In Vitro Development of Tobacco Primary Endosperm Cells in Microculture

用酶解_研磨法分离出烟草 (NicotianatabacumL .)受精后胚囊和初生胚乳细胞进行微室饲养培养。培养基为Km8p附加各种其他成分 ,饲养细胞为分裂旺盛的烟草叶肉原生质体 ,在 2 5℃下静止暗培养。培养 3d后 ,初生胚乳细胞开始第一次分裂 ,继续分裂至 14d时形成大的细胞团。首次报道了双子叶植物初生胚乳细胞的离体发育。

烟草雌蕊的花粉管生长途径中几种植物激素的免疫金电镜观察

用免疫金电镜法观察了大叶烟花柱、珠孔及助细胞内玉米素 ( t- Z)、吲哚乙酸( IAA)、赤霉素 ( GA7与 GA4 )和脱落酸〔( + ) ABA〕的分布。刚授粉时的花柱引导组织细胞内与胞间基质中 t- Z较多、IAA、GA7/4 、( + ) ABA较少 ;授粉后 2 4 h(此时花粉管已穿过花柱中部 ) ,该部位 t- Z显著减少 ,IAA略增加 ,GA7/4 显著增加 ,而 ( + ) ABA仍较少。授粉后 2 4 h,花柱中段薄壁组织细胞内与胞间基质中 IAA比刚授粉时显著增加。增加的 IAA、GA7/4 主要分布在淀粉体、液泡与胞间基质中。穿过花柱中部的花粉管壁上有 IAA。刚授粉时珠孔与助细胞内 t- Z较多 ,丝状器内有大量的 t- Z;授粉后 96h,这些部位的 t- Z显著减少。刚授粉时珠孔与助细胞内 IAA、GA7/4 、( + ) ABA较少 ;授粉后 96h,除退化助细胞与宿存助细胞内 GA7/4 较多外 ,其它部位的这些激素仍较少。根据这些结果 ,讨论了雌蕊内这

烟草花青素苷转运相关基因NtAN9的分离与表达分析

为研究花青素苷的转运,利用电子克隆和RT-PCR方法,从普通烟草(Nicotiana tabacum)花中分离了1个编码谷胱甘肽转移酶(GST)基因,命名为NtAN9(GenBank登录号KX356542)。NtAN9包含一个690bp的开放阅读框,编码229个氨基酸残基,属于phi型GST。NtAN9基因组结构由3个外显子和2个内含子组成。多序列比对分析表明,NtAN9与矮牵牛(Petunia hybrida)花青素苷转运相关的GST基因PhAN9具有88%的一致性。系统进化分析显示,NtAN9与花青素苷转运相关的GST基因聚为一支,是PhAN9的直系同源基因。定量PCR分析表明,NtAN9基因在含有花青素苷的四个花发育时期中均有表达,其中在开花前的第Ⅲ期(2cm<花芽<4cm)表达丰度达到最高,而在不含花青素苷的根、茎和叶中不表达。由此推测,分离得到的NtAN9可能具有类似PhAN9的功能,与烟草花青素苷的转运与积累相关。NtAN9基因的分离与表达分析,为进一步研究烟草花青素苷的转运奠定了基础。