抑霉唑、咪鲜胺及其代谢物在荔枝贮藏保鲜中的残留动态及安全评价

为评估抑霉唑和咪鲜胺在荔枝全果、果皮和果肉的残留情况及膳食风险,本研究建立了同时测定抑霉唑、咪鲜胺及其代谢物含量的气相色谱-串联质谱法。该方法检测抑霉唑、咪鲜胺、咪唑乙醇和2,4,6-三氯苯酚的方法检出限(LOD)分别为2.0、3.0、6.0、0.3μg/kg;定量限(LOQ)分别为6.0、10.0、20.0、1.0μg/kg;在荔枝全果、果皮和果肉中的添加回收率为78.9%~107%、RSD为2.6%~5.8%。保鲜实验结果表明,抑霉唑、咪鲜胺浸果浓度越高残留量越高,残留物随贮藏时间延长由果皮逐渐迁移到果肉中。全果和果皮中抑霉唑、咪鲜胺的残留量随贮藏时间延长不断降低,果肉则于浸泡后第7 d达到最大值再逐渐消解。代谢咪唑乙醇和2,4,6-三氯苯酚随着贮藏时间增加不断升高。用质量浓度为500 mg/L的抑霉唑、咪鲜胺溶液分别浸泡保鲜,安全间隔期14 d内荔枝咪鲜胺的慢性、急性膳食摄入风险在可接受的范围内。

沃柑早采果室温贮藏品质分析

为了研究沃柑免受低温冻害问题,以八成熟的沃柑为研究对象,利用咪鲜胺、抑霉唑两种杀菌剂对其进行保鲜处理,清水作对照,于室温贮藏150 d,测定各处理在贮藏期间的品质指标以及腐烂率、失重率等耐贮性指标的变化,并用SPSS软件对不同处理进行主成分分析和聚类分析。结果表明:咪鲜胺、抑霉唑2个处理的可溶性固形物含量在贮藏期结束时均能维持在采前水平,在贮藏第150 d时表现为抑霉唑处理(13.70%)>对照(12.97%)>咪鲜胺处理(12.20%);随着贮藏时间的延长,果实可滴定酸含量均逐渐下降,至贮藏结束时,咪鲜胺、抑霉唑处理的可滴定酸含量由采前的0.83%分别下降到0.32%、0.36%(对照为0.36%);固酸比随着可滴定酸含量的降低而逐渐上升,果实品质也逐渐提升。与对照相比,咪鲜胺、抑霉唑处理均能有效降低沃柑早采果贮藏期的腐烂率(3.33%),而对照果实腐烂率为6.67%,并能延迟果实发生腐烂的时间。2个处理对果实失重率均无显著影响。主成分分析结果显示,在室温贮藏90 d后咪鲜胺、抑霉唑处理的果实风味品质逐渐变好。聚类分析结果显示,当欧氏距离为20时,所有处理(咪鲜胺贮藏90 d除外)的品质指标和耐贮性指标在贮藏0、15、30、45、60、90 d聚为第一类;在贮藏120、150d(含咪鲜胺贮藏90 d)聚为第二类。综合上述各项指标分析结果认为,沃柑可提前于12月底采收,且用咪鲜胺或抑霉唑等保鲜剂处理效果较好。

基于表面增强拉曼光谱技术的柑橘表皮咪鲜胺和抑霉唑农药残留检测

咪鲜胺和抑霉唑是柑橘类水果常用的保鲜剂,二者混用可有效降低致病细菌抗药性,达到更好的保鲜效果,但农残过量会影响食用者健康。基于表面增强拉曼光谱技术,以丑橘为基质,咪鲜胺和抑霉唑混合农药为研究对象,结合化学计量学方法,建立一种快速准确检测柑橘表皮农药残留的方法。为了对比金、银溶胶的增强效果,分别将金、银溶胶用于浓度为10 mg·L^(-1)的咪鲜胺、抑霉唑标准溶液及橘皮萃取液中的混合农药,采集其拉曼光谱。结果表明,咪鲜胺和抑霉唑的单独标准溶液中金溶胶较优,在橘皮萃取液中的混合农药溶液中银溶胶效果更佳。为了获得最佳增强效果,通过不同比例试验对比,最终确定溶胶增强基底与两种农药标准溶液体积比为1∶1,团聚剂NaCl浓度为1 mol·L^(-1)。按照浓度从高到低的方向,分别采集咪鲜胺标准溶液及抑霉唑标准溶液在不同浓度情况下的光谱,检出限分别低于1和0.5 mg·L^(-1),达到国标规定的最大残留限5 mg·L^(-1)。在咪鲜胺和抑霉唑混合农药的定量分析实验中,以橘皮萃取液为基质,用增强效果较好的银溶胶作为增强基底,采集含有梯度浓度的咪鲜胺和抑霉唑混合农药(5~42 mg·L^(-1))的表面增强拉曼光谱,采用多种预处理方法优化光谱数据,对比支持向量回归(SVR)、灰狼算法优化的支持向量回归(GWO-SVR)、粒子群算法优化的支持向量回归(PSO-SVR)、遗传算法优化的支持向量回归(GA-SVR)四种回归模型的建模效果选择最佳算法建立定量模型。结果表明:通过一阶微分预处理方法,选取829和1168 cm^(-1)处的特征峰强度建立灰狼算法优化的支持向量机回归(GWO-SVR)模型得到的预测效果最佳,其校正相关系数(R_(C))为0.978,校正集均方根误差(RMSEC)为1.655 mg·L^(-1),预测相关系数(R_(P))为0.967,预测集均方根误差(RMSEP)为2.227 mg·L^(-1)。研究结果表明,该方法可对柑橘表皮咪鲜胺和抑霉唑混合农药进行定性与定量检测,可为柑橘农残检测提供新思路。

高效液相色谱法同时测定甜瓜样品中的抑霉唑和噻菌灵

提出了一种用高效液相色谱法 (HPLC)同时测定甜瓜样品中的抑霉唑和噻菌灵残留量的方法。用乙酸乙酯作提取剂提取甜瓜样品 ,通过一个净化步骤分离样品中共提取组分。采用InertsilC8 3色谱柱 (15 0mm× 4 .6mm ,5 μmi.d ,) ,流动相为乙腈∶水 =75∶2 5 ,外标法定量 ,方法的检出限噻菌灵为 0 .70ng ,抑霉唑为1.5 3ng ;回收率为 87.5 %～ 98.0 % ;相对标准偏差为 1.5 %～ 4 .2 %。本法用于甜瓜样品中抑霉唑、噻菌灵含量的测定 ,获得了满意的结果。

气相色谱法测定水果和蔬菜中异丙威、嘧霉胺、抑霉唑残留量

介绍了应用配有FTD/NPD/检测器的气相色谱仪测定水果和蔬菜中异丙威、嘧霉胺、抑霉唑残留量的方法。样品用乙酸乙酯提取,经过硅胶柱净化,旋蒸定容后上机。以GC-FTD(NPD)测定,外标法定量。嘧霉胺、异丙威、抑霉唑分别在一定范围内,质量浓度与峰高(峰面积)呈良好的线性关系。方法准确,重现性、精密度好,杂质干扰少。方法检出限嘧霉胺0.005mg/kg,异丙威0.01mg/kg,抑霉唑0.01mg/kg。

嘧霉胺对采后柑橘绿霉病的防治效果

在实验室和贮藏库条件下,对嘧霉胺单剂、嘧霉胺与抑霉唑或嘧霉胺和咪鲜胺混剂防治柑橘绿霉病的效果进行了评价。室内实验结果表明:采用500或1000mg/L嘧霉胺单剂、500mg/L嘧霉胺+500mg/L抑霉唑或500mg/L嘧霉胺+500mg/L咪鲜胺混剂在接种后12～18h进行浸果处理,对由抑霉唑抗性或敏感菌株引起的绿霉病均有显著的防治效果,防效超过94%;500或1000mg/L的抑霉唑对敏感菌株的防效在93%以上,但对抗性菌株的防效低于70%。贮藏库防效试验结果表明:在具抑霉唑抗性菌系的贮藏库中,上述质量浓度的嘧霉胺单剂、嘧霉胺与抑霉唑、或嘧霉胺与咪鲜胺混剂对绿霉病的防治效果明显优于抑霉唑单剂;而在不具抗抑霉唑菌系贮藏库中的防效则与抑霉唑相当。由此认为:嘧霉胺可作为抑霉唑的替代药剂应用于柑橘的采后处理,其推荐使用质量浓度为500～1000mg/L,可单独使用,也可与抑霉唑或咪鲜胺混合使用。

固相萃取-反相高效液相色谱法测定红毛丹中抑霉唑的残留动态

建立固相萃取-反相高效液相色谱法测定红毛丹中抑霉唑的残留动态分析的方法。色谱柱为Shim-pack VP-ODS(150mm×4.6mm,5μm),检测波长229nm,流动相为甲醇-离子对溶液(75:25,V/V),流速0.85mL/min,进样量20μL。抑霉唑在15.0～960.0μg/L(r=0.9994)范围内与峰面积呈良好线性关系,检出限为5μg/L,抑霉唑回收率为86.4%～104.5%,相对标准偏差0.84%～2.87%。同时,还对抑霉唑由红毛丹皮向肉的迁移,在红毛丹体上的降解动态进行分析。该方法操作简便快速,可作为红毛丹中抑霉唑含量监测的方法。

荔枝中抑霉唑和嘧霉胺残留量的超高效液相色谱-串联质谱法同时测定

建立了超高效液相色谱-串联质谱法同时测定荔枝中抑霉唑和嘧霉胺的方法,对提取试剂、流动相、质谱条件进行了研究,并对抑霉唑和嘧霉胺可能的断裂机理进行了推测。待测样品直接用乙腈提取,采用电喷雾离子源(ESI)、多反应监测正离子模式扫描,外标法定量。抑霉唑、嘧霉胺的质量浓度在1.00～20.0μg/L范围内与峰面积呈良好线性,方法的检出限为0.005mg/kg;添加水平为0.005、0.010、0.020mg/kg时抑霉唑和嘧霉胺的平均回收率分别为91%～96%和83%～90%,相对标准偏差分别为6.5%～8.4%和9.5%～11.1%。该方法快速、简便、准确,可用于荔枝中抑霉唑和嘧霉胺残留量的定性与定量检测。

粮谷中抑霉唑残留的气相色谱法测定

报道了气相色谱法测定粮谷中抑霉唑残留的方法。选取稻谷、小麦、燕麦和黍（大黄米）4种粮谷产品为研究对象，考察了不同类型检测器、不同提取体系、不同淋洗曲线和不同离心时间的破乳效率对抑霉唑测定的影响。试样以正己烷-乙酸乙酯（体积比1：1）提取，经毛细管气相色谱柱HP-5（30m×0．25mm×0．25μm）分离，μ-ECD检测器测定。方法检出限为0．005mg／kg（S／N=3）。添标水平为0．01、0．05、0．25和0．50mg／kg时平均回收率为82％-111％，相对标准偏差为5．5％-11．5％。线性范围为0.05—1．0mg／L（r^2=0.9994）。该方法快速、灵敏、准确，适合粮谷中抑霉唑残留的测定。

锥栗贮藏保鲜研究

本试验采用不同浓度的抑霉唑浸泡 ( 2 0 0 0ppm、10 0 0ppm、0ppm)、不同温度 ( - 1～ 0℃、5℃、10℃ )等措施 ,对长芒、黄榛、油榛三个品种的锥栗进行保鲜研究。试验结果表明 :用长芒浸泡 2 0 0 0ppm的抑霉唑 ,并在 - 1～ 0℃的低温条件下贮藏 。

杀菌剂抑霉唑在梨子中残留动态分析

提出了通过液-液萃取，而后用气相色谱方法测定梨中抑霉唑残留量的方法。对已报道的样品提取、纯化方法进行了改进。本试验以丙酮作提取剂，经乙酸乙酯萃取，用高灵敏度气相色谱μ-ECD检测器测定。方法检出限为0．01mg／kg，平均回收率为80．5％～111．8％，相对标准偏差为0．3％～3．3％。该法可用于梨肉和梨皮中抑霉唑残留量的测定。同时，还对抑霉唑由梨皮向梨肉的迁移，在梨体上的降解等动态进行了测定。

浙江衢州地区柑橘绿霉病菌对抑霉唑和多菌灵的抗性水平及其分子机制

研究了采自浙江衢州地区,包括柯城区、衢江区和开化县12个贮藏库的70个柑橘绿霉病菌Penicillium digitatum菌株对抑霉唑和多菌灵的抗性频率、抗性水平及其抗性分子机制。结果表明:柯城区和衢江区的抑霉唑抗性菌株(最低抑制浓度MIC≥0.5μg/mL)的比例分别为77.1%和62.5%,两地抗性菌株的平均EC50值分别为2.07±1.04μg/mL和2.35±0.73μg/mL,分别是当地敏感菌株EC50值的41.4和47.0倍;而采自开化县的菌株均对抑霉唑敏感(MIC≤0.1μg/mL),平均EC50值为0.04±0.02μg/mL。柯城区和衢江区的多菌灵抗性菌株(MIC≥10μg/mL)的比例分别为54.3%和54.2%,而开化县的抗性菌株比例仅为9.1%。即来自柯城和衢江两个柑橘主产区的绿霉病菌群体对抑霉唑和多菌灵的抗性频率均远高于非柑橘主产区的开化县群体,说明抗药性群体的形成与药剂使用历史有关。进一步研究发现,衢州地区柑橘绿霉病菌对抑霉唑的抗性均属于IMZ-R3型,即与抑霉唑靶标基因CYP51B启动子区的插入突变有关,而对多菌灵的抗性则与β-微管蛋白基因的992位核苷酸点突变(T→A)导致对应的200位点的氨基酸突变(F→Y)有关。

离心破乳-气相色谱法测定黑米中残留抑霉唑的研究

报道了离心破乳．气相色谱法测定黑米中残留抑霉唑的方法。考察了不同离心速率、不同离心时间的破乳效率。试样以V（正己烷）：V（乙酸乙酯）=1：1提取，经毛细管气相色谱柱HP．5（30m×0．25mm×0．25um）分离，u-ECD检测器测定。方法检出限为1．0×10^-3mg／kg（S／N=3）。在添标水平0．05、0．25和0．50mg／kg时的平均回收率为92．3％～104．3％，相对标准偏差为6．9％～9．3％。线性范围为0．02～1．0mg／L（r^2=0．9994）。方法适合黑米中残留抑霉唑的测定。

抑霉唑的合成研究

以间二氯苯和咪唑等为原料，经过酰化、还原、烷基化反应制备了杀菌剂抑霉唑。其化学结构经￣１ＨＮＭＲ确认。

500g/L抑霉唑乳油对柑橘青霉和绿霉病菌的抑制作用与防治效果

试验结果表明，500g／L抑霉唑乳油对柑橘青霉病菌和绿霉病菌的抑制中浓度（EC50）分别为0.0136mg／kg和0.0129mg／kg。用400～800mg／kg的抑霉唑药液浸果1min，捞起晾干，装箱入库常温贮藏，药后60d，对柑橘青霉、绿霉病的防效达93．11％～96．48％，极显著高于70％甲基硫菌灵用600mg／kg处理的防效（84．30％），且对贮藏期的柑橘没有药害，对果实的色泽和口味没有明显的影响。

改进的QuEChERS-气相色谱法测定果蔬保鲜剂抑霉唑残留

建立果蔬保鲜剂抑霉唑残留的改进QuEChERS快速提取净化方法及气相色谱检测方法。样品用含1%乙酸的乙腈溶液提取,氯化钠和无水硫酸镁盐析后,取上清液,加入N-丙基乙二胺(PSA)与十八烷基硅胶键合相(C18)吸附剂净化,用配有电子捕获检测器的气相色谱测定,外标法定量。抑霉唑在0.2～5.0mg/L(r=0.9994)范围内与峰面积呈良好线性关系;方法检出限(RSN≥3)为0.02mg/kg;回收率为74.3%～86.7%;相对标准偏差小于10%。该方法操作简便、准确,并且成本较低,适用于果蔬保鲜剂抑霉唑残留的测定。

气相色谱法测定水果和蔬菜中嘧霉胺·氟硅唑·抑霉唑残留量

介绍了应用配有FTD/NPD/检测器的气相色谱仪测定水果和蔬菜中嘧霉胺、氟硅唑、抑霉唑残留量的方法。样品用乙酸乙酯提取,经过硅胶柱净化,旋蒸定容后上机。以GC-FTD(NPD)测定,外标法定量。嘧霉胺、氟硅唑、抑霉唑分别在一定范围内,质量浓度与峰高(峰面积)呈良好的线性关系。方法准确,重现性、精密度好,杂质干扰少。方法检出限嘧霉胺0.005mg/kg,氟硅唑0.01mg/kg,抑霉唑0.01mg/kg。

赤霉素和戴挫霉与嘧菌酯混配对甜瓜采后病害控制的增效作用

采用体外抑菌试验和果实损伤接种试验,分别测定了赤霉素和戴挫霉与嘧菌酯混配对甜瓜采后粉霉病和白霉病控制的增效作用。结果表明,在体外抑菌试验中,赤霉素对2种病原菌没有抑制作用,对嘧菌酯的防效也没有增效作用;戴挫霉对2种病原菌具有很好的抑制效果,对嘧菌酯的防效也有增效作用。在甜瓜果实损伤接种试验中,赤霉素能有效控制病害的发生,并且与嘧菌酯配合后,对其具有一定的增效作用;戴挫霉与嘧菌酯配合应用,对甜瓜病害的防效明显高于二者单独使用。

气相色谱法同时测定柑桔中抑霉唑、噻菌灵和嘧霉胺残留

建立了一种快速同时测定柑桔中抑霉唑、噻菌灵和嘧霉胺残留量的气相色谱分析方法。柑桔样品在超声波振荡条件下经乙酸乙酯—正己烷(体积比为1:1)提取,盐析,浓缩液直接用气相色谱—氢火焰检测器进行测定,色谱柱为HP-1701小口径石英毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm)。农药的添加水平在0.2~5.0mg/kg范围时,三种农药的回收率在84.4%~104.2%之间,相对标准差为0.39%~8.97%。各农药的检出限在0.012mg/kg^0.19mg/kg之间。该方法快速、灵敏、准确,能满足柑桔农药多残留检测的要求。

保鲜剂抑霉唑在香蕉中的消解动态及残留分析

采用GC-uECD法探索了室内自然温度和12~14℃恒温贮藏条件下抑霉唑在香蕉中的消解规律和最终残留量。方法的定量限为1~2μg/kg,在添加0.02、0.2、2mg/kg范围内平均回收率为94.7%~107.6%,相对标准偏差为1.0%~7.4%。采用该方法测定抑霉唑在香蕉中的残留,将抑霉唑按有效成分300~450mg/kg在香蕉上使用后,其在香蕉上的原始沉积量为1.596~1.848mg/kg,抑霉唑在香蕉中的消解行为符合一级降解动力学方程,在室内自然温度和12~14℃恒温贮藏条件下半衰期分别为8.9~10.2d和13.3d。