铅对大鼠不同脑区IEG表达的影响

为了研究即刻早期基因（ＩＥＧ）在铅的神经毒性机制中的作用，本实验应用ＦＯＳ和ＪＵＮ蛋白免疫组织化学方法对腹腔注射染铅１３ｍｇ／ｋｇ及１３０ｍｇ／ｋｇ的大鼠不同脑区ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ表达水平进行了观察。图像分析及统计检验结果表明，急性染铅２小时后，大鼠脑组织皮层、海马ＣＡ３区及小脑的ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ表达的阳性面积比［Ａａ（％）］、平均灰度或阳性细胞个数等参数与对照组相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５），即染铅组ＩＥＧ表达高于对照组。这一结果提示第三信使ＩＥＧ作为转录调控因子可能参与了铅对学习记忆损害的神经毒性过程。这对深入阐明铅神经毒性的分子机制提供了一定的实验依据。

铅对小鼠海马c-jun表达及学习记忆功能影响

目的 观察铅对小鼠学习记忆功能及海马区c jun表达的影响。 方法 5～ 6周龄小白鼠交配后 ,通过饮水饲以不同浓度醋酸铅 2 4,4 8,9 6mmol/L。小鼠子代自胚胎期始即暴露于醋酸铅。幼鼠出生后 ,先通过哺乳接触铅 ,断乳后则自行饮用与母鼠饮用浓度相同的含铅水。 6周后用跳台学习试验测试小鼠学习记忆能力 ;最后处死小鼠 ,用RT PCR法观察各组小鼠海马区c junmRNA的表达状况。 结果 3个染铅组小鼠跳台学习成绩显著低于对照组 (P <0 0 1 ) ;3个染铅组小鼠c junmRNA水平均明显降低 ,并具有剂量效应关系。 结论 c jun基因表达水平的下降可能是铅致小鼠学习记忆功能损害的分子机制之一。

铅对小鼠学习记忆功能及海马区c-fos表达的影响

目的 观察铅对小鼠海马区c- fos表达及学习记忆功能的影响 ,并探讨二者的关系。方法 小鼠随机分为3个实验组和 1个对照组 ,每组 10只染铅剂量分别为 2 4、4 8和 9 6mmol L ,用跳台学习试验测试小鼠学习记忆能力 ;用RT PCR法观察各组小鼠海马区c fosmRNA的表达状况。结果 (1) 3个染铅组小鼠跳台学习成绩显著低于对照组 (P <0 . 0 1) ;(2 ) 3个染铅组小鼠c- fosmRNA水平均明显降低 ,以对照组的值为 10 0 ,则低剂量组为 75 . 0 4± 4 .75 ,中剂量组为5 8. 3 5± 5 . 2 9,高剂量组为 42. 66± 6 .3 0 ,与对照组相比 ,P <0 .0 1。高剂量组、中剂量组与低剂量组比较 ,P <0 . 0 1。结论 慢性铅染毒间接阻碍了c- fox基因的反应性表达 ,c- fos基因表达水平的下降可能与铅致小鼠学习记忆功能损害有关。

c-jun、c-fos、BCL-2A基因的功能和铅对其影响

在原癌基因家族中有一类能被第二信使所诱导的基因称为即刻早期基因(IEGs)。IEGs是用丝裂原处理静止细胞时快速诱导的基因类。以c-fos和c-jun为代表的即早基因(IEG)是一类可被第二信使诱导激活的原癌基因[1],具有把短时程作用的细胞外信号和细胞功能的长时程改变偶联起来的效应,是用丝裂原处理静止细胞时快速诱导的基因类。这类基因是细胞经外部刺激后最先表达的一组基因,是联系细胞生化改变与细胞最终对刺激发生特异性反应的中介物。IEGs编码特异的DNA结合蛋白,影响靶基因转录率并参与细胞内信息的传递,将短暂的信号转为长时程的反应。因此,IEGs又被认为是第三信使。IEGs主要包括c-fos、c-jun、c-myc和egr家族。IEGs的表达与突触活动相关并在长期记忆形成和巩固的神经机制中有重要作用。研究证明多种IEGs的表达在记忆的巩固和神经可塑性机制中有十分重要的作用。

氯化甲基汞对大鼠大脑即早基因表达的影响

【目的】 研究即早基因 (IEG)在氯化甲基汞神经毒性机制中的作用。【方法】 应用Fos和Jun蛋白免疫组织化学方法 ,对腹腔注射氯化甲基汞 (0 6mg/kg及 6 0mg/kg)的大鼠不同脑区c fos、c jun表达水平进行观察。【结果】 经图像分析及统计检验结果显示 ,急性染汞 2h后 ,大鼠脑组织皮层、海马CA3 区及小脑的Fos、Jun表达的阳性面积比 [Aa(% ) ]、平均灰度和阳性细胞个数 (n) 3个参数与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,即染汞组IEG表达高于对照组。例如 :高剂量组、低剂量组和对照组在海马CA3 区的Fos表达的平均灰度分别为 136± 8,149± 14,178± 15。【结论】 提示第三信使IEG作为转录调控因子参与了氯化甲基汞对中枢神经损害的毒性过程。这对深入阐明汞神经毒性的分子机制提供了一定的实验依据。

铅对大鼠海马C-fos基因表达及学习记忆的影响

目的 观察和探讨铅对大鼠海马C -fos基因表达及学习记忆的影响。方法 选用健康大鼠 30只 ,每天给醋酸铅灌胃 1次 ,高剂量组 0 2 g/ (kg·d) ,低剂量组 0 1g/ (kg·d) ,连续染毒 3个月后 ,用Y型迷宫试验测试大鼠学习记忆能力 ;最后处死大鼠 ,用原位杂交法观察各组大鼠海马C -fosmRNA的表达状况。结果 ( 1) 2个染铅组大鼠主被动回避反应正确次数显著低于对照组 (P <0 0 1) ;( 2 )光镜下观察高铅组海马切片着色很浅 ,C -fosmRNA阳性细胞很少 ;低铅组着色较浅 ,可见少数C -fosmRNA阳性细胞 ;对照组着色较深 ,C -fos阳性细胞密集 ,阳性锥体细胞呈多角形 ,胞体较大 ,胞浆染色呈不规则的环形。结论 C -fos基因表达水平下降可能是亚慢性铅染毒致大鼠学习记忆障碍的重要环节 ,是铅对学习记忆损害的分子机制之一。

铅对大鼠星型胶质细胞c-Fos和c-Jun蛋白表达影响

目的探讨不同时间点低浓度铅暴露对体外原代培养的星型胶质细胞中即早基因c-Fos和c-Jun蛋白表达的影响。方法出生4～8 d Wistar大鼠脑星型胶质细胞原代培养,1.0μmol/L醋酸铅暴露不同时间后分别收集样品,应用蛋白免疫印迹法测定样品c-Fos和c-Jun蛋白表达的变化。结果 1.0μmol/L醋酸铅处理后,星型胶质细胞中c-Fos和c-Jun蛋白表达均明显降低,与对照组比较,染铅15 min时蛋白表达降低有统计学意义(P<0.05),分别比对照降低33.4%和17.3%;至染铅180 min时c-Fos和c-Jun蛋白表达降至最低,均低于对照的1/2(P<0.01)。结论低浓度染铅可使原代培养的星型胶质细胞中c-Fos和c-Jun蛋白表达持续降低,这可能与铅致大鼠学习记忆功能损害有关。