睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血清HIF-1α、VEGF、sVCAM-1水平的变化及意义

目的探讨睡眠呼吸暂停低通气综合征(SAHS)患者血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、可溶性血管内皮细胞黏附因子-1(sVCAM-1)水平的变化及意义。方法 79例SAHS患者按呼吸暂停低通气指数(AHI)分为轻、中、重度组,以35例健康体检者为对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HIF-1α、VEGF、sVCAM-1的水平。对58例中、重度患者采用持续气道正压通气(CPAP)治疗,并对治疗前后炎症指标进行分析对比。结果轻、中、重度组SAHS患者HIF-1α、VEGF、sVCAM-1表达水平明显高于对照组(P<0.05),对照组分别为(18.7±8.2)pg/mL、(35.5±45.1)pg/mL、(463.1±121.1)ng/mL。HIF-1α水平中度组(33.9±9.0)pg/mL明显高于轻度组(26.5±6.4)pg/mL(P<0.05),轻、中度组间VEGF、sV-CAM-1表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。重度组HIF-1α、VEGF、sVCAM-1表达水平分别为(51.8±17.1)pg/mL、(192.2±77.8)pg/mL、(824.8±201.3)ng/mL明显高于轻、中度组,差异有统计学意义(P<0.05)。中、重度组经CPAP治疗后HIF-1α、VEGF、sVCAM-1表达水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SAHS可导致患者血清HIF-1α、VEGF、sVCAM-1水平升高,且病情越重,血清HIF-1α、VEGF、sVCAM-1浓度越高。经CPAP治疗后,可明显降低HIF-1α、VEGF、sV-CAM-1的水平,改善心血管炎症病变。

HIF—1α在胰腺癌组织中的表达及其对细胞凋亡的影响

目的通过检测胰腺癌组织HIF—1α、Bcl—XL的表达，探讨HIF—1α对胰腺癌细胞凋亡的影响。方法应用免疫组化方法检测41例胰腺癌和20例正常胰腺组织中HIF-1α、Bcl-XL的表达，TUNEL法检测细胞凋亡，RT—PCR和Western blot检测21例胰腺癌组织和10例正常胰腺中HIF-1α、Bcl-XLmRNA和蛋白的表达。结果正常胰腺组织均无HIF—1α、Bcl—XL蛋白和mRNA的表达。胰腺癌组织HIF—1α、Bcl—XL蛋白表达率分别为63．4％和87．8％，HIF—1αmRNA和Bcl—XL mRNA的表达率分别为71．4％和80．9％，两者的表达呈正相关（r=0．335，P=0．032），HIF-1α阳性表达的胰腺癌的凋亡指数较阴性表达者低[（1．32±0．59）％vs（1．79±0．77）％，P=0．034]。结论HIF-1α和Bcl—XL在胰腺癌组织中存在高表达。HIF—1α可能通过上调Bcl—XL的表达抑制胰腺癌细胞凋亡．在胰腺癌发生发展中起重要作用。

缺氧对人胰腺癌SW1990细胞HIF-1α及靶基因Glut1、VEGF表达的影响

目的探讨缺氧对人胰腺癌SW1990细胞HIF-1α及靶基因Glut1、VEGF表达的影响。方法建立人胰腺癌SW1990细胞体外缺氧培养模型,随机分为缺氧培养8h、16h、24h组及常规培养组。采用RT-PCR和Western blot方法分别检测各组细胞HIF-1α、Glut1、VEGF mRNA和蛋白的表达。结果HIF-1α在常规培养细胞中的表达较弱,而在缺氧培养细胞中的表达水平明显增高。SW1990胰腺癌细胞株HIF-1α、Glut1、VEGF mRNA和蛋白在缺氧条件下的表达显著增强,并随缺氧时间的延长而升高。结论缺氧可诱导人胰腺癌SW1990细胞Glut1和VEGF的表达,这种作用可能是通过HIF-1α途径介导的。

缺氧诱导因子-1α在小儿肾母细胞瘤中的表达E

目的研究缺氧诱导因子-1α（hypoxia—induciblefactor-1α，HIF一1et）在小儿肾母细胞瘤（wilmstumor，wT）中的表达及其与临床病理学参数、微血管密度（microvesseldensity，MVD）和预后的关系。方法选取本院2008年1月至2012年1月经手术切除的WT肿瘤标本45例，分别根据年龄、性别、病理分型、临床分期、NWTS-5高低危因素进行分组，采用免疫组织化学方法测定WT组织和瘤旁组织中HIF-1α和CD34的表达，通过CD34标记血管内皮细胞并计算MVD，结合临床资料和随访结果对实验数据进行统计学分析。结果wT组H1F-1α的阳性率高于瘤旁组（95．6％傩40％，P〈0．05），HIF-1α在WT中的表达与与临床分期相关，P〈0．05；WT组MVD高于瘤旁组（58．22±10．009绑（49．43±8．114），P〈0．05，HIF-1α的表达与MVD的相关系数为r=0．402，P〈0．05；HIF-1α表达阳性程度高危组高于低危组，P〈0．05，HIF．1et低表达组术后累计生存率显著高于高表达组，P〈0．05。结论HIF-1α的高表达与WT的生长有关，可促进肿瘤新生血管的生成，并提示小儿WT的预后不良。

神经母细胞瘤细胞在鸡胚尿膜囊模型上生物学性状的研究

目的 探讨神经母细胞瘤（neuroblastoma,NB）鸡胚尿膜囊（chicken chorioallantoic membrane,CAM）血管模型的建立,以及缺氧诱导因子1α（hypoxia inducing factor-1α,HIF-1α）对神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y肿瘤生长和血管生成的影响.方法 含有目的 基因HIF1 α和对照组增强型绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein,EGFP）的非增值性重组5型腺病毒分别转染人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y,检测目的 基因和目的 蛋白表达.SH-SY5Y细胞株经不同处理后分为两组：A组为空白对照组;SH-SY5Y细胞组;B组为HIF1 α-SH-SY5Y组;EGFP-SH-SY5Y组.不同组别细胞悬液分别种植于CAM,1周后A组提取组织RNA,检测人源性促血管相关基因的表达.B组于1周后测量肿瘤体积,分别测定肿瘤周嗣固定范围内放射状血管所占面积以及血管分支数.结果 RT-PCR和细胞免疫组化检测HIF1α转基因组较对照EGFP组目的 基因和蛋白表达水平显著增高,差异有显著统计学意义（P〈0.05）.A组SH-SY5Y细胞悬液种植于CAM膜后,肿瘤形成、周围放射状血管网络形成、肿瘤组织中检测到人源性促血管生长因子的表达.B组HIF1α转基因组血管计数、血管面积较对照EGFP组显著增多,差异有统计学意义（P〈0.05）,而肿瘤大小无显著统计学差异（P〉0.05）.结论 CAM模型作为NB血管模型有可行性.HIF-1 α与肿瘤血管生成具有显著相关性,可作为神经母细胞瘤患者预后评估的指标.

RNA干扰沉默HIF-1α对人鼻咽癌CNE-1细胞黏附和侵袭能力的影响

目的探讨低氧诱导因子-1α（hypoxiainduciblefactor-1alpha，HIF—1α）在低氧状态下，对人鼻咽癌CNE-1细胞黏附和侵袭能力的影响及其分子机制。方法CoCl2模拟肿瘤低氧微环境。分别用RT—PCR和酶联免疫吸附法（ELISA）检测不同低氧时相HIF-1α、E-钙黏蛋白和趋化因子受体4（chemokinereceptor4，CXCR4）在mRNA及蛋白水平的表达情况。采用RNA干扰技术沉默HIF．10t检测其对E-钙黏蛋白、CXCR4蛋白表达的影响。分别采用黏附实验和Transwell侵袭实验检测HIF-1α沉默对CNE-1细胞黏附及侵袭能力的影响。结果CNE-1细胞在低氧条件下，HIF-1α mRNA表达相对恒定，而蛋白随低氧时间延长其表达明显升高（P〈0．05）；E-钙黏蛋白在mRNA及蛋白水平表达均显著降低，而CXCR4均显著升高（P〈0．05）。有效沉默HIF-1α可明显上调E-钙黏蛋白的蛋白表达，下调CXCR4表达。CNE-1细胞的黏附率和侵袭穿膜细胞数明显少（P〈0．05）。结论低氧促进鼻咽癌CNE-1细胞中HIF-1α蛋白表达水平升高。有效沉默HIF-1α可降低CNE-1细胞的黏附和侵袭能力，其分子机制可能与上调E-钙黏蛋白、下调CXCRd表达有关。

HIF-1α、HPSE、VEGF共同促进视网膜母细胞瘤的恶性进程

目的探讨视网膜母细胞瘤（RB）中乙酰肝素酶（HPSE）、低氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达及其与血管内皮生长因子（VEGF）、微血管密度（MVD）的关系。方法应用免疫组织化学法检测34例RB石蜡标本及10例正常视网膜组织中HIF-1α、VEGF蛋白表达，用CD34抗体进行肿瘤血管内皮染色，计数肿瘤微血管密度（MVD）；应用RT—PCR检测18例RB组织中HPSEmRNA、HIF-1α mRNA、VEGFmRNA的表达，分析RB组织中HPSE、HIF-1α、VEGF表达情况及其与肿瘤微血管形成、临床及病理特征的关系。计量资料采用成组设计定量资料t检验、方差分析和q检验；计数资料采用X^2检验、Fisher检验及秩和检验；相关性采用Spearman等级相关分析及kappa检验。结果34例RB石蜡标本中HIF—1α、VEGF阳性表达率为58．8％、64．7％，明显高于正常对照组（X^2=10．784，P〈0．05；X^2=9．269，P〈0．05）。18例RB中HPSE、HIF-1α、VEGFmRNA阳性率为55．6％、44．4％、72．2％，与正常组比较有统计学意义（X^2=8．642，P〈0．05；X^2=6．222，P〈0．05；X^2=9．956，P〈0．05）。HIF-1α、VEGF与MVD的表达呈正相关（r=0．664，P〈0．05；r=0．590，P〈0．05）；RB中HIF-1α mRNA、HPSEmRNA表达与VEGFmRNA表达呈相关性（Z=2．350，P=0．009；Z=2．940，P=0．002）。结论HIF-1α、HPSE可共同作用于VEGF这种促血管生成重要因子，在肿瘤血管形成中起一定作用。