弓首蛔虫及狮弓蛔虫线粒体基因组nad4基因多态性研究

目的比较犬、猫常见蛔虫的线粒体DNA(mtDNA)中烟酰胺脱氢酶亚基Ⅳ基因(nad4)部分序列(pnad4),以期找出它们之间的序列差异和种群遗传关系。方法抽提61个弓首属蛔虫(包括犬弓首蛔虫、猫弓首蛔虫、马来西亚弓首蛔虫和犊弓首蛔虫)和狮弓蛔虫虫体的总DNA,用PCR方法扩增mtDNApnad4,然后用SSCP技术和DNA测序对序列进行分析研究。结果犬弓首蛔虫种群内pnad4的序列差异为1.17%,与猫弓首蛔虫、马来西亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫和狮弓蛔虫种间的平均序列差异分别为13.92%、16.48%、15.12%和20.32%。猫弓首蛔虫种群内pnad4的序列差异为1.00%,与马来西亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫、狮弓蛔虫平均序列差异分别是17.90%、13.55%和18.50%。马来西亚弓首蛔虫种群内pnad4序列差异为0.13%,与牛弓首蛔虫、狮弓蛔虫序列差异分别为13.50%和20.60%。结论犬弓首蛔虫不同地方虫株的pnad4有一定差异,猫弓首蛔虫种群内差异较小,马来西亚弓首蛔虫种群内差异很小。弓首属各虫种之间的差异以及与狮弓蛔虫的差异都较大。马来西亚弓首蛔虫pnad4序列与其它虫种差异都较大,证明它确为一独立种。pnad4序列是弓首蛔虫和狮弓蛔虫理想的种特异的遗传标记。

ABC-ELISA法检测犊弓首蛔虫IgG抗体实验研究

首次以动物为模型,应用 ABC-ELISA 法对家兔血清中犊弓首蛔虫 IgG 抗体进行了测试研究。实验中对犊弓首蛔虫的成虫体壁抗原、体腔液抗原、生殖器官抗原、虫卵抗原、幼虫抗原进行了比较研究,结果显示:幼虫抗原对血清检测的 P/N 值及对被检血清的检出率最高,而检测对照组血清未出现假阳性反应.由此表明,幼虫抗原是最敏感和特异的抗原.在检测方法上,ABC-ELISA 法对被检血清的检出率为96.62%。常规 ELISA 法和 IHA 法的检出率分别为90%和56.67%。3种方法检测对照组血清未出现假阳性反应;在抗体检测滴度上,ABC-ELISA 法比常规 ELISA 法高1～4倍,比 IHA 法高4～128倍.经统计处理,ABC-ELISA 法比常规 ELISA 法敏感1.21倍,比 IHA 法敏感33.76倍.在特异性实验中,用 ABC-ELISA 法检测家兔血清中犊弓首蛔虫 IgG 抗体,与实验家兔乳突类圆线虫和肝片吸虫阳性血清均未出现交叉反应,表明该法检测犊弓首蛔虫抗体特异性良好.另外,对4份血清多次重复检测结果,批内重复和批间试验 OD 值变异系数不超过10%,表明该法稳定性良好.实验结果表明,ABC-ELISA 法具有敏感性高,特异性强,并有较好的稳定性,可用于犊弓首蛔虫抗体的检测,故该法的建立无疑具有理论和实践意义.

犊弓首蛔虫幼虫的化学治疗实验研究

本试验以动物为模型,研究了盐酸左旋咪唑,丙硫咪唑,丙氧咪唑,伊维菌素4种药物对小白鼠组织内犊弓首蛔虫幼虫的化学治疗效果。实验结果显示,4种药物对小白鼠组织内犊弓首蛔虫的化疗效果有非常显著的差异(F>F_(0.01),P<0.01)。其中,丙氧咪唑疗效最好,按50,75,100 mg/kg剂量口服,减虫率分别为86.82%,88.16%,93.30%;其次为伊维菌素,按0.6,0.8 mg/kg剂量肌肉注射,减虫率分别为86.02%和87.14%;丙硫唑咪和左旋咪唑对犊弓首蛔虫幼虫的治疗效果不理想。研究结果证明,丙氧咪唑和伊维菌素治疗小白鼠组织内犊弓首蛔虫幼虫效果良好,从而说明药物治疗母牛组织内犊弓首蛔虫幼虫有较大的可能性,值得进一步研究。