复方术苦芩提取液对腹泻小鼠iIELs及十二指肠INF-γ、IL-4 mRNA转录的影响

旨在研究复方术苦芩提取液对腹泻小鼠小肠上皮内淋巴细胞(intestinal intraepithelial lymphocyte,iIELs)及十二指肠INF-γ、IL-4 mRNA转录的影响。将72只小鼠随机分为6个组,分别为空白组、感染组、阳性药物组(黄芪多糖口服液,浓度为1.2 mg·mL^-1)和药物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(复方术苦芩提取液,生药浓度分别为0.1、1和10 mg·mL^-1)。除空白组外,小鼠连续给药7 d [灌胃0.5 mL·(次·d)^-1]后腹腔注射5×10^7 CFU大肠杆菌,并将感染组小鼠出现腹泻时设定为试验0 h。于试验6 h和4 d时各处死6只小鼠,制作小肠病理切片并计数iIELs数量,qRT-PCR分析十二指肠段INF-γ、IL-4 mRNA水平。结果显示:阳性药物组和药物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组对腹泻小鼠的保护率分别为66.7%、50.0%、66.7%、75.0%。试验6 h时,与空白组相比,感染组小鼠iIELs数量增加,十二指肠INF-γmRNA水平降低、IL-4 mRNA水平增高,差异均极显著(P<0.01);与感染组相比,阳性药物组和药物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组小鼠iIELs数量减少,阳性药物组和药物Ⅲ组小鼠十二指肠INF-γ mRNA水平增高、IL-4 mRNA水平降低。试验4 d时,与空白组相比,感染组小鼠十二指肠和回肠的iIELs数量增加,空肠iIELs数量减少,其十二指肠INF-γ、IL-4 mRNA水平增高,差异均极显著(P<0.01);与感染组相比,阳性药物组和药物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组小鼠十二指肠和回肠的iIELs数量(Ⅰ组十二指肠除外)均减少,空肠iIELs数量增加,阳性药物组和药物Ⅲ组十二指肠段INF-γ、IL-4 mRNA水平均降低。结果表明,复方术苦芩提取液通过调控小鼠小肠iIELs数量,平衡十二指肠INF-γ/IL-4 mRNA转录,达到对小鼠腹泻的保护作用。

半胱胺对鸡小肠粘膜中分泌型IgA细胞和上皮内淋巴细胞的影响

实验组肉鸡在灌喂半胱胺 2 0mg·kg-1(CY Ⅰ )和 80mg·kg-1(CY Ⅱ )后 ,应用鸡新城疫弱毒苗 (NDV) (Ⅳ系苗 )以口腔注入法进行免疫 ,检查小肠粘膜中分泌型免疫球蛋白A (sIgA)阳性细胞和上皮内淋巴细胞 (iIEL)数量的变化。结果表明 ,CY Ⅰ在NDV首免后第 4周 ,十二指肠中sIgA阳性细胞数量极显著增加 (P <0 0 1) ;CY Ⅰ和CY Ⅱ组在NDV首免后第 4周iIEL数量显著增加 (P <0 0 5 ) ;首免后第 5周CY Ⅰ组十二指肠中iIEL数量显著增加 (P <0 0 5 ) ;而盲肠扁桃体中这两种细胞数量的变化不大。提示生长抑素 (SS)可抑制小肠粘膜中sIgA阳性细胞和iIEL的分化和增殖 ,半胱胺通过耗竭鸡小肠中SS的含量可提高鸡的粘膜免疫力。

双歧杆菌、大肠杆菌菌体外多糖对iIEL激活作用的对比研究

目的 :对比研究双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖对iIEL的激活作用。方法 :采用Percoll非连续密度梯度离心法从小鼠小肠提取小肠上皮间淋巴细胞 (iIEL) ;应用有机溶剂提取的双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖与iIEL细胞共同孵育作用后 ,检测iIEL细胞的自然杀伤活性、IFNγ和IL 2产生能力。结果 :大肠杆菌、双歧杆菌菌体外多糖均能显著增强iIEL细胞的自然杀伤活性、IFNγ和IL 2的产生能力 (P <0 0 1) ,双歧杆菌组的作用显著高于大肠杆菌组 (P <0 0 1)。结论 :双歧杆菌和大肠杆菌菌体外多糖均对iIEL细胞具有免疫激活作用 ,但双歧杆菌菌体多糖的作用强。

口服生长抑素基因疫苗对小肠局部细胞免疫的影响

目的研究口服生长抑素(SS)基因疫苗对小肠局部细胞免疫的影响。方法应用SS基因疫苗通过两种方式(试验组Ⅰ和试验组Ⅱ)灌胃小鼠,首次免疫后第3、5和7周分别扑杀小鼠,应用HE染色、亲和免疫组化和甲苯胺蓝染色的方法分别显示小肠上皮内淋巴细胞(iIEL)、固有层CD4+T细胞和肥大细胞的分布及数量变化。结果两个试验组iIEL数量比对照组有极显著增加(P<0.01);首次免疫后小肠固有层CD4+阳性细胞数量增加,但不显著;首次免疫后第3周空肠中肥大细胞数量与对照组相比有极显著性增加(P<0.01)。结论本试验结果提示了SS基因疫苗能提高小鼠肠道细胞免疫功能。

双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖对iIEL激活作用的对比研究

采用Percoll非连续密度梯度离心法从小鼠小肠提取小肠上皮间淋巴细胞（intestinalintraeptheliallymphocyte，iIEL），应用双抗原标记间接免疫荧光法对其抗原表型进行测定；同时，应用有机溶剂提取的双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖与iIEL细胞共同孵育作用后，检测iIEL细胞的自然杀伤活性、IFNγ和IL－2产生能力。结果表明：iIEL细胞的表型为85．1％CD3+73.8％CD8+细胞，且有TCRγδ表达。双歧杆菌、大肠杆菌菌体多糖均能增加iIEL细胞的自然杀伤活性，并能促进iIEL细胞产生IFNγ和IL－2但双歧杆菌菌体多糖的作用强。

小鼠小肠上皮内淋巴细胞的提取及鉴定

肠上皮内淋巴细胞 (iIEL)是具有特殊表型和发育分化机制的淋巴细胞 ,在消化道抗感染免疫和经口免疫耐受中起重要作用。本文参考国外多种方法 ,对以往采用的iIEL分离纯化技术进行改进 ,并应用流式细胞仪和形态学检查对分离纯化后的iIEL进行鉴定。结果显示 ,每只鼠可获得 4× 1 0 6～ 1 0× 1 0 6个iIEL ,iIEL中CD3+T细胞的含量为 87 8%。本文建立了一种简便、高效。

实验性消化道溃疡的iIEL及其亚群(Thy1^-)的T_H1型细胞因子水平变化及细胞毒活性

目的 了解消化道溃疡肠上皮间淋巴细胞 (iIEL)及其亚群 (Thy1- )的TH1型细胞因子的分泌和细胞毒活性。方法 利用水浸限制刺激方法诱发小鼠消化道溃疡模型 ,应用细胞溶解法分离Thy1- iIEL ,采用ELISA法、Northern斑点杂交法和生物学测定法分别检测iIEL及其亚群 (Thy1- )的TH1型细胞因子 (IFN γ、IL 2和TNF α)分泌、mRNA表达和iIEL细胞毒活性。结果 给予水浸限制刺激后 ,iIEL培养上清中IFN γ、IL 2的含量于第 3～ 4天达高峰 ,第 6天仍维持较高水平。IFN γ和IL 2的mRNA表达水平与测得的细胞因子水平呈相应变化。Thy1- iIEL亚群培养上清中 ,IFN γ和IL 2的含量与正常对照差异未见显著性。iIEL的杀伤活性在水浸限制刺激后第 2天达高峰 ,1周后恢复正常。结论 应激性溃疡发生后一定时间内 ,iIEL的TH1型细胞因子IFN γ、IL 2和TNF α的mRNA表达水平升高 ,IFN γ、IL 2分泌水平增加 ,细胞毒活性增强 ,这一变化可能对肠道功能具有保护作用。TH1型细胞因子分泌水平升高可能不是主要来自于Thy1- 亚群。

肠上皮内淋巴细胞分离鉴定

肠上皮内淋巴细胞（intestine intraepithelial lymphocytes，iIEL），是机体内数量最多的淋巴细胞群体之一。在黏膜免疫防御和口服免疫耐受形成等方面发挥重要的作用。本文参考国内外多种方法，选用机械和消化法分离细胞、密度梯度离心法纯化iIEL，摸索快速、高效、稳定的iIEL提取方法，并对其增殖和表型进行了初步分析。

b型肠上皮内淋巴细胞发育分化的研究进展

b型肠上皮内淋巴细胞（iIEL）是富集于肠道黏膜免疫系统的特殊淋巴细胞亚群，在粘膜免疫应答过程中发挥着重要作用。然而对其确切的发育分化部位的研究尚存争议。有研究表明，与普通T细胞不同，这群细胞是在胸腺外肠道隐窝斑（CP）发育成熟的。现有报道显示，体内存在胸腺内和胸腺外两种发育途径。在正常情况下，b型ilEL全部来源于胸腺，只是在严重淋巴细胞耗竭的情况下，胸腺外发育途径才能发挥其功能。

肠上皮间淋巴细胞的特点及其在不同病理条件下变化规律的研究进展

肠上皮问淋巴细胞（iIEL）是一类数量庞大的淋巴细胞群体，位于肠上皮细胞（IEC）间基侧表面，分布于绒毛柱状上皮细胞间，是构成肠道免疫防御第1线的淋巴细胞。研究结果表明，iIEL作为调节肠道免疫系统的重要淋巴细胞，在维护肠道稳态方面及在肠道疾病的发生发展中都起到重要作用。此外，IEL与IEC之间存在重要的对话，IEL通过直接接触或分泌的因子作用于IEC，维持IEC的生长代谢等。

肠内营养对长期禁食肠瘘患者肠黏膜上皮内淋巴细胞及黏液屏障功能的研究

本研究旨在观察肠内营养对长期禁食肠瘘患者肠黏膜上皮内淋巴细胞(iIEL)及黏液屏障的功能,以期为临床治疗给予支持,现将结果报道如下。一、资料与方法1.一般资料:选择新疆医科大学第一附属医院从2019年2月至2021年10月收治的41例长期禁食肠瘘患者。对受试者予以肠内营养,比较干预前及干预2周后的iIEL以及黏液屏障的功能,以及血清营养指标和生活质量。