免疫亲和注射器微萃取-高效液相色谱串联质谱法测定牛奶中玉米赤霉醇类化合物

将偶联玉米赤霉醇单克隆抗体的二氧化硅作为注射器微萃取的选择性吸附剂,建立了检测牛奶中6种玉米赤霉醇类化合物(ZERs)的免疫亲和注射器微萃取-高效液相色谱串联质谱法(IA-MEPS-LC-MS/MS)。将牛奶离心后,取中间夹层,使用免疫亲和注射器微萃取,超纯水洗涤,甲醇洗脱,洗脱液浓缩,流动相复溶后进行LC-MS/MS分析,采用C18色谱柱分离,水-乙腈为流动相梯度洗脱。使用基质匹配外标法定量,在工作液质量浓度0.1~100.0 ng/mL时6种ZERs线性良好,相关系数在0.9943~0.9962;在ZERs添加水平为1 ng/g时,平均回收率在50.40%~68.34%,日内RSD在4.87%~17.64%,日间RSD在7.04%~18.75%,本方法的检测限(LOD)为0.05 ng/g,定量限(LOQ)为0.2 ng/g。

免疫亲和-填充吸附微萃取和液相色谱-串联质谱法测定牛奶中己烯雌酚

基于免疫亲和-填充吸附微萃取(immunoaffinity microextraction by packed sorbent, IA-MEPS)净化,建立了一种快速简便、环境友好的牛奶中己烯雌酚的液相色谱-串联质谱检测方法.将己烯雌酚单克隆抗体与二氧化硅玻璃微珠偶联,制备可重复使用的IA-MEPS注射器,优化了萃取时间、萃取速率、解吸溶液、解吸时间等重要参数.进一步建立了以IA-MEPS为净化手段的LC-MS/MS分析方法,用于牛奶中己烯雌酚残留量的测定.己烯雌酚的动态柱容量为974 ng/0.2 g玻璃珠,重复使用15次后,柱容量仍能达到初始柱容量的45%.在3个添加浓度水平,己烯雌酚的平均回收率为75.5%-78.9%,日内变异系数小于7.7%,日间变异系数为小于6.7%,方法的检测限为0.1 ng/g,定量限为0.5 ng/g.该方法操作简单、灵敏度高、选择性好,可以满足定量分析牛奶中己烯雌酚的需要.