HPLC法测定生物样品中淫羊藿苷的浓度

以苯甲酸为内标，建立了ＨＰＬＣ测定动物血浆、尿、粪及心、肝、脾、肺、肾等组织匀浆中淫羊藿苷的浓度．色谱柱采用ＺｏｒｂａｘＯＤＳ，流动相为四氢呋喃—水—冰醋酸（２０７５５），紫外检测波长２７０ｎｍ．生物样品经乙酸乙酯提取处理后可获得良好分离，血药浓度在１～１２８μｇ／ｍＬ范围内呈线性关系，相关系数０．９９９９，最低检测浓度为０．５μｇ／ｍＬ．生物样品的平均方法回收率９５．２６％～１０１．３％，平均提取回收率７３．５７％～９７．１０％，日内、日间精密度ＲＳＤ２．０％～７．１％．

大鼠血浆艾芬地尔HPLC-MS测定方法的建立

通过采用C18色谱柱（5μm,4.6 mm×150 mm）,以甲醇-乙酸铵溶液（p H值7.20）为流动相,梯度洗脱（0-3 min,20%A→90%A,80%B→10%B）,流速0.6 ml/min,以酮康唑为内标。质谱检测（MS）设定正离子模式（Positive）,采用电喷雾离子源（ESI）,选择离子检测方式（SIM）,艾芬地尔和内标的最佳目标检测离子分别为m/z 326.3、m/z 531.0。建立了高灵敏度的HPLC-MS法检测大鼠血浆中艾芬地尔。

HPLC法测定人血浆中奥硝唑浓度的不确定度评定

目的:评定HPLC法测定人血浆中奥硝唑浓度的不确定度。方法:对奥硝唑浓度测定过程中各影响因素,包括测定精密度、称量、标准溶液的配制、含药血浆的配制、血浆提取、仪器、标准曲线拟合等进行分析评定,计算各变量的不确定度和合成不确定度,最终计算扩展不确定度。结果:人血浆中低(0.5μg.mL-1)、中(5μg.mL-1)浓度奥硝唑的扩展不确定度分别为0.088μg.mL-1、0.324μg.mL-1(P=95%,k=2)。结论:HPLC法测定人血浆中奥硝唑浓度的不确定度主要由标准曲线拟合(尤其是低浓度)、标准溶液和血浆样品制备处理及仪器允差引入。

HPLC-荧光法测定氨磺必利血药浓度及其药动学研究

目的:建立测定人体血浆中氨磺必利高效液相色谱法,测定健康志愿者口服氨磺必利片48 h内血药浓度,进行药动学研究。方法:采用10%三氯醋酸直接沉淀提取血浆,固定相为C18,以庚烷磺酸钠醋酸溶液(pH 4.85)-乙腈(80∶20)为流动相,荧光检测波长为λex=280 nm,λem=370 nm。结果:氨磺必利线性范围为5～800 ng·mL-1(r=0.9997),低、中、高3个浓度平均方法回收率分别为105.1%、105.4%、101.3%,日内、日间精密度RSD均<4%;AUC0～∞为(3545.74±1199.58)ng·h·mL-1,AUC0～t为(3348.50±1161.27)ng·h·mL-1,C max为(457.69±232.62)ng·mL-1,T max为(4.15±1.31)h,t1/2为(10.77±5.77)h。结论:本法简便、快速、经济、准确,可用于测定人血浆中氨磺必利的浓度及药动学研究。

HPLC法检测大鼠血浆中吡非尼酮的浓度及其药动学研究

目的:建立大鼠血浆吡非尼酮检测的高效液相色谱方法,研究吡非尼酮的药代动力学。方法:血浆经乙酸乙酯,采用ZORBAX SB-C18色谱柱;流动相为乙腈-水-0.1%TFA(三氟乙酸),流速为1.0 mL·min-1;检测波长为318(0～8 min)、246nm(8～10 min)。6只雄性大鼠单剂量灌胃给予15 mg.kg-1吡非尼酮,分别在给药后多点尾静脉采血;用该方法检测血浆中吡非尼酮的浓度。用DAS(数据采集系统)计算药代动力学参数。结果:吡非尼酮浓度在0.025～4.00 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 9);定量下限为0.025 mg·L-1;低、中、高3个浓度的相对回收率分别为(100.40±4.66)%、(102.17±4.02)%和(101.12±2.89)%;日内RSD分别为4.6%,3.9%,2.9%,日间RSD分别为5.5%,4.8%,3.7%。大鼠吡非尼酮灌胃后,血浆吡非尼酮在0.39 h达到1.69 mg·L-1的峰值浓度,血浆半衰期为2.21 h。吡非尼酮在大鼠体内符合一级吸收的二室模型。结论:本方法准确可靠、简便快速,适用于大鼠血浆吡非尼酮浓度的测定及其药代动力学研究。

HPLC-MS法测定大鼠血浆中艾芬地尔浓度及药代动力学研究

目的：建立HPLC-MS法测定大鼠体内艾芬地尔的血药浓度,并研究酒石酸艾芬地尔在健康SD大鼠体内的药代动力学特征。方法：血浆样品碱化后采用乙酸乙酯液-液萃取处理,酮康唑为内标。采用C18色谱柱（5μm,4.6 mm×150mm）,以甲醇-p H 7.20醋酸铵溶液为流动相,梯度洗脱（0-3 min,20%A→90%A,80%B→10%B）,流速0.6 m L·min^-1。质谱检测采用电喷雾（ESI）离子源,正离子模式,采用选择离子检测（SIM）方式检测,检测离子分别为m/z 326.3（艾芬地尔）、m/z 531.0（酮康唑）。选取健康SD大鼠[（250±20）g,雌雄各半],腹腔注射酒石酸艾芬地尔1 mg·kg-1后,采用建立的HPLC-MS法测定各个时间点（0、10、20、30、40、50、60、75、90、100、110、120、150、180、240、360 min,每个时间点6只）大鼠血浆中艾芬地尔的浓度,并计算其药代动力学参数。结果：艾芬地尔浓度在0.5-120μg·L^-1范围内,线性良好（r=0.9974）;日间、日内精密度RSD均小于10.5%,提取回收率均高于88%,专属性良好,血浆样品在本实验的条件下稳定,空白基质中的内源性物质不干扰待测组分和内标的测定。结论：本分析方法对血浆中艾芬地尔的检测具有专属性,且灵敏、可靠。酒石酸艾芬地尔经腹腔注射后在大鼠体内药动学模型为单室模型,其达峰浓度为113.79μg·L^-1,半衰期为2.42 h。