iASPP干扰RNA转染HepG-2细胞后细胞凋亡的变化

目的:观察iASPP基因干扰RNA转染肝癌细胞HepG-2后的干扰效果及细胞凋亡的变化。方法:设计特异性siRNA序列,将序列克隆至PGCsilencerTMH1/Neo/GFP质粒中,用脂质体将重组子转染至HepG-2细胞中,用RT-PCR方法检测iASPP表达的变化,Western blot检测蛋白表达的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果:iASPP干扰质粒转染HepG-2细胞后,iASPP表达下降,凋亡细胞增加。结论:抑制内源性的iASPP,能有效地恢复肝癌细胞HepG-2中p53的抑癌功能。

iASPP干扰RNA转染HepG-2细胞后细胞凋亡的变化

目的:观察iASPP基因干扰RNA转染肝癌细胞HepG-2后的干扰效果及细胞凋亡的变化。方法:设计特异性siRNA序列,将序列克隆至PGCsilencerTMH1/Neo/GFP质粒中,用脂质体将重组子转染至HepG-2细胞中,用RT-PCR方法检测iASPP表达的变化,Westernblot检测蛋白表达的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果:iASPP干扰质粒转染HepG-2细胞后,iASPP表达下降,凋亡细胞增加。结论:抑制内源性的iASPP,能有效地恢复肝癌细胞HepG-2中p53的抑癌功能。

人完整p53凋亡刺激蛋白家族抑制成员多克隆抗体的制备及鉴定

目的:p53凋亡刺激蛋白(ASPP)家族可调节p53抑癌功能,其抑制成员(iASPP)具有特异性抑制p53诱导细胞凋亡的能力。为了对iASPP进行系统研究,文中报道制备完整的iASPP分子多克隆抗体的方法。方法:在完整iASPP独有的N端选择3个免疫原肽段,制备了3个多克隆抗体。用ELISA检测抗体效价,Western blot比较3个抗体检测内源性抗原的效果,并用体外转录翻译系统制备的完整iASPP蛋白作为对照标准。结果:1号抗体效价>1∶32000,2号和3号抗体效价>1∶16000。Western blot确定100000为完整iASPP蛋白的条带位置。结论:成功地制备了iASPP的多克隆抗体,为深入研究完整iASPP提供了有用的工具。

p53凋亡刺激蛋白抑制因子的研究进展

p53凋亡刺激蛋白抑制因子(inhibitory member of the ASPP family,iASPP),属于ASPP蛋白家族的一员,人类的iASPP由PPP1R13L基因编码合成。iASPP与同一家族的ASPP1、ASPP2功能相反,能够特异性抑制野生型p53的诱导目的基因转录活化和促细胞凋亡功能,导致肿瘤的发生,在乳腺癌和急性白血病中高表达,因此被认为是一种新的癌蛋白,本文就近年来iASPP基因的研究进展简要综述。

p53凋亡刺激蛋白抑制蛋白对乳腺癌患者生存时间的影响

目的 探讨p53凋亡刺激蛋白（ASPP）抑制蛋白（iASPP）对乳腺浸润性导管癌患者生存时间的影响及其临床意义.方法 对解放军第150医院1999年01月-2010年12月收治的具有完整临床和随访资料的89例乳腺浸润性导管癌患者作为研究对象.采用免疫组化方法检测iASPP的表达;采用SPSS 16.0统计软件对iASPP表达阳性和阴性患者的生存时间进行分析.结果 89例乳腺浸润性导管癌患者均为女性,中位年龄53.2岁（27～79岁）.所有患者均接受了乳腺癌改良根治术.82例按照临床标准化化疗方案完成了6～9个疗程的化疗.中位随访时间为29个月（3～96个月）.其中有76例患者表达iASPP（85.4％）,13例不表达（14.6％）.随访结束,iASPP阳性患者病死17例（33.3％）,阴性患者病死4例（10.5％）.通过Kaplan-Meier法计算生存率,两组的生存率差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 iASPP在乳腺浸润性导管癌患者中表达率较高,iASPP蛋白阳性患者的生存时间较短,病死率较高.iASPP影响乳腺浸润性导管癌患者的生存质量.