、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-8水平明显低于常温复苏组和低温复苏组,IL-10水平高于常温复苏组,但低于低温复苏组,差异有统计学意义(P<0.05)。低温复苏组大鼠血清中CaMKⅠ、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平明显低于常温复苏组,IL-10水平明显高于常温复苏组,差异有统计学意义(P<0.05)。复苏3 h后,低温复苏组大鼠血液细菌移位量、肠系膜淋巴结细菌移位量均明显低于常温复苏组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在诱导性低温复苏条件下,失血性休克大鼠肠组织中CaMKⅠmRNA及蛋白水平表达降低,大鼠生存时间延长,CaMKⅠ下调可能是诱导性低温复苏减轻大鼠失血性休克肠缺血再灌注损伤的重要分子机制。

重型颅脑损伤亚低温治疗中脑氧代谢变化的研究

目的 :观察重型颅脑损伤 (SHI)亚低温治疗过程中的脑氧代谢变化规律。方法 :对13例SHI患者(GCS≤8分 )进行亚低温治疗 ,同时采用Neurotrend 7TM 多参数监测系统持续监测脑组织氧分压 (PbtO2)、二氧化碳分压 (PbtCO2)、pH值 (pH bt)及脑温 (BT) ,比较治疗前后指标的变化及其与预后的关系。结果 :(1)13例患者伤后平均PbtO29 .69mmHg ,PbtCO258 .08mmHg ,pH bt6 .825 ,在亚低温治疗中PbtO2 与pH bt 逐渐升高 ,PbtCO2 逐渐降低 ,达到正常范围并保持稳定。 (2)监测数据准确可靠 ,未见与监测有关的并发症。 (3)SHI后脑氧代谢指标与GCS、GOS均无明显相关 ,治疗前后的指标变化与GOS呈正相关。结论 :脑氧代谢持续监测安全、有效 ,有利于早期发现SHI后脑组织缺氧及酸中毒。亚低温治疗能有效缓解SHI后的脑组织缺氧及酸中毒 ,从而改善患者预后。治疗中脑氧代谢的相对变化与其绝对数值相比 ,在进行伤情、预后评估及治疗评价方面具有更重要的意义。

亚低温对肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨亚低温对肝缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法 将 18只犬随机分为 3组 :非缺血对照组 (n =6 )、缺血再灌注组 (n =6 )和亚低温处理组 (肝周充填碎冰块造成肝脏亚低温 ,n =6 )。对各组肝上下腔静脉血进行谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶 (LHD )以及丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)、谷胱甘肽过氧化酶 (GSH PX)活性及总抗氧化 (TAX )能力测定。结果 全肝缺血再灌注后ALT ,AST ,LDH和MDA含量明显上升 (P <0 .0 1) ,SOD ,CAT ,GSH PX活性及TAX能力明显下降 (P <0 .0 1) ;而亚低温处理组与缺血再灌注组比较 ,ALT ,AST ,LDH和MDA含量明显下降 (P <0 .0 1) ,SOD ,CAT ,GSH PX活性及TAX能力明显上升 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。结论 亚低温能增强肝组织自身抗氧化能力 ,减轻肝缺血再灌注后氧自由基对肝脏的损伤。

亚低温联合脂肪间充质干细胞对肝缺血再灌注损伤的保护作用

背景:肝缺血再灌注损伤的机制复杂多样,是制约肝脏外科手术的瓶颈,如何减轻肝缺血再灌注损伤一直是医学研究的热点与难点之一。目的:探讨亚低温联合脂肪间充质干细胞预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠(购于昆明医科大学实验动物中心)随机分为6组:假手术组、肝缺血再灌注损伤组、亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组、ERK通路阻断剂组,每组10只,均于缺血前30 min给予亚低温、脂肪间充质干细胞、ERK通路阻断剂干预。肝缺血再灌注12 h后收集大鼠血清及肝组织标本,进行相关指标检测。肝缺血再灌注12 h后收集大鼠血清、肝组织,术后7 d收集大鼠肝组织,进行相关指标检测。结果与结论:①全自动生化分析仪检测肝功能指标:亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组血清中天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶和乳酸脱氢酶活性均低于肝缺血再灌注损伤组(P <0.05),亚低温+脂肪间充质干细胞组血清中3种酶活性低于亚低温组和脂肪间充质干细胞组(P <0.05);②ELISA检测氧化应激指标:亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组肝组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于肝缺血再灌注损伤组(P <0.05),丙二醛水平均显著低于肝缺血再灌注损伤组(P <0.05);亚低温+脂肪间充质干细胞组肝组织中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平显著高于亚低温组和脂肪间充质干细胞组(P <0.05),而丙二醛水平低于亚低温组和脂肪间充质干细胞组(P <0.05);③Western blotting检测相关蛋白表达:与肝缺血再灌注损伤组相比,亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组肝组织中p-ERK1/2相对表达水平显著升高(P <0.05),各组中ERK1/2的表达差异无显著性意义;④TUNEL检测肝细胞凋亡数量:肝缺血再灌注损伤组和ERK通路阻断剂组肝组织中细胞凋亡率明显高于亚低温组、脂肪间充质干细胞组、亚低温+脂肪间充质干细胞组。同时,Western blotting检测相关凋亡蛋白结果与其一致;⑤结果表明,亚低温联合脂肪间充质干细胞对肝缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与激活ERK通路进而下调肝细胞凋亡有关。

亚低温对颅内巨大动脉瘤夹闭术瞬间阻断及缺血再灌注期的脑保护作用

目的:研究亚低温对颅内巨大动脉瘤夹闭术瞬间阻断其供血动脉时缺血再灌注期的脑保护作用。方法:对颅内巨大动脉瘤行夹闭术27例,13例于动脉瘤夹闭瞬间阻断及缺血再灌注期行亚低温处理。直肠温度(RT)控制在31.0℃～36.0℃,脑组织温度(BT)为32.0℃～35.0℃。同时,监测患者的生命体征、BT和失血量。常温组14例,RT控制在36.0℃～37.2℃。2组患者均于术后3个月时根据GOS评估法判定疗效。结果:术中2组生命体征差异无统计学意义。亚低温组与常温组相比,手术完成比较顺利,无严重并发症,病死率较低,运动神经功能良好率较高,预后显著改善。结论:亚低温可明显降低颅内巨大动脉瘤夹闭术患者的病死率,提高患者生命质量,对脑缺血及再灌注性损伤具有良好的脑保护作用。

亚低温对大鼠脑缺血再灌注后自体神经干细胞HIF-1α、MMP-2表达的影响

【目的】探讨亚低温对大鼠脑缺血再灌注后自体神经干细胞HIF-1α、MMP-2表达的影响。【方法】72只SD大鼠随机分为：假手术组（A组）、缺血再灌注＋常温组（B组）、缺血再灌注＋亚低温组（C组）。检测并比较A组、B组和C组缺血后再灌注各时间点的海马区HIF-1α、MMP-2的表达水平。【结果】A组可见很少量的HIF-1α、MMP-2表达；B组和C组再灌注1d后HIF-1α、MMP-2阳性细胞表达均处于较高水平，再灌注3d后阳性细胞表达逐渐下降，再灌注1d、3d及7d后C组阳性细胞数均较B组低（P〈0．05），但再灌注14d后两组阳性细胞数比较无明显差异（P〉0．05）。【结论】亚低温对SD大鼠脑缺血再灌注后的神经保护作用可能与亚低温治疗抑制HIF-1α、MMP-2阳性细胞的表达有关。

红景天苷并亚低温对全脑缺血再灌注损伤后大鼠脑的保护作用

目的探讨红景天苷复合亚低温对全脑缺血再灌注损伤后大鼠海马CA1区细胞凋亡及相关蛋白表达的影响及其机制。方法将150只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、红景天苷组、亚低温组及红景天苷复合亚低温组5组,采用四动脉阻断（4VO）方法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,假手术组仅暴露双侧翼孔及游离颈总动脉,不凝闭椎动脉和夹闭颈总动脉。假手术组、模型组、红景天苷组保持肛温36.5℃;亚低温组和红景天苷复合亚低温组大鼠迅速放入4℃环境使肛温降至32.0℃并维持2h。缺血10min后实现再灌注,再灌注24h后,检测神经功能缺失评分（NDS）、海马CA1区细胞凋亡以及海马组织中Bcl-2、bcl-2相关X蛋白质（Bax）的表达情况。结果与模型组相比,红景天苷和亚低温组均能提高神经功能缺损评分、减少细胞凋亡、上调海马组织Bcl-2表达及下调海马组织Bax表达,而且红景天苷复合亚低温组效果更为明显（F=103.14~1 479.17,q=6.32~98.03,P〈0.05）。结论红景天苷和亚低温能够减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤程度,且二者复合保护作用更佳,其机制可能与上调Bcl-2、下调Bax表达有关。

亚低温治疗弥漫性轴索损伤的临床研究

目的 观察亚低温治疗弥漫性轴索损伤患者的疗效。方法 36例GCS≤8分的弥漫性轴索损伤患者,于创伤后24h内接受亚低温治疗。直肠温度控制在32℃～34℃,当颅内压降至正常范围后再维持低温治疗24～48h,然后缓慢复温;监测和记录治疗前后的脑组织氧分压、颅内压、血气及重要脏器功能指标,于伤后3个月根据GOS标准进行评估,并与对照组比较。结果 亚低温治疗后,患者脑组织氧分压增高(P<0.05),颅内压降低(P<0.05),对创伤后早期发生的高血糖反应具有抑制作用(P<0.05)。GOS评估结果显示,亚低温组患者恢复良好率为52.78％,病死率27.78％,与对照组相比差异有显著性意义(均P<0.05)。结论 采用持续24～48h亚低温治疗弥漫性轴索损伤患者安全、有效,无严重并发症,可降低病死率、改善预后。

低温下钙通道阻滞剂对未成熟心肌的保护作用

目的 :观察低温下钙通道阻滞剂对未成熟心肌的保护效果。方法 :使用改良的非再循环式Langendorff离体心灌注装置 ,比较未使用盐酸尼卡地平低温缺血组 (A组 )及分别在低温缺血前 (B组 )、常温缺血前 (C组 )给予盐酸尼卡地平者的心功能和心肌酶的变化 ,测定缺血后心肌ATP、总钙含量及心肌含水量 ,观察心肌和冠状动脉内皮细胞结构的变化。结果 :B组的各项指标及对心肌和血管内皮结构保护明显优于A组 ,C组与A组无明显差异 ,与B组之间部分数据有显著性差异。结论

浅低温对犬全脑缺血再灌后脑内Na^+-K^+ ATP酶及脂质过氧化的影响

采用犬心脏停跳后复苏动物模型，观察了浅低温对犬脑缺血再灌后酶代谢及脂质过氧化的影响。结果表明：浅低温可促进脑内Ｎａ＋－Ｋ＋ＡＴＰ酶和ＬＤＨ活性的恢复，保护ＳＯＤ活性和降低ＭＤＡ含量，减少ＧＳＨ的丧失。

亚低温长时干预治疗高分级动脉瘤继发蛛网膜下腔出血116例疗效分析

目的探讨亚低温长时干预治疗高分级动脉瘤继发蛛网膜下腔出血(aSAH)疗效及预后危险因素。方法回顾性分析商丘市第三人民医院2013年3月至2019年3月收治的高分级动脉瘤继发aSAH病人共116例,均给予亚低温长时干预,记录临床疗效及随访预后指标,并采用单因素及logistic回归模型分析病人死亡危险因素。结果全部病人亚低温干预时间为5~14 d,干预时间(7.61±2.94)d;治疗过程中出现心律失常、低血压、下肢深静脉血栓、肺炎、急性呼吸窘迫综合征、应激性溃疡、胃肠功能紊乱、应激性高血糖、低钾血症、脑血管痉挛及脑积水分别为71例(61.21%),98例(84.48%),19例(16.38%),62例(53.45%),11例(9.48%),17例(14.66%),109例(93.97%),35例(30.17%),49例(42.24%),61例(52.59%),19例(16.38%);而治疗后死亡16例(13.79%);预后良好64例(55.17%),预后不良52例(44.83%);单因素分析提示,亨特-赫斯(Hunt-Hess)分级V级和合并脑血管痉挛与病人死亡相关(P<0.05);同时logistic回归模型多因素分析提示,Hunt-Hess分级V级和合并脑血管痉挛是病人死亡独立危险因素(P<0.05)。结论亚低温长时干预治疗高分级动脉瘤继发aSAH安全有效,而Hunt-Hess分级V级和合并脑血管痉挛是该类病人死亡独立危险因素。

浅低温对犬全脑缺血再灌注后脑组织形态及脑功能的影响

研究浅低温对犬心脏停跳复苏后脑组织形态学及脑功能的影响。缺血时间１８ｍｉｎ，再灌注８ｈ，观察神经机能及脑顶叶皮质形态学改变，并对顶叶皮层神经细胞及毛细血管进行体视学分析。结果表明，浅低温综合治疗可明显减轻神经细胞及毛细血管的损害，促进脑功能的恢复。

GSTM1表达在亚低温减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用:与小胶质细胞极化的关系

目的评价谷胱甘肽S转移酶μ1(GSTM1)表达在亚低温减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用及其与小胶质细胞极化的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠80只,8周龄,体质量260~280 g,采用随机数字表法分为4组(n=20):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、亚低温组(H组)和GSTM1抑制剂+亚低温组(IH组)。采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型,阻断大鼠左侧大脑中动脉2 h时拔出线栓恢复血流灌注,期间维持大鼠脑温及肛温36~37℃;S组仅分离结扎血管,不进行阻闭;H组在拔出线栓即刻用75%酒精擦拭全身,维持脑温及肛温32~33℃3 h,其余同I/R组;IH组分别于造模前24和1 h时腹腔注射GSTM1抑制剂8.6 mg/kg,其余同H组。于再灌注24 h时对大鼠行改良神经功能缺损评分(mNSS),处死大鼠后取脑,采用TTC染色法观察大脑梗死情况并计算梗死体积百分比;Western blot法检测GSTM1、M1型小胶质细胞标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型小胶质细胞标记物精氨酸1(Arg-1)的表达;qRT-PCR法检测GSTM1、iNOS和Arg-1 mRNA的表达;ELISA法检测IL-6、IL-10、TNF-α和转化生长因子β(TGF-β)的含量。结果与S组比较,其余3组mNSS、脑梗死体积百分比、iNOS、Arg-1及其mRNA表达上调,GSTM1及其mRNA表达下调,IL-6、TNF-α及IL-10和TGF-β含量升高(P<0.05);与I/R组和IH组比较,H组mNSS、脑梗死体积百分比、iNOS及其mRNA表达下调,Arg-1及其mRNA和GSTM1表达上调,TNF-α和IL-6含量下降,TGF-β和IL-10含量升高(P<0.05)。结论GSTM1表达上调参与了亚低温减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的过程,与抑制小胶质细胞向M1型极化,促进其向M2型极化有关。

亚低温对大鼠脑缺血再灌注时小胶质细胞极化及JAK2/STAT3信号通路的影响

目的探讨亚低温对大鼠脑缺血再灌注时小胶质细胞极化及酪氨酸激酶2/信号传导及转录活化因子3(JAK2/STAT3)信号通路的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠45只,8周龄,体质量260~280 g,采用随机数字表法分为3组(n=15):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)和亚低温组(H组)。I/R组和H组采用大脑中动脉闭塞法制备脑缺血再灌注损伤模型,阻断2 h后恢复灌注,期间维持直肠温度36~37℃;H组于再灌注即刻用75%酒精行体表降温3 h,维持直肠温度32~33℃。于再灌注24 h时行改良神经功能缺损评分(mNSS评分),随后麻醉下处死大鼠取脑,TTC染色观察脑梗死体积,采用Western blot法检测M1型标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、M2型标记物精氨酸酶1(Arg-1)、磷酸化JAK2(p-JAK2)及磷酸化STAT3(p-STAT3)表达,采用q-PCR法检测iNOS mRNA和Arg-1 mRNA表达,采用ELISA法检测IL-6和IL-10含量。结果与S组相比,其余2组mNSS评分和脑梗死体积升高,大脑缺血半暗带iNOS和Arg-1及其mRNA表达上调,p-JAK2/JAK2比值、p-STAT3/STAT3比值、IL-6和IL-10含量升高(P<0.05);与I/R组相比,H组mNSS评分和脑梗死体积降低,大脑缺血半暗带iNOS及其mRNA表达下调,Arg-1及其mRNA表达上调,p-JAK2/JAK2比值、p-STAT3/STAT3比值和IL-6含量降低,IL-10含量升高(P<0.05)。结论亚低温可促进大鼠脑缺血再灌注时小胶质细胞由M1型极化向M2型极化偏移,抑制中枢炎症反应,其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。

选择性脑亚低温对大鼠脑缺血再灌注时Drp1 SUMO2/3化修饰的影响

目的:评价选择性脑亚低温对大鼠脑缺血再灌注时动力相关蛋白1(Drp1)小泛素样修饰蛋白2/3(SUMO2/3)化修饰的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠60只,6~8周龄,体质量240~260 g,采用随机数字表法分为4组(n=15):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、选择性脑亚低温组(HT组)和常温组(NT组)。4组大鼠在监测脑温及直肠温度下进行操作,S组仅暴露颈部动脉;其余3组采用阻塞大脑中动脉2 h恢复灌注的方法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。HT组和NT组拔除线栓即刻于左侧颈内动脉以80 ml·kg^(-1)·h^(-1)的速率分别灌注4和37℃生理盐水15 min。于再灌注24 h时行改良神经功能缺损严重程度评分(mNSS)。随后对大鼠实施深麻醉断头取脑,TTC染色观察并计算脑梗死体积百分比;取脑皮质缺血半暗带组织,透射电镜下观察线粒体超微结构改变,免疫共沉淀法检测Drp1 SUMO2/3化修饰水平,Western blot法检测总Drp1(T-Drp1)和总细胞色素c(T-Cytc)表达,分离线粒体和胞浆后检测线粒体外膜Drp1(M-Drp1)和胞浆Cytc(C-Cytc)表达。结果:与S组比较,其余3组mNSS和脑梗死体积百分比升高,M-Drp1、T-Drp1、C-Cytc和T-Cytc表达上调,Drp1 SUMO2/3化修饰水平升高(P<0.05),线粒体碎片化加重,嵴断裂和空泡化明显;与I/R组比较,HT组mNSS和脑梗死体积百分比降低,M-Drp1、T-Drp1、C-Cytc和T-Cytc表达下调,Drp1 SUMO2/3化修饰水平升高(P<0.05),线粒体碎片化减轻、嵴断裂和空泡化减弱。NT组各指标与I/R组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:选择性脑亚低温减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的机制与进一步增加Drp1 SUMO2/3化修饰水平,降低Drp1与线粒体外膜结合,减少线粒体过度分裂有关。

低温缺氧-复氧处理的心肌成纤维细胞源性外泌体对大鼠低温心脏缺血再灌注时心室肌电传导的影响

目的评价低温缺氧-复氧处理的心肌成纤维细胞源性外泌体对大鼠低温心脏缺血再灌注时心室肌电传导的影响。方法SPF级SD乳鼠,1~2日龄,雌雄不拘,差速贴壁法提取原代心肌成纤维细胞。传代至2~4代,待细胞密度达60%~70%,将其转移至4℃、95%N2+5%CO_(2)条件下培养1 h,继续于37℃、95%空气+5%CO_(2)条件下培养24~48 h,随后提取外泌体。SPF级雄性SD大鼠24只,2~3月龄,体质量280~360 g,根据随机数字表法分为3组(n=8):对照组(C组)、低温缺血再灌注组(IR组)和外泌体+低温缺血再灌注组(Exo-IR组)。于平衡灌注前48 h时,Exo-IR组尾静脉无菌注射低温缺氧-复氧处理的心肌成纤维细胞源性外泌体1.5 ml(200μg),C组和IR组尾静脉注射PBS各1.5 ml。C组平衡灌注110 min;IR组和Exo-IR组平衡灌注20 min,停灌60 min后再灌注30 min。分别于平衡灌注20 min、再灌注15和30 min时应用微电极阵列标测技术获取左心室心肌传导速度(CV)、传导绝对不均一性(P_(5-95))和不均一性指数(P_(5-95)/P_(50))。结果与C组比较,IR组和Exo-IR组再灌注15和30 min时CV降低,P_(5-95)和P_(5-95)/P_(50)升高(P<0.05);与IR组比较,Exo-IR组再灌注15和30 min时CV升高,P_(5-95)和P_(5-95)/P_(50)降低(P<0.05)。结论低温缺氧-复氧处理的心肌成纤维细胞源性外泌体可改善大鼠心脏低温缺血再灌注时心室肌电传导。

肺动脉血栓内膜剥脱术治疗慢性栓塞性肺动脉高压及深低温停循环对其疗效的影响

目的探讨肺动脉血栓内膜剥脱术在治疗慢性栓塞性肺动脉高压中的作用及深低温停循环对其疗效的影响。方法回顾性分析1995年2月至2006年10月应用肺动脉血栓内膜剥脱术治疗慢性栓塞性肺动脉高压40例的诊治资料,其中中心型肺动脉栓塞25例,外周型肺动脉栓塞15例。深低温停循环组17例在深低温停循环下行肺动脉血栓内膜剥脱术,不停循环组23例在不停循环下行肺动脉血栓内膜剥脱术。结果围术期深低温停循环组无死亡,不停循环组6例死亡。术后9例出现残余肺动脉高压,18例出现重度肺组织再灌注损伤。手术前后肺动脉压分别为(91±38)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和(58±31)mm Hg,肺循环阻力分别为(978±676)dynes·sea^(-1)·cm^(-5)和(357±279)dynes-sec^(-1)·cm^(-1)、血氧分压分别为(54±8)mm Hg 升到(90±7)mm Hg、血氧饱和度分别为90.0%±4.3%和96.5%±1.8%,P 均<0.05。34例平均随访(42±36)个月(2～109个月),晚期死亡2例,心功能 NYHA 分级Ⅰ级22例、Ⅱ级9例、Ⅲ级1例。结论深低温停循环有利于进行彻底的肺动脉血栓内膜剥脱术,而防治残余肺动脉高压、肺组织再灌注损伤是提高围术期疗效的关键因素。

二氮嗪对幼龄大鼠深低温脑缺血再灌注后氧自由基及细胞凋亡的影响

目的探讨二氮嗪对幼龄大鼠深低温脑缺血再灌注后氧自由基和细胞凋亡的影响及相关的脑保护作用机制。方法将54只3周龄健康SD大鼠随机分为假手术组、模型组和二氮嗪组，每组18只，建立深低温脑缺血再灌注模型。于术后24h处死大鼠，检测脑组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛的含量，Western Blot法检测脑组织细胞质细胞色素C含量，免疫组化法检测脑组织细胞质Caspase．3含量。结果模型组脑组织中SOD含量为（198±41）U／mg，低于假手术组的（321±36）U／mg（P〈0．01）；丙二醛含量为（212±21）nmol／mg，高于假手术组的（100±23）nmol／mg（P〈0．01）；细胞色素C蛋白表达（0．72±0．09）和Caspase-3蛋白表达（83±10）均高于假手术组（0．17±0．02和115±9）（P〈0．01）。二氮嗪组脑组织SOD含量为（264±34）U／mg，高于模型组（P〈0．05）；而丙二醛含量（1744-19）nmol／mg、细胞色素C蛋白表达（0．414-0．05）和Caspase-3蛋白表达（99±11）均低于模型组（P〈0．05）。结论二氮嗪对幼龄大鼠深低温脑缺血再灌注损伤具有脑保护作用，其机制与抑制氧自由基产生和细胞凋亡有关。

右美托咪定联合浅低温对新生大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响

目的 评价右美托咪定联合浅低温对新生大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响.方法 新生SD大鼠96只,日龄6～7d,体重18～22 g.采用随机数字表法,将其分为4组（n=24）：缺血再灌注组（I/R组）、浅低温组（H组）、右美托咪定组（D组）、右美托咪定联合浅低温组（DH组）.采用夹闭双侧颈总动脉缺血15 min后恢复灌注加低血压制备全脑缺血再灌注损伤模型.D组和DH组于缺血前30 min腹腔注射右美托咪定75μg/kg,I/R组和H组腹腔注射等容量生理盐水.I/R组和D组维持颞肌温度36.7～37.2℃,H组和DH组自缺血开始,维持颞肌温度34.8～35.3 ℃ 2 h.于再灌注12、24和72 h（T1-3）时每组随机取8只大鼠行神经功能缺陷评分（NDS评分）,然后处死大鼠取脑组织,采用分光光度法确定脑组织髓过氧化物酶（MPO）活性,采用ELISA法测定脑组织TNF-α、IL-6含量.结果 与I/R组比较,其余3组NDS评分、MPO活性、IL-6和TNF-α含量降低（P＜0.05）;与H组及D组比较,DH组NDS评分、MPO活性、IL-6和TNF-α含量降低（P＜0.05）.结论 右美托咪定通过抑制脑组织炎性反应,可优化浅低温对脑缺血再灌注新生大鼠的脑保护作用.

浅低温联合艾芬地尔对大鼠全脑缺血再灌注后凋亡诱导因子的影响

目的 观察浅低温联合艾芬地尔对大鼠全脑缺血再灌注后海马神经元存活和凋亡诱导因子（AIF）易位的影响,探讨两者在脑复苏中联合作用的机制.方法 80只雄性SD大鼠按随机数字表法分组（n=16）：假手术组（Ⅰ）、模型组（Ⅱ）、艾芬地尔组（Ⅲ）、浅低温组（Ⅳ）和艾芬地尔＋浅低温组（Ⅴ）.Ⅰ组不给予电刺激和心肺复苏;Ⅱ～Ⅴ组致颤（4 min）建立全脑缺血再灌注模型;Ⅲ和Ⅴ组于再灌注即刻腹腔注射艾芬地尔,其余组注射等容量双蒸水;Ⅳ和Ⅴ组于再灌注即刻乙醇涂擦体表,10 min内将直肠温度降至（32±1）℃,维持4h,其余组维持直肠温度（37±1）℃.HE染色观察海马CA1区锥体细胞病理改变及计数;免疫荧光法检测海马CA1区AIF易位;免疫蛋白印迹法半定量测定AIF易位.结果 与Ⅰ组（75.0±3.2）个比,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组CA1区锥体细胞计数均减少（P＜0.05）;与Ⅱ组（36.0±1.2）个比,Ⅲ组（46.8±1.3）个、Ⅳ组（49.0±2.7）个和Ⅴ组（61.3±2.6）个均增加（P＜0.05）,Ⅴ组增加最明显（P＜0.05）.与Ⅰ组比,免疫荧光法观察Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组均出现AIF易位.免疫蛋白印迹法结果显示,与Ⅰ组（0.022±0.003）比,其余各组AIF在细胞核的表达均增加（P＜0.05）;与Ⅱ（1.020±0.029）组比,Ⅲ（0.870±0.016）、Ⅳ（0.820±0.050）、Ⅴ（0.550±0.050）组AIF在细胞核的表达均减少（P＜0.05）,Ⅴ组减少最明显（P＜0.05）.结论 浅低温联合艾芬地尔能更有效地减轻全脑缺血再灌注后神经元损伤,其机制可能是减轻AIF易位后启动的促凋亡作用.