咪唑类物质KK-42对日本沼虾几丁质酶基因表达的影响

为探讨咪唑类物质KK-42提高感染嗜水气单孢菌的日本沼虾幼虾成活率的机制,首次克隆了日本沼虾几丁质酶基因-3部分序列,研究了其时空表达及酶活力的变化。将体长3.5~5.0cm的日本沼虾幼虾随机分为两组,分别用1.95×10-4 mol/L的咪唑类物质KK-42溶液（试验组1）或不含咪唑类物质KK-42的溶液（对照组1）浸泡处理1min,12h后,分别注射嗜水气单胞菌菌悬液（菌攻毒试验组和菌攻毒对照组）或生理盐溶液（试验组2和对照组2）,不同时间测定幼虾的成活率,分析几丁质酶基因-3mRNA水平及其酶活力的变化。结果显示,12-48h时,菌攻毒试验组的成活率比菌攻毒对照组增加133%以上。克隆的日本沼虾几丁质酶基因-3部分mRNA序列与其他甲壳类具有90%以上同源性。几丁质酶基因-3表达水平在肝胰腺中最高,以蜕皮前期最为显著。与对照组1相比,在12h,试验组1几丁质酶基因-3mRNA水平和酶活力分别增高了150%和75%;菌攻毒试验组mRNA水平在12~48h明显高于菌攻毒对照组,尤其在24h,增幅高达304%,酶活力在24h比菌攻毒对照组增高48%。咪唑类物质KK-42预处理能显著上调感染嗜水气单胞菌的日本沼虾幼虾肝胰腺几丁质酶基因-3的转录、诱导酶活力增强,这可能是咪唑类物质KK-42提高幼虾成活率的机制之一。